1、3.23.2体外受精和早期胚胎培养一、从试管牛说起一、从试管牛说起二、体外受精二、体外受精三、胚胎的早期培养三、胚胎的早期培养四、胚胎移植四、胚胎移植3.13.1体内受精和早期胚胎发育119781978年年7 7月月2525日世日世界首例试管婴儿界首例试管婴儿 第一个试管婴儿于第一个试管婴儿于19781978年年7 7月月2525日在英国的奥尔德日在英国的奥尔德姆市医院诞生,她的名字叫姆市医院诞生,她的名字叫路易丝路易丝.布朗布朗。路易丝。路易丝.布朗布朗的母亲梅的母亲梅.布朗因输卵管阻布朗因输卵管阻塞而不能生育。塞而不能生育。医生从梅医生从梅.布朗(时年布朗(时年3131岁)体内提取卵子,再
2、取她岁)体内提取卵子,再取她丈夫(时年丈夫(时年3838岁)的精液,岁)的精液,经处理在体外使卵子受精,经处理在体外使卵子受精,受精卵培养成受精卵培养成1616细胞胚后重细胞胚后重新植入梅新植入梅.布朗的子宫内。布朗的子宫内。9 9个多月后就生下了路易丝个多月后就生下了路易丝.布布朗。朗。219881988年年3 3月月1010日我国首例试管婴儿诞生日我国首例试管婴儿诞生著名妇产科专家张丽珠教著名妇产科专家张丽珠教授与中国首例试管婴儿授与中国首例试管婴儿319921992年年我国首例三胞胎试管婴儿我国首例三胞胎试管婴儿4根据资料回答下列问题:根据资料回答下列问题:1.1.试管婴儿技术包括哪些操
3、作步骤?试管婴儿技术包括哪些操作步骤?(体外受精、胚胎的早期培养和胚胎移植)(体外受精、胚胎的早期培养和胚胎移植)2.2.试管婴儿培育和母亲正常怀孕的过程有试管婴儿培育和母亲正常怀孕的过程有何异同?何异同?相同之处相同之处:都通过有性生殖产生都通过有性生殖产生;都要在母都要在母体子宫内发育形成胎儿。体子宫内发育形成胎儿。不同之处不同之处:受精作用在体外,并在体外发受精作用在体外,并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。育成早期胚胎进行胚胎移植。5一、试管动物技术一、试管动物技术 1、概念:、概念:通过通过人工操作人工操作使卵子和精子使卵子和精子在在体外体外条件条件下下成熟和受精成熟和受精,并通过培
4、养发育,并通过培养发育成成早期胚胎早期胚胎后,再经后,再经移植移植产生后代的技术。产生后代的技术。2、过程:、过程:第一步:体外受精第一步:体外受精 第二步:胚胎的早期培养第二步:胚胎的早期培养第三步:胚胎移植第三步:胚胎移植首先要做的是首先要做的是_ 和和 _。体外受精体外受精胚胎的早期培养胚胎的早期培养 3、意义:、意义:解决动物生育率低的问题,解决动物生育率低的问题,实现良种家畜的大量快速繁殖。实现良种家畜的大量快速繁殖。6 主要包括主要包括_、_和和_等几个主要步骤等几个主要步骤 。二、体外受精二、体外受精卵母细胞的采集卵母细胞的采集精子的获取精子的获取受精受精7(一)卵母细胞的采集和
5、培养(一)卵母细胞的采集和培养冲卵:冲卵:M中期的次级卵母细胞中期的次级卵母细胞1、小型动物如小鼠、兔、猪、羊等、小型动物如小鼠、兔、猪、羊等 用用促性腺激素促性腺激素处理,使其排出处理,使其排出更多更多的卵子,然后的卵子,然后从从输卵管中输卵管中冲取卵子,冲取卵子,直接直接与获能的精子在体外受与获能的精子在体外受精。精。(超数排卵法超数排卵法)2、大型动物如牛等、大型动物如牛等 从屠宰场已屠宰动物或活体动物的从屠宰场已屠宰动物或活体动物的卵巢卵巢中采集中采集卵母细胞。卵母细胞。在在体外培养成熟体外培养成熟后(后(M中期),才能与获能中期),才能与获能的精子受精。的精子受精。8 从卵巢中采集卵
6、母细胞,也可以借助从卵巢中采集卵母细胞,也可以借助_、或或_等工具等工具确定卵泡位置确定卵泡位置,直接从,直接从活体活体动动物中物中吸取泡卵液(连同卵母细胞)取出吸取泡卵液(连同卵母细胞)取出,在体,在体外进行人工培养,使其成熟。外进行人工培养,使其成熟。超声波超声波(B超超)探测仪探测仪内窥镜内窥镜腹腔镜腹腔镜9牛卵巢牛卵巢10B B超活采仪超活采仪11121314活活体体采采集集的的牛牛卵卵母母细细胞胞151617 大家畜或大型动物大家畜或大型动物猪、犬等体型较小,猪、犬等体型较小,易于控制的动物易于控制的动物野生或经济动物野生或经济动物此外,啮齿类实验动物可在处死后从附睾尾收集精液。此外
7、,啮齿类实验动物可在处死后从附睾尾收集精液。(二二)精子的精子的采集采集和和获能获能18(二二)精子的精子的采集采集和和获能获能19获能溶液获能溶液专用受精溶液专用受精溶液 获能的精子和培养成熟的卵子,一般获能的精子和培养成熟的卵子,一般情况下在情况下在_或或_中共中共同培养一段时间才能完成受精过程。同培养一段时间才能完成受精过程。(三三)受精受精20 精子和卵子在体外受精后,应将受精卵移精子和卵子在体外受精后,应将受精卵移入入发育培养液发育培养液中继续培养,以中继续培养,以检查受精状况和检查受精状况和受精卵的发育能力受精卵的发育能力。培养液成分:培养液成分:有机盐、无机盐、维生素、激素、有机
8、盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等氨基酸、核苷酸、血清等三、胚胎的早期培养三、胚胎的早期培养四、胚胎移植四、胚胎移植 培养发育到培养发育到适宜阶段适宜阶段时,可将其取出时,可将其取出向向受体移植受体移植或或冷冷冻冻保存保存。2122胚胎移植胚胎移植采集卵母细胞采集卵母细胞体外培养体外培养采集精子采集精子体外获能体外获能体外受精体外受精早期胚胎培养早期胚胎培养受体牛受体牛小小结结(时期时期:)1 1)超数排卵)超数排卵(试剂)(试剂)2 2)活体取卵)活体取卵(仪器)(仪器)3 3)从屠宰的卵巢取卵)从屠宰的卵巢取卵方法方法(方法,试剂方法,试剂)(试剂)(试剂)(培养条件、目的阶
9、段)(培养条件、目的阶段)成熟的卵子成熟的卵子获能的精子获能的精子MIIMII中期中期方法方法231 1、关于牛体外受精及胚胎的工厂化生产的叙述,正确的是、关于牛体外受精及胚胎的工厂化生产的叙述,正确的是A.A.精子和卵细胞受精形成受精卵后即可移入母牛子宫精子和卵细胞受精形成受精卵后即可移入母牛子宫B.B.采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液才能形成受精卵采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液才能形成受精卵C.C.成熟的卵细胞与收集来的精子相遇形成受精卵,需培养到一定成熟的卵细胞与收集来的精子相遇形成受精卵,需培养到一定 阶段才可移植阶段才可移植D.D.体外受精胚胎的工厂化生产即胚胎发育
10、和受精过程只需在体外体外受精胚胎的工厂化生产即胚胎发育和受精过程只需在体外 进行进行2 2、下列现代生物技术成果获得必须通过胚胎移植的是、下列现代生物技术成果获得必须通过胚胎移植的是 A.A.转基因良种鸡转基因良种鸡 B.B.重组酵母乙肝疫苗重组酵母乙肝疫苗C.C.单克隆抗体单克隆抗体 D.D.试管婴儿试管婴儿 C D 巩固练习巩固练习243 3、采集的卵母细胞,在体外经人工培养成熟后,才能与获能的、采集的卵母细胞,在体外经人工培养成熟后,才能与获能的精子受精,以下原因精子受精,以下原因不正确不正确的是的是A.A.卵子从输卵管中冲出也要经历类似精子获能的过程卵子从输卵管中冲出也要经历类似精子获
11、能的过程B.B.动物排出的卵子成熟程度不同动物排出的卵子成熟程度不同C.C.体外人工培养至减数分裂第二次分裂中期时才成熟体外人工培养至减数分裂第二次分裂中期时才成熟D.D.冲出的卵子还需要培养一段时间由小变大冲出的卵子还需要培养一段时间由小变大D 4 4、下列关于滋养层细胞的叙述,、下列关于滋养层细胞的叙述,不正确不正确的是的是A.A.囊胚滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜囊胚滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜B.B.可以用滋养层细胞做可以用滋养层细胞做DNADNA分析性别鉴定分析性别鉴定C.C.囊胚滋养层细胞就是将来原肠胚的外胚层囊胚滋养层细胞就是将来原肠胚的外胚层D.D.滋养层细胞沿透明带内壁扩展
12、和排列滋养层细胞沿透明带内壁扩展和排列C 25 5 5、下列有关胚胎工程的叙述,正确的是、下列有关胚胎工程的叙述,正确的是 A.A.“试管动物试管动物”的生殖方式属于无性生殖的生殖方式属于无性生殖B.B.卵裂球时期每一个细胞的体积比受精卵大卵裂球时期每一个细胞的体积比受精卵大C.C.通过胚胎移植技术可充分发挥良种母畜的繁殖潜力通过胚胎移植技术可充分发挥良种母畜的繁殖潜力D.D.对某一胚胎的干细胞移植,产生的动物中雄性和对某一胚胎的干细胞移植,产生的动物中雄性和 雌性的概率各占雌性的概率各占1/21/2C 6 6、下列关于胚胎工程的叙述,正确的是(、下列关于胚胎工程的叙述,正确的是()A.A.通
13、过胚胎体外培养可直接获得新生儿通过胚胎体外培养可直接获得新生儿B.B.超数排卵技术要使用一定的激素超数排卵技术要使用一定的激素C.C.胚胎移植中的受体与供体必须都为优良品种胚胎移植中的受体与供体必须都为优良品种D.D.受体母畜需要遗传性状优良的品种,供体母畜可用受体母畜需要遗传性状优良的品种,供体母畜可用 遗传性遗传性 状一般的品种状一般的品种B 267 7、“试管婴儿试管婴儿”技术是通过将不孕夫妇的精子和卵细胞取出在技术是通过将不孕夫妇的精子和卵细胞取出在试管中完成受精,并在试管中培养受精卵使其发育到桑椹胚或囊试管中完成受精,并在试管中培养受精卵使其发育到桑椹胚或囊胚阶段,再将胚胎移入女性子
14、宫内发育成胎儿。它不仅使一部分胚阶段,再将胚胎移入女性子宫内发育成胎儿。它不仅使一部分不能生育的男女重新获得了生育的机会,也为人类的优生开辟了不能生育的男女重新获得了生育的机会,也为人类的优生开辟了新的途径。据此回答:新的途径。据此回答:(1 1)“试管婴儿试管婴儿”技术在生物学上所依据的原理是技术在生物学上所依据的原理是 A.A.有性生殖有性生殖B.B.组织培养组织培养 C.C.克隆技术克隆技术D.D.基因工程基因工程(2 2)“试管婴儿试管婴儿”的形成用到下列哪些技术?的形成用到下列哪些技术?(填序号)(填序号)体外培养体外培养 人工授精人工授精 胚胎移植胚胎移植 核移植核移植A278 8
15、、下图是培育能产生凝血因子牛的过程示意图,回答相关问题:、下图是培育能产生凝血因子牛的过程示意图,回答相关问题:(1 1)为能从良种母牛体内一次取得多枚卵子,可以采用)为能从良种母牛体内一次取得多枚卵子,可以采用 的方法。据报道,这种技术已经被滥用于人类生育中,的方法。据报道,这种技术已经被滥用于人类生育中,从而出现许多人工从而出现许多人工“多胞胎多胞胎”,这种技术带来的危害之一是,这种技术带来的危害之一是 。(2 2)在过程中,当一个精子进入卵细胞后会激发卵子发生反应,)在过程中,当一个精子进入卵细胞后会激发卵子发生反应,如透明带反应等,其意义是如透明带反应等,其意义是 。过程涉及的技。过程
16、涉及的技术是术是 。注射促性腺激素注射促性腺激素影响胎儿的健康发育、对孕妇的身体不利等影响胎儿的健康发育、对孕妇的身体不利等防止多精入卵防止多精入卵胚胎移植胚胎移植281)进行小鼠胚胎工程时,首先在光控周期下饲养成年)进行小鼠胚胎工程时,首先在光控周期下饲养成年雌鼠,并注射促性腺激素,目的是雌鼠,并注射促性腺激素,目的是 。然后从雌鼠输卵管中取出卵子,在一定条件下培养然后从雌鼠输卵管中取出卵子,在一定条件下培养成熟;并从雄鼠附睾中取出精子,在一定条件下培成熟;并从雄鼠附睾中取出精子,在一定条件下培养一段时间,目的是养一段时间,目的是 。再在。再在3737,5%CO5%CO2 2条件下,精卵共同
17、作用条件下,精卵共同作用4h4h,冲洗后继续培养。,冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化,第定时在显微镜下观察胚胎的变化,第5 5天可以看到胚天可以看到胚胎发生收缩,细胞间隙扩大,接着胚胎内部出现裂胎发生收缩,细胞间隙扩大,接着胚胎内部出现裂隙,这时胚胎已经进入隙,这时胚胎已经进入_ _ _期。期。促进超数排卵促进超数排卵使精子获能使精子获能囊胚囊胚9.9.回答下列问题回答下列问题292 2)如果体外受精后,在精原核与卵原核融合之)如果体外受精后,在精原核与卵原核融合之前,用微型吸管除雄原核,再用细胞松弛素前,用微型吸管除雄原核,再用细胞松弛素B B处处理(作用类似于用秋水仙素处理植物
18、细胞),处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞),处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是品种选育中的显著优点是 。3 3)如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核)如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中,由重组细胞发育成小鼠丙,则小鼠丙卵细胞中,由重组细胞发育成小鼠丙,则小鼠丙的基因来源有的基因来源有 。容易获得纯合子并缩短育种时间容易获得纯合子并缩短育种时间小鼠甲(体细胞)的核基因和小鼠乙(卵细胞)小鼠甲(体细胞)的核基因和小鼠乙(卵细胞)的细胞质基因的细胞质基因 301999年4月23日晚9时,在广州中山医科大学第
19、一附属医院出生一健康女婴,她是我国首例第三代试管婴儿,父母身体健康、婴儿的母亲7年前生下一男婴,孩子一岁后发病,最后死于脑出血,5年后,她第二次怀孕6个月时,到医院抽羊水及脐带血诊断,发现胎儿是男孩,而且是血友病患者,遂引产。夫妇二人最后来到中山医科大学附属医院做试管婴儿。医生培养了7个可做活体检查的胚胎,并抽取每个胚胎12个细胞进行检查后,选择了两个胚胎进行移植。最后一个移植成功。根据资料回答下列问题:31(1 1)试管婴儿技术作为现代生物技术和母亲正常怀)试管婴儿技术作为现代生物技术和母亲正常怀孕,生产的过程相同之处是:孕,生产的过程相同之处是:。不同之处是:不同之处是:。(2 2)血友病
20、的遗传方式为)血友病的遗传方式为,如果,如果用用B B、b b分别表示血友病基因和正常基因,则父亲、分别表示血友病基因和正常基因,则父亲、母亲的基因型分别是母亲的基因型分别是和和,如果该夫,如果该夫妇再生一男孩,患血友病的概率是妇再生一男孩,患血友病的概率是。(3 3)医生抽取活体胚胎的)医生抽取活体胚胎的1 1或或2 2个细胞后,可通过观个细胞后,可通过观察察,判断胎儿的性别,你认为医生应选用,判断胎儿的性别,你认为医生应选用胚胎进行移植原因是胚胎进行移植原因是,自然,自然状态下,出现这样胚胎的概率是状态下,出现这样胚胎的概率是。该实例体。该实例体现了现代科学技术应用于社会和人类生活的重要意
21、义。现了现代科学技术应用于社会和人类生活的重要意义。通过通过有性生殖有性生殖产生,在母体子宫内发育形成胎儿产生,在母体子宫内发育形成胎儿受精作用在体外,并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植受精作用在体外,并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植伴伴X X染色体隐性遗传染色体隐性遗传X XB BY Y1/21/2X X B B X X b b染色体组成染色体组成女性女性男性胎儿从母亲获得男性胎儿从母亲获得b b基因,患病的概率为基因,患病的概率为5050,女性正常,女性正常1/41/4321999年4月23日晚9时,在广州中山医科大学第一附属医院出生一健康女婴,她是我国首例第三代试管婴儿,父母身体健康、
22、婴儿的母亲7年前生下一男婴,孩子一岁后发病,最后死于脑出血,5年后,她第二次怀孕6个月时,到医院抽羊水及脐带血诊断,发现胎儿是男孩,而且是血友病患者,遂引产。夫妇二人最后来到中山医科大学附属医院做试管婴儿。医生培养了7个可做活体检查的胚胎,并抽取每个胚胎12个细胞进行检查后,选择了两个胚胎进行移植。最后一个移植成功。根据资料回答下列问题:33(1)试管婴儿技术作为现代生物技术和母亲正常怀孕,生产的过程相同之处是:。不同之处是:。(2)血友病的遗传方式为,如果用B、b分别表示血友病基因和正常基因,则父亲、母亲的基因型分别是和,如果该夫妇再生一男孩,患血友病的概率是。(3)医生抽取活体胚胎的1或2个细胞后,可通过观察,判断胎儿的性别,你认为医生应选用胚胎进行移植原因是,自然状态下,出现这样胚胎的概率是。该实例体现了现代科学技术应用于社会和人类生活的重要意义。通过通过有性生殖有性生殖产生,在母体子宫内发育形成胎儿产生,在母体子宫内发育形成胎儿受精作用在体外,并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植受精作用在体外,并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植伴伴X染色体隐性遗染色体隐性遗XBY1/2X B X b染色体组成染色体组成女性女性男性胎儿从母亲获得男性胎儿从母亲获得b基因,患病的概率为基因,患病的概率为50,女性正常,女性正常1/434DB35