1、艾滋病实验室检测管艾滋病实验室检测管理与设备维护理与设备维护l监测:以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。2艾滋病实验室检测管理与设备维护l诊断:以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。3艾滋病实验室检测管理与设备维护l血液筛查:以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV而进行的检测，包括献血员筛查和原料血浆筛查。4艾滋病实验室检测管理与设备维护l筛查试验阳性不能出阳性报告。l严 格 遵 守 实 验 室 标 准 操 作 程 序（SOP）
2、。l严格按照试剂盒说明书操作。l注意防止样品间交叉污染。5艾滋病实验室检测管理与设备维护常规程序常规程序 初筛初筛-复检复检-确认确认复检：复检：对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。如两种试剂复测均查试剂重复检测。如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告呈阴性反应，则报告HIVHIV抗体阴性；抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确认。艾滋病确认实验室进行确认。6艾滋病实验室检测管理与设备维护 样 品 筛筛查查检检测测 筛查试剂 阳性反应
3、 阴性反应 重重复复检检测测 原有试剂加另外一种筛查试剂 一阴一阳 均阴性反应 均阳性反应 送确认实验室进行确认 阴性报告 HIV抗体筛查试验流程图抗体筛查试验流程图 7艾滋病实验室检测管理与设备维护 免疫印迹法(HIV1/2混合型)HIV-1阳性反应 不确定反应 应 出现HIV-2指示条带 HIV-1阳性报告 不确定反应 阳性反应 阴性反应 报告HIV-2血清学阳性 必要时测核酸 阴性报告 免疫印迹法（HIV-2）每3个月随访一次，共2次，仍属可疑，则作阴性报告如随访期间出现阳性反应则报告阳性 阴性反应 阴性报告 HIV抗体确认试验流程图抗体确认试验流程图 8艾滋病实验室检测管理与设备维护l
4、临床上实际应用的是测定特异性HIV抗体，包括初筛和确认两个方面。HIV抗体一般在感染后几周逐渐出现，可延续至终身，是重要诊断依据，但是从感染到血清抗体阳转有一段窗口期，平均为1到3个月，还有一小部分比例的HIV感染者出现迟缓反应，95%以上HIV-1感染者产生抗体的时间是在感染后6个月以内。9艾滋病实验室检测管理与设备维护主要为血液此外还可用唾液检测HIV（Orasure，如Salivacard），尿液检测HIV抗体。10艾滋病实验室检测管理与设备维护l酶联免疫吸附试验（ELISA）l明胶颗粒凝集试验（PA）l斑点免疫试验（或免疫层析）：胶体金或胶体硒11艾滋病实验室检测管理与设备维护 此类试
5、验比较敏感和特异，可检测血清中的IgA、IgM、IgG抗体。将HIV-1/2混合抗原包被在微孔板底部。“一步法”-实验时加入待检血清和辣根过氧化物酶标记HIV-1/2混合抗原 “二步法”-实验时先加入待检血清，温度处理后，再加酶标记HIV-1/2混合抗原12艾滋病实验室检测管理与设备维护 温度处理后洗涤。待检血清中如有特异性抗体，即将包被抗原和酶标记的抗原桥联在一起，如无抗体，通过洗板而洗去酶标记的混合抗原。加入的底物同被桥联抗原上的酶发生颜色反应，指示抗体存在，如无抗体参与则无显色。实验中设阴性对照和阳性对照。13艾滋病实验室检测管理与设备维护 以HIV抗原致敏粉红色明胶粒子(载体)。这种致
6、敏载体和血清中HIV抗体相遇被桥联而出现肉眼可见的凝集反应,非致敏的明胶粒子因无抗原参与,则不发生凝集。如果试验中的未致敏粒子对照出现凝集，即提示血清中含非特异性凝集因子，需用未致敏粒子吸附处理，重新做试验。14艾滋病实验室检测管理与设备维护 目前已有HIV-1和HIV-2抗原共同致敏的PA试剂（AFD HIV 1/2 PA）和HIV-1、HIV-2抗原分别致敏的PA试剂（AERODIA-HIV-1/2）。前者可用于HIV1/2的筛查，后者可用于区分HIV-1型和HIV-II型。其缺点是判定结果用肉眼观察，无法保存。目前这问题已得到解决，为了保存试验结果，试剂盒可配备数码相机。15艾滋病实验室
7、检测管理与设备维护 雅培Determine HIV1/2快速测试试剂是一种用免疫层析法原理,定性测定血样中HIV1/2抗体。16艾滋病实验室检测管理与设备维护 加样本入反应条，当样品通过硒胶体-抗原结合物时，与硒胶体-抗原结合物混合重组结合，此混合物继续迁移通过固相包被的合成肽和重组抗原的结果窗。如果样品中含有HIV1/2抗体，其抗体将会与硒胶体-抗原结合，并在窗口处被固相包被的合成肽和重组抗原所捕获固定，形成一条红线。如果样品中不含HIV1/2抗体，则无红线形成。为了保证结果有效，在反应条中含有质控条带。17艾滋病实验室检测管理与设备维护 CHEK HIV-1+2（EY）将HIV抗原吸附在基
8、膜上，加入待检标本后,如果标本中有HIV-1或HIV-2抗体，抗体便被吸附在基膜的抗原上，加入P-A金标记溶液，而其Fc部位则和P-A金标记物结合,形成如三明治般的粒子，出现肉眼可见的粉红色圆点。18艾滋病实验室检测管理与设备维护1、窗口期：HIV感染后至抗体检出前的一段时间称为窗口期。2、残余危险度(residue risk)：在目前条件下，筛查后仍具感染性的机率。影响残余危险度的主要因素包括窗口期、试剂质量、实验室质控以及人群感染率等。各国的残余危险度不一，美国1985年是1/2500,随着检测试剂完善，包括“O”亚型的检出、IgM和p24抗原的检测，到1995年降至1/44-66万；据报
9、道非洲为5/1000,泰国1/775,肯尼亚 1/50。19艾滋病实验室检测管理与设备维护20艾滋病实验室检测管理与设备维护lHIVHIV一旦离开宿主在外界环境中生存一旦离开宿主在外界环境中生存能力便很快消失，能力便很快消失，HIVHIV对环境中的物对环境中的物理因素和化学因素抵抗力均较弱，理因素和化学因素抵抗力均较弱，比乙肝病毒（比乙肝病毒（HBVHBV）的抵抗力低得多。的抵抗力低得多。因此，对因此，对HBVHBV有效的消毒和灭活方法有效的消毒和灭活方法均适用于均适用于HIVHIV。21艾滋病实验室检测管理与设备维护lHIVHIV对热很敏感，对低温的耐受对热很敏感，对低温的耐受性强于高温。因
10、此，可以用高温性强于高温。因此，可以用高温灭活灭活HIVHIV，在低温条件下保存在低温条件下保存HIVHIV。l对紫外线不敏感：用紫外线、对紫外线不敏感：用紫外线、射线不能灭活射线不能灭活HIVHIV。22艾滋病实验室检测管理与设备维护l HIVHIV灭活：灭活：美国疾病控制中心证明，在干燥环美国疾病控制中心证明，在干燥环境中的境中的HIV HIV 浓度在几小时之内降低浓度在几小时之内降低909099%99%（即降低即降低1 12 2 loglog ）。在室温（）。在室温（22222727）液体环境下液体环境下HIVHIV可存活可存活1515天以上；经天以上；经5656处理处理3030分钟，可
11、使分钟，可使HIVHIV在体外对人在体外对人T T淋巴细胞失去感淋巴细胞失去感染性，但不能完全灭活血清中的染性，但不能完全灭活血清中的HIVHIV；血清中血清中HIVHIV经过经过603603小时或小时或80308030分钟作用后不能检分钟作用后不能检出感染性出感染性HIVHIV。目前，世界卫生组织推荐的逆目前，世界卫生组织推荐的逆转录病毒灭活方法是转录病毒灭活方法是1002010020分钟。分钟。23艾滋病实验室检测管理与设备维护lHIVHIV保存：保存：l在在-70-70不加保存剂冷冻保存，其感不加保存剂冷冻保存，其感染性可丧失。但若在染性可丧失。但若在-70-70保存于保存于35%35%
12、山梨醇或山梨醇或50%50%小牛血清（小牛血清（FBSFBS）可可存活存活3 3 个月以上，在液氮中（个月以上，在液氮中（-196196）HIVHIV可存活数年以上。因此，可存活数年以上。因此，毒种必须置于液氮中方可长期保存。毒种必须置于液氮中方可长期保存。24艾滋病实验室检测管理与设备维护lHIVHIV耐碱不耐酸：在耐碱不耐酸：在pH3.0pH3.0条件下条件下HIVHIV滴度在滴度在1010分钟可下降分钟可下降4 4个对数级，而个对数级，而pHpH值高达值高达9.09.0时，时，HIVHIV滴度下降甚微。滴度下降甚微。l对含氯消毒剂敏感。对含氯消毒剂敏感。0.50.5次氯酸、次氯酸、2 2
13、戊二醛溶液、戊二醛溶液、3 3碘酒、碘酒、6 6过氧过氧化氢可在化氢可在3 35 5分钟内灭活分钟内灭活HIVHIV。25艾滋病实验室检测管理与设备维护l高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌(121 20(121 20分钟分钟)l干烤干烤 170 2 170 2小时小时l煮沸煮沸 20 20分钟分钟l消毒剂浸泡消毒剂浸泡3030分钟，常用消毒剂为分钟，常用消毒剂为5 5可可用氯用氯(次氯酸钠、次氯酸钾、氯氨次氯酸钠、次氯酸钾、氯氨T)T)、6 6过氧化氢、过氧化氢、2 2戊二醛等。戊二醛等。70%70%酒精酒精1 1分分钟可灭活钟可灭活HIVHIV。26艾滋病实验室检测管理与设备维护27艾滋病实验室检测管
14、理与设备维护l实验室设置实验室设置 国家艾滋病抗体检测参比中心国家艾滋病抗体检测参比中心 艾滋病抗体确证实验室艾滋病抗体确证实验室-卫生部批准卫生部批准 艾滋病抗体初筛中心实验室艾滋病抗体初筛中心实验室-卫生厅审卫生厅审批批 艾滋病抗体初筛实验室艾滋病抗体初筛实验室-卫生厅审批卫生厅审批l各级实验室承担相应的任务各级实验室承担相应的任务28艾滋病实验室检测管理与设备维护l对初筛实验室人员技术培训对初筛实验室人员技术培训l对初筛实验室考评或验收对初筛实验室考评或验收l对初筛实验室进行年度质控血清考核对初筛实验室进行年度质控血清考核l评估省内所使用的评估省内所使用的HIV抗体检测试剂抗体检测试剂l
15、省内各级初筛实验室的质控管理省内各级初筛实验室的质控管理l艾滋病抗体初筛实验阳性标本的确证艾滋病抗体初筛实验阳性标本的确证l向上级部门报告检测工作向上级部门报告检测工作29艾滋病实验室检测管理与设备维护l本地区初筛实验室的技术指导和管理本地区初筛实验室的技术指导和管理l本地区初筛实验室人员的技术培训和咨询本地区初筛实验室人员的技术培训和咨询l本地区初筛实验室的质量管理和质量控制本地区初筛实验室的质量管理和质量控制l对初筛实验可疑阳性或阳性标本的复检对初筛实验可疑阳性或阳性标本的复检l承担艾滋病抗体的初筛实验和咨询承担艾滋病抗体的初筛实验和咨询l汇总本地区艾滋病检测结果并上报汇总本地区艾滋病检测
16、结果并上报30艾滋病实验室检测管理与设备维护l艾滋病抗体初筛实验和检测前后的咨询艾滋病抗体初筛实验和检测前后的咨询l及时向中心实验室送检初筛实验阳性或及时向中心实验室送检初筛实验阳性或可疑阳性标本以及需做确证实验的标本可疑阳性标本以及需做确证实验的标本l作好本实验室的各项管理，如标本登记、作好本实验室的各项管理，如标本登记、实验记录、安全记录等。实验记录、安全记录等。l按规定向上级报告实验室工作和检测的按规定向上级报告实验室工作和检测的阶段总结阶段总结31艾滋病实验室检测管理与设备维护l房屋房屋-清洁区、半污染区、污染区，控温清洁区、半污染区、污染区，控温l设备设备-酶标仪、洗扳机、冷藏，微机
17、，高压灭酶标仪、洗扳机、冷藏，微机，高压灭菌器、生物安全柜、洗眼器等菌器、生物安全柜、洗眼器等l人员人员-3名以上技术人员，含名以上技术人员，含1名中级以上名中级以上 技术职称。全部须经专业技术培训技术职称。全部须经专业技术培训l质量保障措施质量保障措施l安全保护措施安全保护措施-环境、个人环境、个人l具备各项规章制度具备各项规章制度32艾滋病实验室检测管理与设备维护33艾滋病实验室检测管理与设备维护34艾滋病实验室检测管理与设备维护35艾滋病实验室检测管理与设备维护l隔离衣（一次性）隔离衣（一次性）l帽子帽子l口罩口罩l眼镜（依据个人视力配置，不准移出实眼镜（依据个人视力配置，不准移出实验室
18、验室l能保护脚面的、便于消毒、清洗的实验能保护脚面的、便于消毒、清洗的实验室用鞋室用鞋36艾滋病实验室检测管理与设备维护微生物安全柜微生物安全柜 microbiological safety cabinet(MSC)生物安全柜生物安全柜biological safety cabinet（BSC）操作危险性微生物时所用的箱形空气净化操作危险性微生物时所用的箱形空气净化安全装置，保护使用者和环境不受因为安全装置，保护使用者和环境不受因为操作产生的有害危险物质和微生物气溶操作产生的有害危险物质和微生物气溶胶的伤害。生物安全柜按防护水平分为胶的伤害。生物安全柜按防护水平分为I级、级、II级、级、III
19、级。级。37艾滋病实验室检测管理与设备维护为什么使用生物安全柜 1.1.生物安全柜主要用于各种微生生物安全柜主要用于各种微生物物,特别是有害微生物的操作和特别是有害微生物的操作和基因工程操作。基因工程操作。2.2.根本目的是保护工作人员健康根本目的是保护工作人员健康和柜外环境安全。和柜外环境安全。3.3.根据保护对象和程度的不同，根据保护对象和程度的不同，生物安全柜分为生物安全柜分为I I、IIII和和IIIIII级。级。38艾滋病实验室检测管理与设备维护l1.I级生物安全柜：保护工作人员级生物安全柜：保护工作人员l和环境。和环境。l2.II级生物安全柜：保护工作人员级生物安全柜：保护工作人员
20、l、环境和样品。、环境和样品。l3.III级生物安全柜：采用手套箱更级生物安全柜：采用手套箱更l严格地保护工作人员、环境和试样严格地保护工作人员、环境和试样l（产品）。（产品）。39艾滋病实验室检测管理与设备维护l1.II级级A型生物安全柜：型生物安全柜：70%柜内循环，柜内循环，l30%空气排出，无连接法蓝空气排出，无连接法蓝l2.II级级B1型生物安全柜型生物安全柜:30%柜内循环，柜内循环，l3.II级级B2型生物安全柜型生物安全柜:100%空气排出空气排出l4.II级级B3型生物安全柜：型生物安全柜：70%柜内循环，柜内循环，l30%空气排出，有连接法蓝。空气排出，有连接法蓝。l5.I
21、I级级A/B3型生物安全柜：兼顾型生物安全柜：兼顾A型和型和lB3型型40艾滋病实验室检测管理与设备维护l1.凡进行有害微生物和转基因操作，凡进行有害微生物和转基因操作，l均应使用生物安全柜，不可用净化均应使用生物安全柜，不可用净化l工作台。工作台。l2.根据工作性质和防护要求，选用根据工作性质和防护要求，选用l适当级别和型号的生物安全柜。适当级别和型号的生物安全柜。l3.产品质量。产品质量。l4.售后服务。售后服务。41艾滋病实验室检测管理与设备维护l1.对工作人员的防护性能对工作人员的防护性能l2.对样品防护性能对样品防护性能l3.交叉污染防护性能交叉污染防护性能42艾滋病实验室检测管理与
22、设备维护*HIV1/2混合型*卫生部批准文号*卫生部药政局检定所批批检,并贴有防伪标签*进口初筛试剂要有我国的注册证明*敏感性高、操作简便、价格低廉和相对好的特异性,*常用初筛试剂:酶联免疫吸附试验、凝聚试验、免疫斑点试验等。43艾滋病实验室检测管理与设备维护l初筛试验结果:*初筛实验室HIV抗体检测的阴性结果，可以出据试验阴性的报告单，并标明所用试剂名称、试剂效期、试验者等内容。可通过咨询通知本人。*初筛HIV抗体阳性，只视为HIV抗体可疑阳性，初筛实验室无权向个人或送检单位报告阳性结果。可出据“HIV抗体待复查”报告。需再次采血送确认实验室作确认试验44艾滋病实验室检测管理与设备维护l确认
23、试验结果:*阳性结果，只有卫生部批准的HIV抗体确认实验室有资格出据阳性报告，同时按照疫情报告程序和要求呈报有关部门，并经充分分析具体情况决定通知受检者*阴性结果，将阴性结果报给送检单位，可以通知受检者45艾滋病实验室检测管理与设备维护l 艾滋病抗体初筛实验室，每月5日前将上月的检测情况报初筛中心实验室；l艾滋病抗体初筛中心实验室，每月10日前将本实验室和辖区内各初筛实验室上月的检测情况汇总后，报省艾滋病确认实验室；l统一使用“HIV抗体检测数月报表”，参照全国艾滋病检测技术规范(2004年版)的附表6（由季报改为月报）。46艾滋病实验室检测管理与设备维护l首选电子邮件方式：以电子版的形式按时
24、发送到 路新利 收47艾滋病实验室检测管理与设备维护l对于对于“自愿咨询检测月报表自愿咨询检测月报表”，要求县（区）级疾病控制机构于每月要求县（区）级疾病控制机构于每月5号前报市级号前报市级CDC，市级市级CDC每月每月10号前号前报省级报省级CDC。l报告方式：首选电子邮件方式：以电子版的形式按时发送到 路新利 收48艾滋病实验室检测管理与设备维护四、四、HIVHIV检测实验室常用设检测实验室常用设备的维护和校准备的维护和校准49艾滋病实验室检测管理与设备维护l人员条件人员条件 初筛实验室：初筛实验室：有有3 3名以上的医技人员，名以上的医技人员，其中中级卫生技术职称人员其中中级卫生技术职称
25、人员1 1名以上，从名以上，从事病毒血清学检测技术工作事病毒血清学检测技术工作2 2年以上，接年以上，接受过国家或省级受过国家或省级HIVHIV抗体确认中心举办的抗体确认中心举办的HIVHIV抗体检测学习班培训，并获得合格证抗体检测学习班培训，并获得合格证书。书。50艾滋病实验室检测管理与设备维护l确认实验室：确认实验室：有有5 5名以上的医技人员，其名以上的医技人员，其中高级卫生技术职称人员中高级卫生技术职称人员1 1名以上，中级名以上，中级卫生技术职称人员卫生技术职称人员2 2名以上；担任确认试名以上；担任确认试验的操作人员，需从事病毒血清学检测验的操作人员，需从事病毒血清学检测技术工作技
26、术工作5 5年以上，年以上，HlVHlV抗体筛查工作抗体筛查工作3 3年年以上，受过国家或省级以上，受过国家或省级HIVHIV抗体确认中心抗体确认中心举办的举办的HIVHIV抗体确认试验学习班培训，并抗体确认试验学习班培训，并获得合格证书获得合格证书 51艾滋病实验室检测管理与设备维护l初筛实验室：初筛实验室：有独立的实验用房，污有独立的实验用房，污染区和清洁区要分开。染区和清洁区要分开。包括酶标读数仪和洗板机、精确的移包括酶标读数仪和洗板机、精确的移液器、专用的普通冰箱、低温冰箱、液器、专用的普通冰箱、低温冰箱、离心机以及各种消毒与污物处理设施、离心机以及各种消毒与污物处理设施、安全防护用品
27、和恒温设施。安全防护用品和恒温设施。生物安全柜生物安全柜52艾滋病实验室检测管理与设备维护确认实验室：确认实验室：有单独的实验用房，设清洁区、有单独的实验用房，设清洁区、半污染区和污染区三个区域半污染区和污染区三个区域.包括专用的普通冰箱、低温冰箱、水浴箱、包括专用的普通冰箱、低温冰箱、水浴箱、温箱、离心机、酶标读数仪、全自动洗板温箱、离心机、酶标读数仪、全自动洗板机、旋转震荡器、摇床、精确的移液器、机、旋转震荡器、摇床、精确的移液器、贮存或分析资料用的专用电脑和必要的摄贮存或分析资料用的专用电脑和必要的摄影器材、必需的消毒和污物处理设施、具影器材、必需的消毒和污物处理设施、具有初筛和确认试验
28、所需的安全防护条件和有初筛和确认试验所需的安全防护条件和有关设备，以及实验室恒温设施，并要建有关设备，以及实验室恒温设施，并要建立血清库。立血清库。53艾滋病实验室检测管理与设备维护人人设备设备环境环境54艾滋病实验室检测管理与设备维护l检测设备检测设备 酶标读数仪和洗板机、精确的移液器、普酶标读数仪和洗板机、精确的移液器、普通冰箱、低温冰箱、离心机、摇床、水浴通冰箱、低温冰箱、离心机、摇床、水浴箱、成像仪、箱、成像仪、病毒载量检测和流式细胞仪病毒载量检测和流式细胞仪 l安全设备安全设备 生物安全柜、高压灭菌器、护眼器生物安全柜、高压灭菌器、护眼器55艾滋病实验室检测管理与设备维护选购选购使用
29、使用维护、保养维护、保养检定、校准检定、校准56艾滋病实验室检测管理与设备维护l仪器设备档案的内容应包括：仪器设备档案的内容应包括：(1)(1)仪器设备产品使用说明书仪器设备产品使用说明书(2)(2)仪器设备验收记录仪器设备验收记录(3)(3)仪器设备检定或校验记录仪器设备检定或校验记录(4)(4)仪器设备检定或检验合格证书仪器设备检定或检验合格证书(5)(5)使用记录使用记录(6)(6)检测前后仪器设备情况记录检测前后仪器设备情况记录(7)(7)故障及维修记录故障及维修记录57艾滋病实验室检测管理与设备维护l开机、关机时间开机、关机时间l仪器运行状况仪器运行状况l检测样品状态及数量检测样品状
30、态及数量l使用人使用人58艾滋病实验室检测管理与设备维护l维护人员维护人员l维护项目维护项目l结果结果l时间时间59艾滋病实验室检测管理与设备维护l日常维护日常维护l定期检定和校准定期检定和校准60艾滋病实验室检测管理与设备维护l电源：电压一定要匹配，插线板合适，电源：电压一定要匹配，插线板合适，专用的专用的.经常停电或电压不稳的实验室，经常停电或电压不稳的实验室，建议配备稳压器和不间断电源建议配备稳压器和不间断电源l环境：清洁，温、湿度合适环境：清洁，温、湿度合适l良好通风良好通风l长时间不用的设备，长时间不用的设备，注意注意特别容易坏特别容易坏61艾滋病实验室检测管理与设备维护62艾滋病实
31、验室检测管理与设备维护项目每日每周每月每年根据需要擦拭仪器使用完后罩上仪器罩使用蘸有去离子蒸馏水的湿布擦拭仪器外部、皮带、导轨及载板清洁和检查滤光片状态和滤光片轮位置2清洁光路系统如有生物危害物质溅至仪器或送工厂维修前需对仪器进行消毒63艾滋病实验室检测管理与设备维护l使用符合仪器规范要求的电压使用符合仪器规范要求的电压l避免接触仪器的光学部件避免接触仪器的光学部件l保持光学系统清洁，以保证正常的功能和结果无误保持光学系统清洁，以保证正常的功能和结果无误l防止液体溅入仪器防止液体溅入仪器l注意仪器的防尘，不使用时罩上罩子注意仪器的防尘，不使用时罩上罩子l定期对酶标仪进行校准定期对酶标仪进行校准
32、l可使用中性实验室清洁剂对仪器的按键和外部进行可使用中性实验室清洁剂对仪器的按键和外部进行清洗清洗64艾滋病实验室检测管理与设备维护洗板机的洗板机的注意事项注意事项每天操作注意事项：1、每天打开机器后 用蒸馏水进行一至两次的冲洗洗板机内部操作；倒空废液瓶中的废液；检查洗液瓶的洗液是否充足；酶标条在酶标仪板中是否放置水平，不到一排应补足一排；洗板之前，先用所需的洗液对洗板机内的其它液体进行冲洗，避免洗板时液体混用。2、当运行时 随时检查废液瓶中的废液，控制在三分之二以下；随时检查洗液瓶中的洗液，控制在三分之一以上；3、在关机前 用蒸馏水进行一至两次的冲洗洗板机内部操作；倒空废液瓶中的废液；将洗液
33、瓶内的洗液移出，避免结晶；注意防尘。65艾滋病实验室检测管理与设备维护洗板机的日常维护请勿将试剂或液体洒在洗板机上！请勿将试剂或液体洒在洗板机上！万一不小心将试剂或液体洒在洗板机上，请立即用干布或吸水纸将液体擦干，以防止液体侵蚀仪器表面。日常的仪器表面清洁日常的仪器表面清洁 日常工作中，请注意保持洗板机表面的清洁。可以使用温和的家庭用清洁剂进行清洁。而酶标板传送系统的周围，请用干布擦拭。警告：警告：请勿使用强腐蚀性或其它清洁力很高的清请勿使用强腐蚀性或其它清洁力很高的清洁剂。洁剂。66艾滋病实验室检测管理与设备维护 每天对洗板机的内部清洗每天对洗板机的内部清洗 由于洗板用的洗液都包含有盐的缓冲
34、液，容由于洗板用的洗液都包含有盐的缓冲液，容易凝结成晶体（固体）而阻塞洗板机内部的管易凝结成晶体（固体）而阻塞洗板机内部的管子或连接处。因此请每天对洗板机进行内部冲子或连接处。因此请每天对洗板机进行内部冲洗。不进行工作时，请勿将洗液充满洗板机内洗。不进行工作时，请勿将洗液充满洗板机内部管子很长时间。部管子很长时间。警告：警告：在长时间不使用洗板机时，请多运行内部冲在长时间不使用洗板机时，请多运行内部冲洗程序几次，以保证在重新使用时洗板机能正常工洗程序几次，以保证在重新使用时洗板机能正常工作。作。警告：警告：造成洗板机不能正常工作或其精密度降低（造成洗板机不能正常工作或其精密度降低（如加液不准、
35、洗涤不充分等）的常见原因是洗板机内如加液不准、洗涤不充分等）的常见原因是洗板机内部结晶问题。因此切记，应经常对洗板机进行内部冲部结晶问题。因此切记，应经常对洗板机进行内部冲洗。洗。洗板机的日常维护67艾滋病实验室检测管理与设备维护洗板机的日常维护如何清洁洗头如何清洁洗头造成洗头不能正常工作（如不加液、不吸液等）的造成洗头不能正常工作（如不加液、不吸液等）的原因是洗板机内部的结晶问题。如出现结晶问题，原因是洗板机内部的结晶问题。如出现结晶问题，请反复用蒸馏水冲洗管道或使用洗板机自带的维护请反复用蒸馏水冲洗管道或使用洗板机自带的维护工具进行清洁维护。工具进行清洁维护。68艾滋病实验室检测管理与设备
36、维护最常用却最易被忽视的最常用却最易被忽视的l常规维护，每天进行常规维护，每天进行l用用70%70%的酒精擦拭表面的酒精擦拭表面l定期校验，六月一次定期校验，六月一次69艾滋病实验室检测管理与设备维护l用用70%70%的酒精经的酒精经常擦拭常擦拭l用随枪配备的工用随枪配备的工具拆卸、装配，具拆卸、装配，简单易行简单易行70艾滋病实验室检测管理与设备维护l所有移液器在出厂前均已校准所有移液器在出厂前均已校准l通常不需校准通常不需校准71艾滋病实验室检测管理与设备维护l通常推荐通常推荐6 6月一次月一次l需校准的原因需校准的原因 -经常使用经常使用 l-要求高的准确性要求高的准确性 -要高压灭菌要
37、高压灭菌l-用于移高粘稠性、高密度溶液用于移高粘稠性、高密度溶液 -温度变化大温度变化大72艾滋病实验室检测管理与设备维护l两点法校准两点法校准 -在最小量程体积处校准，在最大量在最小量程体积处校准，在最大量程处核对程处核对l校准证书校准证书(包括包括)l型号、管嘴和序列号型号、管嘴和序列号l校准人员、时间、温度校准人员、时间、温度l有关天平的信息有关天平的信息73艾滋病实验室检测管理与设备维护校准设施和测试环境校准设施和测试环境 十万分之一或万分之一的分析天平十万分之一或万分之一的分析天平 蒸馏水或去离子水蒸馏水或去离子水 无通风房间，温度在无通风房间，温度在20-2520-25C C，相对
38、湿度相对湿度55%55%以上以上74艾滋病实验室检测管理与设备维护检查校准检查校准 检查移液器的最大和最小容量值（最大值的检查移液器的最大和最小容量值（最大值的10%10%）新管嘴预湿新管嘴预湿3-53-5次，对两个容量进行各十次移液测次，对两个容量进行各十次移液测试试 计算两组的准确度和精确度，并将结果与说明书所计算两组的准确度和精确度，并将结果与说明书所列的限定值范围比对列的限定值范围比对结果在限定范围内为准确，在之外则需用维修工具结果在限定范围内为准确，在之外则需用维修工具顺时针或逆时针调节顺时针或逆时针调节75艾滋病实验室检测管理与设备维护定期清理箱体内左定期清理箱体内左下角温度传感器
39、，下角温度传感器，保证保证传感器传感器不被样不被样品及霜覆盖（建议品及霜覆盖（建议每月一次）每月一次）定期清理箱体右上定期清理箱体右上方方真空泄压阀真空泄压阀（建（建议每月一次）议每月一次）定期清理定期清理密封条密封条（建议每月一次建议每月一次76艾滋病实验室检测管理与设备维护l如需停机长期不用，在如需停机长期不用，在关掉主机开关后应同时关掉主机开关后应同时把电池开关关闭把电池开关关闭 77艾滋病实验室检测管理与设备维护l定期清理灰尘过定期清理灰尘过滤器（建议每月滤器（建议每月一次）一次）78艾滋病实验室检测管理与设备维护l要求环境温度控制在要求环境温度控制在2828度以下度以下l空间的清洁空
40、间的清洁l稳定的电源供应稳定的电源供应l不宜放得太挤不宜放得太挤79艾滋病实验室检测管理与设备维护lHEPA-HEPA-过滤装置容纳过滤装置容纳有害生物气体。有害生物气体。l需提供人员保护需提供人员保护l也为产品提供保护也为产品提供保护 (按等级而定按等级而定)80艾滋病实验室检测管理与设备维护原分类原分类现行现行NSF分类分类排气特性排气特性Class II,Type AClass II,Type A170%气体循环，气体循环，30%气体排放室内气体排放室内 Class II,Type B3 及及A/B3Class II,Type A270%气体循环，气体循环，30%气体由管道排放至气体由管
41、道排放至废气通道废气通道Class II,Type B1Class II,Type B130%气体循环，气体循环，70%气体由管道排放至气体由管道排放至废气通道废气通道可适用于有微量挥发性有毒化学物质和可适用于有微量挥发性有毒化学物质和痕量放射性核素作为微生物学研究的添痕量放射性核素作为微生物学研究的添加剂的工作场合，但是对这些化学物质加剂的工作场合，但是对这些化学物质和放射性核素的处理应在安全柜的直接和放射性核素的处理应在安全柜的直接排风区内，或者当垂直气流循环时，它排风区内，或者当垂直气流循环时，它们不会影响操作。们不会影响操作。Class II,Type B2Class II,Type
42、B20%气体循环，气体循环，100%气体由管道排放至气体由管道排放至废气通道废气通道适用于使用挥发性有毒化学物质和放射适用于使用挥发性有毒化学物质和放射性核素作为微生物学研究的添加剂的工性核素作为微生物学研究的添加剂的工作场合。作场合。81艾滋病实验室检测管理与设备维护lHEPA 过滤器l带动气流的电机和鼓风机l电机/鼓风机速度调节器l合适的入气量、管道工作和空气平衡控制器82艾滋病实验室检测管理与设备维护l每年检定一次安全柜每年检定一次安全柜l保持所有操作在窗扇保持所有操作在窗扇4 4英寸以内英寸以内l清洁物质和污染物隔离开，减少相互清洁物质和污染物隔离开，减少相互干扰干扰l使用后及时清理使
43、用后及时清理l柜内不宜放太多的物品，不能储藏化柜内不宜放太多的物品，不能储藏化学物质学物质83艾滋病实验室检测管理与设备维护Class II 生物安全柜操作程序清洁程序清洁程序用用70%70%的乙醇或其它消毒剂清洗内部的乙醇或其它消毒剂清洗内部表面表面避免用强腐蚀性的清洗剂避免用强腐蚀性的清洗剂84艾滋病实验室检测管理与设备维护Class II 生物安全柜操作程序关机l移去无关物品移去无关物品l打开打开 U.V.U.V.灯，照射半灯，照射半小时小时85艾滋病实验室检测管理与设备维护86艾滋病实验室检测管理与设备维护87艾滋病实验室检测管理与设备维护l离心力、离心速度l平稳的仪器台l不用时，松转
44、头；使用时，拧紧l转子保持平衡l使用安全：盖子要严l使用后要擦干或开盖至晾干l防止液体泄漏到腔内88艾滋病实验室检测管理与设备维护l大部分为立式l高压、高温89艾滋病实验室检测管理与设备维护l液体样品：液体、培养基、发酵液等l固体体样品：器械、玻璃器皿、有金属或玻璃制成的简单设备、滤器架、发酵罐、塑料等l多孔类材料：纺织材料、滤器、加样器和加样器头、注射器（空）等l混合材料：液体、固体、多孔类材料等的混合物。对于含水量高的材料，推荐分开灭菌l废物/垃圾：该类可能以生物或基因工程材料的方式出现，包括固体、多孔类材料或混合物l包装：包裹或未包裹，或放置于金属或塑料的容器中。91艾滋病实验室检测管理
45、与设备维护S1S2S3S4工厂测试使用校正过的测量系统或数据自动记录系统进行温度和压力曲线的测定，并测定真空（如果有的话）+安装测试使用校正过的测量系统或数据自动记录系统进行温度和压力曲线的测定，并测定真空（如果有的话）_(+)+现场验收测试使用生物指示剂（DIN EN 866)，选取有代表性的最小和最大装样量进行测试，并使用适当装样量对每个灭菌程序进行验证。_(+)(+)(+)校准每年对传感器和测定系统进行校准_(+)(+)(+)生物测试使用生物指示剂（DIN EN 866)，选取有代表性的最小和最大装样量进行测试，并使用适当装样量对每个废物灭菌程序进行验证。_+保养由制造商提供保养计划+实
46、验室级别仪器和过程的验证初始验证初始验证再验证再验证生物安全实验室高压灭菌器的验证和再验证生物安全实验室高压灭菌器的验证和再验证92艾滋病实验室检测管理与设备维护l压力表需要定期检验l等气压和温度下降到正常后,再开阀l高压时,放入指示纸,以便判定灭菌效果93艾滋病实验室检测管理与设备维护 对检验的准确性和有效性有影响的对检验的准确性和有效性有影响的仪器设备必须进行检定和校准。仪器设备必须进行检定和校准。有国家计量检定规程的仪器设备，由法有国家计量检定规程的仪器设备，由法定计量检定机构或经计量行政部门授权定计量检定机构或经计量行政部门授权的技术机构进行检定；的技术机构进行检定；没有国家检定规程的
47、，可以由厂家、自没有国家检定规程的，可以由厂家、自行检定和校准。行检定和校准。94艾滋病实验室检测管理与设备维护l每年制订仪器设备周期检定计划。每年制订仪器设备周期检定计划。l经检定的仪器设备均应按检定或校验结经检定的仪器设备均应按检定或校验结果贴上标志，合格标志为果贴上标志，合格标志为绿色绿色、准用标、准用标志为志为黄色黄色、停用标志为、停用标志为红色红色。l凡检定不合格或超过检定有效期的仪器凡检定不合格或超过检定有效期的仪器设备，一律不得用于检验工作。对超过设备，一律不得用于检验工作。对超过检定期，但暂时不用的仪器设备，贴上检定期，但暂时不用的仪器设备，贴上停用标志。停用标志。95艾滋病实
48、验室检测管理与设备维护l计量仪器（量具除外）在两次检定和校计量仪器（量具除外）在两次检定和校验之间，应根据其使用程度及仪器的具验之间，应根据其使用程度及仪器的具体情况安排运行检查。计量负责人负责体情况安排运行检查。计量负责人负责制定运行检查规程和相关原始记录表。制定运行检查规程和相关原始记录表。规程应至少包括以下内容：运行检查周规程应至少包括以下内容：运行检查周期、检查项目及方法、合格判定指标。期、检查项目及方法、合格判定指标。96艾滋病实验室检测管理与设备维护l所有检定计划、运行检查计划、仪器设所有检定计划、运行检查计划、仪器设备检验规程、运行检查过程及检定证书、备检验规程、运行检查过程及检
49、定证书、测试报告或校验记录、运行检查记录等测试报告或校验记录、运行检查记录等资料应及时存档。资料应及时存档。97艾滋病实验室检测管理与设备维护l在实际工作中应当分析检测设备和计量器具对在实际工作中应当分析检测设备和计量器具对分析测试结果的影响，特别要注意分析测试结果的影响，特别要注意“用于检测用于检测的所有设备的所有设备”和和“辅助测量设备辅助测量设备”两点。两点。1 1）如果承担分析检测工作的主要仪器设备）如果承担分析检测工作的主要仪器设备对环境有特殊要求，并且该要求会对检测结果对环境有特殊要求，并且该要求会对检测结果有重要影响，则环境检测设备的检定和校准就有重要影响，则环境检测设备的检定和
50、校准就很重要，如温度计、湿度计、及实验室洁净度很重要，如温度计、湿度计、及实验室洁净度检测仪器等。检测仪器等。98艾滋病实验室检测管理与设备维护 2 2）检测结果要可追溯，也就是检测、）检测结果要可追溯，也就是检测、检定和校准可以链式溯源，必须保证不检定和校准可以链式溯源，必须保证不能断链。不仅大型仪器设备需要定期检能断链。不仅大型仪器设备需要定期检定校准，特别要注意小型设备、计量器定校准，特别要注意小型设备、计量器具、标准物质和标准样品都要有可溯源具、标准物质和标准样品都要有可溯源的校准链。的校准链。99艾滋病实验室检测管理与设备维护lISO/IEC17025ISO/IEC17025（检测和
