1、妇科感染常见病原菌及检测方法妇科感染常见病原菌及检测方法妇科感染常见疾病妇科感染常见疾病阴道病阴道病/阴道炎阴道炎尿道炎尿道炎子宫颈炎子宫颈炎盆腔感染盆腔感染 子宫内膜炎子宫内膜炎 输卵管卵巢脓肿输卵管卵巢脓肿 输卵管炎症输卵管炎症妇科感染实验室检查的意义妇科感染实验室检查的意义很多妇科感染症状、体征有很多相似之很多妇科感染症状、体征有很多相似之处。处。临床诊断本身既不敏感，也不特异临床诊断本身既不敏感，也不特异。实验室诊断可以：实验室诊断可以：明确病原微生物，使治疗更具针对性；明确病原微生物，使治疗更具针对性；提高患者治疗依从性；提高患者治疗依从性；使患者更有可能遵从性伴侣告知使患者更有可能
2、遵从性伴侣告知。病例一病例一患者，女性，患者，女性，2424岁，已婚，孕岁，已婚，孕2525周。外阴瘙周。外阴瘙痒一周来就诊。妇检：宫高与妊娠月份相符痒一周来就诊。妇检：宫高与妊娠月份相符,外阴潮红、充血，见大量黄色脓性分泌物外阴潮红、充血，见大量黄色脓性分泌物。考虑什么病？进一步做什么检查？考虑什么病？进一步做什么检查？阴道炎阴道炎正常情况下阴道内寄居有大量需氧菌及正常情况下阴道内寄居有大量需氧菌及厌氧菌，形成厌氧菌，形成正常的阴道菌群正常的阴道菌群。任何原因将阴道菌群生态平衡打破，可任何原因将阴道菌群生态平衡打破，可形成形成条件致病菌，引起阴道炎条件致病菌，引起阴道炎。阴道粘膜生态系统阴道
3、粘膜生态系统阴道炎阴道炎临床常见有：细菌性阴道病、念珠菌性阴临床常见有：细菌性阴道病、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎。道炎、滴虫性阴道炎。吴文湘,廖秦平.阴道炎的诊治进展J.中国实用妇科与产科杂志,2009(12):949-952.阴道炎相关病原实验室检查阴道炎相关病原实验室检查病例病例1患者，女性，患者，女性，2424岁，已婚，孕岁，已婚，孕2525周。外阴瘙痒一周。外阴瘙痒一周来就诊。妇检：宫高与妊娠月份相符周来就诊。妇检：宫高与妊娠月份相符,外阴潮外阴潮红、充血，见大量黄色脓性分泌物。红、充血，见大量黄色脓性分泌物。医生：医生：根据病史及临床表现可初步诊断为根据病史及临床表现可初步诊断为。
4、，以明确病原学诊断。，以明确病原学诊断。念珠菌性阴道炎念珠菌性阴道炎主要病原菌为：主要病原菌为：白色假丝酵母菌白色假丝酵母菌 约占约占80%-90%光滑假丝酵母菌光滑假丝酵母菌 热带假丝酵母菌热带假丝酵母菌 近平滑假丝酵母菌近平滑假丝酵母菌约占约占10%-20%念珠菌性阴道炎的实验室诊断念珠菌性阴道炎的实验室诊断1.pH 4.51.pH 4.51.pH 4.52.2.盐水湿片盐水湿片+10%KOH+10%KOH3.3.定量革兰染色定量革兰染色Nugent评分评分4.DNA4.DNA杂交探针杂交探针线索细胞线索细胞KOH氢氧化钾氢氧化钾盐水湿片盐水湿片线索细胞线索细胞是诊断是诊断BVBV的最敏感
5、特异的指的最敏感特异的指标标。胺试验胺试验将一滴阴道分泌物滴于玻片上，再加一滴将一滴阴道分泌物滴于玻片上，再加一滴10KOH，可闻到氨味或鱼腥样气味，即，可闻到氨味或鱼腥样气味，即胺试验阳性。胺试验阳性。10%KOH氢氧化钾氢氧化钾定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评评分分定量革兰染色是定量革兰染色是BV 诊断最特异的检查诊断最特异的检查。定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评评分分乳酸杆菌革兰染色乳酸杆菌革兰染色定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评评分分阴道加德纳菌革兰染色阴道加德纳菌革兰染色定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评评分分动弯杆菌革兰染色动弯杆菌革兰染色定量革兰染色
6、定量革兰染色 Nugent评评分分线索细胞革兰染色线索细胞革兰染色定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评评分分分数解释标准：分数解释标准：0-3 分分 正常正常 4-7 分分 中介中介 7-10 7-10 分分 细菌性阴道炎细菌性阴道炎定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评评分分乳酸杆菌乳酸杆菌0分，上皮细胞周围非常清楚。分，上皮细胞周围非常清楚。评分：评分：0分分定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评评分分乳酸杆菌乳酸杆菌0分，少量杂菌，见白细胞和菌丝。分，少量杂菌，见白细胞和菌丝。评分：评分：1分分 诊断：诊断：BV阴性，但诊断为阴性，但诊断为VVC定量革兰染色定量革兰染色 Nuge
7、nt评评分分乳酸杆菌乳酸杆菌2分，加德纳菌分，加德纳菌/普雷沃菌等普雷沃菌等 3分分，动弯杆菌，动弯杆菌 1分。分。评分：评分：6分分 诊断：诊断：BV中间型中间型定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评评分分乳酸杆菌乳酸杆菌3分，加德纳菌分，加德纳菌/普雷沃菌等普雷沃菌等 3分，动分，动弯杆菌弯杆菌 4分。分。评分：评分：10分分 诊断：诊断：BV阴道毛滴虫阴道毛滴虫 阴道的致病性厌氧寄生原虫，虫体为阴道的致病性厌氧寄生原虫，虫体为 8-45m，呈梨形或椭圆形，无色透明，大小为，呈梨形或椭圆形，无色透明，大小为白细胞的白细胞的2-3倍。倍。毛滴虫性阴道炎的实验室诊断毛滴虫性阴道炎的实验室诊断
8、1.pH 4.51.pH 4.52.2.盐水湿片盐水湿片3.3.快速抗原检查快速抗原检查4.DNA4.DNA杂交探针杂交探针5.5.培养培养6.6.核酸扩增实验核酸扩增实验盐水湿片盐水湿片革兰染色革兰染色快速抗原检查快速抗原检查检测阴道毛滴虫特定的抗原检测阴道毛滴虫特定的抗原已有商品化试剂已有商品化试剂最优试验条件并不需要活的微生物最优试验条件并不需要活的微生物培养培养核酸扩增试验核酸扩增试验APTIMA Trichomonas vaginalis(ATV)test（Gen-Probe,Inc.San Diego,CA）是）是近期近期FDA 批准的检查，既可用于女性批准的检查，既可用于女性TV
9、 的筛检，也可用于诊断。的筛检，也可用于诊断。可以使用多种标本类型。可以使用多种标本类型。一些实验室也可通过比对，验证自己的一些实验室也可通过比对，验证自己的PCR方法。方法。病例二病例二患者，女性，患者，女性，4040岁，已婚，阴道分泌物增多岁，已婚，阴道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血，伴腰酸，偶有性生活后出血2 2年。检查外年。检查外阴正常，宫颈肥大，阴正常，宫颈肥大，度糜烂，接触性出血度糜烂，接触性出血。考虑什么病？进一步做什么检查？考虑什么病？进一步做什么检查？子宫颈炎子宫颈炎子宫颈可因各种致病因素的侵袭而发生炎症子宫颈可因各种致病因素的侵袭而发生炎症，有急性和慢性两种。，有急性
10、和慢性两种。尿道炎尿道炎是指尿道黏膜的炎症是指尿道黏膜的炎症。多为致病菌逆行侵。多为致病菌逆行侵入尿道引起。入尿道引起。尿道炎尿道炎/宫颈炎相关病原实验室检查宫颈炎相关病原实验室检查尿道炎尿道炎/宫颈炎相关病原实验室检查宫颈炎相关病原实验室检查病例二病例二患者，女性，患者，女性，4040岁，已婚，阴道分泌物增多岁，已婚，阴道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血，伴腰酸，偶有性生活后出血2 2年。检查外年。检查外阴正常，宫颈肥大，阴正常，宫颈肥大，度糜烂，接触性出血度糜烂，接触性出血。医生：医生：根据临床表现初步诊断为根据临床表现初步诊断为。取。取，嘱病人，嘱病人送检送检（注意保温），以明确感染
11、病原体。（注意保温），以明确感染病原体。淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌革兰染色革兰染色 为革兰阴性双球菌，似肾形或咖啡豆状，常为革兰阴性双球菌，似肾形或咖啡豆状，常成双排列，凹面相对。成双排列，凹面相对。急性淋病患者的淋球菌常被吞噬于中性粒细急性淋病患者的淋球菌常被吞噬于中性粒细胞内；慢性淋病患者的淋球菌多分布在细胞外。胞内；慢性淋病患者的淋球菌多分布在细胞外。简便、快速，可做出初步诊断。简便、快速，可做出初步诊断。仅对男性患仅对男性患者进行涂片革兰染色者进行涂片革兰染色。淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌细胞内革兰阴性双球菌细胞内革兰阴性双球菌对对GC 特异性达特异性达95细胞外革兰阴性双球菌细胞外革兰阴性双球菌对
12、对GC 特异性达特异性达10-29培养培养诊断淋病的重要手段诊断淋病的重要手段接种到接种到选择培养基选择培养基，置于，置于36、含、含5-10%CO2，湿润湿润环境中培养。环境中培养。如果床边直接接种标本到选择培养基，加如果床边直接接种标本到选择培养基，加CO2 药片形成气体环境，培养敏感性会更好药片形成气体环境，培养敏感性会更好。培养培养初代培养生长缓慢，初代培养生长缓慢，24小时后可形成灰色小时后可形成灰色/湿湿润、半透明的小菌落（直径润、半透明的小菌落（直径0.5-1mm）。）。氧化酶阳性、触酶阳性、葡萄糖产酸试验阳性氧化酶阳性、触酶阳性、葡萄糖产酸试验阳性且仅分解利用葡萄糖。且仅分解利
13、用葡萄糖。图片图片by陈东科陈东科核酸扩增试验核酸扩增试验已有商品化试剂盒。已有商品化试剂盒。优点是快速、准确，缺点是试验设备要求优点是快速、准确，缺点是试验设备要求高。高。淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌DNA 在感染成功治疗后，在标在感染成功治疗后，在标本中仍可保留本中仍可保留3周之久，所以不能作为治疗周之久，所以不能作为治疗评估指标。评估指标。杂交探针杂交探针目前目前FDA 已有批准的已有批准的GC的杂交试验试的杂交试验试剂盒。剂盒。不可针对尿标本。不可针对尿标本。病例三病例三病人，女，病人，女，24岁，主诉为持续岁，主诉为持续3天的轻度排天的轻度排尿困难，化脓性阴道分泌物，发热，并伴尿困难，化脓性
14、阴道分泌物，发热，并伴有中度的双侧下腹痛。查体：子宫和附件有中度的双侧下腹痛。查体：子宫和附件压痛，化脓性宫颈分泌物。压痛，化脓性宫颈分泌物。考虑什么病？进一步做什么检查？考虑什么病？进一步做什么检查？盆腔炎盆腔炎盆腔炎症性疾病是女性上生殖道一系列疾盆腔炎症性疾病是女性上生殖道一系列疾病的总称。病的总称。包括：包括：子宫内膜炎子宫内膜炎 输卵管卵巢脓肿输卵管卵巢脓肿 输卵管炎症输卵管炎症 盆腔腹膜炎盆腔腹膜炎盆腔炎致病菌盆腔炎致病菌盆腔炎外源性病原体外源性病原体内源性病原体内源性病原体主要为性传播疾病主要为性传播疾病病原体：淋病奈瑟病原体：淋病奈瑟菌、沙眼衣原体、菌、沙眼衣原体、支原体等支原体
15、等来自于原寄生于阴道来自于原寄生于阴道的正常菌群，包括：的正常菌群，包括：需氧菌和厌氧菌需氧菌和厌氧菌内源性病原体内源性病原体需氧菌及兼性厌氧菌需氧菌及兼性厌氧菌：金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌、阴道加德纳菌等阴道加德纳菌等厌氧菌：厌氧菌：脆弱拟杆菌、消化链球菌、普雷沃菌、真杆脆弱拟杆菌、消化链球菌、普雷沃菌、真杆菌等菌等 感染特点：容易形成盆腔脓肿、感染性血栓感染特点：容易形成盆腔脓肿、感染性血栓静脉炎，脓液有粪臭并有气泡静脉炎，脓液有粪臭并有气泡盆腔炎相关病原实验室检查盆腔炎相关病原实验室检查病例三病例三病人，女，病人，女，24岁，主诉为持续岁，主诉
16、为持续3天的轻度排天的轻度排尿困难，化脓性阴道分泌物，发热，并伴有尿困难，化脓性阴道分泌物，发热，并伴有中度的双侧下腹痛。查体：子宫和附件压痛中度的双侧下腹痛。查体：子宫和附件压痛，化脓性宫颈分泌物。，化脓性宫颈分泌物。医生：医生：根据临床表现初步诊断为根据临床表现初步诊断为。进一步送检至少一套血培养，抽。进一步送检至少一套血培养，抽取脓肿置于厌氧容器尽快送检，并取宫取脓肿置于厌氧容器尽快送检，并取宫颈内拭子送检，必要时取子宫内膜活检颈内拭子送检，必要时取子宫内膜活检，以明确感染病原体。，以明确感染病原体。盆腔炎相关厌氧菌培养流程 分离培养分离培养挑取菌落挑取菌落需氧培养需氧培养厌氧培养厌氧培
17、养厌氧培养厌氧培养生长生长不生长不生长生长生长专性厌氧菌：专性厌氧菌：做第二次耐氧试验做第二次耐氧试验形态染色形态染色 菌落特征菌落特征 生化反应生化反应 药敏鉴定药敏鉴定 气相色谱气相色谱厌氧（厌氧（+）需氧（需氧（-）兼性厌氧菌兼性厌氧菌标本标本肉眼观察肉眼观察染色镜检染色镜检直接涂片染色镜检直接涂片染色镜检 在接种时做涂片，革兰染色并镜检：在接种时做涂片，革兰染色并镜检：观察脓细胞的有无及特殊情况，细菌与细观察脓细胞的有无及特殊情况，细菌与细胞之间的相关性。胞之间的相关性。观察有无细菌，微生物的类型和大概的数观察有无细菌，微生物的类型和大概的数量以及有无芽孢、形状和位置、着色及菌量以及有
18、无芽孢、形状和位置、着色及菌体特征。体特征。大致推断微生物的种类，如梭菌、放线菌大致推断微生物的种类，如梭菌、放线菌、拟杆菌、消化球菌和消化链球菌等。、拟杆菌、消化球菌和消化链球菌等。常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征拟杆菌、普雷沃菌属产气荚膜梭菌，破伤风梭菌双歧杆菌属，真杆菌属乳酸杆菌属，放线菌属消化链球菌属，消化球菌属常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征革兰阴性杆菌，两端钝圆着色深，中间着革兰阴性杆菌，两端钝圆着色深，中间着色浅不均匀，且有空泡，长短不一色浅不均匀，且有空泡，长短不一拟拟杆菌杆菌常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征革兰阳性粗短两端钝圆杆菌，无芽孢，中革兰阳性粗短两端钝圆杆菌，无芽孢，中性粒细胞也
19、很少且变形破碎，标本来自战性粒细胞也很少且变形破碎，标本来自战伤或肢体严重肿胀者伤或肢体严重肿胀者产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征革兰阳性杆菌，菌体有分枝，呈棒状或栅革兰阳性杆菌，菌体有分枝，呈棒状或栅状排列状排列放线菌放线菌革兰阴性厌氧菌鉴定（革兰阴性厌氧菌鉴定（CLSI M35-A2）革兰阳性厌氧菌鉴定（革兰阳性厌氧菌鉴定（CLSI M35-A2）商品化的鉴定试剂商品化的鉴定试剂我们使用的是商品化的厌氧菌鉴定卡API 20A和ANC病例三病例三该患者脓液涂片见革兰阴性杆菌，染色不该患者脓液涂片见革兰阴性杆菌，染色不均，两端圆而深染，中间不着色或染色较均，两端圆而深染，中间不着色或染色较浅，似为空泡。浅，似为空泡。病例三脓液培养：在厌氧血平板上生长良好，形脓液培养：在厌氧血平板上生长良好，形成圆形、微凸、光滑、边缘整齐、半透明成圆形、微凸、光滑、边缘整齐、半透明、灰白色，不溶血的菌落。需养平板上不、灰白色，不溶血的菌落。需养平板上不生长。生长。病例三API鉴定卡鉴定为鉴定卡鉴定为脆弱拟杆菌脆弱拟杆菌感谢您的聆听！感谢您的聆听！
