呼吸道病毒抗原检测在呼吸道感染中的应用价值培训课件.ppt

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1、本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。Acute respiratory infection(ARIs)Upper respiratory tract infection(URI)普通感冒 流行性感冒 以咽炎为主要表现的感染 Lower respiratory tract infection(LRI)支气管炎 肺炎 社区获得性肺炎(Community Acquired Pneumonia,CAP)医院获得性肺炎(Hospital Acquired Pneumonia)本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如

2、有不当之处,请联系本人或网站删除。70%80%的上呼吸道感染是由病毒引起1 90%的急性支气管炎由病毒引起,10%由细菌引起2 针对成人,1556%肺炎由病毒引起,而在儿童感染中,4367%由病毒引起。其中儿童中有45%的病毒与细菌的混合感染,而成人中为15%3 1.Mkel MJ,Puhakka T,Ruuskanen O,et al.Viruses and bacteria in the etiology of the common cold.J Clin Microbiol 1998;36:539-42.2.Cohen,Jonathan and William Powderly.Infe

3、ctious Diseases.2nd ed.Mosby(Elsevier),2004.Chapter 33:Bronchitis,Bronchiectasis,and Cystic Fibrosis.3.Ruuskanen,O;Lahti,E,Jennings,LC,Murdoch,DR(2011-04-09).Viral pneumonia.Lancet 377(9773):126475.Etiology&Epidemiology本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。所有呼吸道病毒都会引起相似的症状 流行感冒综合症(流感病毒A、

4、B,人肺炎病毒与腺病毒所引起)发烧,咳嗽 咽喉痛,肌无力 头痛 恶心,呕吐 坏死性肺炎 肺部细胞死亡 腺病毒 心脏骤停,肺炎/多器官衰竭 呼吸道合胞病毒,流感 严重急性呼吸系统综合症 SARS病毒,某些 H5N1(禽流感)流感,副流感,腺病毒,呼吸道合胞病毒本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。主要几次爆发的A型流感病毒大流感的亚型 1918-19 西班牙大流感:H1N1(仍然流行)2009 发现一种新型:H1N1 (也仍然流行)1957-58 亚洲大流感:H2N2(得到控制)1968 香港大流感:H3N2(仍然流行)其他几次A型流

5、感的亚型 1970 猪流感:H1N1 1997-98,2003-06 禽流感:H5N1(得到控制)2013禽流感:H7N9()流感病毒本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。服用抗病毒药物48小时内即 出现明显作用 快速诊断对于病人治疗选择非常有必要 许多临床医生对这些症状的病人使用抗生素类药物,这些药物效果不大、价格昂贵、并且有副作用 一经诊断,抗病毒药物将是非常有效的流行性感冒 患者管理本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。药物名称药物名称原产地药物名原产地药物名品牌生

6、产商品牌生产商Amantadine金刚烷胺SymmetrelEndo Pharmaceuticals Inc.Rimantidine金刚烷乙胺FlumadineForest LaboratoriesZanamivir扎那米韦Relenza瑞乐沙Glaxo SmithKline葛兰素史克Oseltamivir特敏福/达菲/克流感Tamiflu奥司他韦Hoffman-LaRoche,Inc.罗氏制药金刚烷胺(金刚烷胺(Amantidine):):流感病流感病毒毒A导致的早期患病者中,服用该导致的早期患病者中,服用该药有很好的防止作用。然而,病毒药有很好的防止作用。然而,病毒会很快产生耐药反应。会很

7、快产生耐药反应。金刚烷乙胺(金刚烷乙胺(Rimantidine):类似类似于金刚烷胺,但副作用小。于金刚烷胺,但副作用小。神经氨酸酶抑制药物(扎那米韦、神经氨酸酶抑制药物(扎那米韦、奥司他韦)奥司他韦)都是可用药物。这些药都是可用药物。这些药物效果显著并且比金刚烷胺的副作物效果显著并且比金刚烷胺的副作用小,病毒对药物的抑制作用出现用小,病毒对药物的抑制作用出现也较晚。也较晚。抗病毒药物在服用48小时内作用明显流行性感冒 患者管理本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。没有专门的抗病毒药物,不能使用抗生素 疫苗可以用作预防成人呼吸道窘迫

8、综合征 疫苗是将减活的腺病毒4、7、21放在同一个胶囊剂中 世界范围内新研制的多种成果让疫苗更好的预防疾病的发生腺病毒 患者管理本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。按照优先顺序,建议使用以下的流感测试:A.实时荧光定量PCR(RT-PCR)B.抗原检测 C.病毒分离培养 D.不推荐使用血清学检测(抗体检测)美国儿科学会(AAP)及CDC推荐的流感病毒诊断方法本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。抗原检测主要分为间接免疫荧光法(IFA)和直接免疫荧光法(DFA)。DFA法

9、较IFA法的步骤更为简便,而且减少了后一种方法中二抗的非特异性反应,从而大大地提高了诊断的特异性。因此,在国外,很多主流的病原微生物检测产品采用的是直接免疫荧光法。抗原检测本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。抗原检测是一种快速、简便的检测方法,能作为病毒感染的早期诊断。而现在国内大多使用的血清学测试不能用于早期诊断:单一血清标本的流感血清学试验数据不可信 1。配对的急性和恢复期血清标本用于测定抗体滴度,适用于回顾性诊断和科研目的1。病毒的抗原和核酸检测可以用于早期诊断;抗体检测可以用于回顾性调查,但对病例的早期诊断意义不大2。1

10、Harper SA,Bradley JS,Englund JA,et al.Seasonal Influenza in Adults and ChildrenDiagnosis,Treatment,Chemoprophylaxis,and Institutional Outbreak Management:Clinical Practice Guidelines of the Infectious Diseases Society of America.Clin Infect Dis.2009 Apr 15;48(8):1003-32.2 中国卫生部颁布的流行性感冒诊断与治疗指南(2011年版

11、)抗原检测和血清学检测的本质区别本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。1、病毒治疗针对性强病毒种类抗病毒药物流感病毒金刚烷乙胺、瑞乐沙、奥司他韦(达菲)呼吸道合胞病毒利巴韦林喷雾剂副流感病毒利巴韦林腺病毒主要采取支持治疗,西多福韦(静脉注射)Ruuskanen O,Lahti E,Jennings LC,et al.Viral pneumonia.Lancet.2011 Apr 9;377(9773):1264-75.为什么要早期诊断?本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除

12、。2、病毒治疗有时效性大部分呼吸道病毒越早治疗效果越好。比如,在出现流感症状的48小时内使用奥司他韦效果最好,过了这个时间段后疗效甚微。奥司他韦在体内的活性形式与神经氨酸(NA)的过渡态相似,能够竞争性地与流感病毒神经氨酸酶的活性位点结合,因而是一种强效的高选择性的流感病毒NA抑制剂(NAIs),它主要通过干扰病毒从被感染的宿主细胞中释放,从而减少甲型或乙型流感病毒的传播。这在2011版流感诊疗指南中也有明确提到。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。3、避免抗生素的滥用准确的诊断能帮助医生确定是否使用抗生素来治疗病人。滥用抗生素危

13、害很多,最主要的是细菌耐药性问题。世界上已出现多种超级细菌,它们对许多抗生素耐药。同时,滥用抗生素还会导致隐形伤亡,对肌体和体质造成长远损害。许多抗生素都是通过肝肾代谢的,滥用抗生素会引发药物性肝炎或导致肾功能不全。本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。病毒名称IgM检出日期检出率IgM持续时间流感病毒0-7天8-14天61-112天10%78%71%2-20周副流感病毒平均6.7天2-11周呼吸道合胞病毒5-6天2-10周腺病毒0-7天50%2个月Immunoassay Diagnosis of Adenovirus Infect

14、ions in Children.Examination for influenza IgA and IgM antibodies in pregnancies associated with fetal neural-tube defects.Serum IgM antibody and influenza A infection.Serum IgM and IgA responses in influenza A infections.Isotype-and subclass-specific responses to infection and reinfection with para

15、influenza-3 virus:comparison of the diagnostic potential of ELISAs detecting seroconversion and specific IgM and IgA.Cell-Free and Cell-Bound Antibody in Nasal Secretions from Infants with Respiratory Syncytial Virus Infection.检测抗原不仅仅是早期诊断!本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。可同时通过荧光检测七

16、种病毒 可筛查或分别定性检测A、B型流感病毒,呼吸道合胞病毒,腺病毒和副流感病毒1、2和3型共七种呼吸道疾病相关病毒。阳性:呈现果绿色阴性:无绿色,只呈现背景色七项呼吸道病毒抗原检测试剂本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。快速、灵敏地检测 采用一步染色法,孵育15分钟后可观察结果 经过严格筛选的、FITC标记的、用于检测7种病毒的单克隆抗体本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。Direct Fluorescent Anti-body Test(sensitivity 9

17、8.3%100%,specificity 95.5%100%,D3 Ultra DFA,Diagnostic Hybrids)Farooq O,Faden HS,Cohen ME,et al.Neurologic complications of 2009 influenza-a H1N1 infection in children.J Child Neurol.2012 Apr;27(4):431-8.D3试剂和病毒分离培养法相比,灵敏度和特异性都非常高。产品性能(数据)本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。Pollock NR,

18、Duong S,Cheng A,et al.Ruling out novel H1N1 influenza virus infection with direct fluorescent antigen testing.Clin Infect Dis.2009 Sep 15;49(6):e66-8.在这篇报道中,作者的结论是:他们所在医院通过采集高质量的标本(单孔样本中的柱状上皮细胞数达60个以上),从而使检测的灵敏度和特异性均接近PCR,因此DFA试剂能非常有效地对甲型流感病毒进行排查检测。The DFA was calculated to have a sensitivity of 93%

19、(95%confidence interval CI,8%),specificity of 97%(95%CI,4%),negative predictive value 96%(95%CI,5%),and positive predictive value of 95%(95%CI,7%)relative to PCR.本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。目前,国内大多数医院还在使用血清学方法对呼吸道病毒进行诊断。而使用D3 Ultra DFA试剂不仅能给临床用药提供相关依据,而且还避免了抗生素的滥用。提高医院对呼吸道病毒的诊疗

20、水平本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。1.区分病毒感染还是细菌感染,只要使用血常规和CRP等就可以了。IDSA出版的CAP指南中明确指出:急性期反应物:血沉(ESR)、C-反应蛋白、血清降钙素原等不能单独作为区分病毒还是细菌感染。(strong recommendation;high-quality evidence)Zhang T,Zhu Q,Zhang X,et al.The Clinical Characteristics and Direct Medical Cost of Influenza in Hospitaliz

21、ed Children:A Five-Year Retrospective Study in Suzhou,China.PLoS One.2012;7(9):e44391.对呼吸道病毒诊疗认识的一些误区本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。2.病毒治疗和不治疗差不多,病人自己会痊愈。2009年的一次调查中,920个成人,其中没有接受抗病毒治疗的患者死亡率是18.2%,而接受不同时期抗病毒治疗(奥司他韦)的死亡率分别为2.9%(2天),4.6%(2-5天)和4.9%(5天)1。在儿童中(n=541),通过Cox回归分析,也得到相似的结

22、论,没有接受抗病毒治疗的死亡率是10.8%,而接受不同时期抗病毒治疗(奥司他韦)的死亡率分别为1.8%(2天),3.3%(2-5天)和3.7%(5天)1。H1N1发病超过5天后才服用奥司他韦等抗病毒药物仍然会增加重症危险2。1 Yang SG,Cao B,Liang LR,et al.Antiviral therapy and outcomes of patients with pneumonia caused by influenza A pandemic(H1N1)virus.PLoS One.2012;7(1):e29652.Epub 2012 Jan 20.2 Yu H,Feng Z,

23、Uyeki TM,et al.Risk factors for severe illness with 2009 pandemic influenza A(H1N1)virus infection in China.Clin Infect Dis.2011 Feb 15;52(4):457-65.本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。本项目的开展可以很好地避免抗生素的滥用,同时也是顺应了卫生部2012年抗生素滥用专项整治活动的要求。准确的诊断能帮助医生确定是否使用抗生素来治疗病人。同时也减少患者看病负担,合理准确的用药能帮助患者更快

24、地痊愈,减少因无效治疗带来的经济负担。本项目的开展还有助于监控疾病的大规模传染,呼吸道病毒相对其它病原体更容易在人群中大规模传播。因此,对于危害性较大、传播速度快、范围广的呼吸道病毒有必要进行监控,从而防止疾病扩散和减少损失。呼吸道病毒的疫情有效监控也是对社会安定的重要保证。项目的社会效益分析本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。病毒虽然可怕,但是如果能够早发现早治疗,病情是能够得到缓解和控制的。目前国内的呼吸道病毒诊断试剂大多采用抗体检测的方法,不能对患者进行早期诊断,少数采用荧光定量PCR方法的试剂只是针对流感病毒的,无法一次鉴

25、定多种病毒,且成本较高。上海星耀医学代理的美国D3 Ultra DFA试剂很好地弥补了国内市场的空白,其凭借着直接免疫荧光法快速、早期诊断的优势,能够为患者提供优质、高效的诊断结果,同时提高了医院的诊断水平并带来一定的经济效益。相信在不久的将来,抗原检测产品必将成为国内市场的主流产品。总结本文档所提供的信息仅供参考之用,不能作为科学依据,请勿模仿。文档如有不当之处,请联系本人或网站删除。此项目可用于呼吸道病原学的研究 已有二、三十篇使用D3 Ultra DFA试剂用于呼吸道病原学研究的文献发表在国内外的核心期刊上。部分发表论文摘入:胡芙蓉,徐营,李平等.2221例婴幼儿呼吸道感染的检测分析.中

26、华医院感染学杂志2010年第20卷第15期田曼,施圣云,秦铭等.儿童急性下呼吸道感染病毒病原学分析.临床儿科杂志第28 卷第2期2010年2月王春,赵百慧,张泓等.上海市儿童下呼吸道感染常见病毒诊断方法比较.检验医学2011年9月第26卷第9期陈世勇,金霞霞,吴春龙等.浙江省台州地区未成年人呼吸道合胞病毒流行特点分析.疾病监测2010年10月30日第25卷第10期Crawford JM,Stallone R,Zhang F,et al.Laboratory Surge Response to Pandemic(H1N1)2009 Outbreak,New York City Metropolitan Area,USA.Emerg Infect Dis.2010 Jan;16(1):8-13.Zhang T,Zhu Q,Zhang X,et al.The Clinical Characteristics and Direct Medical Cost of Influenza in Hospitalized Children:A Five-Year Retrospective Study in Suzhou,China.PLoS One.2012;7(9):e44391.

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