1、未成熟网织红细胞指数未成熟网织红细胞指数的临床应用的临床应用温州医学院附属第一医院未成熟网织红临床应用1一、概一、概 念念未成熟网织红细胞指数：未成熟网织红细胞指数：（immature reticulocyte fraction，IRF）是指是指幼稚幼稚的或的或未成熟未成熟的网织红细胞的网织红细胞 （即含高RNA的网织红细胞）与与总的总的网织红细胞的比值。网织红细胞的比值。未成熟网织红临床应用2二、检 测 原 理 未成熟网织红细胞的噻唑橙、碱性槐黄噻唑橙、碱性槐黄荧光染料荧光染料 荧光强度 新亚甲蓝、嗪750 光散射 未成熟网织红细胞显示出极亮的荧光强度 或/和较强的光散射特征。未成熟网织红临
2、床应用3三、检测IRF的仪器概况 1.1.SysmexSysmex XEXE2100血细胞分析仪血细胞分析仪 R R3000网织红细胞分析仪网织红细胞分析仪 碱性槐黄碱性槐黄荧光荧光染料染料 前向角散射光前向角散射光 侧向荧光侧向荧光将将Ret分为分为 低荧光强度低荧光强度Ret -LFR 中荧光强度中荧光强度Ret -MFR 高荧光强度高荧光强度Ret -HFR IRF HFR+MFR激光束激光束强度强度未成熟网织红临床应用42.2.ABXPENTRAABXPENTRA120120网织红细胞分析仪网织红细胞分析仪 噻唑橙噻唑橙荧光荧光染料染料 RNA 微孔微孔 细胞阻抗信号细胞阻抗信号 体积
3、体积 激光束激光束 垂直荧光垂直荧光 结构结构 将将Ret分为分为 低低RNA含量含量-Ret L 中中RNA含量含量-Ret M 高高RNA含量含量-Ret H IRF Ret M+Ret H未成熟网织红临床应用5 3.3.拜尔拜尔 DVIADVIA120120血细胞分析仪血细胞分析仪 染料嗪染料嗪 750 RNA 低角光散射低角光散射 大小大小 高角光散射高角光散射 血红蛋白浓度血红蛋白浓度 光吸收信号光吸收信号 RNARNA含量含量固体激光二极管固体激光二极管未成熟网织红临床应用6 4.4.雅培雅培 CELL-DYNCELL-DYN37003700血细胞分析仪血细胞分析仪 新亚甲蓝新亚甲
4、蓝 RNARNA 0 0光散射光散射 排除血小板排除血小板 10 10光散射光散射 测定测定RBC和和Ret 90 90光散射光散射 测定测定Ret IRFIRF 90 90光散射强度光散射强度 氦氖激光氦氖激光未成熟网织红临床应用75.5.库尔特血细胞分析仪库尔特血细胞分析仪 新亚甲蓝染料新亚甲蓝染料 电阻法电阻法 细胞体积细胞体积 高频传导技术高频传导技术 细胞内部信息细胞内部信息 激光散射光激光散射光 细胞表面及颗粒特征细胞表面及颗粒特征 高光散射区域数高光散射区域数/总区域总区域技术技术未成熟网织红临床应用8四、四、IRF IRF 的的 临临 床床 应应 用用（一）骨髓移植的监测作用（
5、一）骨髓移植的监测作用 认为认为IRFIRF与绝对中性粒细胞计数与绝对中性粒细胞计数(ANC)的变化趋势极为的变化趋势极为一致一致,并对恢复骨髓活性的反应并对恢复骨髓活性的反应超过超过了了ANCANC。（临床或亚临床感染时能够引起临床或亚临床感染时能够引起ANC受抑受抑）IRFIRF较移植前较移植前增加增加20%提示骨髓红系植活。提示骨髓红系植活。与与RetRet比较比较提前提前了了一半一半时间。时间。未成熟网织红临床应用9(二二)、贫血诊治的观察价值贫血诊治的观察价值 1.1.EPOEPO对肾性贫血治疗过程中的应用对肾性贫血治疗过程中的应用 发现发现RetRet和和IRFIRF在在2 2后明
6、显增高后明显增高,而其它红细胞参数在早期尚未检出其疗效反应。而其它红细胞参数在早期尚未检出其疗效反应。2.2.在肾移植过程中的应用在肾移植过程中的应用 当当IRFIRF在移植后在移植后升高升高25%以上时以上时,较网织红细胞绝对数较网织红细胞绝对数平均平均早早上升上升7,认为认为IRFIRF是肾移植后红系生成是肾移植后红系生成最敏感最敏感的早期标志物。的早期标志物。未成熟网织红临床应用103.3.IRFIRF和和RetRet在一般性贫血中的应用在一般性贫血中的应用 临床诊断 Ret IRF AA 低 低 HA 高 高叶酸或VitB12缺乏 低/正常 高地中海贫血 正常/高 正常/高 铁缺乏 低
7、/正常 高 慢性疾病 低/正常 正常 骨髓再生 低 高/正常增生减低性贫血 低 低 失血/缺氧 正常/高 高未成熟网织红临床应用11五、对五、对IRFIRF在肾移植过程中在肾移植过程中 的变化及意义的探讨的变化及意义的探讨(一）一）目的目的 探讨肾移植手术后未成熟网织红细胞指探讨肾移植手术后未成熟网织红细胞指数（数（IRF）的变化规律及临床意义。的变化规律及临床意义。未成熟网织红临床应用12（二）标（二）标 本本 的的 来来 源源正常对照组 50例我院健康体检者各种患者组 32例肾移植患者 （手术前、手术后3天、7天、14天、21天、28天和56天 不同时间段的标本）未成熟网织红临床应用13（
8、三）标（三）标 本本 的的 采采 集集1.采血采血1mL+15ll 15%EDTA-K2 充分混匀，并在充分混匀，并在2 2小时内小时内测定完毕。测定完毕。2.2.采血采血2 2mL于空白试管中，分离血清。于空白试管中，分离血清。未成熟网织红临床应用14（四）测（四）测 定定 方方 法法1 1、EDTA-K2抗凝血 在在GEN-SGEN-S血细胞分析仪上血细胞分析仪上 测定测定IRFIRF、Ret%Ret%、RBCRBC、HgbHgb ，采用配套试剂。采用配套试剂。2、血清标本于日立血清标本于日立7600生化分析仪上生化分析仪上 测定测定Cr和和BUN 未成熟网织红临床应用15（五）统（五）统
9、 计计 学学 处处 理理均数标准差均数标准差(s)组内比较采用配对组内比较采用配对t检验检验两组间比较采用两样本均数两组间比较采用两样本均数t检验检验变量间的变化采用相关分析法变量间的变化采用相关分析法未成熟网织红临床应用16 （六）（六）结结 果果表 肾移植手术前、后不同时间段IRF、Ret%、RBC、Hgb、Cr和BUN变化及与对照组的比较(xs)组别 例数 IRF Ret%RBC Hgb Cr BUN (1012/L)(g/L)（mmol/L）（mmol/L）对照组 50 0.2590.066 0.0120.004 4.630.42 141.411.3 90.06.8 5.961.55手
10、术前 32 0.2280.079 0.0160.009 3.020.75 88.821.2 640.9259.6 19.937.45术后3天 32 0.2750.060 0.0150.007 3.170.58 93.117.9 243.6123.9 12.914.63术后7天 32 0.3450.0960.0130.008 3.180.52 91.815.5 273.0285.3 13.626.80术后14天 32 0.3080.1180.0160.009 3.070.48 88.814.6 194.0149.4 13.668.11术后21天 32 0.3040.1320.0230.0112.
11、930.55 86.117.4 181.6158.5 12.467.91术后28天 32 0.2590.050 0.0250.0073.040.56 89.717.4 151.3124.4 10.775.01术后56天 32 0.3110.079 0.0210.0093.640.61 112.618.2 108.123.9 8.812.10注：与对照组比较P0.05,P0.01；与手术前比较P0.05,P0.01。未成熟网织红临床应用17IRF在移植后第3天就出现升高，第7天达到高峰Ret%在移植后第21天才高于移植前RBC和Hgb在第56天时显著高于移植前IRF的变化与Cr、BUN的量存有一
12、定的负相关性表中显示未成熟网织红临床应用18 IRF是一个对于有足够骨髓储存的病人 1-3天内轻微的红血球改变就能提供明显的证据 IRF的升高是预期肾移植成功的升高是预期肾移植成功 重要的早期敏感的指标 IRF是衡量肾移植成功和肾功能是衡量肾移植成功和肾功能 得到改善的一个很好的指标。未成熟网织红临床应用19六、未成熟网织红细胞在实验性六、未成熟网织红细胞在实验性苯中毒中的变化苯中毒中的变化（一）目的 探讨慢性苯中毒时未成熟网织红细胞指数（IRF）的变化规律。未成熟网织红临床应用201 1、实验方法、实验方法实验动物：小鼠分为对照组和实验组两组资料对照组（对照组（A）玉米油2ml/kg实验组（
13、实验组（B）苯+玉米油2ml/kg每周每周3次次，按注射次数不同分为，按注射次数不同分为 15次、次、18次、次、21次、次、24次次（二）方法（二）方法未成熟网织红临床应用212、标本采集及要求、标本采集及要求眶动脉血0.5ml6ul.15%EDTA-K2未成熟网织红临床应用223、测定指标及方法WBCRBCHBPLTRET%IRFMRV血细胞分析仪血细胞分析仪未成熟网织红临床应用234、统计分析、统计分析各组数据以均数各组数据以均数标准差表示标准差表示实验组与实验组与相应相应对照组测定指标对照组测定指标 比较采用两样本均数比较采用两样本均数t检验检验变量间的变化采用相关分析法变量间的变化采
14、用相关分析法 未成熟网织红临床应用24（三）结果（三）结果 实验组各参数变化趋势图0.20.30.40.50.60.70.80.911.11234实验组（B）与正常对照组的比值 WBCWBC和和IRFIRF下降的幅度最明显且时间也最早下降的幅度最明显且时间也最早WBCIRFRet%Plt RBC HgbMRV 未成熟网织红临床应用251、苯中毒临床特点：、苯中毒临床特点：造血系统异常是慢性苯中毒的主要特征之一，早期中毒以白细胞波动，持续降低为主，以后有血小板减少，最后出现红细胞减少。2 2、本研究显示、本研究显示 小鼠模型符合慢性苯中毒的变化规律。IRF和MRV是反映骨髓红系造血功能的早期 敏感指标。（四）讨论（四）讨论 未成熟网织红临床应用263.结论结论 慢性苯中毒引起再生障碍性贫血时 IRF和MRV降低比其他红系指标早。IRF和和MRV的检测的检测作为了解骨髓红系受抑制状态的新型指标，具有一定的使用价值。未成熟网织红临床应用27未成熟网织红临床应用28
