1、广州医学院第二附属医院10/20/20221 前 言 尿液自动化分析只需几分钟就能出十几项尿化学指标，对病人的健康体检和初诊的快速诊断是无疑的，但由于尿干化学检验法本身检测原理上的局限性，同时存在着许多影响因素而直接影响尿液自动化分析的准确性。而大多数医院将自动化分析结果误认为是尿液化验结果，不了解如何应用这些方法，以至给临床造成许多误诊和漏诊。现就有关尿液分析的临床应用与大家讨论。10/20/20222 结果有二种含义：l反应机体酸碱代谢状态l监控尿pH变化对其他膜块区反应的干扰作用 10/20/20223原理：甲乙烯酸 尿中电解质 溴麝香草酚蓝 黄 酸性 马来酐 H+绿 中性 (COOH)
2、(Na+)(指示剂)蓝 碱性10/20/20224 尿中糖、蛋白、pH对三种方法的影响 干化学法 悬浮法 折射法尿葡萄糖 不受其影响 SG偏高 SG偏高 尿蛋白 SG增高最为明显 影响最少 SG增高次之 pH pH7.0+0.005 pH8.0+0.010 10/20/202251.引起指示制变色的原因可影响结果如pH.蛋白。2.尿标本必须新鲜。3.干化学法不宜用于新生儿尿比重检查。4.干化学法比重结果间隔较大，不能反映较小的比重变 化，对于病理性特别是系统观察的病例仍以折射仪法更为理想。5.NCCLS建议以折射法作为干化学测定尿比重的参比方法。10/20/20226 尿PH 干化学法 比密计
3、法 折射仪法 5.0 1.015 1.015 1.015 6.0 1.015 1.015 1.015 6.5 1.015 1.015 1.015 7.0 1.011 1.015 1.015 8.0 1.010 1.015 1.015 9.0 1.009 1.015 1.01510/20/20227尿糖(mg/L)干化学法 比密计法 折射仪法 0 1.010 1.012 1.013 5000 1.010 1.015 1.015 10000 1.010 1.017 1.017 15000 1.010 1.019 1.019 20000 1.010 1.021 1.021 10/20/20228尿蛋
4、白(mg/L)干化学法 比密计法 折射仪法 0 1.010 1.012 1.013 1000 1.013 1.012 1.014 3000 1 014 1.013 1.015 5000 1.015 1.014 1.016 7500 1.015 1.014 1.017 10000 1.016 1.015 1.01810/20/20229注意事项及实验应用：1.尿液pH pH3假阴性，pH8假阳性。而用磺基水杨酸法和加热乙酸法作尿蛋白定性 时，因尿液过碱，远离蛋白质的等电点 出现假阴性结果。10/20/2022102.尿液所含蛋白成分 干化学法：尿中球蛋白浓度为4000mg/L以下时，蛋白定性为阴
5、性，它对球蛋白的敏感性仅为白蛋白的1/1001/50。磺基水杨酸法：对球蛋白反应的敏感亦较白蛋白低，浓度同时为2000mg/L时，白蛋白出现阳性（+）反应，球蛋白仅为阳性（+）反应。10/20/202211l 加热乙酸法：对单纯球蛋白尿具有特殊反应，即浓度从500mg/L5500mg/L浓度的尿液，此法均表现为大小不等的凝块状而尿液本底并没有明显混浊，从而提示本法可能为高度非选择性蛋白尿的过筛试验。10/20/202212l青霉素是临床上常用的抗菌素，青霉素静脉滴注后约76%于6小时内原形经肾排出。丛玉隆等实验结果表明滴注240万单位组在2小时内，320万单位组在3小时内，480万单位组在5小
6、时内，磺柳酸法呈假阳性，干化学法呈假阴性。因此对于青霉素静脉滴注的患者，最好静脉滴注6小时后取样进行实验。10/20/202213 青霉素浓度 （U/ml）0 1000 5000 1万 2万 4万 8万 干化学法 （mg/L）1000 1000 1000 1000 700 0 0 磺 基水杨酸法 +大剂量青霉素静脉滴注后对尿蛋白定性结果影响(干化学)药物剂量(U)给药前 给药后(h)0.5 1 2 3 4 5 6 240万 +240万 +320万 +320万 +_ +480万 +_ _ +480万 +_ _ +10/20/202214 磺柳酸法 干化学法 加热醋酸法灵敏度 50100 70 1
7、00（mg/L)测定蛋 各种蛋白质 白蛋白 各种蛋白质 白类型优 点 筛选首选 快速简便 阳性确证试验 阴性确证试验 NCCLS参比方法 影响因素 碱性尿假()pH 8假(+)pH 3假()加酸过多过少 大量PG假(+)大量PG假()假()造影剂假(+)试剂注意避光 盐少：白蛋白、降糖药假(+)失效、受潮 球蛋白不沉淀10/20/202215l原理：l GOD 葡萄糖酸l葡萄糖+O2+H2O POD H2Ol H2O2 +l Ol 邻联甲苯胺 兰色 （色素原）l10/20/202216注意事项及实验应用：1.干化学法与班氏法的特异性.敏感性和对维生素C反应的差异：干化学法 班氏法灵敏度 1.6
8、72.78mmol/L 8.33mmol/L特异性 葡葡糖 葡葡糖.果糖.乳糖.半乳糖等还原物维生素C 假阴性 假阳性10/20/202217 许多抗生素对班氏法测定结果有不同程度的影响，而对干化学法定性及酶法定量没有影响。10/20/202218 高浓度酮体尿可引起假阴性；尿液比重增高可降低试带对糖的敏感性。患者大量服用左旋多巴使尿糖出现假阴性。尿糖测定假阳性极少见，除非尿液被过氧化物或次氯酸盐污染。干化学法测定葡萄糖只是一般半定量的过筛试验，它所设计的档次与传统班氏定性法的挡次存在着差异，二者不可相互比较。对于动态观察的糖尿病病人，最好使用湿化学定量分析。10/20/202219原理：乙酰
9、乙酸 碱性 +亚硝基铁氰化钠 紫红色化合物酮 体 含量 与试剂反应 乙酰乙酸 20%灵敏度高酮体 丙酮 2%灵敏度次之 B-羟丁酸 78%无反应10/20/202220 1.由于尿酮体中的丙酮和乙酰乙酸都具有挥发性，乙酰乙酸更易受热分解成酮，尿液被细菌污染后，酮体消失，因此尿液必须新鲜。2.注意干化学法与酮体法的敏感度差异，同一病理标本，两种方法可能出现截然不同的结果。3.在糖尿病酮症酸中毒早期，酮体的主要成分是B-羟丁酸，乙酰乙酸很少或缺乏；在糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后，乙酰乙酸含量反而比急性期初始含量高。10/20/202221 化学成分 测定方法(mg/L)干化学法 酮体粉法 乙酰乙酸
10、 50100 80 丙酮 400 1000 B-羟丁酸 不反应 不反应 10/20/202222lBIL检测原理：l 胆红素在强酸接介质中 与2.4二氯苯胺重氮盐起偶氮反应呈紫红色反应。lUBO检测原理：在强酸条件下UBO和对二甲氨笨甲醛发生醛化反应。10/20/2022231.标本必须新鲜，以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素，尿胆原氧化成尿胆素。2.尿液中含有高浓度维生素C和亚硝酸盐时，抑制偶氮反应，使尿胆红素呈假阴性；当患者接受大剂量氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代射产物时，可呈假阳性。10/20/2022243.尿液中一些内源性物质如胆色素原、引哚、胆红素等，可使尿胆原检查结果出现假
11、阳性。4.正常人尿胆原排出量每天波动很大，夜间和上午量少，午后则迅速增加，在午后24小时达最高峰；同时尿胆原清除率为2ml/min；pH8.0时增加至25ml/min，因此有学者提倡预10/20/202225 先给患者服用碳酸氢钠，碱化尿液，收集午后24时（2h排出量）进行测定，以提高检验率。5.对于阻塞性黄疸尿胆原减少的病人，不能使用干化学法进行测定，因为大多数尿液试制带都没有设制测尿胆原阴性这一项。10/20/202226 细菌硝酸盐 亚硝酸盐+对氨基苯磺酸 重氮 还原酶 +桃红色显色剂10/20/202227l 分 类 菌 名 致病率(%)l 大肠杆菌属 72.0l Klebs氏杆菌属
12、16.0l含硝酸盐还原酶 变形杆菌 5.0l 葡萄球菌属 5.0l 假单胞菌属 1.0 l不含硝酸盐还原酶 粪链球菌属 1.0l急性尿路感染单纯由大肠杆菌引起者占85%，而慢性肾炎由大肠杆菌引起者占52%，有些是细菌混合感染。10/20/202228l 尿亚硝酸盐阳性常见于大肠埃希氏菌引起的泌尿系感染，其检出敏感度为0.30.6mg/L。同时符合以下三个条件：感染的细菌含有硝酸盐还原酶；食物中含有适量的硝酸盐；尿液标本在膀胱停留4h以上，并除外药物等干扰因素。此试验检出率为80%，反之呈 阴性结果。标本放置过久或污染可呈假阳性。10/20/202229 亚硝酸盐+白细胞组合，敏感性和特异性分别
13、为89.8%和92.0%，阴性预测值98.6%，说明阳性不能肯定为菌尿，但阴性基本可除外菌尿；亚硝酸盐+干化学白细胞检查+显微镜检查的组合，灵敏度和阴性预测值100%，此时的尿亚硝酸盐特异性和阳性预测值100%；10/20/202230 硝酸盐和白细胞的敏感性分别为43%和77%，特异性为99%和96%，两个试验组合的敏感 性和特异性为92%和95%；亚硝酸盐+干化学白细胞检查+尿蛋白试带检 测新生儿和婴儿尿路感染，阳性预测值很低，阴性预测值为99.4%，男女之间无差别。因此认为，试带法有助于婴儿尿路感染的诊断，可避免进行昂贵的培养。10/20/202231 粒细胞酯酶吲哚酚酯 引哚酚+重氮盐
14、 紫色 分 解 10/20/2022321.尿液标本必须新鲜，留尿后应立即测定；2.此法只能测中性粒细胞，不与单核细胞、淋巴细胞反应；3.尿中污染甲醛或含有高浓度胆红素、呋喃坦啶，可产生假阳性；4.尿蛋白5g/L或尿液中含有大量先锋霉素或庆大霉素等，可使结果偏低出现假阴性。5.由于尿液分析仪白细胞检测与显微镜下计数实验原理截然不同，报告方式是两种不同的概念，很难找出两者的对应关系。6.仪器白细胞检查只是一个筛选实验，决不可代替显微镜检查。10/20/202233l检测原理：Hb 过氧化氢茴香素 H2O 类过氧化物酶 +O 邻联甲苯胺 邻联甲苯胺 （色素原）（蓝色）10/20/202234l注意
15、事项及实验应用：1.干化学法既可与完整的红细胞反应，又能测定游离的Hb量，因此报告要了解临床诊断，综合分析。由于肾病患者终尿中的红细胞可因各种因素变形裂解使Hb逸出，可导致仪器法与目测法的差异。2.假阳性：尿中含有的易热酶、肌红蛋白或菌尿。3.假阴性：大量维生素C可干扰试验结果。10/20/202235l测定原理：l 1,2-稀二醇l2,6-二氯酚靛酚钠 2,6-二氯二对酚胺l (氧化型)酸性 (还原型)l试剂膜块区发生由绿色或深蓝色至粉红色的颜色变化10/20/2022361、灵敏度50-100/L，只能测定还原维生素C。2、维生素C在碱性环境中极不稳定，容易分解。3、假阳性：龙胆酸、L-多巴、半胱氨酸、硫代 硫酸钠等。4、维生素C含量增高对血红蛋白、葡萄糖、胆 红素、亚硝酸盐的检测产生负干扰。10/20/20223710/20/20223810/20/202239
