肿瘤检测的临床应用课件.ppt

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1、肿瘤标志物检测的临床应用 肿瘤检测的临床应用1肿瘤标志物检测的临床应用一,肿瘤发病的情况二,肿瘤检查的方法 三,肿瘤的实验室检测肿瘤检测的临床应用2世界癌症发病率 一项最近研究发现,到2030年,世界范围内的癌病发病率将增加75%,而贫穷国家将增长90%。这项5月31号发表在柳叶刀:肿瘤学网络版的报告指出,在某些发展中国家,宫颈癌、胃癌等某些癌症的发病率看起来会下降,但是其他一些与“西式生活方式”相关的癌症的发病率将会有较大增加,比如,乳腺癌、前列腺癌、直肠癌。肿瘤检测的临床应用3世界肿瘤情况 在人类发展指数较低的国家(主要是撒哈拉以南的非洲国家),感染类癌症(尤其是宫颈癌),以及肝癌、胃癌、

2、卡波西肉瘤发病率较高。在人类发展指数高的国家(比如澳大利亚、巴西、俄罗斯、英国),与吸烟、生殖系统风险因素、肥胖、饮食习惯相关的癌症,如肺癌、乳腺癌、前列腺癌、直肠癌,发病率较高。该研究的领导者,世界癌症研究机构的弗莱迪.布雷博士(Dr.Freddie Bray)及同事指出,到2030年,人类发展指数较低的国家的癌症发病率将增加93%,而中等发展国家(如南非、中国、印度)将增长78%。肿瘤检测的临床应用4一、我国恶性肿瘤发病率与死亡率 2012年全国肿瘤登记中心收到全国104个肿瘤登记处2009年的肿瘤登记数据。通过对上报数据的综合审核,有72个登记处的数据入选,以反映2009年我国肿瘤登记覆

3、盖地区恶性肿瘤的发病与死亡水平。入选资料覆盖人口达8547万,包括了31个城市地区(5749万人)和41个农村地区(2789万人),登记结果令人震惊。肿瘤检测的临床应用5肿瘤发病率与死亡率 全国登记地区发病率(粗率)285.91/10万,中国人口标化率为146.87/10万,累计率(074岁)为22.08%。全国登记地区恶性肿瘤死亡率(粗率)为180.54/10万,中国人口标化率为85.06/10万,累计率(074岁)为我国居民因癌死亡的几率为12.94%。这让也就意味着,约每5个人中就可能有一个人会患癌症,约每8个死亡人中就可能有一个人会死于癌症!肿瘤检测的临床应用6恶性肿瘤发病恶性肿瘤发病

4、 恶性肿瘤发病前十位主要是肺癌肺癌、消化系统癌(胃癌、结直肠癌、肝癌肝癌、食管癌、胰腺癌)、乳腺癌、淋巴瘤、膀胱癌、甲状腺癌。这十类肿瘤占全部恶性肿瘤发病的76.39%。肿瘤检测的临床应用7恶性肿瘤发病恶性肿瘤发病 恶性肿瘤发病率最高的肿瘤为:肺癌肺癌,胃癌,肝癌肝癌、食管癌;男性发病率最高的为肺癌肺癌,女性为乳腺癌。城市恶性肿瘤发病首位,男性是肺癌肺癌,女性是乳腺癌;农村恶性肿瘤发病首位男女均是胃癌。肿瘤检测的临床应用8恶性肿瘤发病恶性肿瘤发病 城市与农村相比,城市粗发病率高出农村,而中国人口标准化发病率城市男性低于农村,女性高于农村。男性40岁以前和75岁以后城市恶性肿瘤发病率高于农村,5

5、074岁农村高于城市;女性除了6064岁城市低于农村外,其余年龄段均高于农村。肿瘤检测的临床应用9恶性肿瘤死亡率恶性肿瘤死亡率 城市恶性肿瘤死亡率整体高于农村,而男性死亡率略低于农村。015岁男女、城乡差距不大;男性1579年龄段恶性肿瘤死亡率城市低于农村,80岁以上城市高于农村;女性1569岁年龄段农村高于城市,70岁以上农村低于城市。肿瘤检测的临床应用10恶性肿瘤死亡率恶性肿瘤死亡率 恶性肿瘤死亡前十位是肺癌肺癌、消化系统癌(肝癌肝癌、胃癌、食管癌、结直肠癌、胰腺癌)、乳腺癌、白血病白血病、脑癌、淋巴瘤。这十类肿瘤占全部恶性肿瘤的84.27%。男女、城乡恶性肿瘤死亡首位均为肺癌肺癌 肿瘤检

6、测的临床应用11 我国每年新发癌症病例200万人,因癌症(cancer)死亡人数为140万;我国居民每死亡5人中,即有1人死于癌症;在全国不少大城市,恶性肿瘤已经超越心脑血管疾病,成为第一死亡原因。肿瘤检测的临床应用12二,肿瘤检查的方法、病理学的确证结果(金标准)脱落细胞学,穿刺细胞学,组织细胞学、影像学的大体检测 超声影像,普通放射CT,MRI,PECT、实验室的肿瘤标志物检验方法及应用肿瘤检测的临床应用13三、实验室肿瘤标志物检测方法、血清学水平、组织学水平、细胞学水平、分子学水平:肿瘤检测的临床应用141、血清学水平 1、放射免疫分析 2、酶免疫分析 3、荧光免疫分析 4、化学发光分析

7、 5、电化学发光分析肿瘤检测的临床应用15二、组织学水平、免疫组织化学、原位分子杂交组化技术 它是将免疫学技术、分子生物学技术同组织病理学制片技术巧妙结合在一起,在组织细胞原位显示某些化学成分和特定基因片段以确定肿瘤性质的检测方法、图像分析技术,可以定量测定组织切片上肿瘤细胞DNA含量和形态学分析,对判断肿瘤恶性程度和预后有重要临床价值肿瘤检测的临床应用16三、细胞学水平、流式细胞术,FCM 用流式细胞术对细胞和细胞器的结构和某些功能进行定量测定,并利用细胞表面的特异性对特定细胞亚型进行分析和分选的先进技术方法,常用的于:白血病和淋巴瘤的标记物(CD系列)来诊断和鉴别,用来选择肿瘤细胞的化疗药

8、提供依据,用来测定消化道外周CD水平。、电镜:电镜酶细胞化学技术、免疫电镜技术,原位杂交电镜技术肿瘤检测的临床应用17四、分子水平 1、PCR,聚合酶链反应技术 是一种简单,敏感,高效,特异,快速的能在体外进行DNA扩增技术 用于上皮细胞,CK19MRNA,CK20MRNA CEAMRNA,AFPMRNA、生物芯片技术:基因芯片技术,组织芯片技术,蛋白基因芯片技术肿瘤检测的临床应用18Put science on your side.19 2009 Abbott肿瘤标志物运用1.癌症的早期诊断(临床医学)2.疗效及复发的监测3.肿瘤疾病的预后和分期4.癌症高危人群识别(预防医学)癌症高危人群识

9、别(预防医学)5.组织学鉴别诊断(病理学)组织学鉴别诊断(病理学)6.肿块良恶性状况鉴别诊断(病理学)肿块良恶性状况鉴别诊断(病理学)肿瘤检测的临床应用19肿瘤标志物的定义 肿瘤标志物主要是指癌细胞分泌或脱落到体液或组织中的物质,或是缩主(人体)对体内新生物反应而产生并进入到体液或组织中的物质。肿瘤检测的临床应用20理想的肿瘤标志物的特点:(1)敏感性高,能早期测出所有肿瘤患者;(2)特异性好,鉴别肿瘤和非肿瘤患者应100准确;(3)有器官特异性,能对肿瘤定位;(4)血清中浓度与瘤体大小、临床分期相关,可用以判断预后;(5)半衰期短,能反映肿瘤的动态变化,监测治疗效果、复发和转移;(6)测定方

10、法精密度、准确性高,操作简便,试剂盒价廉。但至今为止,尚无一种理想的TM。肿瘤检测的临床应用21肿瘤标志物的分类及临床应用 肿瘤标志物的分类和命名尚未完全统一;粗粗分类有癌胚抗原类、酶类、激素类、糖蛋白类、癌基因类和细胞表面肿瘤抗原类等6大类。前4类称为血清肿瘤标志物,后两类称细胞肿瘤标志物 肿瘤检测的临床应用22癌胚抗原类 如AFP,CEA等,是从肝癌、结肠癌的组织中发现的,而胚胎时期的肝、胃肠管组织也能合成,并存在于胎儿的血清中,因此称为胚胎抗原。肿瘤检测的临床应用23酶类 当机体某个部位发生肿瘤时,肿瘤细胞代谢异常,使某些酶或同工酶合成增加;或由于肿瘤组织的压迫和浸润,导致某些酶的排泄受

11、阻,使肿瘤患者血清中酶活性异常升高。酶是较早发现并用于临床诊断的一类肿瘤标志物,如患肝癌时GT升高,患前列腺癌时PAP升高等。肿瘤检测的临床应用24糖蛋白类.糖链抗原类:是用各种肿瘤细胞株制备单克隆抗体,来识别的肿瘤相关抗原,大多是糖蛋白或粘蛋白,如CA125,CA15-3,CA19-9等。肿瘤检测的临床应用25激素类 正常情况下不产生激素的某些组织,在发生恶变时能产生和释放一些肽类激素(异位内分泌激素)并导致相应的征候群,因此,这些异位内分泌激素升高也可作为肿瘤相关的标志物,如小细胞肺癌可分泌促肾上腺皮质激素(ACTH),患甲状腺髓样癌时降钙素升高,患绒毛膜上皮细胞癌时hCG明显升高。肿瘤检

12、测的临床应用26癌基因类 癌基因的激活和抑癌基因的变异,可使正常细胞发生恶变,导致肿瘤的发生。因此,癌基因表达的蛋白可作为肿瘤标志物,如ras基因蛋白,myc基因蛋白,p53抑癌基因蛋白等。肿瘤检测的临床应用27细胞表面肿瘤抗原类 SCC,鳞状上皮细胞癌抗原肿瘤检测的临床应用28检验科已经开展的肿瘤标志物检测项目 AFP,CEA,CA-125.CA-153.CA-199.T-PSA.f-PSA B-HCG.B2-MG.Ferritin肿瘤检测的临床应用29、甲胎蛋白(AFP):AFP在胚胎期是功能蛋白,合成于卵黄囊、肝和小肠,AFP在临床上用于以下辅助诊断:(1)产前筛查诊断胎儿宫内死亡、神经

13、管畸形、无脑儿和脊柱裂。(2)急慢性肝炎肝炎,在1100例肝炎患者测定中发现167%AFP20-90g/L,8790-400g/L,28400-1000g/L,其中1例维持1000g/L以上达6周,后逐步下降。(3)原发性肝细胞癌约70以上AFP在400g/L以上,多逐渐升高,亦有不高于400g/L,甚至在正常水平的患者。用于高危人群的筛查,不建议用于正常健康人体检。肿瘤检测的临床应用30AFP 1、主要相关肿瘤:肝细胞癌和生殖细胞癌。、其它相关肿瘤:胚胎细胞癌、卵巢畸胎瘤、胃癌、胆道癌、胰腺癌等。、其他影响因素:良性疾病包括肝炎、肝硬化、肠炎以及遗传性酪氨酸血症等会升高;怀孕时也可一时性升高

14、。肿瘤检测的临床应用312癌胚抗原(CEA):CEA是一种酸性糖蛋白,胚胎期在小肠、肝脏、胰腺合成,成人血清含量极低(5g/L,如吸烟者为15-20g/L,65可达20-40g/L)。CEAl965年被发现时,认为是结肠癌的标志物(60%-90患者升高),但以后发现胰腺癌(80%)、胃癌(60)、肺癌肺癌(75)和乳腺癌(60)也有较高表 肿瘤检测的临床应用32CEA、主要相关肿瘤:广谱的肿瘤标志物。、其它相关肿瘤:常见于肺癌、大肠癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、甲状腺髓样癌等。、其他影响因素:吸烟者假阳性较多,妊娠期妇女和心血管疾病、糖尿病、非特异性结肠炎等疾病患者中约有15%53%的血清CEA也

15、会升高。肿瘤检测的临床应用33CA125:最初认为是卵巢癌特异的,但深入研究,它也是一种广谱的标志物。正常值以35Uml为界,822卵巢癌、58胰腺癌、32肺癌,及其他非妇科肿瘤皆有不同程度的升高,但作为卵巢癌的辅助诊断是个重要的标志物,与病程有关。肿瘤检测的临床应用34CA-125、主要相关肿瘤:卵巢癌。、其它相关肿瘤:肺癌、胰腺癌、乳腺癌、肝癌、胃肠道恶性肿瘤、子宫癌。、其他影响因素:女性盆腔炎、子宫内膜异位、行经期、卵巢囊肿、子宫肌瘤、慢性肝炎、胰腺炎、胆囊炎、肺炎等会升高。肿瘤检测的临床应用35CAl5-3:是乳腺细胞上皮表面糖蛋白的变异体,近年推出作为乳腺癌标志物,正常40Uml哺乳

16、期妇女或良性乳腺肿瘤皆低于此值。乳腺癌晚期100,其他 期75%此值明显升高。同样,该标志物也是广谱的,可见于50肝细胞癌、53肺癌、34卵巢癌患者。由于CEA在乳腺癌中也有诊断价值,如两者联合将可提高10阳性率。肿瘤检测的临床应用36CA-153、主要相关肿瘤:乳腺癌的首选标志物。、其它相关肿瘤:肺癌、卵巢癌、肺腺癌、结直肠癌等均可增高、其他影响因素:良性乳腺疾患、子宫内膜异位、卵巢囊肿等患者的血清CA15-3也可超过正常值。肿瘤检测的临床应用374CA19-9:CAl9-9为唾液酸化的乳-N-岩藻戊糖II,是一种类粘蛋白的糖蛋白成分,与Lewis血型成分有关。血清内正常值37UmL(95)

17、,异常升高也是在多种肿瘤出现,如79%胰腺癌、58%结肠癌、49肝癌、67胃癌、67如胆囊癌、肺癌、乳腺癌皆有10左右是升高的。肿瘤检测的临床应用38CA-199 主要相关肿瘤:胰腺癌、胆管癌、结直肠癌。其它相关肿瘤:肝癌、胆囊癌、胆管癌等。其他影响因素:很多消化系统的良性疾病患者中也有升高,据报道又近10%的胰腺炎患者血清CA19-9有中等度升高。肿瘤检测的临床应用39-HCG:是一存在于胎盘中的糖蛋白激素,分于量为45000,当怀孕时血与尿中水平上升,正常血中只含微量。以特殊的免疫试验可测定HCG的亚单位。由于60以上的非精原细胞瘤患者体内HCG上升,所以-HCG的测定可监视非精原细胞瘤的

18、治疗反应及复发状况,甚至有些肿瘤复发可在临床体征出现前几周或几个月通过测定HCG查出。肿瘤检测的临床应用40-HCG 主要相关肿瘤:妇科肿瘤和非精原性睾丸癌。其它相关肿瘤:乳腺癌、精原性睾丸癌、肺癌、肝癌等肿瘤检测的临床应用412-MG:表达在大多数有核细胞表面,临床上多用于证实淋巴增殖性疾病,如白血病、淋巴瘤及多发性骨髓瘤。其水平与肿瘤细胞数量、生长速率、预后及疾病活动性有关。例如骨髓瘤2-microglobulin水平高于4O mgL时,预示生存时间短,高于60mgL时,对化疗反应不敏感。此外,根据此水平还可为骨髓瘤患者分期。肿瘤检测的临床应用422-MG 主要相关肿瘤:恶性肿瘤辅助性标志

19、物,慢性淋巴细胞白血病、淋巴细胞肉瘤、多发性骨髓瘤等尤为明显。其它相关肿瘤:肺癌、乳腺癌、胃肠道癌及子宫颈癌中也可见升高。其他影响因素:肾功能衰竭、多种血液系统疾病及炎症时会升高,且在多种疾病中均可增高,故应排除由于某些炎症 疾病或肾小球滤过功能见底所致的血清2-MG增高。肿瘤检测的临床应用43铁蛋白:是一种铁结合蛋白,存在于各种组织,病理状态下,释放到血液增加,不是肿瘤特异的标志,在多种癌症患者血中均有不同程度的阳性率,肝癌患者的阳性率在70以上,所以可辅助肝癌诊断。此外,在进展性乳腺癌思考Ferritin水平也有显著升高,且与病程有关。肿瘤检测的临床应用44前列腺特异性抗原(PSA):PS

20、A是目前诊断前列腺癌最敏感的指标,可用于前列腺癌的早期诊断、监测治疗及预测复发具有极高的组织器官特异性。正常人体血清内PSA 4g/L,这个正常值有随年龄增长的趋势。50岁者一般低于40g/L,50-55岁为44g/L,60-69岁为68g/L,70岁可达77g/L,(有文章观点:每增岁结果加为参考范围)异常升高预示有患前列腺癌的可能。以 4g/L为临界值,早期前列腺癌63-70阳性,总阳性率可达69-925。有报告,PSA值如为40-100g/L,特异性相对较低,只有25确诊前列腺癌;但10Og/L者,往往又是晚期前列腺癌,肿瘤检测的临床应用45 测定PSA的类型和百分比有利于鉴定前列腺良性

21、和恶性疾患,f-PSA百分比较低可能是前列腺癌恶性度较高。固定临界值应是25(占PSA的量).国内报告,如以t-PSA42g/L为诊断标准,其敏感性 为 l00%,特异性仅 68%,符合率为74;如以fPSAtPSA(FT)值O11为诊断标准,其敏感性为85%,特异性98,符合率96;如以tPSA42g/L,同时FT011为诊断标准,其敏感性为86%,特异性为99,符合率97%。可见,最后一个指标为最佳。肿瘤检测的临床应用46PSA 主要相关肿瘤:前列腺癌。其它相关肿瘤:某些妇科肿瘤、多囊卵巢综合症、乳腺癌。其他影响因素:前列腺炎、前列腺肥大会引起升高。肿瘤检测的临床应用47Put scien

22、ce on your side.48 2011 Abbott肿瘤标志物套餐设置1.肺癌 SCC+CEA+Cyfra+ProGRP2.消化道癌症 AFP+CA199+CEA+PG I+PG II3.妇科肿瘤 SCC+HE4+CA125+CA153+CEA 4.前列腺癌 tPSA+fPSA 肿瘤检测的临床应用48Put science on your side.49 2011 AbbottPepsinogen:胃癌癌前病变标志物:胃癌癌前病变标志物ProGRP:小细胞肺癌标志物:小细胞肺癌标志物HE4:卵巢癌标志物:卵巢癌标志物SCC:宫颈癌标志物:宫颈癌标志物独有肿瘤标志物独有肿瘤标志物肿瘤检测

23、的临床应用49Put science on your side.50 2009 Abbott肺癌标志物检测组lSCC:肺鳞癌lProGRP:小细胞肺癌lCEA:肺腺癌lCyfra 21-1:非小细胞肺癌肿瘤检测的临床应用50Put science on your side.51 2009 Abbott多标志物联合筛查,有利于肺癌早期检出多标志物联合使用多标志物联合使用,针对于高危人群(吸烟人群)及出现疑似肺癌症状(咳血,胸痛,肺部肿物)的患者进行肺癌筛查非小细胞肺癌(NSCLC):SCCCyfra21-1CEA小细胞肺癌(SCLC):ProGRPNSECEA灵敏度:NSCLC 82,SCLC

24、80特异性:92此筛查表现优于PSA在前列腺癌筛查中的表现肿瘤检测的临床应用5152Company Confidential 2010 Abbott胃蛋白酶原(PG)检测临床应用体检中心体检中心消化科消化科消化科消化科肿瘤检测的临床应用52如何看检验报告单单位:因为检测方法学的不同,单位的不同,所以参考范围(截断值)也有所不同因为检验项目结果的不确定性,必须看动态的检测结果,二次差%为有效。相对定量与绝对定量与定性的问题参考范围是对于大多数人的统计值适用,但最好是个人自身对比做参考肿瘤检测的临床应用53小结 因为环境的恶化(大气污染、饮食卫生、生活习惯等)导致肿瘤的发病在不断提高,这对医疗的诊断防治水平要求也在提高,能发现发明具有更高特异性,更高灵敏度的肿瘤标志物及其更加有效的检测方法,为早期发现早期诊断早期治疗肿瘤提供保证。肿瘤检测的临床应用54谢谢大家谢谢大家谢谢大家谢谢大家肿瘤检测的临床应用55

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