1、1l 概念:实验诊断学:2一、按临床检验分类:l临床一般检验l临床血液学检验l临床化学检验l临床免疫学检验l临床病原学检验l临床遗传病检验二、按器官系统分类3一、实验诊断现状:l仪器的自动化l试验的多样化l方法的标准化l质量的规范化4二、实验诊断发展趋势:l新技术新方法不断出现l床旁检验l循证实验医学l个体化诊断5一、试验前影响因素二、试验中影响因素三、试验后影响因素6一、筛查试验:二、诊断试验:7一、准确性:二、精密度:三、灵敏度:四、特异性:8一、参考值二、医学决定水平三、危机值910(1)采血前检查注射器和针头,避免因连接不紧而使空气进入产生泡沫致溶血;(2)采集标本最好采用封闭式真空采
2、血管;(3)所选采血部位的皮肤应完整;(4)采血时应定位准确,严禁针尖在静脉中反复穿刺(5)采血完成将血从注射器中推入试管时应拔掉针头;(6)采血时体位不同对血常规检验结果也有影响,直立位与卧位相比易导致血红蛋白、白细胞、红细胞、血细胞压积等项目测定值偏高;11l 抗凝剂:抗凝剂:EDTAEDTA盐盐(EDTA-Na2(EDTA-Na2,EDTA-K2)EDTA-K2)是对白是对白细胞形态和血小板影响相对较小的抗凝剂,最适合细胞形态和血小板影响相对较小的抗凝剂,最适合用于血常规检验。用于血常规检验。l血液和抗凝剂的比例:血液比例过高时,容易出现血液和抗凝剂的比例:血液比例过高时,容易出现微凝块
3、,可能阻塞血细胞仪,血液比例过低,抗凝微凝块,可能阻塞血细胞仪,血液比例过低,抗凝剂相对过剩,会引起血细胞形态和体积的一些改变,剂相对过剩,会引起血细胞形态和体积的一些改变,导致结果不准。导致结果不准。12血液检查的标本量与抗凝剂比例要合适。血液比例血液检查的标本量与抗凝剂比例要合适。血液比例过高时,容易出现微凝块,可能阻塞血细胞仪,血过高时,容易出现微凝块,可能阻塞血细胞仪,血液比例过低,抗凝剂相对过剩,会引起血细胞形态液比例过低,抗凝剂相对过剩,会引起血细胞形态和体积的一些改变,导致结果不准。和体积的一些改变,导致结果不准。131.红细胞参数检测3.血小板参数检测2.白细胞参数检测145.
4、红细胞容积分布宽度(RDW)3.红细胞比容测定(HCT)1.红细胞计数(RBC)2.血红蛋白测定(HB)红细胞4.红细胞平均值参数平均红细胞血红蛋白量(MCH)pg平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)g/L平均红细胞容积(MCV)fl15正常红细胞呈双凹圆盘形,大小较一致,直径正常红细胞呈双凹圆盘形,大小较一致,直径6-6-9m9m,平均,平均7.5m7.5m,边缘部厚度,边缘部厚度2m2m,中央约,中央约为为1m1m。瑞氏染色(瑞氏染色(Wright stainWright stain):周边部位着色深,呈):周边部位着色深,呈浅桔红色,中心部位淡染(又称中央苍白区)浅桔红色,中心部位淡染(又
5、称中央苍白区),约占约占RBCRBC直径的直径的1/3-2/51/3-2/5。透射电镜:双凹性圆盘状透射电镜:双凹性圆盘状1617 红细胞形态学改变:通过血涂片Wright染色观察RBC大小、形态、胞浆的着色及结构方面有无异常改变,对诊断的病因有帮助。大小异常、形态异常、染色反应异常 结构异常18红细胞计数:19血红蛋白血红蛋白(HB):20正常参考值RBCHB成年男性成年男性(4.05.5)1012/L120160g/L 成年女性成年女性(3.55.0)1012/L110150g/L新生儿新生儿(6.07.0)1012/L170200g/L21红细胞及血红蛋白增多:红细胞及血红蛋白增多:红细
6、胞红细胞血红蛋白血红蛋白成年男性成年男性6.0 010101212/L/L170g/L成年女性成年女性5.510101212/L/L160g/L22轻轻 度度 :男性:男性 120g/L120g/L,女性,女性 110g/L110g/L中中 度:度:90g/L90g/L重重 度:度:60g/L60g/L极重度:极重度:30g/L30g/L23红细胞增多见于:红细胞增多见于:(1 1)血容量减少:严重呕吐、腹泻、大面积烧伤及晚期消化)血容量减少:严重呕吐、腹泻、大面积烧伤及晚期消化道肿瘤患者。道肿瘤患者。慢性肾上腺皮质功能减退、慢性肾上腺皮质功能减退、尿崩症、甲亢危尿崩症、甲亢危象等。象等。血液
7、中的有形成分相对地增多所致。血液中的有形成分相对地增多所致。(2 2)心肺疾病:先天性心脏病、慢性肺脏疾患及慢性一氧化)心肺疾病:先天性心脏病、慢性肺脏疾患及慢性一氧化碳中毒等。因缺氧必须借助大量红细胞来维持供氧需要。碳中毒等。因缺氧必须借助大量红细胞来维持供氧需要。(3 3)干细胞疾患:真性红细胞增多症。)干细胞疾患:真性红细胞增多症。24红细胞减少见于:红细胞减少见于:(1 1)缺乏造血原料、造血障碍和造血组织损伤。)缺乏造血原料、造血障碍和造血组织损伤。(2 2)红细胞遭受物理、化学或生物因素破坏。)红细胞遭受物理、化学或生物因素破坏。(3 3)各种原因的血管内或血管外溶血。)各种原因的
8、血管内或血管外溶血。(4 4)急性或慢性失血急性或慢性失血。25血红蛋白增多:血红蛋白增多:身体缺氧、血液浓缩、真性红细胞增多症、肺气身体缺氧、血液浓缩、真性红细胞增多症、肺气肿等。肿等。血红蛋白减少:血红蛋白减少:各种贫血,如急性、慢性再生障碍性贫血、缺铁各种贫血,如急性、慢性再生障碍性贫血、缺铁性贫血等。性贫血等。26一、红细胞生成不足一、红细胞生成不足 (一)骨髓造血障碍 造血干细胞复制和分化异常 再生障碍性贫血障碍性贫血 异常细胞或组织骨髓浸润 骨髓病性贫血 原因不明或多种机制 慢性系统性疾病(慢性感染、炎症、恶性肿瘤、慢性 肾病、肝病、风湿性疾病、内分泌病等)伴发的贫血(二)细胞分化
9、和成熟障碍 DNA合成障碍 叶酸及(或)维生素B12缺乏所到的巨幼细胞贫血 血红蛋白合成障碍 血红素合成缺陷 缺铁性贫血、铁粒幼细胞性贫血 珠蛋白合成缺陷 珠蛋白生成障碍性贫血(海洋性贫血)二、红细胞破坏过多二、红细胞破坏过多 (一)红细胞内在缺陷(遗传性缺陷)(二)红细胞外来因素(获得性因素)三、失血三、失血 急性失血 急性失血后贫血 慢性失血 同缺铁性贫血根据病因和发病机制的贫血分类根据病因和发病机制的贫血分类27抗凝全血经离心沉淀后,测得下沉红细胞在全血抗凝全血经离心沉淀后,测得下沉红细胞在全血中所占容积的百分比。中所占容积的百分比。男性:男性:42%42%49%49%女性:女性:37%
10、37%48%48%协助诊断贫血及程度协助诊断贫血及程度血浆容量是否丢失血浆容量是否丢失计数红细胞各项平均值计数红细胞各项平均值28 红细胞平均值参数平均红细胞血红蛋白量(MCH)pg平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)g/L平均红细胞容积(MCV)fl29平均红细胞容积(平均红细胞容积(MCVMCV):平均每个红细胞的体积。):平均每个红细胞的体积。Hct(L/L)Hct(L/L)MCVMCV(fl fl)RBC count(RBC count(10101212/L/L)参考值:参考值:80-100 80-100 fl fl30平均红细胞血红蛋白量(平均红细胞血红蛋白量(MCHMCH):平均每个
11、红细胞):平均每个红细胞所含的血红蛋白量。所含的血红蛋白量。Hb(g/L)Hb(g/L)MCH(pg)MCH(pg)RBC count(RBC count(10101212/L/L)参考值:参考值:26-32 26-32 pgpg31平均红细胞血红蛋白浓度(平均红细胞血红蛋白浓度(MCHCMCHC):平均每升红):平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度。细胞中所含血红蛋白浓度。Hb(g/L)Hb(g/L)MCHC(g/L)MCHC(g/L)Hct(L/L)Hct(L/L)参考值:参考值:310-350 310-350 g/Lg/L32临床意义临床意义33所测红细胞容积大小的变异系数,是反应外周所测红
12、细胞容积大小的变异系数,是反应外周血红细胞异质性的参数。血红细胞异质性的参数。参考值:参考值:14.5%14.5%用于各种贫血的诊断和鉴别用于各种贫血的诊断和鉴别(电阻抗法-脉冲-细胞容积-平均值-标准差-变异系数CV)34贫血的贫血的MCVMCV、RDWRDW分类法分类法 RDW是表示红细胞体积大小是否均一的、定量的表示指标。根据这个分类方法,将贫血分为六种。35小细胞性贫血:l 均一性:RDW正常,见于轻型地中海型贫血,慢性病贫血。l 非均一性:RDW14.5%,见于缺铁性贫血,血红蛋白H病,、地中海贫血,红细胞碎片过多。36正细胞性贫血:l 均一性:再生障碍性贫血、失血性贫血、慢性肝病、
13、无贫血症状的血红蛋白病、遗传性球形红细胞增多症、慢性病贫血。l 非均一性:混合型营养不良性贫血、早期缺铁性贫血、早期叶酸缺乏性贫血、铁粒幼细胞性贫血。37大细胞性贫血:l均一性:部分再生障碍性贫血、MDS。l 非均一性:叶酸或维生素B12缺乏性巨幼细胞贫血、免疫溶血性贫血。38患儿,女,4岁,因发热和腹泻来诊,其血常规检查结果如下:RBC 5.511012L、HGB 97g/L、MCV 60fl、HCT 0.332、MCH 19.4pg、MCHC 322gL、RDW 13.0。血涂片发现,红细胞体积较小有靶形红细胞。应初步判断该患儿是何种贫血?39根据贫血的贫血的MCVMCV、RDWRDW分类
14、法,应初步怀疑该患分类法,应初步怀疑该患儿是儿是轻型地中海型贫血。经过向孩子家长询问,该女孩母亲患有地中海贫血,该女孩外祖父母来自广东沿海地区,但未明确做过诊断。401.红细胞参数检测3.血小板参数检测2.白细胞参数检测全血细胞检测全血细胞检测412.白细胞分类1.白细胞计数五分类白细胞三分类42白细胞计数循环血液中中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞的总数。43参考范围:成人:4.010.0109/L (4000-10000/L)儿童:5.0 12.0l09L (5000-12000/L)6个月 2岁婴儿:11.0 12.0109L (11000-12000/L)新生儿
15、:15.0 20.0l09L (15000-20000/L)44计数各类白细胞的绝对值。5种白细胞各自生理功能存在差异,不同病理情况引发各种白细胞数量和质量的改变。45三分类:通过电阻抗型血细胞分析仪测量细胞体积,将白细胞分为三群。46五分类:中性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞淋巴细胞单核细胞各种仪器对异常白细胞不能完全识别,遇仪器分析有异常提示或疑为血液系统疾病者,需制备涂片,染色后镜检,观察细胞形态及分类。4748白细胞计数白细胞分类计数白细胞形态学491生理性白细胞增多:(1)胎儿及初生儿白细胞常在10.0 10.0 20.0 xl09L。(2)孕妇妊娠5个月以上时,白细胞总数常可达10
16、.510.5x10 x109 9L或更高,后期可20.020.0 x10 x109 9L(3)剧烈的运动和劳动可使白细胞高达12.0 x109L,甚至20.0 x10 9L以上。(4)暴热和严寒,白细胞总数常有一过性增高,复温后迅速恢复至正常水平。502病理性白细胞增高:(1)某些细菌性感染所引发的疾病,特别是化 脓性球菌引起的局部炎症和全身性感染,如:脓肿、化脓性脑膜炎、肺炎、阑尾炎、中耳 炎、扁桃体炎、脓胸、肾盂炎、输卵管炎、胆囊炎及败血症等。(2)某些病毒性感染所导致的疾病:乙型脑炎,传染 性单核细胞增多症,麻疹等。(3)严重的组织损伤或坏死:如大手术后,烧伤,急 性出血严重创伤,血管栓
17、塞等。51 (4)过敏反应:如输血反应,药物过敏,急性变态反应 性疾病等。(5)中毒反应:如各种药物中毒,农药中毒,重金属中 毒,糖尿病酸中毒,妊娠中毒症等。(6)肿瘤及血液病:慢性粒细胞白血病,急性粒细胞白 血病等。(7)应用某些升白细胞的化学药物促使白细胞增高,多 见于化疗和放疗治疗期间因白细胞数量急剧减少时,需要尽快提升白细胞而进行下一步疗程治疗的患者。52病理性白细胞减少:(1)某些病毒性感染:如流感,病毒性肝炎,风 疹等。某些细菌性感染,如伤寒和副伤寒。(2)血液系统疾病:如再生障碍性贫血,原发性 粒细胞缺乏症。(3)脾功能亢进。(4)理化因素:如放射线,放射性治疗,化学治 疗药物,
18、解热镇痛药物等,抗肿瘤类细胞毒 性药物等均可导致白细胞数量减少。531.红细胞参数检测3.血小板参数检测2.白细胞参数检测全血细胞检测全血细胞检测543.血小板体积分布宽度(PDW)1.血小板计数(PLT)2.平均血小板体积(MPV)血小板55参考值:(100300)109L临床意义:是辅助出血性疾病的诊断、了解骨髓增生情况、手术前准备等常用指标。lPLT增多多见于骨髓增生性疾病、原发性血小板增多症、急性大出血等;l因感染所致血小板破坏和消耗过多、急性白血病、化学品及药物的毒性作用等造成的骨髓受抑制均可引起PLT减少。56参考值:7.613.2临床意义:l PLT下降MPV下降:骨髓受抑,当骨髓功能开始恢复时,MPV先于PLT上升,也就是说,MPV是骨髓功能恢复的早期指标之一;lPLT下降MPV上升:血小板破坏增多;lPLT下降MPV正常:血小板在周围血里面分布出现异常;lPLT正常MPV上升:血栓前状态或者血栓性疾病。57血小板体积分布宽度正常范围为14.8-17.2,PDW增大常见于急非淋化疗后、巨幼细胞性贫血、慢粒、脾切除、巨大血小板综合征、血栓性疾病。58