1、骨髓细胞形态学检查骨髓穿刺检查 对骨髓组织进行(1)肉眼检查、直接了解其造血功能。(2)细胞学检查,包括有核细胞计数分类。(3)细胞培养,染色体检查。(4)寄生虫,疟原虫,黑热病小体检查。(5)细菌培养。1.确诊某些造血系统或非造血系统疾病确诊某些造血系统或非造血系统疾病 特征性细胞形态改变特征性细胞形态改变 各类白血病 AA 恶性组织细胞增生症 MA 多发性骨髓瘤 IDA 霍奇金病R-S细胞 戈谢(Gancher)病 NHL骨髓浸润 尼曼-匹克病 骨髓转移癌 海兰组织细胞增生症 疟疾 黑热病辅助诊断某些造血系统疾病辅助诊断某些造血系统疾病 骨髓造血功能改变为主骨髓造血功能改变为主 溶血性贫血
2、(HA)血小板减少性紫癜 骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓增殖性疾病(MPD)真性红细胞增多症(PV)原发性血小板增多症(ET)原发性骨髓纤维化(MF)鉴别诊断鉴别诊断 原因不明发热、淋巴结、脾或肝肿大,骨痛或关节痛 PB异形淋巴细胞、类白血病反应、嗜酸细胞增多症注意!禁忌症禁忌症:因凝血因子缺乏而引起的严重出血者如血友病;一次穿刺只能反应穿刺部位骨髓情况,必要时需多次多部位穿刺;必要时需结合骨髓活检:1.某些疾病还需了解骨髓组织结构变化以及骨髓细胞与组织间的相互关系;2.某些疾病出现“干抽”的情况;血细胞的生成3、Myelodysplastic syndrome(MDS)粒细胞是由粒-单系细
3、胞发育而来的,其发育阶段为:糖原染色(PAS)胞体818m,圆形或椭圆形,核圆居中,紫红色染质开始凝集,核仁消失或不清。圆形或椭圆形,直径1520微米。骨髓增殖性疾病(MPD)(4)寄生虫,疟原虫,黑热病小体检查。Hemolytic anemia(HA)染色质较紧密,核仁不清或隐约可见,或染色质疏松核仁消失。染色质疏松,排列成粗网状,也有形成块状者。圆形或椭圆形或不规则形,直径1220微米。胞体1018m圆形或椭圆形。粒细胞是由粒-单系细胞发育而来的,其发育阶段为:胞浆粉红色,充满特异性颗粒。血小板减少性紫癜造血(Hemopoiesis)各种血细胞均来源于骨髓中生成的全能造血干细胞。全能造血干
4、细胞有如下功能:1.自我更新功能。2.分化成熟功能。其是由胚胎期卵黄囊的血岛生成的,而后种植于各造血器官。亦称多能干细胞。或淋髓干细胞。分化为髓系多能干细胞(myeloid-pluripotent stem cell MPSC)和淋巴系多能干细胞(lymphoid pluripotent stem cell LPSC)血细胞发育过程形态学演变血细胞发育过程形态学演变示意图 骨髓细胞形态学检查的内容和方法一、低倍镜检查 必需先用低倍镜观察整个涂片切记不可省略,不用必然出现诊断错误。1.确定标本取材和图片制作是否满意肉眼观察:骨髓小粒及脂肪小滴。镜下:寻找骨髓特异细胞如各系幼稚细胞及巨核细胞、浆细
5、胞、网状细胞、组织嗜碱细胞等。2.判断骨髓增生程度 骨骨 髓髓 增增 生生 程程 度度 分分 级级 有核细胞:成熟红细胞 有核细胞%常见原因增生极度活跃 1:0.5-2 1:1 50 leukemia 增生明显活跃 1:5-12 1:10 10 leukemia,增贫 增 生 活 跃 1:16-32 1:20 1-10 正常,各种贫血 增 生 减 低 1:35-70 1:50 0.5-1 CAA 增生明显减低 1:100-300 1:200 0.5 AAA 3.观察巨核细胞数量:低倍镜分类:油镜,注意观察巨核细胞及血小板形态有无异常。判断巨核系成熟程度及产血小板的功能。4.有无异常细胞异常组织
6、细胞转移癌细胞Gaucher细胞Niemann-Pick细胞Gaucher细胞二、油浸镜检查油浸镜检查 1.有核细胞计数、分类 粒系总数各阶段比例 红系总数各阶段比例 淋巴细胞系统各阶段比例、总数 注意单核细胞总数比例 浆细胞总数、比例 G:E24:1 巨核细胞分类 异形细胞、寄生虫Blood SmearBlood Smear骨髓检查同时应配合观察血片,对确立血液病诊断或鉴别诊断有重要意义。Blood SmearBlood Smear白细胞分类计数成熟红细胞形态有无异常略估血小板形态与数量注意有无寄生虫疟原虫 填充报告单 细胞化学染色是以细胞细胞形态学形态学为基础,根据化学反应化学反应的原理应
7、用骨髓涂片进行固定,化学反应显色,复染等程序染色光光学显微镜学显微镜下观察 Peroxidase(POX)Peroxidase(POX)粒细胞和单核细胞粒细胞和单核细胞 Myeloblast(-)Promyelocyte/N(+)Eosinophil strong positive Basophil(-)Monocyte()Lymphocyte、erythroid、Megakaryocyte(-)中性粒细胞碱性磷酸酶染色NAP -醋酸萘酚酯酶染色-NAE 糖原染色(PAS)几种常见急性白血病的细胞化学染色结果几种常见急性白血病的细胞化学染色结果 急淋急淋 急粒急粒 急单急单 红白血病红白血病P
8、OX +视合并的白细胞类似而定SB +同上ASD、NEC +同上-NAE +同上-NAE+NaF 不被NaF抑制 能被NaF抑制 同上NAP 增加 减少 正常或增加 同上PAS +,粗 或+,弥漫 或+,弥漫性 +颗粒状 性淡红色 淡红色或细颗 或块状 粒状 铁染色铁染色 细胞外铁 细胞内铁常见血液病的血液学特征常见血液病的血液学特征1、Anemia Iron deficiency anemia(IDA)Hemolytic anemia(HA)Posthemorrhagic anemia Megaloblastic anemia(MA)Chronic anemia:chronic,acute2
9、、Leukemia Acute leukemia:ALL、AML Chronic leukemia:CML、CLL常见血液病的血液学特征常见血液病的血液学特征3、Myelodysplastic syndrome(MDS)4、Multiple myeloma(MM)5、Idiopathic thrombocytopenic purpura(ITP)粒细胞系统4粒细胞是由粒-单系细胞发育而来的,其发育阶段为:4原粒早幼粒中幼粒晚幼粒杆状核分叶核4其中一般学者认为:从中幼阶段分为嗜中性、嗜酸性、嗜碱性粒细胞粒细胞系统4原始粒细胞4胞体1018m,圆形椭圆形,胞浆量少,淡紫兰色,胞核圆形或椭圆形,居中
10、或偏位,占2/3以上,核染色质细颗粒状,核仁25个,较小,清晰。粒细胞系统4原始粒细胞II型4有原粒的典型特征,所不同的是胞浆中有少量、细小颗粒。粒 细 胞 系统4早幼粒细胞4胞体1220m圆形,胞浆量丰富,出现深紫红色A颗粒,胞核占1/2以上,椭圆形偏于一侧,染色质较原粒粗,可见核仁粒细胞系统4中幼粒细胞4胞体1018m圆形,颗粒细小,紫红色,胞核一侧较平或微有凹陷,占1/22/3,染色质较粗,着红色。红系总数各阶段比例溶血性贫血(HA)NHL骨髓浸润 尼曼-匹克病原粒早幼粒中幼粒晚幼粒杆状核分叶核核形不一,可呈椭圆形、凹陷扭曲或折叠等.骨髓检查同时应配合观察血片,对确立血液病诊断或鉴别诊断
11、有重要意义。为颗粒型巨核细胞,其边缘胞浆可裂解成血小板。核圆形或椭圆形,染色质纤细疏松,核仁13个,胞浆灰蓝色,量多,边缘不规则,无颗粒。5 AAAMyeloblast(-)Promyelocyte/N(+)NAP 增加 减少 正常或增加 同上Blood Smear有原粒的典型特征,所不同的是胞浆中有少量、细小颗粒。核巨大,分叶状,染色质粗而紧密,染紫红色,无核仁。Chronic leukemia:CML、CLL3、Myelodysplastic syndrome(MDS)染色质疏松,但较原单致密,核仁可有可无。粒细胞系统4中性晚幼粒4胞体1016m圆形,胞体一侧有凹陷,胞浆中为中性颗粒。粒细
12、胞系统4中性杆状核4胞体1013m,圆形,胞核凹陷大于核直径的1/2,呈带状、马蹄形或S形粒细胞系统4中性分叶核4胞体1013m,胞核呈分叶状,25叶,染色质深紫红色块状,叶与叶之间由丝状染色质相连。胞浆粉红色,充满特异性颗粒。粒细胞系统4嗜酸性中幼粒4胞体1018m圆形,颗粒粗大,着桔红色,不掩盖胞核,胞核一侧较平或微有凹陷,占1/22/3,染色质较粗,着红色粒细胞系统4嗜酸性分叶核4胞体1013m,圆形,核分叶,25叶,胞体含嗜酸性颗粒。粒 细 胞系统4嗜碱性分叶核4胞体1013m,圆形,核分叶,25叶,胞体含嗜碱性颗粒。异 常粒 细胞Auer小体红红细胞系统原始红细胞早幼红细胞胞体818
13、m,圆形或椭圆形,核圆居中,紫红色染质开始凝集,核仁消失或不清。胞浆增多,着色比原红为淡。红 细 胞 系统中幼红细胞胞体815m,圆形,胞核变小,圆形。染色质凝集成块或成条索状,核仁完全消失。胞浆呈灰蓝色,少数可呈蓝色或灰红色。红 细 胞 系统晚幼红胞体710m,圆形。更小,圆形,染色质紫褐色或黑褐色密集成块,结构不清。胞浆量更多,染色与一般红细胞着色无异。淋 巴 细 胞系统原始淋巴细胞胞体1018m圆形或椭圆形。染色质呈颗粒状,分布均匀较原粒稍粗。核仁清晰,12个,核膜清楚。胞浆量少、着蓝色,核周带明显,无颗粒。淋巴细胞系统幼稚淋巴细胞胞体918m圆形或椭圆形。染色质较紧密,核仁不清或隐约可
14、见,或染色质疏松核仁消失。胞浆量稍增多,可的少许嗜天青颗粒。淋巴细胞系统原幼淋成 熟 淋 巴 细胞胞 体 大 小 不等,圆形,胞核圆形或有凹陷,染色质紧密成块,深紫红色.胞浆量少,染蓝色.原始单核细胞 圆形或椭圆形,直径1520微米。核圆形或椭圆形,染色质纤细疏松,核仁13个,胞浆灰蓝色,量多,边缘不规则,无颗粒。单核细胞系统幼稚单核细胞圆形、椭圆形或不规则形,直径1525微米。核形不一,可呈椭圆形、凹陷扭曲或折叠等.染色质疏松,但较原单致密,核仁可有可无。胞浆量多、灰蓝色,出现较多嗜天青颗粒。单核细胞系统单核细胞圆形或椭圆形或不规则形,直径1220微米。核形不规则,常呈折叠、分叶状、肾形等。
15、染色质疏松,排列成粗网状,也有形成块状者。胞浆呈淡灰蓝色,有多量的粉尘样嗜天青颗粒,边缘可有突起。单核细胞系统原巨核细胞 圆 形,直 径1520微米核巨大常偏位,圆形或不规则形。染色质粗颗粒状,着色深,呈网状排列,核仁隐约可见(23个)或不清。浆深蓝色,无颗粒。巨核细胞系统幼巨核细胞 体积增大,近圆 形,直 径2050微米,核圆形,边缘处有凹陷、或分叶状,染色质粗糙,核仁不清。浆少,深蓝色,边缘有伪足。巨核细胞系统颗粒型巨核细胞外形不规则,直径4070微米。核巨大,分叶状,染色质粗而紧密,染紫红色,无核仁。胞浆量多,充满细小紫红色颗粒。巨核细胞系统产血小板型巨核细胞为颗粒型巨核细胞,其边缘胞浆可裂解成血小板。巨核细胞系统巨核细胞系统裸核型巨核细胞为胞浆完全脱落的血小板。巨核细胞系统巨核细胞系统大血小板