1、 实验室生物安全与监督检查方法实验室生物安全与监督检查方法 广西壮族自治区卫生监督所 黄春松 1第一部分实验室生物安全l实验室生物危害和生物安全的含义实验室生物危害和生物安全的含义l实验室生物安全相关的指南的发展实验室生物安全相关的指南的发展2（一）实验室生物安全的含义l什么是生物危害？什么是生物危害？l广义上的生物危害：广义上的生物危害：指有害或有潜在危害指有害或有潜在危害的生物因子对人、环境、生态和社会造成的生物因子对人、环境、生态和社会造成的危害或潜在危害。的危害或潜在危害。l实验室生物危害：实验室生物危害：指在微生物和生物医学指在微生物和生物医学实验室研究过程中对人、环境、生态和社实验
2、室研究过程中对人、环境、生态和社会造成的危害和对环境造成的污染。会造成的危害和对环境造成的污染。3实验室生物危害的类型例如：例如：l病毒、细菌、真菌、毒素和寄生虫等。病毒、细菌、真菌、毒素和寄生虫等。l来自感染的人和动物的血液、体液和各种组织来自感染的人和动物的血液、体液和各种组织等。等。l组织细胞的培养和某些类型的核酸的转染。组织细胞的培养和某些类型的核酸的转染。4实验室相关感染暴露途径：暴露途径：l经皮接种感染经皮接种感染l气溶胶吸入感染气溶胶吸入感染l粘膜接触感染粘膜接触感染 l食入感染食入感染5实验室相关感染感染源感染源l培养物和储存物培养物和储存物l实验动物实验动物l标本标本l被上述
3、内容污染的物品被上述内容污染的物品6实验室相关感染敏感宿主敏感宿主l免疫系统免疫系统l疫苗接种状况疫苗接种状况l年龄年龄7实验室相关感染l80%80%是不明原因的感染。是不明原因的感染。l20%20%感染的原因是明确的。感染的原因是明确的。80%是由工作人员操作失误引起的；20%是由设备故障引起的。l导致感染最多的导致感染最多的4 4种实验室事故种实验室事故溢出和泼洒针头和注射器锐器、碎玻璃动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤8 实验室相关感染（事例）9什么是生物安全？l为了避免微生物和医学实验室中在进行各种有危害或有潜在危害的为了避免微生物和医学实验室中在进行各种有危害或有潜在危害的生物因子活动
4、过程中生物因子活动过程中,可能对人、环境和社会造成的危害或潜在危害，可能对人、环境和社会造成的危害或潜在危害，而采取的防护措施（简称硬件而采取的防护措施（简称硬件:包括实验室设施和安全设备）和管理包括实验室设施和安全设备）和管理措施（简称软件措施（简称软件:是指管理体系是指管理体系,包括生物手册、程序性文件、管理包括生物手册、程序性文件、管理制度、操作细则以及相应记录表格），达到对人、环境和社会的安制度、操作细则以及相应记录表格），达到对人、环境和社会的安全防护目的。全防护目的。l实验室生物安全防护的内容包括实验室生物安全防护的内容包括安全设备、个体防护装置和措施安全设备、个体防护装置和措施（
5、一级防护），实验室的特殊设计和建设要求（二级防护），严格（一级防护），实验室的特殊设计和建设要求（二级防护），严格的管理制度和标准化的操作程序和规程。的管理制度和标准化的操作程序和规程。10（二）实验室生物安全相关的指南lWHOWHO的的实验室生物安全手册实验室生物安全手册1983年第一版，1993第二版，2004第三版，l欧洲经济共同体（欧洲经济共同体（EECEEC）EEC委员会指令93/88对微生物危险等级的分类l美国的美国的微生物和生物医学实验室生物安全手册微生物和生物医学实验室生物安全手册l19831983年第一版，年第一版，19931993年第三版，年第三版，19991999年第四版
6、；年第四版；美国的美国的生物危害主要防护：生物安全柜的选择、安装和生物危害主要防护：生物安全柜的选择、安装和使用使用l20002000年第二版；年第二版；11（二）实验室生物安全相关的指南l加拿大的加拿大的实验室生物安全指南实验室生物安全指南19901990年第一版，年第一版，19961996年第二版，年第二版，20032003年第三版年第三版(征求意征求意见稿见稿)l英国的英国的根据危害和防护分类的生物因子的分类根据危害和防护分类的生物因子的分类(危险病原体咨询委员会危险病原体咨询委员会,ACDP),ACDP)1995年，第四版 12（二）实验室生物安全相关的指南l我国的生物安全相关标准我国
7、的生物安全相关标准lGB19489实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求，2004年年4月月6日，第一版日，第一版l卫生部的卫生部的微生物和生物医学实验室生物安全通用准微生物和生物医学实验室生物安全通用准则则，2003年年8月月1日，第一版日，第一版l病原微生物实验室生物安全环境管理办法病原微生物实验室生物安全环境管理办法2006年年3月月2日国家环境保护总局第日国家环境保护总局第32号号13病原微生物的分类病原微生物的分类l第七条 国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类：病原微生物实验室生物安全管理条例 14病原微生物的分类病原微生物的分类l第
8、一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。l第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。15病原微生物的分类病原微生物的分类l第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。16人间传染的病原微生物名录中华人民共和国卫生
9、部制定中华人民共和国卫生部制定二六年一月十一日二六年一月十一日17微生物的危害等级（Risk Group）l危害等级分类的依据：危害等级分类的依据：微生物的致病性；微生物的致病性；传播方式和宿主范围；传播方式和宿主范围；具有的有效预防措施；具有的有效预防措施；具有的有效治疗措施。具有的有效治疗措施。18微生物的危害等级（Risk Group）l微生物的危害等级（分为四个等级）：微生物的危害等级（分为四个等级）：危害等级危害等级I I：是指低个体和低社会危害；是指低个体和低社会危害；不可不可能引起健康成人或动物致病的微生物；能引起健康成人或动物致病的微生物；要求要求I I级生物级生物安全防护水平
10、（安全防护水平（BSLBSLI I）危害等级危害等级IIII：是指中等个体危害，有限的社是指中等个体危害，有限的社会危害；会危害；很少引起严重的人或动物疾病；要求二级很少引起严重的人或动物疾病；要求二级生物防护水平（生物防护水平（BSLBSL2 2）19微生物的危害等级（Risk Group）l危害等级危害等级IIIIII：是指高个体危险，低社会危险；是指高个体危险，低社会危险；可以可以引起严重的疾病引起严重的疾病（Bacillus Bacillus anthracisanthracis,Mycobacterium tuberculosis,Mycobacterium tuberculosis
11、 HantaanHantaan viruses,Yellow fever virus Creutzfeldt-Jakob HIV viruses,Yellow fever virus Creutzfeldt-Jakob HIV），），要求三要求三级生物安全防护水平（级生物安全防护水平（BSLBSL3 3）l危害等级危害等级VIVI：是指高个体危险和高社会危险；是指高个体危险和高社会危险；可能要可能要求非常严重的疾病（拉萨热病毒、埃波拉求非常严重的疾病（拉萨热病毒、埃波拉 病毒病毒,马马尔堡病毒），要求四级生物安全防护水平（尔堡病毒），要求四级生物安全防护水平（BSLBSL4 4）20(三三)实
12、验室的标准和要求实验室的标准和要求l第五条 国家实行统一的实验室生物安全标准。实验室应当符合国家标准和要求。21国家的生物安全相关标准lGB19489实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求，2004年年4月月6日，第一版日，第一版l卫生部的卫生部的微生物和生物医学实验室生物安全通用准微生物和生物医学实验室生物安全通用准则则，2003年年8月月1日，第一版日，第一版l卫生部卫生部临床实验室安全准则临床实验室安全准则2005年年12月月1日日22实验室生物安全通用要求l BSL-1实验室实验室 1)无须特殊选址，普通建筑物即可，但应有防止节肢动物和啮齿动物进入的设计。2)每个实验室应设洗手池
13、，宜设置在靠近出口处。3)在实验室门口处应设挂衣装置，个人便装与实验室工作服分开设置。4)实验室的墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑，不得铺设地毯。5)实验台面应防水，耐腐蚀、耐热。6)实验室中的橱柜和实验台应牢固。橱柜、实验台彼此之间应保持一定距离，以便于清洁。7)实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗。8)实验室内应保证工作照明，避免不必要的反光和强光。9)应有适当的消毒设备。23实验室生物安全通用要求lBSL-2实验室实验室 1)满足6.1要求。2)实验室门应带锁并可自动关闭。实验室的门应有可视窗。3)应有足够的存储空间摆放物品以方便使用。在实验室工
14、作区域外还应当有供长期使用的存储空间。4)在实验室内应使用专门的工作服；应戴乳胶手套。5)在实验室工作区域外应有存放个人衣物的条件。6)在实验室所在的建筑物内应配备高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求。7)应在实验室内配备生物安全柜。8)应设洗眼设施，必要时应有几喷淋装置。9)应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。10)有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等设备用电源。11)实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识。24高致病性病原微生物的运输高致病性病原微生物的运输l第十条 运输高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本，应当通过陆路运输；没有陆路通
15、道，必须经水路运输的，可以通过水路运输；紧急情况下或者需要将高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本运往国外的，可以通过民用航空运输。第十一条 运输高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本，应当具备下列条件：25实验室级别实验室级别l第二十条 三级、四级实验室应当通过实验室国家认可。国务院认证认可监督管理部门确定的认可机构应当依照实验室生物安全国家标准以及本条例的有关规定，对三级、四级实验室进行认可；实验室通过认可的，颁发相应级别的生物安全实验室证书。证书有效期为年。第二十一条 一级、二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动。三级、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动，应当具备下列条件：26实
16、验室备案实验室备案l第二十五条 新建、改建或者扩建一级、二级实验室，应当向设区的市级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门备案。设区的市级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门应当每年将备案情况汇总后报省、自治区、直辖市人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门。27工作人员培训工作人员培训l第三十四条 实验室或者实验室的设立单位应当每年定期对工作人员进行培训，保证其掌握实验室技术规范、操作规程、生物安全防护知识和实际操作技能，并进行考核。工作人员经考核合格的，方可上岗。28实验档案和环境保护实验档案和环境保护l第三十七条 实验室应当建立实验档案，记录实验室使用情况和安全监督情况。实验室从事高致病性病原
17、微生物相关实验活动的实验档案保存期，不得少于年。第三十八条 实验室应当依照环境保护的有关法律、行政法规和国务院有关部门的规定，对废水、废气以及其他废物进行处置，并制定相应的环境保护措施，防止环境污染。29标识标识l第三十九条 三级、四级实验室应当在明显位置标示国务院卫生主管部门和兽医主管部门规定的生物危险标识和生物安全实验室级别标志。30法律责任法律责任 l第五十六条 三级、四级实验室未依照本条例的规定取得从事高致病性病原微生物实验活动的资格证书，或者已经取得相关资格证书但是未经批准从事某种高致病性病原微生物或者疑似高致病性病原微生物实验活动的，由县级以上地方人民政府卫生主管部门、兽医主管部门
18、依照各自职责，责令停止有关活动，监督其将用于实验活动的病原微生物销毁或者送交保藏机构，并给予警告；31法律责任法律责任l第五十九条 违反本条例规定，在不符合相应生物安全要求的实验室从事病原微生物相关实验活动的，由县级以上地方人民政府卫生主管部门、兽医主管部门依照各自职责，责令停止有关活动，监督其将用于实验活动的病原微生物销毁或者送交保藏机构，并给予警告；32法律责任法律责任l第六十条 实验室有下列行为之一的，由县级以上地方人民政府卫生主管部门、兽医主管部门依照各自职责，责令限期改正，给予警告；逾期不改正的，由实验室的设立单位对主要负责人、直接负责的主管人员和其他直接责任人员，依法给予撤职、开除
19、的处分；有许可证件的，并由原发证部门吊销有关许可证件：33法律责任法律责任l（一）未依照规定在明显位置标示国务院卫生主管部门和兽医主管部门规定的生物危险标识和生物安全实验室级别标志的；（二）未向原批准部门报告实验活动结果以及工作情况的；（三）未依照规定采集病原微生物样本，或者对所采集样本的来源、采集过程和方法等未作详细记录的；（四）新建、改建或者扩建一级、二级实验室未向设区的市级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门备案的；（五）未依照规定定期对工作人员进行培训，或者工作人员考核不合格允许其上岗，或者批准未采取防护措施的人员进入实验室的；（六）实验室工作人员未遵守实验室生物安全技术规范和操作规程
20、的；（七）未依照规定建立或者保存实验档案的；（八）未依照规定制定实验室感染应急处置预案并备案的。34医疗机构临床实验室监督检查医疗机构临床实验室监督检查l相关法规相关法规 医疗机构临床实验室管理办法医疗机构临床实验室管理办法35医疗机构临床实验室管理的一般规定医疗机构临床实验室管理的一般规定 l第六条卫生行政部门在核准医疗机构的医学检验科诊疗科目登记时，应当明确医学检验科下设专业。l医疗机构应当按照卫生行政部门核准登记的医学检验科下设专业诊疗科目设定临床检验项目，提供临床检验服务。新增医学检验科下设专业或超出已登记的专业范围开展临床检验项目，应当按照医疗机构管理条例的有关规定办理变更登记手续。
21、36医疗机构临床实验室管理的一般规定医疗机构临床实验室管理的一般规定l第十九条 诊断性临床检验报告应当由执业医师出具。l乡、民族乡、镇的医疗机构临床实验室诊断性临床检验报告可以由执业助理医师出具。37医疗机构临床实验室质量管理医疗机构临床实验室质量管理 l第二十五条 医疗机构临床实验室应当对开展的临床检验项目进行室内质量控制，绘制质量控制图。出现质量失控现象时，应当及时查找原因，采取纠正措施，并详细记录。l第二十六条 医疗机构临床实验室室内质量控制主要包括质控品的选择，质控品的数量，质控频度，质控方法，失控的判断规则，失控时原因分析及处理措施，质控数据管理要求等。l第二十七条 医疗机构临床实验
22、室定量测定项目的室内质量控制标准按照临床实验室定量测定室内质量控制指南（GB/20032302-T-361）执行。38常见的检验科仪器常见的检验科仪器l全自动生化仪l血细胞分析仪l全自动化学发光分析仪39医疗机构临床实验室质量管理医疗机构临床实验室质量管理l第二十八条 医疗机构临床实验室应当参加经卫生部认定的室间质量评价机构组织的临床检验室间质量评价。l第二十九条 医疗机构临床实验室参加室间质量评价应当按照常规临床检验方法与临床检验标本同时进行，不得另选检测系统，保证检验结果的真实性。医疗机构临床实验室对于室间质量评价不合格的项目，应当及时查找原因，采取纠正措施。40医疗机构临床实验室安全管理
23、医疗机构临床实验室安全管理 l第三十三条 医疗机构应当加强临床实验室生物安全管理。l医疗机构临床实验室生物安全管理要严格执行病原微生物实验室生物安全管理条例等有关规定。41医疗机构临床实验室安全管理医疗机构临床实验室安全管理l第四十二条 医疗机构临床实验室应当按照医疗废物管理条例和医疗卫生机构医疗废物管理办法相关规定妥善处理医疗废物。42关于标本的处理关于标本的处理l医疗废物管理条例第十九条 医疗卫生机构应当根据就近集中处置的原则，及时将医疗废物交由医疗废物集中处置单位处置。l医疗废物中病原体的培养基、标本和菌种、毒种保存液等高危险废物，在交医疗废物集中处置单位处置前应当就地消毒。l 中华人民
24、共和国国家标准实验室生物安全通用要求废废弃物处置弃物处置 所有弃置的实验室生物样本、培养物和被污染的废弃物在从实验室中取走之前,应使其达到生物学安全。生物学安全可通过高压消毒处理或其他被承认的技术达到。实验室废弃物应置于适当的密封且防漏容器中安全运出实验室。43关于标本的处理关于标本的处理l标本处理：可重复使用的物品和污染的器具应置于装有次氯酸钠1:10稀释液或其他合适的消毒剂的不锈钢容器内，然后进行高压灭菌、清洗和再次灭菌。对医疗废弃物处理的管理应遵守有关法规。临床实验室安全准则44监督管理监督管理 l第四十五条 医疗机构有下列情形之一的，由县级以上地方卫生行政部门按照医疗机构管理条例相关规
25、定予以处罚：l（一）未按照核准登记的医学检验科下设专业诊疗科目开展临床检验工作；l（二）未按照相关规定擅自新增医学检验科下设专业；l（三）超出已登记的专业范围开展临床检验工作。45医学检验科二级科目医学检验科二级科目l临床体液、血液专业l临床微生物学专业l临床化学专业l临床免疫、血清学专业l临床细胞分子遗传学专业l其它46监督管理监督管理l第四十六条 县级以上卫生行政部门应当对辖区内医疗机构临床实验室的管理、质量与安全等情况进行监督检查，发现存在质量问题或者安全隐患时，应当责令医疗机构立即整改。47监督管理监督管理l第四十八条 县级以上卫生行政部门履行监督检查职责时，有权采取下列措施：l（一）对医疗机构临床实验室进行现场检查，了解情况，调查取证；l（二）查阅或者复制临床实验室质量和安全管理的有关资料，采集、封存样品；l（三）责令违反本办法及有关规定的医疗机构临床实验室及其人员停止违法违规行为；l（四）对违反本办法及有关规定的行为进行查处。48谢谢！谢谢！49l洗手洗手l实验室工作人员在实际或可能接触了血液、体液或者其他污染材料后，即使戴了手套也应立即洗手。l摘除手套后、使用卫生间前后、离开实验室前、进食或吸烟前并应洗手。l洗手池不得用于其它目的。l -实验室生物安全通用要求505152535455565758596061626364656667
