1、第6章 从杂交育种到基因工程 第2节 基因工程及其应用,人教版必修2,怎样让奶牛产出人奶呢?,目的基因,供体细胞,受体细胞,一、基因工程的基本步骤,(一) 提取目的基因,(二)目的基因与运载体结合,(三)将目的基因导入受体细胞,(四)目的基因的检测和表达,1、要想获得目的基因必须用限制酶切几个切口?,思考与讨论:,2、会产生几个黏性末端?,思考与讨论:,基因的运载体,用同种限制酶切割,DNA连接酶,作为运载体必须具备哪些条件?,1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2.具多个限制酶切点,以便与外源基因连接。 3.对宿主细胞无毒害作用。 4.具有某些标记基因,便于进行筛选。,1、常用的受体细胞
2、:,大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等,2、常用微生物作受体细胞的原因:,微生物增殖快、代谢快、目的产物多。,3、若运载体是质粒,受体细胞为细菌应作何处理:,应用CaCl2处理,操作过程中用到哪些工具?,(一)基因的“剪刀”,、分布:,主要在微生物中,专一性,3,5-磷酸二酯键,一般产生黏性末端(或产生平末端),限制性核酸内切酶,二、基因工程的工具,、结果:,3、切割具体部位:,、作用特点:,(二)基因的针线DNA连接酶,作用:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。,连接的是什么部位?,3,5-磷酸二酯键,DNA聚合酶和DNA连接酶的比较,不同点,相同点,DNA
3、聚合酶,DNA连接酶,连接DNA片段,不需要模板,连接的是游离的脱氧核苷酸,需要模板,连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖,形成磷酸二酯键,(三)基因的运输工具运载体,1、功能:,2、常用的运载体:,3、必须具备的条件,1.原理:,基因重组,DNA分子水平,定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。,三、基因工程的概念,体外,4.结果:,3.操作环境:,2.操作水平:,、基因工程与作物育种,四、基因工程的应用,生长快、肉质好的转基因鱼(中国),转基因的紫番茄,2、基因工程与药物研制,3、 环境保护,超级细菌,讨论:转基因食品安全吗?,练习,1.基因工程的正确操作步骤是( ),使目的基因
4、与运载体结合 将目的基因导入受体细胞 检测目的基因的表达是否符合特定性状要求 提取目的基因, B. C. D. ,C,2.要使目的基因与对应的载体重组,所需的两种酶是( ) 限制酶 连接酶 解旋酶 还原酶 ,A,3.基因工程技术中的目的基因主要来源于 ( ),A.自然界现存在生物体内的基因 B.自然突变产生的新基因 C.人工诱变产生的新基因 D.科学家在实验室中人工合成的基因,A,4.下列关于基因工程的叙述中,正确的是( ),A.限制酶只用于提取目的基因 B.细菌体内的环状DNA均可作运载体 C.DNA连接酶可用于目的基因和运载体的连接 D.重组DNA分子一旦进入受体细胞,基因工程则完成.,5.以下说法正确的是( ),A.目的基因是指重组DNA B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C.DNA重组所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 D.只要受体细胞中含有目的基因,目的基因就一定能够成功表达,C,B,