1、1一、血凝检测二、心肌酶谱三、耐药监测四、肿瘤标记物 2一、血凝检测(一)、血凝与凝血因子检测1、凝血因子 目前主要认为有14个:国际委员会命名(其中是 的激活态,已废除)激肽释放酶原(PK)高分子量激肽原(HMWK)以上14个因子分四组:3(1)、维生素K依赖性凝血因子:凝血酶原 稳定因子 血浆凝血活酶成分 PTC Stuart-Prower 因子(2)、接触凝血因子 接触因子 血浆凝血活酶前质 PTA PK 激肽释放酶原 HMWK 高分子量激肽原4(3)、对凝血酶敏感因子 纤维蛋白原 易变因子 抗血友病球蛋白 纤维蛋白稳定因子(4)、其他 组织凝血活酶 Ca2+5(二)、过程(瀑布学说)内
2、源性凝血途径(APTT)外源性凝血途径(PT)a Ca2+a a Ca2+PF3 a Ca2+PF3 (凝血酶原)a(凝血酶)(纤维蛋白原)a(纤维蛋白)6(三)、血凝分析项目正常值PT(凝血酶原时间)11-13sFIB(纤维蛋白原)200-400mg/dlAT(凝血酶原活动度)70-140%APTT(部分凝血活酶时间)26-36sTT(凝血酶时间)12-26sAT-(抗凝血酶)80-120%PLG(纤溶酶原)80-120%AT-PL(抗纤溶酶)80-120%7(三)、血凝分析项目正常值HEP(肝素)high 0.1-0.9U/ml low 0.02-0.3U/ml P-C(蛋白C)70-14
3、0%P-S (蛋白S)60-140%凝血因子(、)50-100%D-Dimer(D-二聚体)250ng/mlFDP(纤维蛋白降解产物)0.848(三)、血凝分析项目正常值t-PA(组织型纤溶酶原激活物)25-34岁:4.0-5.5ng/ml 55-64岁:7.6-8.6ng/ml PAI(组织型纤溶酶原抑制物)18 10ng/mlLA(狼疮抗凝物)0.8-1.2Low HEP(低分子量肝素浓度测定)高值:0.1-1U/ml 低值:0.05-0.3U/ml 血小板凝集试验 ADP 90 40hmsVW因子测定 40%9(四)、检测应用 PT、APTT、PLT是基本项1、PT 血浆凝血酶原时间 (
4、反映外源性凝血途径)组织凝血活酶+钙离子 凝血酶原 凝血酶 纤维蛋白原 纤维蛋白 血浆凝固 参考值:11-14s 临床意义 延长:先天缺失,DIC,肝病,VitK缺乏,服抗凝剂 缩短:血栓前状态,DIC早期10 2、APTT(活化部分凝血活酶时间)试剂+钙离子 观察血小板血浆凝固时间 反映内源性凝血途径 参考值:26-36s 临床意义 延长:、减少(血友病)严重的或纤维蛋白原降低 血中抗凝物增多或肝素治疗 缩短:血栓前状态及血栓病(心梗,脑梗)3、PLT 血小板计数(仪器局限性)114、应用范围(1)、术前筛查(2)、出血性疾病病因分析(3)、抗凝治疗的监测(4)、DIC患者90%PT均异常(
5、5)、评价肝脏疾病的预后125、注意事项(1)、因子可被玻璃激活,采血管要硅化(2)、针头不能细小(细胞破坏,物质释放)(3)、避免表面张力液体(器材)(4)、抗凝剂的合理使用(5)、采血时不能拍打(激活凝血因子)(6)、采血时要一针见血,因子存在组织液中(羊水栓塞DIC)13二、心肌酶谱既往:CK、AST、LDH目前:TNI(TNT)、MYO、CK-MB1、肌钙蛋白横纹肌结构蛋白,存在肌原纤维肌丝内。肌钙蛋白复合物:TNC、TNI、TNT检测方法:EIA临床意义:50%心梗患者3小时内TNT升高,持续时间长(CK的4倍),值高30-40倍,当一峰大于二峰,提示心肌再灌注。不稳定心绞痛时,其升
6、高提示小坏死。142、肌红蛋白 低分子量氧结合蛋白,广泛分布于心肌、骨骼肌中,损害时常升高。方法及参考范围:EIA 50-85ng/ml 临床意义:急性心梗早期指标:心梗1.5-4小时即开始升高,12小时达到高峰,48小时恢复正常。区别急性肌损伤:心衰、慢性肾功能不全。153、肌酸激酶同工酶CK是由M、B两个亚基 构成的二聚体,组成CK-MM(骨骼肌)、CK-MB(心肌)、CK-BB(脑)三种同工酶。正常血清主要为CK-MM,CK-BB含量微,CK-MB小于5%。检测方法:血清抑制法、电泳法 37 时CK-MB 10U/L临床意义:心梗后3-4小时开始升高,12-24小时达到高峰,3-5天恢复
7、正常,其升高与心肌损害程度一致(面积、预后)。16小结:心梗组合检测 心梗组合 参考范围 结果判断 CTn(I)0.1 ng/ml 阴性 0.1-0.6 ng/ml 可疑 0.6-1.5ng/ml 心脏疾病 CK-MB 5ng/ml MYO 男性:19-92ng/ml 女性:17-72ng/ml17三、耐药监测 目前世界耐药菌株关注的几个问题 药敏方法 结果介绍18金黄色葡萄球菌:获得性耐药株的新挑战19法国肺炎球菌对青霉素的耐药性0 05 51010151520202525303035354040454550508484868688889090929294949696多重耐药性多重耐药性20
8、肠球菌:获得性耐药株的新挑战21肠球菌对糖肽类耐药机制特点 万古 替考拉宁 诱导 转移 菌VanA 耐 耐 +粪,屎VanB 耐 敏 +粪,屎VanC 低耐 低耐 -黄,鸡,坚VanD 中耐 中耐 -?屎22细菌的耐药监测目的:及时掌握院内感染动向方法:E-test意义:为抗生素合理使用提供信息以下简要介绍NPRS23SICHUAN广州(广州(2)重庆(重庆(1)长沙(长沙(1)杭州(杭州(2)上海(上海(2)北京(北京(3)武汉(武汉(2)2494-2001年G-全国监测的细菌种类和菌数菌 名%菌数绿脓杆菌212126大肠杆菌181868肺炎克雷伯菌141449鲍曼不动杆菌111066阴沟肠
9、杆菌9972嗜麦芽胞菌3315枸橼酸杆菌属3299假单胞菌属2228不动杆菌属2183乙酸钙不动2180变形杆菌群3345菌 名%菌数沙雷菌属1145产酸克雷伯菌1128克雷伯菌属187黄杆菌属177洋葱博克菌168产硷杆菌162产气肠杆菌2157聚集肠杆菌161肠杆菌属155非发酵糖菌4305 肠杆菌科菌5708251994-2001间10575株革兰阴性菌的总耐药趋势40506070809010094(603)95(1123)96(1448)98(1644)99(1500)00(1969)01(1992)亚胺培南亚胺培南头孢他啶头孢他啶头孢噻肟头孢噻肟哌酮哌酮/舒巴坦舒巴坦哌拉哌拉/他唑他
10、唑环丙沙星环丙沙星头孢吡肟头孢吡肟S%2610种抗生素对1994-2001间10575株G-的总覆盖率86.586.579.579.5737372.772.77272545446.346.359.259.253.453.475.375.34045505560657075808590亚胺培南亚胺培南哌酮哌酮/舒巴坦舒巴坦头孢他啶头孢他啶哌拉哌拉/三唑三唑头孢匹肟头孢匹肟替卡西林替卡西林/克拉克拉头孢曲松头孢曲松环丙沙星环丙沙星庆大霉素庆大霉素阿米卡星阿米卡星S%27嗜麦芽不动杆菌属奇&通变形绿脓克雷伯属 泰能 他啶 舒普深 噻肟 曲松 吡肟其它菌嗜麦芽不动杆菌属奇/普通变形绿脓克雷伯属大肠杆菌可
11、诱导肠杆菌革兰阴性杆菌耐药组成28细菌的主要耐药机制1、抗菌药物向无活性形式转化(产酶)2、对抗菌药物的作用靶位的修饰3、细菌对抗生素通透性的变化4、主动排除29ESBLs的代表性菌株大肠埃希菌肺炎克雷伯菌粘质沙雷菌弗劳地枸橼酸菌阴沟肠杆菌铜绿假单胞菌等30AmpC酶与革兰氏阴性菌的耐药特点1、AmpC酶属于Bush1型酶或Ambler C群酶。2、水解青霉素类、1、2、3代头孢菌素类和单环酰胺类的-内酰胺酶。3、克拉维酸不能抑制AmpC酶,体外试验尚能诱导AmpC酶。4、舒巴坦、他唑巴坦的抑制作用非常有限。、舒巴坦、他唑巴坦的抑制作用非常有限。311994-2001间1868株大肠杆菌的总耐
12、药趋势2020404060608080100100949496969898999900000101亚胺培南亚胺培南头孢他啶头孢他啶头孢噻肟头孢噻肟舒普生舒普生哌拉哌拉/他唑他唑环丙沙星环丙沙星阿米卡星阿米卡星头孢吡肟头孢吡肟3232个医院 1994-2001年大肠杆菌及肺炎克雷伯菌产生ESBLs百分率0 0101020203030404050506060707080809090100100949495959696989899990 0大肠杆菌大肠杆菌肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌中介101 66 319 263 260 229 356 270300 150 158 164 数字为株数%年331994
13、-2001间1304株鲍曼不动杆菌的总耐药趋势3030404050506060707080809090100100949496969898999900000101亚胺培南亚胺培南头孢他啶头孢他啶舒普生舒普生哌拉哌拉/他唑他唑环丙沙星环丙沙星阿米卡星阿米卡星%34四、肿瘤标志物1、定义:与肿瘤存在和发展有关的物质,一般分3类:癌胚抗原 激素类多肽和酶 蛋白或其他物质 2、来源:一般不是肿瘤发生新出现的,原有物质在癌变时过量生成或分泌,或正常时胚胎出现癌变时复出。35肿瘤标记物3、选择标准 敏感:一旦癌变有异常表达,最好早期即有量变 最好与肿瘤的生长、消退有量的比例关系 较高特异性:理想者为某种肿瘤特有最好 实用性:标本易得,方法简便,成本低,易于大量检测。36肿瘤标记物4、主要临床意义 早期诊断:不能提供太多信息 检测病情发展,追踪疗效,监视复发和转移,评价预后价值更大。37肿瘤标志物在肿瘤诊断及其治疗监测中的应用 CEAAFPCA125CA153CA199CA724PSAFreePSAHCGCYFRA211NSETGFeFe-P其他结肠癌胰腺癌 胃癌 CA242肝癌 前列腺癌 PAP胚细胞癌 卵巢癌睾丸癌子宫颈癌 乳腺癌 非小细胞肺癌 小细胞肺癌 膀胱癌 甲状腺癌白血病3839