干化学原理课件.ppt

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1、1主要内容主要内容2MicroSlide MicroSlide 多涂层薄膜干片技术多涂层薄膜干片技术扩散层扩散层扩散层扩散层试剂层试剂层试剂层试剂层指示剂层指示剂层指示剂层指示剂层支持层支持层支持层支持层标本标本MicroSlide多涂层薄膜干片技术:将所需试剂预固相在多层薄膜和邮票大小的透明支持基垫之上。当血浆,血清,尿液或脑脊液与这些已含化学物质的干式薄膜接触时发生反应并对反应信号进行测量。3干片分类干片分类干片干片(MicroSlide)(MicroSlide)钠钾氯胆固醇 甘油三酯总蛋白 白蛋白高密度酯蛋白 脂肪酶 谷丙转氨酶 谷氨酸转移酶碱性磷酸酶 r谷氨酰转酞酶乳酸脱氢酶 肌酸激酶

2、肌酸激酶同工酶 尿素氮肌酐 淀粉酶胆碱脂酶总胆红素结合/非结合胆红素血氨比色比色/速率速率法干片法干片免疫速率免疫速率法干片法干片电极法电极法干片干片4指示剂层指示剂层 支持层支持层扩散层扩散层试剂层试剂层通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度5指示剂层指示剂层 支持层支持层 多孔结构,允许标本通过多孔结构,允许标本通过 均匀分布标本均匀分布标本 过滤大分子(蛋白质,脂肪等)过滤大分子(蛋白质,脂肪等)去除干扰物质(溶血,黄疸等)去除干扰物质(溶血,黄疸等)提供反射测定的背景提供反射测定的背景试剂层试剂层比色比色/速率法干片结构速率法干片结构6试剂层试剂层扩散

3、层扩散层 试剂层试剂层指示剂层指示剂层 支持层支持层 包含检测反应所需的酶,缓冲液,催化剂等包含检测反应所需的酶,缓冲液,催化剂等 多层试剂,控制反应顺序多层试剂,控制反应顺序比色比色/速率法干片结构速率法干片结构葡萄糖干片葡萄糖干片指示剂层指示剂层扩散层扩散层 试剂层试剂层 支持层支持层试剂层产物与指示剂层中的试剂层产物与指示剂层中的染料结合时,形成有色复合物,染料结合时,形成有色复合物,其与分析物浓度成正比。其与分析物浓度成正比。比色比色/速率法干片结构速率法干片结构支持层支持层扩散层扩散层 试剂层试剂层指示剂层指示剂层 提供反应支持基垫提供反应支持基垫 允许光路自由通过允许光路自由通过比

4、色比色/速率法干片结构速率法干片结构均匀分布标本均匀分布标本比色比色/速率法干片功能演示速率法干片功能演示扩散层扩散层试剂层试剂层指示剂层指示剂层支持层支持层10均匀分布标本均匀分布标本标本进入扩散层标本进入扩散层均匀分布标本均匀分布标本扩散层扩散层试剂层试剂层指示剂层指示剂层支持层支持层比色比色/速率法干片功能演示速率法干片功能演示11标本迅速向四周扩散标本迅速向四周扩散均匀分布标本均匀分布标本扩散层扩散层试剂层试剂层指示剂层指示剂层支持层支持层比色比色/速率法干片功能演示速率法干片功能演示12标本均匀向下层渗透标本均匀向下层渗透扩散层扩散层试剂层试剂层指示剂层指示剂层支持层支持层比色比色/

5、速率法干片功能演示速率法干片功能演示13标本与试剂反应标本与试剂反应扩散层扩散层试剂层试剂层指示剂层指示剂层支持层支持层比色比色/速率法干片功能演示速率法干片功能演示14反应物在指示剂层被固定反应物在指示剂层被固定扩散层扩散层试剂层试剂层指示剂层指示剂层支持层支持层比色比色/速率法干片功能演示速率法干片功能演示15反射光的测定反射光的测定干扰物质干扰物质反光背景反光背景成色层成色层生成纯净的反射光生成纯净的反射光光源光源滤光片滤光片接收器接收器比色比色/速率法干片功能演示速率法干片功能演示16透射透射 与与 反射反射17 竞争性与非竞争性免疫速率反应模式竞争性与非竞争性免疫速率反应模式 需要液

6、体反应底物需要液体反应底物 地高辛、苯妥因、苯巴比妥、地高辛、苯妥因、苯巴比妥、CRPCRP、卡马西平卡马西平免疫速率法干片免疫速率法干片18免疫速率法干片免疫速率法干片酶酶抗体抗体酶标抗原酶标抗原胶乳试剂胶乳试剂扩散层扩散层受体层受体层胶乳层胶乳层聚酯支持层聚酯支持层19酶标抗原酶标抗原抗体抗体胶乳试剂胶乳试剂病人标本病人标本免疫速率法干片免疫速率法干片20胶乳试剂胶乳试剂酶标抗原酶标抗原 标本中抗原标本中抗原抗体抗体免疫速率法干片免疫速率法干片21竞争法结合竞争法结合结合抗原结合抗原 +游离抗原游离抗原免疫速率法干片免疫速率法干片22加入液体反应底物洗去未结合物质加入液体反应底物洗去未结合

7、物质免疫速率法干片免疫速率法干片23竞争法结果竞争法结果 高浓度高浓度 低浓度低浓度免疫速率法干片免疫速率法干片24 离子选择电极技术离子选择电极技术 直接法测定两电极间电势不同直接法测定两电极间电势不同 钾,钠,氯钾,钠,氯25盐桥盐桥S2S1S3S4aIar离子载体膜离子载体膜M+ClM+ClAgClAgCl AgAg离子载体膜离子载体膜M+ClM+ClAgClAgClAgAgaIarVV干片干片常规常规已知浓度液体已知浓度液体(参比液参比液)待测液体待测液体(标本标本)离子选择电极离子选择电极(ISE)(ISE)盐桥盐桥ar26Electrometer干片在接触点被穿透测量电压读数通过电

8、压读数计算出分析物的浓度27Aqueous Aqueous Solution Solution(Serum)(Serum)水相水相(血清血清)Non-aqueous solutionNon-aqueous solution(Lipids,Proteins)(Lipids,Proteins)非水相非水相(血脂血脂,蛋白质蛋白质)以间接法检测的容以间接法检测的容量量以直接法检测的容以直接法检测的容量量间接法无法对间接法无法对血脂和血脂和蛋白质进行校正蛋白质进行校正.28组成成分组成成分 原始体积原始体积水相水相9.9.3 3 ulul非水相非水相 0.0.7 7 ulul总样本体积总样本体积 10

9、.0 10.0 ulul按照血清中按照血清中,非水相占有的体积约为非水相占有的体积约为7%7%计算计算标本标本电解质排斥效应电解质排斥效应29组成成分组成成分 原始体积原始体积稀释液稀释液 990.0 990.0 ulul水相水相 9.9.3 3 ulul非水相非水相 0.0.7 7 ulul总样本体积总样本体积 1000.0 ul1000.0 ul稀释后的正常人标本稀释后的正常人标本(100(100倍稀释倍稀释)稀释比率稀释比率=最终体积最终体积/原始体积原始体积总的血清稀释比率总的血清稀释比率=1 1000/10=000/10=1 100 00 倍倍水相稀释比率水相稀释比率=(990+9.

10、=(990+9.3 3)/9.)/9.3 3=107.45 107.45 倍倍电解质排斥效应电解质排斥效应30正常人正常人标本标本Na=140Na=140K=4.0K=4.0稀释稀释 1:1001:100检测检测计算计算Na=140Na=140K=4.0K=4.0结果结果Na=130.3Na=130.3K =3.72K =3.72单位:单位:mmol/Lmmol/LNa=140Na=140 /107.45/107.45100=130.3 mmol/L100=130.3 mmol/LK =4/107.45K =4/107.45100=3.72 mmol/L100=3.72 mmol/L直接离子选

11、择电极法直接离子选择电极法检测检测间接离子选择电极法间接离子选择电极法结果结果电解质排斥效应电解质排斥效应31蛋白质增高脱水巨球蛋白血症多发性骨髓瘤高球蛋白血症肉芽肿病某些胶原病血脂增高甲状腺机能减退肾病综合症糖原过多症糖尿病急性胰腺炎直接法直接法 vs.vs.间接法间接法 ISEISE疾病状态对标本的影响疾病状态对标本的影响32电极与电极膜重复使用电极与电极膜重复使用单一采样针、进样通道单一采样针、进样通道大量蠕动泵、电磁阀大量蠕动泵、电磁阀众多管道、多种液体众多管道、多种液体频繁定标与冲洗保养频繁定标与冲洗保养 有电解质排斥效应有电解质排斥效应 直接法直接法 vs.vs.间接法间接法 IS

12、EISE每个测试独立电极每个测试独立电极一次性一次性TipTip头头无泵,无阀无泵,无阀无管道无管道定标周期长,环保定标周期长,环保没有电解质排斥效应没有电解质排斥效应优异的稳定性,杜绝交叉污染优异的稳定性,杜绝交叉污染杜绝交叉污染杜绝交叉污染维修保养简单维修保养简单无管道腐蚀老化无管道腐蚀老化,节约成本节约成本节约时间,环保,实现零污染节约时间,环保,实现零污染结果准确可靠结果准确可靠干化学(直接法)干化学(直接法)常规法(间接法)常规法(间接法)干化学的优势干化学的优势33减少了蛋白质在电极上的积累使电极保持“清洁”延长使用时间 减少电极保养降低漂移/提高准确性降低定标频率34尿酸尿酸个性

13、化的抗干扰能力个性化的抗干扰能力 MicroSlide多层涂膜技术可以针对不同检测项目使用加以不同成份的薄膜以达到最佳的检测结果某些干片中有清道夫层(如尿酸):去除维他命C 和钙的干扰 某些干片试剂层下有半透膜层(如尿素氮):去除药物干扰半半透透膜膜尿素氮尿素氮溶血溶血血脂血脂胆红素胆红素能有效排除标本中能有效排除标本中对检测结果造成的影响对检测结果造成的影响VITROSVITROS干化学技术优势干化学技术优势优异的抗干扰能力优异的抗干扰能力36内源性干扰物的出现频率内源性干扰物的出现频率标本溶血引起的干扰情况标本溶血引起的干扰情况20018016014012010080604020100 2

14、00 300 400 500 600 700 800 900 1000HEMOLYSATE ADDED(as hemoglobin mg/dL)(FINAL /ORIGINAL)=RESULT100%HITACHI 747T.BILICPKMgALBPHOSUATRIGALTTPALKPGGTAMYL*CL*GLU*CHOL*GLOB*CREAT*D.BILI*BUN*CO2*NA*CA3820018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000HEMOLYSATE ADDED(as hemoglobin mg/dL)

15、(FINAL /ORIGNAL)=RESULT100%*ALKP*AMYL*ECO2*CAL*CK*CL*CREAT*NA*URCA*UREABILIPHOSPROTALBTRIG GLU CHOLMg标本溶血引起的干扰情况标本溶血引起的干扰情况JNJ V75039血脂的干扰情况血脂的干扰情况20018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000LIPEMIA (INTRALIPID Added mg/dL)(FINAL/ORIGNAL)=RESULT100%CX5(7,4)*BILIURCAPHOSGLUPROTM

16、gCHOLALBCACREATALKPAST#ALT*UREA*CK*CL*K*GGT*NA*CO2#LDH 109%AT 750 MG/DL40血脂的干扰情况血脂的干扰情况20018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000LIPEMIA ADDED(as hemoglobin mg/dL)(FINAL/ORIGNAL)=RESULT100%*ALB*ALKP*ALT*AMYL*AST*ECO2*BILI*CA*CK*CL*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*MG*PHOS*PROT*URCA*UREAJN

17、J V750 41胆红素引起的干扰胆红素引起的干扰20018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000BILIRUBIN ADDED (mg/dL)(FINAL/ORIGNAL)=RESULT100%*CREATASTPHOS#LDH#ALKPCAPROTECO2#MgCHOLGLUALT*TRIG*NA*CL*UREA*CK*AMYL*ALB*URCA*FEDUPONT DIMENSION4220018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900

18、 1000BILIRUBIN ADDED (mg/dL)(FINAL/ORIGNAL)=RESULT100%PROT*ALB*ALKP*AMYL*AST*ECO2*CA*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*NA*CL*URCA*UREA*TRIG*CK胆红素引起的干扰胆红素引起的干扰JNJ V750 43 多层涂薄膜干片技术,针对不同检测项目的个性化 优异的抗干扰能力 稳定的定标曲线,可长达6个月 无需上下水和管道 只产生固体废物,经济环保 中英文菜单,操作保养简便 直接法离子选择电极检测离子 独特的胆红素检测干化学技术特点干化学技术特点可靠的结果可靠的结果优质的服务优质的服务轻松的工作轻松的工作高效的管理高效的管理44干化学定义干化学定义干片分类干片分类比色速率法干片免疫速率法干片直接离子选择电极法干片干化学的抗干扰能力干化学的抗干扰能力 小结小结4546

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