1、红细胞检验l红细胞计数红细胞计数 l血红蛋白测定血红蛋白测定 l血细胞比容血细胞比容l 红细胞平均指数计算红细胞平均指数计算l 网织红细胞计数网织红细胞计数l 嗜碱性点彩红细胞计数嗜碱性点彩红细胞计数l 红细胞沉降率测定红细胞沉降率测定3 造血干细胞造血干细胞 早幼红细胞早幼红细胞中幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞晚幼红细胞网织红细胞网织红细胞成熟红细胞成熟红细胞EPO红系祖细胞红系祖细胞原始红细胞原始红细胞成熟红细胞成熟红细胞120天天铁铁 铁代谢铁代谢原卟啉原卟啉 胆色素代谢胆色素代谢珠蛋白珠蛋白 蛋白质代谢蛋白质代谢衰老红细胞衰老红细胞6 检测方法检测方法1.手工显微镜法手工显微镜法:2.血
2、液分析仪法血液分析仪法:7定义:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数后,滴入改良Neubauer计数板,在显微镜下计数一定范围内的红细胞数,经换算即可求得每升血液中的红细胞数。8计数板计数板910红细胞稀释液组成与作用红细胞稀释液组成与作用稀释液稀释液 组成组成 作用作用 备注备注Hayem液液 NaCl、Na2SO4、HgCl2 调节渗透压、增加红细调节渗透压、增加红细 胞悬浮性和防腐作用胞悬浮性和防腐作用高球蛋白血症时,高球蛋白血症时,蛋白质沉淀致红蛋白质沉淀致红细胞凝集细胞凝集枸橼酸钠稀释液枸橼酸钠稀释液 NaCl、枸橼酸钠、甲醛、枸橼酸钠、甲醛 NaCl和枸橼酸钠调和枸橼酸钠调 节渗透压节渗
3、透压,枸橼酸钠,枸橼酸钠 具抗凝,甲醛防腐具抗凝,甲醛防腐 生理盐水生理盐水 生理盐水生理盐水 急诊时用急诊时用1%甲醛生理盐水甲醛生理盐水 甲醛、生理盐水甲醛、生理盐水 急诊时用急诊时用11【操作】【操作】1.1.准备计数板准备计数板2.2.加稀释液:加稀释液:2ml2ml3.3.加血:加血:1010l l混匀混匀4.4.充池充池5.5.计数计数6.6.计算:红细胞数计算:红细胞数=N/5=N/5*2525*1010*200200*10106 6/L/L12 1.分析前质量控制 患者准备、标本采集、存储温度和时间 2.分析中质量控制 计数误差(技术误差和固有误差)、白细胞影响 3.分析后质量
4、控制 结合临床资料131.手工显微镜法(1)血液分析仪的校正 (2)白细胞减少时的对照核实。(3)血小板计数受小红细胞干扰时的校正 2血液分析仪法 方法精确,且操作简便、快速,已广泛应用。14成年:男性(45.5)1012/L 女性(3.55.0)1012/L新生儿:(6.07.0)1012/L151生理性变化生理性变化(1)年龄与性别的年龄与性别的 差异差异(2)精神因素精神因素(3)剧烈体力运动和剧烈体力运动和劳动劳动(4)气压降低气压降低(5)妊娠中、后期妊娠中、后期 16 2病理性变化病理性变化 (2)红细胞增多红细胞增多 1)原发性红细胞增多原发性红细胞增多 2)继发性红细胞增多继发
5、性红细胞增多3)相对性红细胞增多相对性红细胞增多(1)红细胞和血红蛋红细胞和血红蛋白量减少白量减少1)红细胞生成障碍)红细胞生成障碍2)造血原料缺乏造血原料缺乏3)利用障碍红细胞)利用障碍红细胞4)破坏过多和失血破坏过多和失血17 医学决定水平医学决定水平高于高于6.8l012/L,应采取相应的治,应采取相应的治疗措施。疗措施。低于低于3.51012/L为诊断贫血的界为诊断贫血的界限,应继续寻找原因。限,应继续寻找原因。低于低于1.5l012L应考虑输血应考虑输血 指该项目结果如高于指该项目结果如高于或低于某一个值时就应或低于某一个值时就应该采取一定的措施,为该采取一定的措施,为患者处理起提供
6、依据的患者处理起提供依据的作用。作用。血红蛋白血红蛋白(血色素,血色素,Hb Hb 或或 HGB)HGB)组成组成珠蛋白:珠蛋白:4条,种属特异性条,种属特异性亚铁血红素:亚铁血红素:4个,无种属特异性个,无种属特异性19 每个 Hb 分子由 2 条类肽链和 2 条类肽链组成,每条珠蛋白肽链含有 1 个亚铁血红素。120天恶性肿瘤手术切除后或治疗较彻底,血沉可趋于正常,复发或转移时又可增快。简便快速、精密度高,无需单独采血并计算网织红细胞其他参数。1氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法ESR测定在30min或lmin内得到检测结果,大大缩短了临床等候报告的时间。Hayem液 NaCl、Na2SO
7、4、HgCl2 调节渗透压、增加红细(2)骨髓移植后监测骨髓造血恢复:RBC Hct【质量保证】以手工计数法为重点。技术误差:稀释倍数、分光光度计波长、光缝、比色杯光径需校正ESR测定在30min或lmin内得到检测结果,大大缩短了临床等候报告的时间。网织红细胞(reticulocyte,Ret)是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞LFR、MFR、HFR、540 nm 处有一吸收波峰,用分光光度计测定早幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞 在人体不同生长时期,在人体不同生长时期,Hb Hb 种类与比例不同:种类与比例不同:21 定义:血红蛋白测定是测定外周血液中各种血红蛋白的总浓度,用g/L
8、表示221氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法 2其他测定法 十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)法叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法碱羟血红蛋白法沙利(Sahli)酸化血红蛋白法溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法(CTAB)等 23HiCNHiCN转化液:即文齐氏液540 nm 540 nm 处有一吸收波峰,用分光光度计测定处有一吸收波峰,用分光光度计测定换算成每升血液中的血红蛋白浓度,或制备标准曲线供查阅。换算成每升血液中的血红蛋白浓度,或制备标准曲线供查阅。CN-血红蛋白血红蛋白高铁血高铁血红蛋白红蛋白氰化高铁氰化高铁血红蛋白血红蛋白高铁氰高铁氰化钾化钾540nm血红蛋血红蛋白白浓度浓度吸光度
9、吸光度24 血红蛋白浓度计算公式:Hb(g/L)=AHb(g/L)=A?540540HiCNHiCN/44/4464458/100064458/1000251251 =A =A367.7367.7u A A?540540HiCNHiCN:测定管吸光度u 4444:毫摩尔消光系数u 64458/100064458/1000:1mmol/L Hb1mmol/L Hb溶液中所含HbHb克数u 251251为稀释倍数血红蛋白血红蛋白SDS-HbSDS-HbSDSSDS540nm血红蛋血红蛋白浓度白浓度吸光度吸光度 十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)法 方法方法 优点优点 缺点缺点 HiCN操作简便
10、、快速操作简便、快速(5min),结果稳,结果稳定可靠,定可靠,试剂容易保存,便于试剂容易保存,便于质控,为质控,为参考方法参考方法KCN有剧毒有剧毒高白细胞和高球蛋白可致浑浊。高白细胞和高球蛋白可致浑浊。HbCO转化慢转化慢 SDS-Hb 不用剧毒试剂、无公害,操作简不用剧毒试剂、无公害,操作简便,呈色稳定,准确度和精度高便,呈色稳定,准确度和精度高 SDS-Hb消光系数未确定消光系数未确定SDS质量差异性大。质量差异性大。SDS溶血活力大,不适于同时进溶血活力大,不适于同时进行自动化分析行自动化分析 AHD575 同同HiCN法,不用剧毒试剂法,不用剧毒试剂 不便于自动检测、氯化血红素纯度
11、不便于自动检测、氯化血红素纯度达不到标准达不到标准 HiN3 准确度和精密度高,试剂毒性低准确度和精密度高,试剂毒性低HbCO转化慢转化慢 CTAB溶血活力强,但不破坏白细胞,溶血活力强,但不破坏白细胞,适合自动化分析适合自动化分析精密度和准确性低精密度和准确性低2627l 分析前质量控制:同红细胞计数l分析中质量控制技术误差:稀释倍数、分光光度计波长、光缝、比色杯光径需校正HiCN转化液:棕色玻璃瓶HiCN参考液:关键质控物:室内质控l分析后质量控制:同红细胞计数28成年:男性:120120160g160gL L;女性:llOllO150g150gL L。新生儿:170170200g200g
12、L L。老年(70(70岁以上):男性:9494122g122gL L;女性8787112g112gL L。29u 轻度贫血,成年男性HbHb120g/L120g/L,成年女性110g/L110g/L;u 中度贫血90g/L90g/L;u重度贫血60g/L60g/L;u极度贫血30g/L30g/L。31 血细胞比容血细胞比容(HCTHCT),以前称为红细胞压积,是指在一定条件下经离心沉,以前称为红细胞压积,是指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。测定目的测定目的:1.1.诊断贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多诊断贫血、真性红细
13、胞增多症和红细胞增多 2.2.测定血液稀释和血液浓缩的变化测定血液稀释和血液浓缩的变化 3.3.计算计算MCVMCV和和MCHC MCHC 1.常量法常量法(Wintrobe法法)和微量法和微量法(microhematocrit)将抗凝血液标本置于孔径统一的温氏管或毛细玻璃管中,以一定转速将抗凝血液标本置于孔径统一的温氏管或毛细玻璃管中,以一定转速离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。5层:血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细层:血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和氧合红细胞层。胞层和氧合红细胞层。2.血液分析仪法
14、血液分析仪法 由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标后导出,由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标后导出,Hct红细胞计数红细胞平均体积。红细胞计数红细胞平均体积。检测原理检测原理方法方法优点优点 缺点缺点温氏法温氏法无需特殊仪器,广泛无需特殊仪器,广泛应用应用不能完全排除残留血浆,且不能完全排除残留血浆,且单独采血,用血量大单独采血,用血量大微量法微量法快速快速(5min)标本用量标本用量小、结果准确、小、结果准确、重复重复性好。性好。WHO推荐的首推荐的首选参考方法选参考方法有残留血浆,但较温氏法少有残留血浆,但较温氏法少电阻抗法电阻抗法简便快速简便快速(5-15s)白细胞、血小板增多可引白细
15、胞、血小板增多可引起血液导电异常,使结果不起血液导电异常,使结果不可靠可靠血细胞分析仪法血细胞分析仪法简便快速、精密度高,简便快速、精密度高,无需单独采血无需单独采血准确性稍低,结果仅供参考准确性稍低,结果仅供参考34 1.操作规范化操作规范化 避免操作误差,如抗凝量不准,混匀不充分,离心速度不避免操作误差,如抗凝量不准,混匀不充分,离心速度不均等。均等。2注意干扰因素注意干扰因素 假性增高:红细胞形态异常和红细胞增多时应注明,假性增高:红细胞形态异常和红细胞增多时应注明,(细胞变形性减低和数量增多细胞变形性减低和数量增多 血浆残留量增加血浆残留量增加);高网织红细胞或高白细胞等高网织红细胞或
16、高白细胞等 假性降低:体外溶血、自身凝集等。假性降低:体外溶血、自身凝集等。质量保证质量保证参考值参考值男性:男性:0.420.49;女性:女性:0.370.48临床意义临床意义HCT的临床意义与红细胞计数相似。的临床意义与红细胞计数相似。HCT减低是诊断贫血的指标,减低是诊断贫血的指标,HCT的高低与红细胞数量及平的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关均体积、血浆量有关主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞平均体积和血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度等
17、。红细胞平均血红蛋白浓度等。临床意义临床意义 1临床补液量的参考临床补液量的参考 各种原因导致脱水时,各种原因导致脱水时,HCT都会增高,补液时可监测都会增高,补液时可监测HCT,HCT恢复正常表示血容量得到纠正。恢复正常表示血容量得到纠正。2真性红细胞增多症诊断指标真性红细胞增多症诊断指标 当当HCT大于大于0.7,RBC为为(7-10)X1012L,Hb大于大于180gL,即可诊断。,即可诊断。临床意义临床意义 3红细胞平均指数计算的基础数据红细胞平均指数计算的基础数据 红细胞平均值红细胞平均值(MCV、MCHC)可用于贫血的形态学可用于贫血的形态学分类。分类。4血液流变学指标血液流变学指
18、标 HCT增高表明红细胞数量偏高,增高表明红细胞数量偏高,全血黏度增加,严重者表现为高黏滞综合征,全血黏度增加,严重者表现为高黏滞综合征,微循环障碍、组织缺氧。微循环障碍、组织缺氧。HCT与其他血液流变学指标联合应用,可对一些血栓前状与其他血液流变学指标联合应用,可对一些血栓前状态进行监测。态进行监测。40红细胞平均体积红细胞平均体积(mean corpuscular volume,MCV),指红细胞群体中,指红细胞群体中单个红细胞体积的平均值,以飞升单个红细胞体积的平均值,以飞升(f1)为单位;为单位;平均红细胞血红蛋白含量平均红细胞血红蛋白含量(mean corpuscular he-mo
19、globin,MCH),指红细胞群体中单个红细胞血红蛋白含量的平均值,以皮克指红细胞群体中单个红细胞血红蛋白含量的平均值,以皮克(pg)为单为单位;位;平均红细胞血红蛋白浓度平均红细胞血红蛋白浓度(mean corpuscular Hemoglobin concentration,MCHC),指测定红细胞比容时被压紧的红细胞,指测定红细胞比容时被压紧的红细胞血红蛋血红蛋白浓度白浓度(gL)。(1)MCV=1)MCV=每升血液中红细胞体积每升血液中红细胞体积/每升血液中红细胞每升血液中红细胞个数个数=Hct/RB(f1)=Hct/RB(f1)(2)MCH=(2)MCH=每升血液中血红蛋白含量每升
20、血液中血红蛋白含量/每升血液中红细每升血液中红细胞个数胞个数=Hb/RBC(pg)=Hb/RBC(pg)(3)MCHC=(3)MCHC=每升血液中血红蛋白含量每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细每升血液中红细胞比容胞比容=Hb/Hct=Hb/Hct41 检测原理检测原理 1手工法手工法 同时计数红细胞,同时计数红细胞,测定血红蛋白和血细胞比容,测定血红蛋白和血细胞比容,计算计算出红细胞出红细胞3个平均指数。个平均指数。例:例:RBC为为3.50X1012L,Hct为为0.36,Hb为为120g/L Hct 0.36MCV(fl)103(fl)RBC 3.50X1012L Hb HbMCH(p
21、g),),MCHC(gL)RBC Hct检测原理检测原理2血液分析仪血液分析仪 能直接导出能直接导出MCV的值,再结的值,再结合仪器直接测定的合仪器直接测定的RBC和和Hb,计算出,计算出MCH和和MCHC MCHHbRBC,MCHCHb(RBCMCV)。44参考值参考值临床意义临床意义贫血分类贫血分类 MCVMCHMCHC 贫血贫血 正细胞贫血正细胞贫血 正常正常正常正常正常正常再生障碍性贫血、急再生障碍性贫血、急性失血性贫血、某些性失血性贫血、某些溶血性贫血溶血性贫血大细胞贫血大细胞贫血 增高增高增高增高正常正常 各种造血物质缺乏或各种造血物质缺乏或利用不良的贫血利用不良的贫血单纯小细胞贫
22、血单纯小细胞贫血 减低减低减低减低正常正常慢性感染、慢性肝肾慢性感染、慢性肝肾疾病性贫血疾病性贫血小细胞低色素贫小细胞低色素贫血血 减低减低减低减低减低减低缺铁性贫血及铁利用缺铁性贫血及铁利用不良贫血,慢性失血不良贫血,慢性失血性贫血性贫血作为贫血的红细胞形态学分类作为贫血的红细胞形态学分类47网织红细胞网织红细胞(reticulocyte(reticulocyte,Ret)Ret)是晚幼红细胞脱核后到完全是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞成熟红细胞间的过渡细胞胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸(RNA)(RNA),经煌焦油蓝等活体染色后,经煌焦油蓝等活体染色
23、后,嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒,连缀成线,线连接成网。嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒,连缀成线,线连接成网。属于尚未完全成熟的红细胞属于尚未完全成熟的红细胞(当嗜碱性物质消耗殆尽后才被视为当嗜碱性物质消耗殆尽后才被视为成熟红细胞成熟红细胞),一般为,一般为8 89.5m9.5m。4849 检测原理检测原理 1.普通光学显微镜法普通光学显微镜法 活体染色(新亚甲蓝或煌焦油蓝活体染色(新亚甲蓝或煌焦油蓝)的碱性着色基团的碱性着色基团 网织红细胞网织红细胞RNA的磷酸基的磷酸基(带负电荷带负电荷)RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩,胶体间的负电荷减少而发生凝缩,蓝色的点状、线状或网状结构蓝色的点状、线状
24、或网状结构,显微镜下计数显微镜下计数1000个红细胞中所占的网织红细胞数,以百分比或分数数个红细胞中所占的网织红细胞数,以百分比或分数数表示。表示。检测原理检测原理 流式细胞仪法流式细胞仪法2仪器法仪器法 网织红细胞计数仪网织红细胞计数仪 血液分析仪法。血液分析仪法。荧光染料与网织红细胞中荧光染料与网织红细胞中RNA结合,结合,发出特定颜色的荧光进行发出特定颜色的荧光进行RNA定量定量精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数(Ret)。将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞 比率比率(HFR、MFR、LFR)
25、并计算网织红细胞其他参数。并计算网织红细胞其他参数。血液分析仪法血液分析仪法 提供与网织红细胞相关的提供与网织红细胞相关的多个多个参数,参数,网织红细胞绝对值、网织红细胞绝对值、网织红细胞百分比、网织红细胞百分比、网织红细胞平均体积、网织红细胞平均体积、网织红细胞血红蛋白分布宽度、网织红细胞血红蛋白分布宽度、网织红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞平均血红蛋白浓度、网织红细胞平均血红蛋白浓度、LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数。网织红细胞成熟指数。53【质量保证】【质量保证】以手工计数法为重点。以手工计数法为重点。1染料选择染料选择【质量保证】【质量保证】2正确辨认网
26、织红细胞正确辨认网织红细胞 外周血中网织红细胞主要为外周血中网织红细胞主要为型,凡含有型,凡含有2个以上个以上网织颗粒的红细胞均应计为网织红细胞。网织颗粒的红细胞均应计为网织红细胞。3网织红细胞计数方法网织红细胞计数方法 (1)Miller窥盘:窥盘:(2)显微成像系统:计算机和细胞形态分析软件,显微成像系统:计算机和细胞形态分析软件,HFR:粗颗粒堆积成网状。:粗颗粒堆积成网状。MFR:粗颗粒在:粗颗粒在10个以上,或细小颗粒超过个以上,或细小颗粒超过15个。个。LFR:细胞内含:细胞内含15个以下细小颗粒个以下细小颗粒 网织红细胞百分数:网织红细胞百分数:成人和儿童成人和儿童:0.0050
27、.025 新生儿新生儿:0.020.06网织红细胞绝对数:网织红细胞绝对数:成人和儿童成人和儿童:(2484)X109L参考值参考值临床意义临床意义1评价骨髓增生能力,判断贫血类型评价骨髓增生能力,判断贫血类型。(1)网织红细胞增多:表示骨髓造血功能旺盛,网织红细胞增多:表示骨髓造血功能旺盛,各种增生性贫血各种增生性贫血(2)网织红细胞减少:常见于再生障碍性贫血网织红细胞减少:常见于再生障碍性贫血(3)鉴别贫血:鉴别贫血:临床意义临床意义2评价疗效评价疗效(1)观察贫血疗效观察贫血疗效:贫血随访贫血随访缺铁贫或巨幼贫有效治疗后,缺铁贫或巨幼贫有效治疗后,23d后后Ret开始上升,开始上升,71
28、0d达到最高峰达到最高峰(约约10),2周后渐降至正常。周后渐降至正常。(2)骨髓移植后监测骨髓造血恢复:骨髓移植后监测骨髓造血恢复:骨髓移植后第骨髓移植后第21天,如天,如Ret大于大于15X109L,常表示无,常表示无移植并发症;移植并发症;若骨髓开始恢复造血功能,首先若骨髓开始恢复造血功能,首先HFR和和MFR上升,其次上升,其次为网织红细胞计数值上升。为网织红细胞计数值上升。临床意义临床意义3放疗和化疗的监测放疗和化疗的监测 指导临床适时调整治疗方案,避免造成严重的骨指导临床适时调整治疗方案,避免造成严重的骨髓抑制。髓抑制。机体接受放、化疗后,如出现骨髓抑制,早期机体接受放、化疗后,如
29、出现骨髓抑制,早期HFR和和MFR降低,而后网织红细胞数值降低;停止放、降低,而后网织红细胞数值降低;停止放、化疗,骨髓功能恢复后,这些指标依次上升。化疗,骨髓功能恢复后,这些指标依次上升。临床意义临床意义65定义定义:嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞(basophilicstipplingcell)是不完全成是不完全成熟的红细胞胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒,经碱熟的红细胞胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒,经碱性染料性染料(如美蓝如美蓝)染色后,细胞内可见到深染的颗粒;若以染色后,细胞内可见到深染的颗粒;若以瑞氏染色,则在粉红色的胞质中见到瑞氏染色,则在粉红色的胞质中见到大小,形状不一
30、大小,形状不一紫紫红色或蓝黑色颗粒,故名嗜碱性点彩红细胞。红色或蓝黑色颗粒,故名嗜碱性点彩红细胞。检测原理检测原理 嗜碱性嗜碱性点彩红细胞计数点彩红细胞计数(basiphilic stippling count),用碱性美蓝液作血涂片染色,红细胞呈,用碱性美蓝液作血涂片染色,红细胞呈淡蓝绿色,颗粒显深蓝色;用瑞氏染色,颗粒呈淡蓝绿色,颗粒显深蓝色;用瑞氏染色,颗粒呈蓝黑色。蓝黑色。通常在油镜下计数通常在油镜下计数1 000个红细胞中的嗜碱性点彩红细胞数,换算成个红细胞中的嗜碱性点彩红细胞数,换算成百分率。百分率。方法学评价方法学评价 嗜碱性点彩红细胞计数操作目前仍用显微镜血涂片染色的传统嗜碱性
31、点彩红细胞计数操作目前仍用显微镜血涂片染色的传统检查法。必要时可扩大红细胞计数的数量。例如,先计数检查法。必要时可扩大红细胞计数的数量。例如,先计数50个视个视野中嗜碱性点彩红细胞数,同时计数野中嗜碱性点彩红细胞数,同时计数5个视野内红细胞总数,再按个视野内红细胞总数,再按下式求出点彩红细胞的百分比。下式求出点彩红细胞的百分比。50个视野中嗜碱性点彩红细胞数个视野中嗜碱性点彩红细胞数嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞 5个视野内红细胞总数个视野内红细胞总数10质量控制质量控制 计数时必须选择红细胞分布均匀的区域计数。计数时必须选择红细胞分布均匀的区域计数。参考值参考值 0.03%临床意义临床意义
32、 嗜碱性嗜碱性点彩红细胞计数增高主要见于:点彩红细胞计数增高主要见于:1中毒患者中毒患者 如铅、汞、银、铋等如铅、汞、银、铋等金属中毒金属中毒及硝及硝 基苯、苯胺等中毒时,点彩红细胞显著增高。基苯、苯胺等中毒时,点彩红细胞显著增高。2各类贫血各类贫血 如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、恶性贫血、恶性肿瘤等,此时网织红细恶性贫血、恶性肿瘤等,此时网织红细胞增加胞增加 常表示造血旺盛。常表示造血旺盛。红细胞沉降率红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)简称血沉,指在规定简称血沉,指在规定条件下,离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速
33、率。条件下,离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。血沉过程一般血沉过程一般分为分为3期:期:缗钱状红细胞形成期,一般要经过数分钟至缗钱状红细胞形成期,一般要经过数分钟至10min。快速沉降期,形成缗钱快速沉降期,形成缗钱状红细胞以等状红细胞以等速下降,约速下降,约40min40min。细胞堆积期,又称缓慢沉积期或挤紧期,此时红细胞细胞堆积期,又称缓慢沉积期或挤紧期,此时红细胞 堆积在试管底部。堆积在试管底部。七、红细胞沉降率测定七、红细胞沉降率测定 检测原理检测原理 1魏氏法魏氏法(Westergren法法)将离体抗凝血液置于特制刻度测定管内,垂直立于室将离体抗凝血液置于特制刻度测定管内,垂直
34、立于室温中,温中,记录记录1h时红细胞层下沉的距离时红细胞层下沉的距离(上层血浆的高度上层血浆的高度),用毫米,用毫米(mm)数值报告。数值报告。检测原理检测原理 2 2血沉仪法血沉仪法 血液经抗凝静置后,红细胞下降,红细胞与血浆血液经抗凝静置后,红细胞下降,红细胞与血浆分离,分离,其界面随时间而下移,血沉仪用发光二极管和光其界面随时间而下移,血沉仪用发光二极管和光电管检测此界面的透光度改变,得到血沉值并显示红电管检测此界面的透光度改变,得到血沉值并显示红细胞沉降高度细胞沉降高度H H与对应时间与对应时间t t相关的相关的H Ht t曲线。曲线。741 1手工法手工法 魏氏法:魏氏法:为传统方
35、法,为国内规范方法为传统方法,为国内规范方法.EDTA或枸橼酸钠抗凝血液标本充分混合后,吸入魏氏血或枸橼酸钠抗凝血液标本充分混合后,吸入魏氏血沉管沉管200mm刻度处,将血沉管垂直室温放置至少刻度处,将血沉管垂直室温放置至少60min,应避,应避免振动、风吹、阳光直射,然后读取柱中红细胞沉淀上透明血免振动、风吹、阳光直射,然后读取柱中红细胞沉淀上透明血浆层约浆层约lmm处结果。处结果。ICSH方法方法:参考方法参考方法,用于验证其他方法的可靠性。用于验证其他方法的可靠性。2仪器法仪器法血沉仪可动态记录整个血沉过程的变化,描绘出红细胞沉降的血沉仪可动态记录整个血沉过程的变化,描绘出红细胞沉降的曲
36、线,曲线,ESR测定在测定在30min或或lmin内得到检测结果,大大缩短内得到检测结果,大大缩短了临床等候报告的时间。了临床等候报告的时间。79 质量保证质量保证 红细胞数量、表面积、厚度、直径、血红蛋白量和血浆中各种红细胞数量、表面积、厚度、直径、血红蛋白量和血浆中各种蛋白比例。蛋白比例。影响红细胞缗钱状形成的主要因素有:影响红细胞缗钱状形成的主要因素有:1.1.血浆中各种蛋白的比例血浆中各种蛋白的比例,与总蛋白浓度无关。清蛋白带负电荷,与总蛋白浓度无关。清蛋白带负电荷,球蛋白与纤维蛋白原带正电荷,红细胞因唾液酸而带负电荷,彼此排球蛋白与纤维蛋白原带正电荷,红细胞因唾液酸而带负电荷,彼此排
37、斥。斥。促缗钱状聚集的物质:促缗钱状聚集的物质:纤维蛋白原纤维蛋白原球蛋白球蛋白球蛋白、胆固醇、甘油三酯等;球蛋白、胆固醇、甘油三酯等;清蛋白及卵磷脂则抑制红细胞缗钱状的形成。清蛋白及卵磷脂则抑制红细胞缗钱状的形成。影响因素影响因素 2 2红细胞数量和形状红细胞数量和形状 红细胞数量:红细胞数量:一般情况下,红细胞沉降率和血浆逆阻力保持一定一般情况下,红细胞沉降率和血浆逆阻力保持一定的平衡状态,的平衡状态,如红细胞数量减少,其总面积减少,所承受的血浆逆阻力也减少,如红细胞数量减少,其总面积减少,所承受的血浆逆阻力也减少,因此血沉加快;因此血沉加快;但如红细胞数量太少,则影响红细胞缗钱状形成,血
38、沉也但如红细胞数量太少,则影响红细胞缗钱状形成,血沉也减慢;反之,红细胞增多时,血沉减慢。减慢;反之,红细胞增多时,血沉减慢。红细胞直径和形状红细胞直径和形状:直径愈大血沉愈快,球形红细胞、镰形红细胞不:直径愈大血沉愈快,球形红细胞、镰形红细胞不易聚集,因而血沉减慢。易聚集,因而血沉减慢。影响因素影响因素3 3血沉管与血沉架血沉管与血沉架 血沉管与血沉架规格必须符合标准。血沉管与血沉架规格必须符合标准。血沉管置血沉架上应完全垂直,倾斜时,会加速沉降。血沉管置血沉架上应完全垂直,倾斜时,会加速沉降。4.4.血标本血标本 避免脂肪血;避免脂肪血;抗凝剂浓度增加使血沉减慢,每周配制抗凝剂浓度增加使血
39、沉减慢,每周配制1 1次,置冰箱次,置冰箱血与抗凝剂比例要准确。血与抗凝剂比例要准确。抽血应在抽血应在30s30s内完成,不得混入消毒剂,避免形成凝块。内完成,不得混入消毒剂,避免形成凝块。影响因素影响因素5温度温度 1825C的室温下测定。室温过高时血沉加快,可以的室温下测定。室温过高时血沉加快,可以按温度系数校正。按温度系数校正。6其他其他 注射器、试管、血沉管要干燥洁净,以避免溶血。注射器、试管、血沉管要干燥洁净,以避免溶血。7及时测定及时测定 采血后应尽快进行测定,室温下,标本置放时间采血后应尽快进行测定,室温下,标本置放时间不应超过不应超过4h,置,置4冰箱时枸橼酸钠抗凝血可冰箱时枸
40、橼酸钠抗凝血可6h,EDTA抗凝血抗凝血可可24h。影响因素影响因素 质量保证质量保证 参考值参考值 5050岁:男性岁:男性 15mm15mmh h,女性,女性5050岁:男性岁:男性 20mm20mmh h,女性,女性8585岁:男性岁:男性 30mm30mmh h,女性女性 42mm42mmh h。儿童儿童 10mm10mmh h。1 1血沉增快血沉增快 (1)(1)生理性:生理性:女性高于男性。妇女月经期由于子宫内膜破损及出血,血沉略有增快;女性高于男性。妇女月经期由于子宫内膜破损及出血,血沉略有增快;妊娠妊娠3 3个月以上可因生理性贫血及血浆纤维蛋白原增加使血沉增快;个月以上可因生理
41、性贫血及血浆纤维蛋白原增加使血沉增快;老年人,特别是老年人,特别是7070岁以上的高龄者,多因纤维蛋白原增高而血沉增快岁以上的高龄者,多因纤维蛋白原增高而血沉增快。临床意义临床意义(2)(2)病理性病理性 1)1)各种炎症各种炎症:感染是血沉加快最常见的原因。:感染是血沉加快最常见的原因。急性细菌性炎症时,由于血中急性时相反应蛋白增多,包括急性细菌性炎症时,由于血中急性时相反应蛋白增多,包括11胰蛋胰蛋白酶、白酶、22巨球蛋白、巨球蛋白、C C反应蛋白、转铁蛋白、纤维蛋白原等。在炎症发反应蛋白、转铁蛋白、纤维蛋白原等。在炎症发生后生后2 23d3d可出现血沉增快;可出现血沉增快;慢性炎症,如结
42、核病、结缔组织炎症、风湿热等,于活动期常见慢性炎症,如结核病、结缔组织炎症、风湿热等,于活动期常见血沉增快,病情好转时血沉减慢,非活动期血沉可正常。血沉增快,病情好转时血沉减慢,非活动期血沉可正常。临床意义临床意义 2)2)组织损伤及坏死:组织损伤及坏死:范围较大的组织损伤或手术创伤常致血沉增快,范围较大的组织损伤或手术创伤常致血沉增快,若无合并症,一般若无合并症,一般2 23 3周内恢复正常;周内恢复正常;心肌梗死时,于发病后心肌梗死时,于发病后3 34d4d可见血沉增快可见血沉增快(急性时相急性时相反应蛋白反应蛋白),并持续,并持续1 1 3 3周,而心绞痛时血沉多正常。周,而心绞痛时血沉
43、多正常。3)3)恶性肿瘤:恶性肿瘤:血沉可作为恶性肿瘤的普查筛选的辅助指标,血沉可作为恶性肿瘤的普查筛选的辅助指标,通常迅速增长的恶性肿瘤血沉均增快,良性肿瘤血沉通常迅速增长的恶性肿瘤血沉均增快,良性肿瘤血沉多正常。多正常。恶性肿瘤手术切除后或治疗较彻底,血沉可趋于正常,恶性肿瘤手术切除后或治疗较彻底,血沉可趋于正常,复发或转移时又可增快。复发或转移时又可增快。4)4)高球蛋白血症:高球蛋白血症:多种因素导致的免疫球蛋白增高可见血沉增快,多种因素导致的免疫球蛋白增高可见血沉增快,如系统性红斑狼疮、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶如系统性红斑狼疮、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤、亚急性感染
44、性心内膜炎、肝硬化、慢性肾炎性淋巴瘤、亚急性感染性心内膜炎、肝硬化、慢性肾炎等。等。高粘滞性综合征时,血沉可不增快甚至减慢。高粘滞性综合征时,血沉可不增快甚至减慢。5)贫血贫血:贫血患者血红蛋白低于:贫血患者血红蛋白低于90gL时,血沉可时,血沉可轻度增快,并随贫血加重而增快。轻度增快,并随贫血加重而增快。6)高胆固醇血症高胆固醇血症:如动脉粥样硬化、糖尿病、肾病综合:如动脉粥样硬化、糖尿病、肾病综合征、粘液性水肿、原发性家族性高胆固醇血症等,血沉常征、粘液性水肿、原发性家族性高胆固醇血症等,血沉常常增快。常增快。2血沉减慢血沉减慢 一般临床意义较小,主要见于真红、低纤维蛋一般临床意义较小,主要见于真红、低纤维蛋白原血症、充血性心力衰竭、红细胞形态异常白原血症、充血性心力衰竭、红细胞形态异常(如异如异形红细胞、球形红细胞、镰形红细胞形红细胞、球形红细胞、镰形红细胞)。