1、新生儿遗传性耳聋基因筛查项目新生儿遗传性耳聋基因筛查项目Contents目录目录项目背景及意义项目背景及意义实验流程及质控实验流程及质控血片采集、递送与保存血片采集、递送与保存耳聋遗传咨询耳聋遗传咨询临床案例临床案例C o n t e n t s 目录项目背景及意义实验流程及质控血片采集、递目目 录录项目背景及意义项目背景及意义part 1Contents目 录项目背景及意义p a r t 1 C o n t e n t s 我国残疾人群：我国残疾人群：8502万万 听力残疾人群：听力残疾人群：2054万万数据来自：数据来自：关于使用关于使用2010年末全国残疾人总数及各类、不同残疾等级人数的
2、通知年末全国残疾人总数及各类、不同残疾等级人数的通知，2010年末各类残疾人比例年末各类残疾人比例听力残疾比例高听力残疾比例高4 我国残疾人群：8 5 0 2 万 听力残疾人群：2 01.中国出生缺陷防治报告（2012）2.中国听力论坛（2013）80%的聋儿出生在听力正常的家庭的聋儿出生在听力正常的家庭每年新增每年新增3.5万万先天性聋儿先天性聋儿【1】每年新增每年新增3-4万万迟发性聋儿迟发性聋儿【2】我国耳聋出生缺陷现状我国耳聋出生缺陷现状5 8 0%的聋儿出生在听力正常的家庭每年新增3.5 万先天耳耳 聋聋Journal of Audiology and Speech Patholog
3、y.2011,19(1):73-77遗传是耳聋最大病因遗传是耳聋最大病因6耳 聋非综合征型（7 0%）遗传因素（约6 0%流调单位：流调单位：301医院聋病分子诊断中心医院聋病分子诊断中心流调范围：全国流调范围：全国 28 个省市个省市样品规模：样品规模：10880 例例正常人群中携带耳聋基因突变比正常人群中携带耳聋基因突变比例约为例约为基因基因病征病征正常人携带比例正常人携带比例聋人中携带比例聋人中携带比例GJB2先天聋3%21%SLC26A4迟发聋2%14.5%12S rRNA药物聋0.3%4.4%GJB3高频聋我国本土上克隆的第一个遗传疾病基因四大致聋基因四大致聋基因7流调单位：3 0
4、1 医院聋病分子诊断中心流调范围：全国 2 8 GJB2基因：基因：先天性重度以上感音神经性耳聋；当先天性重度以上感音神经性耳聋；当GJB2基因发生纯合突变时，患者出生即表基因发生纯合突变时，患者出生即表现出耳聋症状；进行人工耳蜗移植效果良好现出耳聋症状；进行人工耳蜗移植效果良好SLC26A4基因（基因（PDS基因）：基因）：大前庭水管综合征（大前庭水管综合征（EVAS），当患者患感冒、头部受打击时，听力急剧下降；），当患者患感冒、头部受打击时，听力急剧下降；避免颅压增大，使用改善微循环药物和神经营养药治疗避免颅压增大，使用改善微循环药物和神经营养药治疗线粒体基因突变：线粒体基因突变：氨基糖甙
5、类药物敏感性耳聋；患者使用氨基糖甙类药物会导致重度耳聋的发生；氨基糖甙类药物敏感性耳聋；患者使用氨基糖甙类药物会导致重度耳聋的发生；母系家族成员应杜绝使用氨基糖甙类抗生素药物母系家族成员应杜绝使用氨基糖甙类抗生素药物GJB3基因：基因：后天高频感音神经性耳聋；表现为后天突发性耳聋；进行人工耳蜗移植效果良好后天高频感音神经性耳聋；表现为后天突发性耳聋；进行人工耳蜗移植效果良好基因型与致病关系基因型与致病关系8G J B 2 基因：基因型与致病关系8新生儿筛查耳聋基因意义新生儿筛查耳聋基因意义及早确诊先天性耳聋，避免由聋致哑及早确诊先天性耳聋，避免由聋致哑及早发现迟发性耳聋，通过生活指导，避免或及
6、早发现迟发性耳聋，通过生活指导，避免或延缓耳聋发生延缓耳聋发生及早发现药物性耳聋，终身禁用耳毒性药物，及早发现药物性耳聋，终身禁用耳毒性药物，并预防家族成员发生药物性耳聋并预防家族成员发生药物性耳聋遗传咨询遗传咨询9新生儿筛查耳聋基因意义及早确诊先天性耳聋，避免由聋致哑9先天性聋儿先天性聋儿及早安装助听器或人工耳蜗植入及早安装助听器或人工耳蜗植入避免孩子由聋致哑避免孩子由聋致哑迟发性聋儿迟发性聋儿通过生活指导通过生活指导避免或延缓耳聋发生避免或延缓耳聋发生终身禁用耳毒性药物终身禁用耳毒性药物并预防家族成员发生药物性耳聋并预防家族成员发生药物性耳聋药物性聋儿药物性聋儿10高危新生儿的干预措施高危
7、新生儿的干预措施先天性聋儿及早安装助听器或人工耳蜗植入迟发性聋儿通过生活指导目前，新筛项目已经在北京、成都、长治、南通、固始、郑州等地方开展目前，新筛项目已经在北京、成都、长治、南通、固始、郑州等地方开展开展地区开展地区2014.1南通新筛项目培训南通新筛项目培训2014.8河南固始新筛项目培训河南固始新筛项目培训2013.6长治新筛项目长治新筛项目2012.4北京新筛项目北京新筛项目2012.10成都新筛项目成都新筛项目2014.10郑州新筛项目郑州新筛项目全国新筛项目开展情况全国新筛项目开展情况11目前，新筛项目已经在北京、成都、长治、南通、固始、郑州等地方全国受益新生儿达到全国受益新生儿
8、达到100万例！万例！全国新筛项目开展情况全国新筛项目开展情况12 全国受益新生儿达到1 0 0 万例！全国新筛项目开展情况1目目 录录实验流程及质控实验流程及质控part 2Contents目 录实验流程及质控p a r t 2 C o n t e n t s晶芯晶芯九项遗传性耳聋基因检测试剂盒九项遗传性耳聋基因检测试剂盒四个基因的四个基因的9个突变位点：个突变位点：GJB2 35 del G、176 del 16、235 del C和299 del AT；SLC26A4 IVS7-2 AG、2168 AG；线粒体12s rRNA 1555 AG、1494 CT，GJB3 538 CT针对中
9、国人设计，指标覆盖了国人中98%GJB2,50%PDS,90%药物性耳聋患者。快 速：8小时灵 敏：2-20 ng/L 高通量：同时检9个位点准 确：与测序验证相符率100%芯片杂交仪芯片杂交仪芯片洗干仪芯片洗干仪芯片扫描仪芯片扫描仪14晶芯 九项遗传性耳聋基因检测试剂盒四个基因的9 个突变位点：快检测流程检测流程15血片接收及血斑提取血片接收及血斑提取2.5 h核酸扩增核酸扩增3.5 h芯片杂交及清洗芯片杂交及清洗 2h芯片扫描及结果判读芯片扫描及结果判读5 min检测流程1 5 血片接收及血斑提取2.5 h 核酸扩增3.5 h 芯芯片芯片及质控及质控IVS7-2MIVS7-2MIVS7-2
10、M4321QC：表面化学质控探针 BC：空白对照探针PC：杂交阳性对照探针 MC：磁珠质控探针IC：基因扩增内对照探针 NC：阴性对照探针野生型探针突变型探针16芯片及质控I V S 7-2 MI V S 7-2 MI V S 7-2 M4 3 2 1质量控制质量控制17通过芯片内质控与室内、室间质量控制，完全能够满足临床对准确性、一致性的需求！质量控制1 7 通过芯片内质控与室内、室间质量控制，完全能够满足检测结果展示检测结果展示18先天性聋先天性聋235 纯合纯合1555均质均质299 杂合杂合携带者携带者药物聋敏感药物聋敏感2168/IVS7-2复合杂合复合杂合先天性聋先天性聋检测结果展
11、示1 8 先天性聋2 3 5 纯合1 5 5 5 均质2 9 9 杂合结果发放结果发放19结果上传结果上传短信发送短信发送上网查结果上网查结果医院就诊医院就诊报告打印报告打印医院就诊医院就诊电话回访电话回访北京北京郑州郑州结果发放1 9 结果上传短信发送上网查结果医院就诊报告打印医院就目目 录录血片采集、递送与血片采集、递送与保存保存Part 3Contents目 录血片采集、递送与P a r t 3 C o n t e n t s采血所需物品采血所需物品21物品准备物品准备采血针采血针滤纸片滤纸片知情同知情同意书意书血片架血片架打印纸打印纸自封袋自封袋同代谢病筛查采集血片要求！采血所需物品2
12、 1 物品准备采血针滤纸片知情同意书血片架打印纸自采血流程采血流程22分娩机构信息登记采血晾干标本血片递送市妇幼保健院签署知情同意书采血流程2 2 分娩机构信息登记采血晾干标本血片递送市妇幼保健院采血实施采血实施23（一）签署知情同意书 采血前将本次筛查的项目、条件、方式、费用等情况如实告知新生儿的监护人、遵循知情选择的原则。采血实施2 3（一）签署知情同意书采血实施采血实施24（二）信息登记 同代谢性疾病筛查：认真填写采血卡片，做到字迹清楚、登记完整。并注意在填写过程中不要污染滤纸片。卡片内容包括：公/自费、采血单位、母亲姓名、住院号、新生儿性别、出生日期、采血日期、居住地址、联系 和采血人
13、等信息。采血实施2 4（二）信息登记采血实施采血实施25（三）规范采血采血时间：与代谢性疾病同时采血方式：同代谢性疾病合格要求：不少于2个血斑 直径大于8mm 血斑自然渗透，滤纸正反面血斑一致血斑无污染采血实施2 5（三）规范采血不合格血片展示不合格血片展示26酒精污染的血斑，出现渗血环组织液污染样本过少，渗透不良样本过多不合格血片展示2 6 酒精污染的血斑，出现渗血环组织液污染样本过采血实施采血实施27（四）血片递送与保存1、采血单位 采血完成后制成干血片，完成初级质控，集中放入自封袋，封好封口，以防霉变，放入专用运输包，与代谢性疾病筛查血片同时送区县妇幼，并做好交接登记。2、市妇幼保健院
14、完成血片二级质控后，干燥密封保存，放入专用运输包，递送到筛查单位，并做好交接登记。3、筛查单位 完成交接，对血片进行三级质控后，进行检测并长期保存血片（2-8）。因特殊情况未按期采血或不合格标本退回需要重新采血者，应当及时预约或追踪采集血片。采血实施2 7（四）血片递送与保存目目 录录耳聋遗传咨询耳聋遗传咨询part 4Contents目 录耳聋遗传咨询p a r t 4 C o n t e n t s耳聋遗传咨询意义耳聋遗传咨询意义29减轻患者身体和精神上的痛苦；减轻患者及其亲属的心理压力；帮助他们正确对待遗传性耳聋、了解发病概率；采取正确的预防、治疗措施，从而最终降低人群遗传性耳聋的发病率
15、；意义：耳聋遗传咨询意义2 9减轻患者身体和精神上的痛苦；意义：耳聋遗传咨询对象耳聋遗传咨询对象301.已生育聋儿的正常夫妇询问再发风险者；2.有耳聋家族史的正常夫妇，担心后代会遗传此病者；3.未婚或已婚的男女双方均为聋哑人或其中一人为聋哑人，需要给予婚前婚配指导或婚后生育指导者；4.新生儿耳聋患者，指导用药及生活指导；此外，由于耳聋基因在正常人群中也有一定的携带率，因此有婚配或生育要求但无耳聋家族遗传史的正常人也在耳聋遗传咨询服务对象范围内。耳聋遗传咨询对象3 0 1.已生育聋儿的正常夫妇询问再发风险者遗传咨询工作流程遗传咨询工作流程 u 第一步：样本芯片检测结果报告发送第一步：样本芯片检测
16、结果报告发送u邮寄或者短信发送邮寄或者短信发送u 第二步：整理需要第二步：整理需要 追访的名单追访的名单u新生儿耳聋基因实验室检测及报告发送完成后，整理并打印新生儿耳聋基因实验室检测及报告发送完成后，整理并打印GJB2、SLC26A4、12S rRNA、GJB3基因突变携带者列表清单基因突变携带者列表清单u 第三步：第三步：追访并记录追访结果追访并记录追访结果u确认新生儿家长收到报告并告知查看筛查结果确认新生儿家长收到报告并告知查看筛查结果u对于需要和希望进行门诊复诊的新生儿及家长，追访中告知其来诊的预约方对于需要和希望进行门诊复诊的新生儿及家长，追访中告知其来诊的预约方式及就诊时间、流程等式
17、及就诊时间、流程等u初次追访失败的，记录追访时间及失败原因，需进行随后的第二次初次追访失败的，记录追访时间及失败原因，需进行随后的第二次 追访，若追访，若第三次追访失败，送约定部门第三次追访失败，送约定部门31遗传咨询工作流程 第一步：样本芯片检测结果报告发送3 1遗传咨询工作流程遗传咨询工作流程 u 第四步：遗传咨询工作u身份确认：筛查编号、母亲姓名、出生医院u听力检测是否通过？是否有耳聋家族史？u听力未通过者来门诊复诊u听力通过者定期（每3月-半年）测查听力至3岁或到门诊进行听力复诊和遗传咨询u绘制药物相关耳聋基因携带者母系家族谱，记录家族中已有听障者的发病年龄、原因、听力状况，并通知其领
18、取致聋药物卡片等32遗传咨询工作流程 第四步：遗传咨询工作3 2遗传咨询工作流程遗传咨询工作流程 u 第五步：门诊复诊新生儿遗传咨询工作 登记复诊新生儿耳聋基因筛查结果、编号、听力筛查是否通过，询问有无听力障碍家族史 有家族史者绘制家系图；绘制药物相关耳聋基因携带者母系家系图，记录家族中已有听障者的发病年龄、原因、听力状况，并通知其领取致聋药物卡片等 OAE听力测试 听力检测结果及基因筛查结果联合分析定期复查听力、诊断性听力学检查或分子诊断 分子诊断程序：GJB2、SLC26A4全基因测序检测33遗传咨询工作流程 第五步：门诊复诊新生儿遗传咨询工作3 3遗传咨询工作流程遗传咨询工作流程小结小结
19、 u 门诊复诊新生儿遗传咨询工作结合听筛结果提供听力及遗传综合资讯听筛通过听筛未通过基筛通过基筛未通过基筛通过基筛未通过随诊程序分子诊断程序听力/分子诊断程序听力/分子诊断程序提供听力及遗传服务及康复指导，并长期随访观察34遗传咨询工作流程小结 门诊复诊新生儿遗传咨询工作结合听目目 录录临床案例临床案例part 5Contents目 录临床案例p a r t 5 C o n t e n t s耳聋检测应用案例耳聋检测应用案例1野生型（正常）235delC纯合（耳聋）235delC纯合（耳聋）235delC杂合（正常）235delC杂合（耳聋）爷爷奶奶母亲父亲姑姑未知（过世）在郑州大学第三附属医
20、院听力筛查中心，孩子进行听力筛查但未通过，抽血检查耳聋基因，结果孩子是235纯合突变，父亲是235纯合突变，母亲是235杂合突变，爷爷和姑姑分别是235杂合突变和野生型，奶奶不在了，因父母均是聋哑人，对母亲进行GJB2基因测序，查出是257CG杂合突变。结果展示结果展示GJB2 235 杂合GJB2 235 纯合36耳聋检测应用案例1 野生型2 3 5 d e l C 纯合（耳聋）2 3 5 d e耳聋检测应用案例耳聋检测应用案例2IVS7-2纯合（耳聋）IVS7-2纯合（耳聋）IVS7-2杂合（正常）爸爸妈妈女儿儿子IVS7-2杂合（正常）山东聊城岳姓家庭，大女儿5岁半，先天性聋，小儿子2岁半，出生时听筛已过，由于一次意外跌倒，听力丧失；两个孩子已做耳部CT检查，显示大前庭和内耳畸形。经耳聋芯片检测，两个孩子均为IVS7-2纯合突变，父母均为IVS7-2杂合突变。37耳聋检测应用案例2 I V S 7-2 纯合（耳聋）I V S 7-2 纯
