1、Experiment and Guide for Microbiology,2020年4月3日2时25分,1,2020年4月3日2时25分,2,EXP I Bright-Field Microscope,EXP II Microbial Morphology,EXP III Inoculation, Growth, Biochemical Tests of Bacteria,EXP IV Actinomycetes , Fungi and Spirochetes,EXP V Disinfection & Sterilization, Heredity and Variation,EXP VI
2、Determination of Antimicrobial Activity, Biological Assay of Antibiotics,EXP VII Sterility Test of drugs and Microbial limit Tests,EXP I Bright-Field Microscope,2020年4月3日2时25分,3,2020年4月3日2时25分,4,Arm,Tube,Nosepiece,Stage clips,Stage,Stage motion knob,Base,Coarse adjustment knob,Fine adjustment knob,2
3、020年4月3日2时25分,5,Light source control 1: on/off,Light source control 2,Ocular lens,Objective lens,Link computer,Condenser,Test,2020年4月3日2时25分,6,2020年4月3日2时25分,7,1 .25 (0.65、0.25) 100(40、10） 160 / 0.17 数值孔径 放大倍数 镜筒长/盖玻片厚度 数值孔径： N.A. = ns i n / 2 n 玻片和物镜之间的折射率。 光线最大射入角。 分辨率： R0.61/ N.A. 波长,2020年4月3日2时2
4、5分,8,2020年4月3日2时25分,9,2020年4月3日2时25分,10,Strain,Magnification,Staphylococcus aureus,10010,2020年4月3日2时25分,11,2020年4月3日2时25分,12,EXP II Microbial Morphology,video,2020年4月3日2时25分,13,Bacteria can be divided into two major groups, called gram-positive and gram-negative. The original distinction between gra
5、m-positive and gram-negative was based on a special staining procedure, the Gram stain .,Principle-Grams stain,2020年4月3日2时25分,14,2020年4月3日2时25分,15,Procedures： Simple Stain,2020年4月3日2时25分,16,washing,Smears,Air dry,Fixation,Staining (Methylene blue),Examine (oil immersion),Drawing,Procedures：Simple St
6、ain,2020年4月3日2时25分,17,Procedures：Gram Stain,2020年4月3日2时25分,18,Crystal violet,Lugols iodine,95% ethyl alcohol,safranin,Primary stain,Mordant,Decolorizing,Counter stain,washing,washing,washing,washing,3-area,mixture,E.coli,S.aureus,2020年4月3日2时25分,19,Grams stain,2020年4月3日2时25分,20,E.coli,S.aureus,G+,G-,
7、2020年4月3日2时25分,21,2020年4月3日2时25分,22,Principle-spore stain,Central core,Cortex,Spore coat / membrane,exosporium,2020年4月3日2时25分,23,2020年4月3日2时25分,24,2020年4月3日2时25分,25,Bacillus subtilis,2020年4月3日2时25分,26,2020年4月3日2时25分,27,2020年4月3日2时25分,28,2020年4月3日2时25分,29,Procedures,Preparation of specimen (1) Place
8、a drop of culture media of Saccharomyces cerevisiae and Bacillus subtilis respectively on a glass slide and mix it with inoculating loop. (2) Smear some vaselin around the edges of the cover slip with toothpick. (3) Place a concavity slide on the cover slide and press it softly for sticking. (4) Rev
9、erse the specimen rapidly. Observation with microscope (1) Place the specimen on the stage. (2) Observe it with low power lens(10) and fix the edge of drop. (3) Observe it with high power lens(40).,2020年4月3日2时25分,30,2020年4月3日2时25分,31,2020年4月3日2时25分,32,2020年4月3日2时25分,33,2020年4月3日2时25分,34,EXP III Inoc
10、ulation，Growth， Biochemical Tests of Bacteria,2020年4月3日2时25分,35,The most useful and pragmatic method for obtaining pure cultures is the streak plate in which a mixes culture is spread or streaked over the medium surface such that individual cells become separated from one another. Each isolated cell
11、 grows into a colony. agar slant Broth semisolid media 3-way streak-plate,Sterilization of the inoculating loop,2020年4月3日2时25分,36,Saureus Ecol i BSubtilis agar slant Broth semisolid media 3-way streak-plate,Media ：1set/person,Cultures： 1set/group,2020年4月3日2时25分,37,2020年4月3日2时25分,38,2020年4月3日2时25分,39
12、,0.5cm,2020年4月3日2时25分,40,2020年4月3日2时25分,41,2020年4月3日2时25分,42,2020年4月3日2时25分,43,strains cultural characteristics Saureus Ecol i Bsubtilis,2020年4月3日2时25分,44,2020年4月3日2时25分,45,2020年4月3日2时25分,46,2020年4月3日2时25分,47,2020年4月3日2时25分,48,2020年4月3日2时25分,49,2020年4月3日2时25分,50,E. coli,E. aerogenes,Indole productio
13、n,Red: +,2020年4月3日2时25分,51,E. coli,E. Aerogenes cotrol,The Methyl Red Test,Red: +,2020年4月3日2时25分,52,The Voges-Proskauer Test,E. coli,E. aerogenes,Red: +,2020年4月3日2时25分,53,Citrate Utilization,2020年4月3日2时25分,54,2020年4月3日2时25分,55,ResultsIMViC Series,2020年4月3日2时25分,56,2020年4月3日2时25分,57,ResultsHydrogensu
14、lfide Production,2020年4月3日2时25分,58,Hydrogensulfide Production,2020年4月3日2时25分,59,EXP IV Actinomycetes and Fungi,2020年4月3日2时25分,60,methylene blue (oxidation type ） blue,methylene blue (reduction type ） no color,yeast cells,metabolism,possibility of reduction,Viable yeast cell,dead cell,2020年4月3日2时25分,
15、61,2020年4月3日2时25分,62,1. Drop a blob of methylene blue,2.Take some yeast,3.Cover the suspension,4.Examine the slide,2020年4月3日2时25分,63,2020年4月3日2时25分,64,Saccharomyces cerevisae,2020年4月3日2时25分,65,Agar surface,气生菌丝 基内菌丝,2020年4月3日2时25分,66,1.Place a drop of methylene blue,2.Press a cover slip on the colon
16、y surface,3.Cover the suspension,4.Examine the slide,2020年4月3日2时25分,67,放线菌2809,2020年4月3日2时25分,68,青霉菌,2020年4月3日2时25分,69,Results and Discussion,antinomycetes,molds,2020年4月3日2时25分,70,2. Describe the characteristics of Colonies of Actinomycetes 2809, Yeast(Sacchariomyces) and Molds (Penicillum),Results
17、and Discussion,2020年4月3日2时25分,71,3. Lawn of Actinomycetes(15),2020年4月3日2时25分,72,4. Describe the characteristics of Molds(4 Penicillum, Aspergillus, Mucor, Rhizopus),2020年4月3日2时25分,73,2020年4月3日2时25分,74,2020年4月3日2时25分,75,2020年4月3日2时25分,76,1. Draw a representative field for spirochetes.,Results and Dis
18、cussion,Spirochetes,2020年4月3日2时25分,77,2020年4月3日2时25分,78,253.7nm,2020年4月3日2时25分,79,2020年4月3日2时25分,80,2020年4月3日2时25分,81,2020年4月3日2时25分,82,2020年4月3日2时25分,83,2020年4月3日2时25分,84,filter paper discs containing penicillin,resistant strains,Sensitive strains,Inhibition zone,2020年4月3日2时25分,85,R,penicillin G 20
19、000U/ml,Starch agar 50,2,2020年4月3日2时25分,86,2020年4月3日2时25分,87,The results of flagella variation.,The results of drug-resistant mutation,2020年4月3日2时25分,88,EXP VI Determination of Antimicrobial Activity， Biological Assay of Antibiotics,2020年4月3日2时25分,89,The minimal inhibitory concentration (MIC) The mi
20、nimal bactericidal concentration (MBC),Cultures: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, and standard strains of Staphylococcus aureus(ATCC25925) and Escherichia coli(ATCC25922). Antibiotics: penicillin G, streptomycin, szithromycin, levofloxacin.
21、Media: Mueller-Hinton agar incubated at 55 in water bath.,2020年4月3日2时25分,90,2020年4月3日2时25分,91,1,2,3,4,5,6,7,8,media,2020年4月3日2时25分,92,Antimicrobial activity of drugs * +: growth. -: no growth,2020年4月3日2时25分,93,2020年4月3日2时25分,94,Spore suspension of Bacillus subilis,2020年4月3日2时25分,95,I=lg2 D=1,W=(SH +
22、UH) (SL + UL) V=(UH +UL) (SH + SL) = Dantilog(IV/W),2020年4月3日2时25分,96,2020年4月3日2时25分,97,2020年4月3日2时25分,98,2020年4月3日2时25分,99,fungi medium,fluid thioglycollate medium,1 2 3 4 5 6 7,S.aureus,Sample,Sample,1ml,1ml,1ml,1ml,1ml,ck,ck,ck,Procedures test for sterility of drugs,2020年4月3日2时25分,100,0.9% natural saline injection solution,“+”growth，“-”no growth,2020年4月3日2时25分,101,10-2,10-5,10-4,10-3,1ml,1ml,1ml,1ml,video,2020年4月3日2时25分,102,Count clonies:30-300,2020年4月3日2时25分,103,EMB平板典型大肠杆 菌菌落特征： 中心黑色或紫红色，有 或无绿色金属光泽,大肠杆菌测定EMB选择性分离鉴别,2020年4月3日2时25分,104,
