1、3 禽流感病毒致病性划分依据 AIV 可以根据致病性分为高致病性禽流感病毒(High Pathogenic Avian Influenza virus, HPAIV) 、低致病性禽流感病毒(Low Pathogenic Avian Influenza virus, LPAIV)与无致病性 禽流感病毒(Non-pathogenic Avian Influenza vius, NPAIV) 。国际动物卫生组织(World Organization for Animal Health, OIE)将高致病性禽流感病毒列为 A 类动物疫病,并规定了 高致病性禽流感病毒的分类标准: 1) 用 0.2mL
2、110 稀释的无菌感染流感病毒的尿囊液,经静脉注射接种 8 只 48 周龄 易感鸡,在接种后 10 天内,能导致 67 只或 8 只鸡死亡,这些流感病毒应属于高致病性。 2) 分离物能使 15 只鸡致死,但病毒不是 H5 或 H7 亚型,则应进行下列实验:将病毒 接种于细胞培养物上, 观察其在胰蛋白酶缺乏时是否引起细胞病变或形成蚀斑, 如果病毒不 能在细胞上生长,则分离物应被考虑为非高致病性禽流感病毒。 3) 对低致病性的所有 H5、H7 毒株及其它病毒,在缺乏胰蛋白酶的细胞上能够生长时, 则应进行血凝素切割位点氨基酸序列分析,如果分析结果同其他高致病性禽流感病毒相似, 被检分离物应被考虑为高
3、致病性禽流感病毒。 WHO 在 OIE 标准的基础上也制定了一个更为量化的标准静脉接种致病指数 (intravenous injection-mediated pathogenicity index , IVPI)27: 1) 收获接种病毒的 SPF 鸡胚的感染性尿囊液; 2) 将含毒尿囊液用灭菌生理盐水稀释 10 倍(切忌使用抗生素) ,进行无菌检验; 3) 将此稀释病毒液以 0.1mL/羽静脉接种 10 只 6 周龄 SPF 鸡, 2 只同样鸡只接种 0.1mL 稀释液作对照(对照鸡不应发病,也不计入试验鸡) ; 4) 每隔 24h 检查鸡群一次,共观察 10 天。 根据每只鸡的症状用数字
4、方法每天进行记录:正常鸡记为 0,病鸡记为 1,重病鸡记为 2,死鸡记为 3(病鸡和重病鸡的判断主要依据临床症状表现。一般而言,“病鸡”表现有下 述一种症状,而“重病鸡”则表现下述多个症状,如呼吸症状、沉郁、腹泻、鸡冠和/或肉髯 发绀、脸和/或头部肿胀、神经症状。死亡鸡在其死后的每次观察都记为 3) 。 IVPI 值每只鸡在 10 天内所有数字之和/(10 只鸡 10 天) ,如指数为 3.00,说明所有 鸡 24h 内死亡;指数为 0.00,说明 10d 观察期内没有鸡表现临床症状。IVPI 大于 1.74 时为 判定为高致病性禽离流感病毒 , IVPI 大于 1.2 小于 1.74 时判定为中致病性禽流感病毒, IVPI 小于 1 时判定为低致病性禽流感病毒。 27 WHO. WHO manual on animal influenza diagnostic and survaillance. WHO/CDS/CSR/NCS/2002.5 2002.