1、农残检测专题培训 目 录n农药及农药残留的知识n样品的前处理知识n仪器分析GCMS的基础与操作n农残检测应注意的问题 农药及农药残留的知识一、农药概述一、农药概述二、农药残留的概念二、农药残留的概念三、农药残留的危害三、农药残留的危害四、农残分析的目的四、农残分析的目的五、有机氯农药的性质、危害、允许残留量、所用分析仪器五、有机氯农药的性质、危害、允许残留量、所用分析仪器六、农残分析程序六、农残分析程序一、农药概述一、农药概述（一）农药的概念是指用于防治危害农作物及农副产品病虫害、杂草及其他有害生物的药物总称。现在农药不仅应用于农业，而且也广泛应用于畜牧业、林业和公共卫生事业等方面。1.按化学
2、成分按化学成分可分为有机氯、有机磷、氨基甲酸可分为有机氯、有机磷、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类及砷、汞、铜、硫磺等制酯类、拟除虫菊酯类及砷、汞、铜、硫磺等制剂。剂。2.按用途按用途可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植物生长调节剂和粮食熏蒸剂等。物生长调节剂和粮食熏蒸剂等。（二）农药的分类（二）农药的分类（三）农药的作用（三）农药的作用n农药在防治农作物病虫害和杂草、提高农业产量方面具有农药在防治农作物病虫害和杂草、提高农业产量方面具有显著的效果。显著的效果。n 农药与人、动物的健康有着密切的关系。农药的使用，农药与人、动物的健康有着密切的关系。农药的使用，杀灭了一些病
3、原及传播媒介，使某些疾病得到了控制，在杀灭了一些病原及传播媒介，使某些疾病得到了控制，在一定程度上提高了人类的健康水平。提高农畜产品的产量一定程度上提高了人类的健康水平。提高农畜产品的产量和质量等方面，起着重要的作用。但是，大量广泛施用农和质量等方面，起着重要的作用。但是，大量广泛施用农药也会造成对食物的污染。药也会造成对食物的污染。n农药还存在残毒和污染的严重问题，农药对食品，特别是动物性农药还存在残毒和污染的严重问题，农药对食品，特别是动物性食品的污染。长期食用被农药污染的食品，人类健康会受到严重食品的污染。长期食用被农药污染的食品，人类健康会受到严重的危害。的危害。食品中残留农药过高会导
4、致食品中残留农药过高会导致癌症和帕金森症。癌症和帕金森症。n 每年，我国农药中毒人数超过每年，我国农药中毒人数超过10万人，大部分是由于农药残留万人，大部分是由于农药残留而引起。死亡而引起。死亡20003000人。近人。近170种农药被列入致癌物。种农药被列入致癌物。注：注：目前全世界实际生产和使用的农药品种为目前全世界实际生产和使用的农药品种为500多种，其中大量多种，其中大量使用的有使用的有100种，主要是化学合成的。种，主要是化学合成的。n 因此，我国相继制订了一系列措施，来控制农药对食品的污染。因此，我国相继制订了一系列措施，来控制农药对食品的污染。二、农药残留的概念二、农药残留的概念
5、农药残留农药残留(pesticide residues)是指农药施用后，是指农药施用后，残残存存在生物体、农副产品和环境中的在生物体、农副产品和环境中的微量农药原微量农药原体、有毒代谢产物、降解物和杂质体、有毒代谢产物、降解物和杂质的总称。残的总称。残留的数量叫残留量。留的数量叫残留量。产生农药残留的根本原因：产生农药残留的根本原因：n部分种植者违反农药用规范，滥用高毒和剧毒农药或接近收获期使用农药。农药残留毒性的类型：农药残留毒性的类型：n 化学稳定性：难以生物降解、脂溶性强、生物体富集有机氯农药，如六六六、DDTn 三致性：致癌、致畸、致突变杀虫脒的代谢产物（N-4-氯邻甲苯胺）、代森类杀
6、菌剂代谢产物（乙撑硫 脲）、敌枯双、三环锡等n 环境激素化合物：也称内分泌干扰化合物美国EPA提出60种环境激素化合物，其中除草醚等农药39种。n 迟发性神经毒性：下肢麻痹、肌肉无力、食欲不振摄入溴苯磷、TOCP（三邻甲苯磷酸酯，1930年美国引起姜酒事件）n一般来说，农药对人体健康的影响分为急性中毒与慢性中毒。n急性中毒往往容易造成死亡，成为最明显的农药危害。中毒的症状亦比较明显，具体表现为头痛、恶心、多汗、呼吸困难、肌肉痉挛、神志不清，如不及时抢救便会危及生命。n长期食用含有农药的食品能引致农药在体内不断累积而引起慢性中毒，触发多种慢性疾病，包括癌症、生殖和神经疾病，以及降低免疫力等。因为
7、慢性中毒在人体没有明显症状，往往不能引起人们的注意。三、农残的危害三、农残的危害农药残留分析的目的农药残留分析的目的n 研究农药使用后在环境中的代谢和降解，制定农药残留限量标准、农药安全使用标准；n 检测食品和饲料中农药残留的种类和水平，以确定其质量和安全性，满足对食品质量和安全的管理需要；n 检测环境介质和生态系生物构成的农药残留种类和水平，以了解环境质量和评价生态系统的安全性，满足环境监测与保护的管理需要。农药残留分析是分析化学中最复杂的领域，原因是：农药残留分析是分析化学中最复杂的领域，原因是：n 残留水平低残留水平低,ng(10-9g)、pg(10-12g)水平；水平；n 使用农药历史
8、的未知性和样品种类的多样使用农药历史的未知性和样品种类的多样性，造成分析过程的复杂性；性，造成分析过程的复杂性；n 农药品种的不断增多，对农药多残留分析农药品种的不断增多，对农药多残留分析提出了更高的技术适应性要求。提出了更高的技术适应性要求。有机氯农药及其对食品的危害有机氯农药及其对食品的危害 有机氯农药(organochlorine pesticides)是具有杀虫活性的氯代烃的总称，常用的有机氯农药有666、DDT、氯丹、艾氏剂等。有机氯农药一般不溶于水。易溶于有机溶剂，在生物体内的蓄积具有高度选择性，多贮存于机体脂肪组织或富含脂肪的部位，性质非常稳定，在环境中残留期长，并不断迁移和循环
9、，从而遍及全球的每个角落。目前，有机氯农药广泛地污染了世界环境。在我国，目前，有机氯农药广泛地污染了世界环境。在我国，造成农药污染的主要是有机氯农药。由于许多国家停止生造成农药污染的主要是有机氯农药。由于许多国家停止生产和使用有机氯农药，食品中的有机氯残留量明显下降。产和使用有机氯农药，食品中的有机氯残留量明显下降。我国已于我国已于19831983年停止生产有机氯农药。年停止生产有机氯农药。有机氯农药对人和动物来说，其急性毒性仍属于中等有机氯农药对人和动物来说，其急性毒性仍属于中等毒性。食用有机氯农药污染的食品主要存在慢性中毒问题，毒性。食用有机氯农药污染的食品主要存在慢性中毒问题，其慢性毒性
10、作用主要表现在侵害肝、肾和神经系统，可引其慢性毒性作用主要表现在侵害肝、肾和神经系统，可引起贫血、肝病、神经炎等病症。起贫血、肝病、神经炎等病症。食品中有机氯农药的允许残留量食品中有机氯农药的允许残留量n以前国际上对以前国际上对666和和DDT的使用情况未作统一的规定。的使用情况未作统一的规定。n 2001年年5月月22日在斯德哥尔摩来自日在斯德哥尔摩来自100多个国家环境官多个国家环境官员参加的联合国环境会议上通过了员参加的联合国环境会议上通过了关于持久性有机关于持久性有机污染物的斯德哥尔摩公约污染物的斯德哥尔摩公约，决定在全世界范围内禁，决定在全世界范围内禁用或严格限用用或严格限用12种有
11、机污染物。这种有机污染物。这12种有机污染物中种有机污染物中的的9种为有机氯农药，即艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、种为有机氯农药，即艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、氯丹、七氯、灭蚁灵、毒杀芬、六氯苯、滴滴涕。氯丹、七氯、灭蚁灵、毒杀芬、六氯苯、滴滴涕。我国制定的各类食品中有机氯农药的允许残留量见表。我国制定的各类食品中有机氯农药的允许残留量见表。食品中有机氯农药的最大残留限量食品中有机氯农药的最大残留限量/（mg/kg）食物 最大允许残留量六六六滴滴涕原粮0.050.05蔬菜、水果0.050.05豆类、薯类0.050.05水产品0.10.5蛋品0.10.1肉及肉制品0.10.2脂肪含量10%以下（以原样
12、计）12牛乳0.021.0乳制品脂肪含量10%以下（以原样计）0.010.01脂肪含量10%以上（以脂肪计）0.50.5茶叶0.20.2食品中有机氯农药的测定方法食品中有机氯农药的测定方法n食品中有害物质常用的检测方法食品中有害物质常用的检测方法薄层色谱法薄层色谱法气相色谱法气相色谱法高效液相色谱法高效液相色谱法质谱法质谱法色色质联用质联用酶联免疫吸附剂测定酶联免疫吸附剂测定早期，有机氯农药的定量测定，一般用分光光度法，但这种早期，有机氯农药的定量测定，一般用分光光度法，但这种方法操作繁琐，选择性差，灵敏度不高。方法操作繁琐，选择性差，灵敏度不高。其后又发展了柱色谱，纸色谱和薄层色谱。而且薄层
13、色谱其后又发展了柱色谱，纸色谱和薄层色谱。而且薄层色谱有比较快的发展。由于它简单易行，可作为易于普及的一有比较快的发展。由于它简单易行，可作为易于普及的一种定性和半定量测试手段。种定性和半定量测试手段。气相色谱法给有机氯农药残留量的检测提供了一个灵敏、气相色谱法给有机氯农药残留量的检测提供了一个灵敏、快速、准确的方法（灵敏度为快速、准确的方法（灵敏度为10-910-12g）现已广泛使用。）现已广泛使用。农药残留分析程序农药残留分析程序 样品采集：采样、样品运输和保存；样品预处理：缩分、剔除或粉碎样品，成为检测样品；样品制备：提取：从试样中分离残留农药的过程；净化：提取物中的农药与干扰物质分离的
14、过程；分析测定：上机。一、一、取样方法取样方法二、二、样品的预处理样品的预处理a.a.取样原则取样原则 -代表性 -方法与目的保持一致 -精度要求 -防止化学变化或丢失 -防止污染b.b.商业取样分类商业取样分类 -监测调查取样：随机、概率、分 布水平 -执法取样：强制性、超标与否c.c.取样量要求取样量要求 -小的或轻的产品 1.01.5Kg -中等大小产品 2.025Kg -大的产品 4.05.0Kg -肉、禽、鱼 1.01.5Kg -谷物和制品 0.51.0Kgd.d.采集要求采集要求 -根茎类蔬菜 采集整个果实 -豆类 整个果实 -果类蔬菜 去除茎部 -谷物 整个籽粒 -肉类 整体 粉
15、状物：粉碎、过40目筛或匀浆，取250-500g样品 谷物：研磨后按四分法进行液体样品：充分混合，过滤除去漂浮物、沉淀物和泥土 是指通过溶解、吸附（吸着）或挥发等方式将样品中的残留农药分离出来的操作步骤，也叫萃取萃取。提取方案的选定主要考虑残留农药的理化特性理化特性而决定。其外还有试样类型、样品组分（脂肪、水含量）、农药在样品中存在形式以及检测方法。二、提取方法提取方法n匀浆法：称取匀浆法：称取5 g样品于高速组织捣碎机中，加入样品于高速组织捣碎机中，加入25 mL100%纯甲醇，充分匀浆捣碎纯甲醇，充分匀浆捣碎2 min，取上清液，待净，取上清液，待净化化n机械振荡法：称取机械振荡法：称取5
16、 g样品，加入样品，加入25 mL100%纯甲醇，于纯甲醇，于电动振荡机上振荡电动振荡机上振荡1 h，静置（或离心），取上清液，待净，静置（或离心），取上清液，待净化。化。n人工手摇法：称取人工手摇法：称取5 g样品，加入样品，加入25 mL100%纯甲醇，手纯甲醇，手动摇晃动摇晃5 min，静置（或离心），取上清液，待净化。，静置（或离心），取上清液，待净化。制备过程中避免组分发生化学变化；要防止和避免欲测定组分的沾污；尽可能减少无关化合物引入制备过程；尽可能简单易行。提取原理提取原理 利用残留农药与样品基质的物理化学差异物理化学差异，使其从检测系统有干扰作用的样品基质中提取分离出来（相似相
17、溶）。极性极性-溶解度、分配系数；挥发性挥发性-蒸汽压。提取原则提取原则 溶剂提取法溶剂提取法 根据农药与样品组分在不同溶剂中的溶解性差异，选用对残留农药溶解度大的溶剂，经过震荡、捣碎等方式将分析物从样品基质中提取出来的方法。按提取对象分按提取对象分液液-液提取液提取液液-固提取固提取液液-气提取气提取 指通过溶解、扩散作用使固相物质中的化合物进入溶剂中的过程。原理：原理：利用样品中不同组分分配在两种不混溶的溶剂中溶解度溶解度或分配比分配比的不同来达到分离、提取或纯化的目的。a.水样：液液提取 (生物液体，如尿液、奶液、血浆，加入乙醇或盐)b.植物和动物样品：固液提取+液液提取c.土壤样品：固
18、液提取+液液提取d.食品样品：固液提取+液液提取不同样品中残留农药的提取不同样品中残留农药的提取净化净化 是指通过物理的或化学的方法除去提取物中对测定有干扰作用的杂质的过程。在净化过程中，加入在净化过程中，加入H2SO4的目的，是除去提取液中的杂质，如色素、的目的，是除去提取液中的杂质，如色素、脂类、蜡质等。脂类、蜡质等。脂类：蜡质、脂肪、油脂色素：叶绿素、叶黄素、花青素氨基酸衍生物：蛋白质、肽、生物碱、氨基酸碳水化合物：糖、淀粉、醇木质素：酚类及其衍生物 农药残留分析中常见的干扰物质：农药残留分析中常见的干扰物质：磺化法操作流程说明磺化法操作流程说明n加入100ml2%硫酸钠水溶液（作用是洗
19、去极性大的杂质）/50ml正己烷（提取）二者无先后顺序。n加入浓硫酸10ml（硫酸：正己烷=1:10）轻摇，放置时间要长一些，视情况最好静置过夜（吸附效果好，因硫n酸是强氧化剂，它能使脂肪、蛋白质变性）弃去硫酸层，漏斗下口用水洗一下，继续加入硫酸直至硫酸层为乳n白色，弃去硫酸层。n再次加入100ml2%硫酸钠水溶液，（洗酸）振荡3min静置10min，放下层。n过无水硫酸钠（650灼烧4h）柱,（脱水，ECD检测器怕水）最后用正己烷10ml冲洗与鸡心瓶中。n加PT溶液（浓度为：1%PEG+2%TEG，介质50%丙酮/己烷）40ul。（掩盖柱子的活性点）n减压浓缩44旋转蒸发至干。n配线性：50
20、ppb、250ppb、500ppb。n进气相用ECD分析，若有检出进GC-MS。n附磺化法的操作流程。称量（1）液固提取（2）减压过滤（3）浓缩（6）液液提取（4）净化（5）气相色谱质谱联用n第一节 气相色谱/质谱基础n第二节 开关机介绍n第三节 GCMSD调谐n第四节 样品采集技术n第五节 定性与定量技术n第六节 仪器维护及日常保养第一章第一章 气相色谱气相色谱/质谱基础质谱基础气相色谱气相色谱原理原理 气相色谱的流动相为惰性气体，气-固色谱法中以表面积大且具有一定活性的吸附剂作为固定相。当多组分的混合样品进入色谱柱后，由于吸附剂对每个组分的吸附力不同，经过一定时间后，各组分在色谱柱中的运行
21、速度也就不同。吸附力弱的组分容易被解吸下来，最先离开色谱柱进入检测器，而吸附力最强的组分最不容易被解吸下来，因此最后离开色谱柱。如此，各组分得以在色谱柱中彼此分离，顺序进入检测器中被检测、记录下来。气相色谱法的特点气相色谱法的特点（1 1）分离效能高）分离效能高（2 2）检测灵敏度高）检测灵敏度高（3 3）分析速度快）分析速度快（4 4）应用范围广）应用范围广（5 5）样品用量少）样品用量少 因此，气相色谱法已成为石油、化学、化工、生化、因此，气相色谱法已成为石油、化学、化工、生化、医药、食品、农业、环境保护等生产及科研部门中不可医药、食品、农业、环境保护等生产及科研部门中不可缺少的分析手段缺
22、少的分析手段。质谱原理质谱原理 质谱分析法是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析的一种分析方法。被分析的样品首先要离子化，然后利用不同离子在电场或磁场的运动行为的不同，把离子按质荷比（m/z）分开而得到质谱，通过样品的质谱和相关信息，可以得到样品的定性定量结果。气质联用（气质联用（GC/MSGC/MS）气质联用的有效结合既充分利用色谱的分离能力，又发挥了质谱的定性专长，优势互补，结合谱库检索，可以得到较满意的分离机鉴定结果。INTERFACEGCMSD10-5 TorrM/Z 69丰度的40%;M/Z 502的丰度M/Z 69丰度的2%；n对于标准谱图调谐，要求M/Z 69丰度的40%M
23、/Z 219的丰度M/Z 69丰度的80%;M/Z 69丰度的2%M/Z 502的丰度M/Z 69丰度的5%；重要的是对调谐做出正确评价：重要的是对调谐做出正确评价：质量数的峰宽平滑对称的峰合适的电子倍增器电压适当的丰度值低水峰及空气峰正确的质量分配合适的相对丰度合适的同位素比例标准谱图调谐报告有权使用MS参数易于建立用户调谐文件诊断手动调谐通过手动调谐检漏手动调谐允许交互设置自己的调谐参数。它使您非常灵活地改变自动调谐中的参数。当在 MSD 中执行诊断时，手动调谐非常重要。手动调谐对于检漏也非常有用处手动调谐允许交互设置自己的调谐参数。它使您非常灵活地改变自动调谐中的参数。影响质量轴影响峰宽
24、(分辨与灵敏度)影响灵敏度(传输效率)要进行手动调谐,进入 参数参数/手动调谐手动调谐。通过执行 轮廓图轮廓图 或 扫描扫描 观察调节结果。继续调整参数直至得到满意的结果。产生一份报告并创建一个调谐文件存贮这些参数。记住质量峰宽通过调节 AMU 增益和补偿增益和补偿来调整。还要记住 AMU 增益增益对高质量数更有效，而 AMU 补偿补偿对整个质量范围都同样有效。这最好通过 轮廓图轮廓图 来实现。记住质量轴校正是通过质量增益质量增益和质量补偿质量补偿来完成。同样要记住质量增益质量增益对高质量数更有效，而 质量质量 补偿补偿对整个质量范围同样有效。这最好通过 P轮廓图来完成。记住 EM 电压电压用
25、来调节整个质量范围的丰度.。推斥极、离子聚焦推斥极、离子聚焦及入射透镜补偿入射透镜补偿是用来调整一个质量对另一个质量的相对丰度。这最好通过 扫描扫描 来完成。通过手动调谐检漏发现漏气时先检查气相色谱进样口的状态。进样口在分流状态时质谱仪仍然表现为漏气时再用以下方法捡漏。在前一幻灯片所示的窗口点击参数参数/编辑调谐并显示参数编辑调谐并显示参数即出现当前窗口.将其中至少一个质量数改写为捡漏物质(如丙酮)的特征离子(M/Z58)，点击OK。回到手动调谐窗口，点击轮廓图。用棉签蘸捡漏物质（丙酮）接近怀疑漏气的位置。如果某处漏气，捡漏物的特征离子峰（58）强度立即明显增大。注意棉签接近而不是接触漏气部位
26、，避免过多溶剂进入分析管道。编辑调谐和显示参数菜单编辑调谐和显示参数菜单质量数 1,2,3：分别显示轮廓图中所要观察的质量数。窗口：为每个质量数窗口宽度。采样 2N：采样点数。以2的N次方计。例如N选择5，则在每个质量数采集32次。平均值：对每个轮廓质量平均的次数。次数越多，调谐时扫描速度越慢。步长：质量数变化的步长。它越大，扫描速度越快，但牺牲了分辨率。阈值：0500 该值越大，被遴选下去的峰越多，显示的峰越少。第四章样品采集技术数据采集方法编辑:n开始编辑完整方法 从“Method/方法”菜单中选择“Edit Entire Method/编辑完整方法”项，如下图所示，选中除“Data An
27、alysis/数据分析”外的三项，点击“OK/确定”，进入下一画面。编辑气相参数n柱箱n检测器n进样口编辑扫描方式质谱参数n编辑溶剂延迟时间以保护灯丝，调整倍增器电压模式（共有三种模式：绝对值，相对值和增益因子），选择要是用的数据采集模式，如扫描（Scan）、选择离子（Sim）等。更改EM电压溶剂延迟采集方式编辑采集参数离子源与四极杆温度编辑时间事件表 MS采集参数（SCAN）nMS SIM/Scan 参数对话框允许您设置质谱采集数据是用全扫描(Scan)或选择离子检测(SIM)方式。n全扫描方式监测在选择的整个质量范围内每 0.1 amu 质量单位的丰度。在正常的全扫描方式中，从数据平均产生
28、的峰记入硬盘中。nEM（电子倍增器）电压决定加在电子倍增器上的电压和质谱的响应。电压值越高，响应（信号和噪音）越大。EM 的电压可以设置为相对于当前调谐文件中给出的相对值(Rel)，也可以是绝对值(Abs)。当设置为 Rel 时，调谐文件中的倍增器电压就按在这里输入的值调整，当输入是 Abs 时，这个值即为使用的实际值。n溶剂延迟指从分析开始到打开质谱的时间（分钟）。直到溶剂峰从柱子中出来并通过质谱 MS 后才能打开质谱。SIMSIM是什么是什么?只监视所选择信息的质荷比它如何做它如何做?控制质量分析器，仅仅对感兴趣的质量进行分析为什么做为什么做?提高灵敏度改善峰形改善精确度应用应用痕量分析复
29、杂基质常规定量选择离子检测SIM 数据采集DwelltimeSIMmass 1SIMmass 2SIM 循环时间四极杆电压(amu)TIMESIMmass 3空中时间扫描数据采集扫描时间扫描循环时间空中时间四极杆电压(amu)TIMESIM 与SCAN比较 选择:离子/组数目 每个离子驻留时间 以便获得良好的数据采集所需的循环/峰数目 目标:每个峰通过 15-25 次循环 每个离子驻留时间相同 运用时间规划(SIM Groups)使 采集/循环离子数目最少设置 SIM 采集 SIM/Scan同步采集n一次进样，同时采集SIM和Scan的数据:nSIM 数据用于目标化合物的定量nScan 数据用
30、于未知化合物的谱库检索nSIM and Scan 的数据保存在相同的数据文件夹中（data.ms和datasim.ms)n可以使用 AutoSIM 的指令自动将全扫描的方法转换为SIM的方法nSIM 组和离子会被自动选择n不需要手动建立 第七章 定性与定量分析农药的分析概述n农药分析的三个过程n定性n定量n确认常用农药分析方法n常用农药分析方法气相色谱法-FID,ECD,FPD and NPDn液相色谱法-UV and FLDn气质联用技术是目前最有效的方法,而且灵敏度很高。色质联用是最有效的农药确认方法校正（定量）校正即是利用某个峰的峰高或峰面积来确定其对应组分的浓度或含量 当检测器灵敏度针
31、对不同的组分而变化；及检测器对同一组分不同含量响应值发生变化时须做校正校正方法 *面积百分比法AREA%*峰高百分比法HEIGHT%归一化法NORM%外标法ESTD 内标法ISTD*不是校正方法面积百分比法AREA%AREA(pk)AREA%=x100%AREA(pk)假定检测器响应都相同 所有组分都流出所有组分都被检测到优点缺点无需做校正以上所有的假定简单、快速的定量过程需测量所有的组分进样量不要求严格所有的面积都必须准确色谱条件n色谱柱：毛细柱，HP-5（DB-5或相当极性柱30m0.32mm0.25m。n柱温：程序升温n 速率/min 温度 保持时间/min 运行时间/minn 初始 -
32、60.0 2 2n 1 15 180.0 0 10n 2 5 260.0 0 26n 3 20 280.0 0 27n进样口温度：260.0n载气：氦气99.995%，1mL/min.n进样量：1Ln检测器温度：300.0定性确认 在保留时间窗口内出现与对应目标化合物一致的峰，视为疑似检出。测定结果计算结果计算n以外标法定量，按下式计算：n n AiCV n X=n Asmn式中：nX-试样中目标化合物含量，mg/kg；nAi-样液中目标化合物峰面积；nAs-标准溶液中目标化合物峰面积；nC-标准工作液中目标化合物的浓度，g/mL；nV-最终样液体积，mL；nm-最终样液所代表的试样量，g。数
33、据采集l采集方法l调谐文件lGC 参数lMS 参数l注射器参数方法流程定性分析l选择检索l检索策略l报告选项l对自动产生的报告中检索的结果进行检查定量分析l积分选择l积分参数文件l定量资料库l报告规格l检查自动产生的定量报告用户报告和资料库l设计用户报告和/或资料库l检查所产生或更新的报告 第六章 维护与保养日常维护-GC维维护护周周期期描描述述备注载气 压力:每天 净化器:根据需要清洗铜管:5 51 18 80 0-4 41 19 96 6干燥器:3 31 15 50 0-0 05 53 32 2脱氧管:3 31 15 50 0-0 04 41 14 4 使用 99.999%(或更纯)的载气
34、 使用金属净化器进样口 根据进样体积隔垫:5 50 08 80 0-8 88 89 96 6（灰灰）衬管:1 19 92 25 51 1-6 60 05 54 40 0橡胶O形环:5 51 18 80 0-4 41 18 82 2分流板:1 18 87 74 40 0-2 20 08 88 85 5密封圈:5 50 06 61 1-5 58 86 69 9 使用低流失隔垫.使用适当的衬管.清洗或更换分流板色谱柱 根据需要HP5MS:1 19 90 09 91 1S S-4 43 33 3柱接头螺帽(进样口):5 51 18 81 1-8 88 83 30 0柱接头螺帽(MSD):0 05 59
35、 98 88 8-2 20 00 06 66 6使用低流失交联柱，柱子接MS前老化垫圈 进样口:根据需要 GC/MS接口:更换柱子时进样口:0.20mm:5 50 08 80 0-8 88 85 53 3 0.25mm:0.32mm:GC/MS接口:0.20mm:5 50 06 62 2-3 35 50 08 8 0.25mm:5 50 06 62 2-3 35 50 08 8 0.32mm:5 50 06 62 2-3 35 50 06 6 不要在GC/MS接口使用石墨垫圈！不要过度拧紧！色谱柱在不使用时要安全保存起来。安全保存中有两大要点：1.保存柱子切勿划伤。划伤后的柱子可能由于高温加热
36、而足以使之从划痕处断裂。2.堵上柱子两端以保护柱子中的固定液不被氧气和其它污染物所污染。当使用熔凝硅柱时，记住这是一种玻璃材质，一定注意保护眼睛。色谱柱保存色谱柱保存检检查查周周期期部部件件号号备备注注标准谱图调谐每周建立系统档案 检查性能PFTBA每月0 05 59 97 71 1-6 60 05 57 71 1必要时加.不不要要过满.注意做校正阀排气机械泵油每每周周：检查液面和外观半半年年:检查油和前级管道阱Liter:6 60 04 40 0-0 08 83 34 4Gallon:6 60 04 40 0-0 07 78 89 9前级管道阱小球:9 93 30 01 1-1 11 10
37、04 4定期更换扩散泵油每年6 60 04 40 0-0 08 80 09 9需要时更换离子源根据需要需要时清洗.保持在真空下电子倍增器根据需要0 05 59 97 71 1-8 80 01 10 03 3使用尽可能低电压HED(HP5973only)根据需要G G1 10 09 99 9-8 80 00 00 01 1需要时更换放气口密封O-形环(仅HP5973)根据需要0 09 90 05 5-1 12 21 17 7需要时更换灯丝根据需要HP5973:G G1 10 09 99 9-6 60 00 05 53 3HP5972:0 05 59 97 72 2-6 60 00 05 53 3
38、应用溶剂延迟延长其寿命 MSD维护清洗离子源程序清洗离子源程序 所有真空室内的操作须戴不掉毛的手套(要非常干净）从工作站中从工作站中tune and vacuum/vacuum/power-on tempstune and vacuum/vacuum/power-on temps将离子源和四极杆温度设将离子源和四极杆温度设为为0,0,拆卸离子源拆卸离子源用专用绿色砂纸或三氧化二铝粉（用无水乙醇混成糊状）打磨除灯丝及螺丝外用专用绿色砂纸或三氧化二铝粉（用无水乙醇混成糊状）打磨除灯丝及螺丝外的金属零件表面，特别注意离子轨道内各部分。的金属零件表面，特别注意离子轨道内各部分。用水仔细冲洗用水仔细冲洗
39、HPLCHPLC级甲醇清洗，再用二氯甲烷清洗，最后用丙酮或正己烷清洗级甲醇清洗，再用二氯甲烷清洗，最后用丙酮或正己烷清洗将所有离子源部件（包括未打磨的部件）放入洁净烧杯，分析纯无水乙醇超声将所有离子源部件（包括未打磨的部件）放入洁净烧杯，分析纯无水乙醇超声波清洗波清洗4 4次，每次次，每次1010分钟。注意：如果使用强溶解性溶剂如丙酮等，不要清洗透分钟。注意：如果使用强溶解性溶剂如丙酮等，不要清洗透镜绝缘体和加热块导线。镜绝缘体和加热块导线。放于洁净烧杯，置于放于洁净烧杯，置于GCGC柱温箱内，将炉温设为柱温箱内，将炉温设为2020C C（使风扇不停转动）约（使风扇不停转动）约6060分分钟钟
40、组装，确认无短路，放回。插好各部件电线组装，确认无短路，放回。插好各部件电线抽真空（确认泵工作正常，此时离子源与四极杆不加热）。抽真空（确认泵工作正常，此时离子源与四极杆不加热）。1 1小时后将温度升至小时后将温度升至正常状态正常状态至少至少2 2小时后调谐小时后调谐 农残检测应注意的问题样品制备（1）样本应在冷冻状态下运送和保存，并避免在运送期间解冻，样品储存一般需在20，样品提取浓缩液储存应在05。通常动植物样品需搅拌或匀浆（籽粒需磨碎过40目筛），土壤样本需去石块等杂物，阴干后充分混匀，过40目筛。n样品检测前需混匀，可用粉碎机搅拌混匀，颗粒尽量小。n粉碎前应保持半冷冻状态，以免待测成份
41、随水分流失。（2）提取：用溶剂将待测样品中农药溶解、分离出来的操作步骤。根据样本和待测农药种类，用不同溶剂和方法进行提取。n原理：相似相溶。选择与待测农药极性相似的溶剂，提取剂沸点应4580，且不能与样本发生作用，毒性低，价格便宜，必须能溶解待测农药。采用ECD时，不能选带卤素的溶剂。对含水量高的样本，一般选与水相混溶的溶剂（乙腈、丙酮等），要求溶剂对样本有较强的渗透能力，以便能将样本中农药充分提取。当单一溶剂效果不理想，可选择2种或2种以上不同极性的溶剂，以不同比例配成混合提取剂，溶剂的级性由强到弱顺序：水乙腈甲醇乙酸乙醇异丙醇丙酮正丁醇正戊醇乙酸乙酯二氯甲烷三氯甲烷苯甲苯二甲苯四氯化碳二硫
42、化碳环己烷正己烷（石油醚）。n振荡法：在盛有样本的容器中加提取剂，振荡一定时间。n均质法：用均质机对加提取剂的样本快速均质。快速、简便。n超声法：样本加入提取剂，以超声波提取。n索氏提取：提取效果好，但时间长，干扰物多。多用于动物样本。n快速混匀法：适用于液体样品。提取方法：n 一般经三次提取，第一次约提取70-90%，第二次和第三次提取残渣中的剩余部分。无水硫酸钠和氯化钠的盐析作用能提高待测组分的回收率。干性样品（含水量10%）应加入适量水分再提取，采用乙酸乙酯提取含水量高的样本中农药时需加一定量的无水硫酸钠，提取浓缩菜汁或含糖量高的样本中农药时需加适量水，提取干燥土壤中农药时也需加适量水都能提高提取效果。（3）净化：将样本中待测农药与干扰杂质分离的步骤。原则是尽量完全除掉干扰杂质，而又使待测农药损失尽量少。n液液分配：乙腈正己烷，丙酮正己烷，丙酮石油醚。n吸附柱层析：弗罗里硅土、三氧化二铝、硅胶、活性炭、硅藻土等。存于干燥器中。n固相萃取：四步：固定相活化、样品上柱、洗涤和洗脱。（4）浓缩：n氮吹仪n旋转蒸发仪：水浴温度，蒸发速度，不能蒸干。（5）定容：一定要准确。方法评价指标：灵敏度（以方法最低检出浓度表示），准确度（添加回收率表示），精密度（标准偏差）。
