1、脑脊液检验,检验与生物技术学院 检验医学系 司 徒 博 drstb,一、概 述,70% 侧脑室脉络丛 (主动分泌与超滤） 30% 大脑与脊髓的细胞间质液,脑脊液 （cerebrospinal fluid, CSF),侧脑室 室间孔 第3脑室 中脑导水管 第4脑室 正中孔和外侧孔 蛛网膜绒毛 上矢状窦吸收后进入体循环,生理作用,1. 保护脑组织免于脊髓免受外力震荡损伤 2. 参与脑组织物质代谢并供给营养 3. 调节颅内压与酸碱平衡 4. 参与运转生物胺类物质影响垂体功能， 参与神经内分泌调节,血脑屏障 （Blood-Brain barrier）,毛细血管内皮细胞及细胞间紧密连接、基膜、周细胞、星
2、形胶质细胞足突和极狭小的细胞外隙共同组成的一个细胞复合体。,维持脑内环境稳定和避免有害物质入侵。,功能,Diagram,通透性,炎症、肿瘤、损伤、缺血、阻塞等病理状态 下，血脑屏障被破坏，通透性改变，可引起 脑脊液成分的改变,血脑屏障,检查目的 通过对脑脊液压力、一般性状、化学成分、 显微镜、微生物、免疫学的检查，对神经系 统疾病进行诊断、疗效观察与预后判断。,二、适应证与标本采集,1.适应证： （1）有脑膜刺激症状 （2）疑有颅内出血 （3）剧烈头痛、昏迷、抽搐、瘫痪等症状与体征而 原因不明 （4）中枢神经系统疾病进行椎管内治疗、造影等。,禁忌症： （1）怀疑颅内压明显增高、视神经乳头水肿或
3、 颅内占位、有脑疝先兆者 （2）休克、严重衰竭或濒危病人 （3）穿刺部位的皮肤和软组织有感染者、 （4）腰椎骨质破坏,2.标本采集 腰椎穿刺 小脑延髓池 侧脑室,步骤： 压力测定,细菌学检验,生化与免疫学检验,细胞学检验,留取3管，每管约1-3ml。 尽快送检，以防细胞破坏、葡萄糖分解或形成凝块。,（一）一般性状检查 （二）化学检查 （三）显微镜检测 （四）细菌学检测 （五）分子生物学检测,三、检查项目,（一） 一般性状检查 （1）颜色 正常:无色,红色脑脊液鉴别： （1）穿刺损伤 第一管血性，第二到第三管颜色变浅或消 失，离心后上清液无色透明,（2）蛛网膜下腔出血或脑室出血 三管均匀血性，离
4、心后上清液可成淡红或黄色,黄变症 脑脊液中因含变性血红蛋白、胆红素、 或蛋白异常升高所致的颜色变黄。,黄变症,2、透明度 正常：清澈透明 化脓性感染：明显浑浊 病毒感染：微浑或透明 结核性脑膜炎:毛玻璃样,3、凝固物 正常：无 纤维蛋白原含量增多时可出现凝块， 化脓性炎症（1-2小时内块状凝固） 结核性脑膜炎（12-24h后液面网状薄膜）,（二）化学检查 1.蛋白质检查 正常：含量极低（血浆蛋白的1/200), 绝大部分为球蛋白 病理情况下CSF蛋白含量呈不同程度上升， 且以球蛋白为主,（1）Pandys test (潘氏试验） 实验原理： 脑脊液中球蛋白与苯酚结合可形成不溶性蛋白盐而 沉淀，
5、产生白色浑浊或沉淀。 结果：半定量（-）（+）,阴性: 清晰透明，不显雾状。 极弱阳性(土):微呈白雾状。 阳性 ( + ): 灰白色云雾状。 (2 + ): 白色浑浊。 (3 + ): 白色浓絮状沉淀。 (4 + ): 白色凝块。,结果判断,正常,（2)定量试验 1）比浊法：磺基水杨酸-硫酸钠法 2）比色法：丽春红和考马斯亮兰法,参考值：400mg/L,（1）血脑屏障通透性增高 脑膜炎：化脑、结脑、病脑 （病脑，结脑，化脑） ； 出血性疾病：脑室及蛛网膜下腔出血脑脊液中蛋白质含 量升高 （2）脑脊液循环障碍： 脑部肿瘤、椎管梗阻，蛛网膜下隙梗阻、格林-巴利综合征（蛋白-细胞分离现象）时，脑脊
6、液中蛋白质含量增高。,（三）葡萄糖测定 正常含量：血清葡萄糖60%（2.5-4.5mmol/L) 影响因素： 血清葡萄糖含量 血脑屏障通透性 葡萄糖酵解程度,方法：葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法,临床意义,降低： 1. 中枢神经系统感染 降低程度（化脑结脑隐球菌脑膜炎） 2. 脑肿瘤 3. 脑寄生虫、神经梅毒 4. 低血糖 升高： 新生儿、病毒性感染、脑出血、糖尿病、 外伤等。,(四）氯化物测定 正常: 脑脊液氯化物比血液高约20% （Donnan balance） 参考范围： 120-130mmol/L 方法：离子选择电极,临床意义 （1）降低：化脑、结脑、脑脊液氯化物含量降低，结脑尤 为明显；
7、低氯血症。 （2）增高：尿毒症、呼吸性碱中毒、心力衰竭。,（五）酶类检查 1.LDH（乳酸脱氢酶） 鉴别细菌性感染与病毒性感染（正常或轻度） 其他：脑出血、蛛网膜下腔出血、肿瘤、脱髓鞘病。,2.腺苷脱氨酶（ADA） 结脑患者脑脊液中ADA明显高于其他脑膜炎 3.溶菌酶 结脑患者溶菌酶增高程度高于其他脑炎，且增减程度与病情好坏正相关,（三）显微镜检查,(一)白细胞计数及分类计数 方法： 改良牛鲍计数盘（池深0.1mm ，总容积 0.9ul）或 血细胞计数仪直接计数。,改良牛鲍 计数盘,正常 无红细胞；少量白细胞； 参考值： 儿童 015106/L 成人 08 106/L,分类,1.方法：直接分类
8、（多核与单个核细胞比例）； 染色分类 2.参考值：主要为淋巴及单核细胞（7：3）,1.中枢神经系统感染性疾病： 化脓性脑膜炎：细胞数显著升高，以中性粒细胞主； 结核性脑膜炎：中度升高，早期以中性粒为主，数 天后以淋巴为主； 病毒性脑膜炎、脑炎，新型隐球菌性脑膜炎： 轻度升高，以淋巴为主。,临床意义,4.脑膜白血病：分类中可见相应的白血病细胞 5.脑寄生虫病：可查见嗜酸性粒细胞与浆细胞。,2.蛛网膜下腔出血：大量红细胞和中性粒细胞。 3.中枢神经系统肿瘤：以淋巴细胞为主。,（四）细菌学检测,1.直接涂片：普通细菌：革命兰染色。新型隐球 菌墨汁染色；结核菌-抗酸染色 2.细菌培养： 常见菌：脑膜炎奈瑟菌、链球菌、葡萄球菌、大肠艾希菌、厌氧菌等 常用平板：血平板、巧克力平板 注意：正常无菌，应防止污染，重视真菌和厌氧菌的培养。,结核分枝杆菌病：红色、细长、直或弯曲、有时着色不均而 成颗粒状排列的杆菌,新生隐球菌 （印度墨汁负染）,（五）分子生物学检测,荧光定量PCR 检测各类病原体核酸,常见疾病CSF变化,CSF特点,Thank You !,
