第10章-遗传信息传递与表达课件.ppt

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1、 遗传信息的传递与表达遗传信息的传递与表达第一节第一节DNADNA的生物合成(复制)的生物合成(复制)第二节第二节RNARNA的生物合成(转录)的生物合成(转录)第三节蛋白质的生物合成(翻译)第三节蛋白质的生物合成(翻译)DNA转录转录翻译翻译复制复制逆转录逆转录RNA复制复制RNA蛋白质蛋白质为什么子女与父母非常相象?为什么子女与父母非常相象?基因就是指基因就是指DNA中能编码蛋白质和功能中能编码蛋白质和功能RNA的特定核苷酸序列。的特定核苷酸序列。一、一、DNA复制方式复制方式二、参与二、参与DNA复制的因子复制的因子三、三、DNA复制过程复制过程四、逆转录四、逆转录五、五、DNA损伤的修

2、复损伤的修复一、一、DNADNA的复制方式的复制方式 半保留复制半保留复制(semiconservative replication)-在在 DNA复制过程复制过程中,双螺旋结构解开而成为单链,中,双螺旋结构解开而成为单链,分别以分别以DNA双螺旋中的一条链为双螺旋中的一条链为模板,按碱基互补配对的原则合模板,按碱基互补配对的原则合成两条新的互补链。这样新合成成两条新的互补链。这样新合成的的DNA双链中一股单链是从亲代双链中一股单链是从亲代完整地接受过来的,另一股单链完整地接受过来的,另一股单链完全重新合成。完全重新合成。DNA半保留复制的证据半保留复制的证据第一代第二代细菌(含15N-DNA

3、)普通DNA普通DNA重DNA 重DNA普通培养基普通培养基细菌DNA双链密度梯度离心15N-DNA14N-DNA1.底物底物 dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP)2.聚合酶聚合酶 DNA聚合酶聚合酶I、II、III3.模板单链的模板单链的DNA母链母链4.引物寡核苷酸引物(引物寡核苷酸引物(RNA)5.其他酶和蛋白质因子其他酶和蛋白质因子 解链酶,解旋酶,解链酶,解旋酶,单链结合蛋白,连接单链结合蛋白,连接酶酶(一)(一)DNA聚合酶的活性聚合酶的活性 5至至3的聚合活性的聚合活性5 3方向方向 核酸核酸 外切酶活性外切酶活性5 3外切酶活性外切酶活性3 5外切酶活性外切酶活性

4、 5至3的聚合活性(5 3)pp pp pppPPPOHOHOH55PPiN1N2N3N1N2N3533 核酸外切酶活性 35外切酶活性 53外切酶活性533535外切酶活性53外切酶活性(二)DNA拓扑异构酶(解旋酶)既能水解,又能打断碱基互补配对的氢键拓扑酶 切断DNA双链中的一股拓扑酶 切断DNA双链(三)单链DNA结合蛋白(SSB)维持模板处于单链状态保护单链的完整(四)引物酶是RNA聚合酶,合成一段RNA引物 (五)(五)DNA连接酶(连接酶(ligase)v催化两段催化两段DNA之间的连接之间的连接35535353HOP DNA ligaseNADATPNMNAMP+PPi+POH

5、P5533+53DNAligaseOOHPOOO-OOHPOOOPP-PPi(一)(一)复制的起始复制的起始(二)(二)复制的延伸复制的延伸(三)(三)复制的终止复制的终止 1.DNA复制的起点 原核生物从一个固定的起始点开始,同时向两个方向进行的,称为双向复制起点起点起点复制复制原核生物原核生物DNA的复制的复制(一)(一)复制的起始复制的起始 2.复制叉的形成复制叉的形成 复制叉复制叉-复制复制开始后由于开始后由于DNA双链解开,在双链解开,在两股单链上进两股单链上进行复制,形成行复制,形成在显微镜下可在显微镜下可看到的叉状结看到的叉状结构。构。拓扑异构酶解链酶单链结合蛋白DNA聚合酶引物

6、酶及引发体DNA连接酶引物领头链随从链冈崎片段55333.起始的过程起始的过程打开打开DNA超螺链超螺链打开双螺旋打开双螺旋防止复螺旋防止复螺旋单链结合蛋白单链结合蛋白解链酶解链酶引物复合体引物复合体引物酶引物酶拓扑异构酶拓扑异构酶合成合成DNA复制起始的过程复制起始的过程拓扑异构酶拓扑异构酶解链酶解链酶单链结合蛋白单链结合蛋白DNA聚合酶聚合酶引物酶及引发体引物酶及引发体DNA连接酶连接酶引物引物DNA双链双链 5 3 5 3拓扑异构酶拓扑异构酶解链酶解链酶单链结合蛋白单链结合蛋白DNA聚合酶聚合酶引物酶及引发体引物酶及引发体DNA连接酶连接酶引物引物DNA复制起始的过程复制起始的过程拓扑异

7、构酶拓扑异构酶与与DNA双链双链结合,解开结合,解开超螺旋。超螺旋。5 3 5 3拓扑异构酶拓扑异构酶解链酶解链酶单链结合蛋白单链结合蛋白DNA聚合酶聚合酶引物酶及引发体引物酶及引发体DNA连接酶连接酶引物引物DNA复制起始的过程复制起始的过程解链酶解开解链酶解开DNA双螺旋双螺旋 5 3 5 3拓扑异构酶拓扑异构酶解链酶解链酶单链结合蛋白单链结合蛋白DNA聚合酶聚合酶引物酶及引发体引物酶及引发体DNA连接酶连接酶引物引物单链结合蛋白单链结合蛋白防止复螺旋防止复螺旋 5 3 5 3DNA复制起始的过程复制起始的过程拓扑异构酶拓扑异构酶解链酶解链酶单链结合蛋白单链结合蛋白DNA聚合酶聚合酶引物酶

8、及引发体引物酶及引发体DNA连接酶连接酶引物引物DNA复制起始的过程复制起始的过程引物酶合成引物引物酶合成引物 5 3 5 3二、二、DNA复制的延伸复制的延伸1.DNA聚合酶把新生链的第一个脱聚合酶把新生链的第一个脱氧核苷酸加到引物的氧核苷酸加到引物的3-OH上,开始上,开始新生链的合成过程。新生链的合成过程。AG T AC T A A T DNA DNA 聚合酶聚合酶ACGACGTT引物引物AG T AC T A A T AGCGACGGTTT T 组成组成 DNA 的脱氧核糖核苷酸一个个连接起来的脱氧核糖核苷酸一个个连接起来3,5-磷酸二酯键磷酸二酯键引物引物AG T AC T A A

9、T GCGACGGTTTTA引物引物AG T AC T A A T GCGACGTTGTTA引物引物AG T AC T A A T GCGACGTGTTAA引物引物AG T AC T A A T GCGACGGTTAA T引物引物AG T AC T A A T GCGACGGTTAA TA引物引物AG T AC T A A T GCGCGGTTAA TA T引物引物AG T AC T A A T GGCGGTTAA TA T C引物引物AG T AC T A A T GGCGGTTAA TA T CDNADNA模板链模板链DNA新链新链引物引物335533553355DNA连接酶3355DNA

10、聚合酶聚合酶DNA聚合酶聚合酶53352.冈崎片段冈崎片段冈崎片段冈崎片段 冈崎用电冈崎用电子显微镜看到了子显微镜看到了DNA复制过程中出现一些复制过程中出现一些不连续片段,这些不不连续片段,这些不连续片段只存在与连续片段只存在与DNA复制叉上其中的复制叉上其中的一股。后来就把这些一股。后来就把这些不连续的片段称为冈不连续的片段称为冈崎片段。崎片段。DNA连接酶3.半不连续复制半不连续复制领头链领头链随从链随从链冈崎片段冈崎片段 5 3 5 3半不连续复制半不连续复制 DNA复复制时制时,一条链是连续的一条链是连续的,另一条链是不连续的另一条链是不连续的,称称为半不连续复制。为半不连续复制。三

11、三 复制的终止复制的终止复制有终止信号复制有终止信号pol 5 3外切酶活性水解引物外切酶活性水解引物pol聚合活性填补空隙聚合活性填补空隙DNA连接酶连接缺口。连接酶连接缺口。领头链领头链随从链随从链冈崎片段冈崎片段 5 3 5 3拓扑异构酶拓扑异构酶解链酶解链酶单链结合蛋白单链结合蛋白DNA聚合酶聚合酶引物酶及引发体引物酶及引发体DNA连接酶连接酶引物引物课堂小结课堂小结四、逆转录四、逆转录1、逆转录:是以、逆转录:是以RNA为模板合成为模板合成DNA的过程。的过程。2、逆转录酶:是一种以、逆转录酶:是一种以RNA为模为模板的板的DNA聚合酶。聚合酶。没有没有3 5外切酶的活性,外切酶的活

12、性,所以没有校对功能,逆转录的所以没有校对功能,逆转录的错配率高。错配率高。突变可分为:突变可分为:自发突变、人工诱变自发突变、人工诱变 突变的意义突变的意义突变是进化、分化的分子基础突变是进化、分化的分子基础只有基因型改变的突变只有基因型改变的突变致死性的突变致死性的突变突变是某些疾病的发病基础突变是某些疾病的发病基础DNA 的损伤也称突变,是指的损伤也称突变,是指DNA分子上分子上 碱基的改变。碱基的改变。二、引发突变的因素二、引发突变的因素 诱变因素 突变类型物理因素 紫外线照射 形成胸腺嘧啶二聚体 离子辐射 打断DNA分子上的共价键化学因素 5-溴尿嘧啶(5-BU)5-BU取代A,并异

13、构成G,结果是A-T配对变 为G-T配对,最后变为C-G配对 羟胺 转换T为C,结果是A-T配对改为C-G配对 亚硝酸盐 使C脱氨成U,原G-C配对变为G-U配对,最 后使G-C变为A-T 氮芥类 使G的N-7烷化后除去,成为无鸟嘌呤的链生物因素 肿瘤病毒 插入宿主细胞基因组中,引起细胞癌变诱变因素及突变类型诱变因素及突变类型三、突变分子改变的类型三、突变分子改变的类型错配错配 (点突变)(点突变)一个碱基改变一个碱基改变缺失、插入和框移突变缺失、插入和框移突变片段插入或缺失片段插入或缺失重排重排较大片段重组或重排较大片段重组或重排四、四、损伤的修复损伤的修复损伤损伤-复制过程中发生的复制过程

14、中发生的DNA突变突变光修复光修复切除修复切除修复重组修复重组修复SOS修复修复(一)光修复(一)光修复 紫外光照射可使相邻的两个紫外光照射可使相邻的两个T 形成二聚体形成二聚体 光修复酶可使二聚体解聚为单体状态,光修复酶可使二聚体解聚为单体状态,DNA完完全恢全恢复正常。光修复酶的激活需复正常。光修复酶的激活需300-600m波长的光。波长的光。NNCH3OORHPHROOCH3NNNNCH3OORHHNNCH3OORPUVTT光修复酶(二)切除修复(二)切除修复参与的酶有参与的酶有 核酸内切酶,核酸内切酶,pol,DNA连接酶连接酶特异核酸内切酶pol DNA连接酶 (三)重组修复重组蛋白

15、RecA,pol,连接酶参与 损伤会保留下去(四)(四)SOS修复修复 DNA损伤面太大,复制难以损伤面太大,复制难以继续。继续。通过通过SOS修复,复制有可能继修复,复制有可能继续,细胞续,细胞 有可能存活,但有可能存活,但SOS修复机修复机制的特异性低,制的特异性低,对碱基的识别、选择能力对碱基的识别、选择能力差、错误多。差、错误多。第二节第二节 RNA RNA的生物合成的生物合成定义:定义:RNA的生物合成就是转录,即以的生物合成就是转录,即以 DNA为模板,在依赖于为模板,在依赖于DNA的的RNA聚合酶聚合酶 的催化下,以的催化下,以4种种NTP(ATP、CTP、GTP 和和UTP为原

16、料,合成为原料,合成RNA的过程。的过程。合成部位:细胞核合成部位:细胞核合成原料:四种合成原料:四种NTP转录特点:转录特点:1、转录单位:启动子、转录单位:启动子 终止子终止子2、不对称转录:两条、不对称转录:两条DNA链不同时链不同时 进行转录的现象。进行转录的现象。编码链或反意义链;模板链或有意义链编码链或反意义链;模板链或有意义链 3、RNA聚合酶:聚合酶:全酶:有全酶:有 5个亚基组成个亚基组成 作用识别启动子,引发作用识别启动子,引发RNA的的 合成。合成。核心酶:不含核心酶:不含亚基,延长亚基,延长RNA链链转录过程:转录过程:转录的起始:转录的起始:RNA的延长:的延长:5

17、3 识别识别解链解链磷酸二酯键的形成磷酸二酯键的形成(ATP、GTP)转录的终止:转录的终止:遇到终止子,遇到终止子,RNA链停止延长,核心酶链停止延长,核心酶脱离,新脱离,新RNA释放。释放。AG T AC T A A T DNADNA的的一条链一条链AGCUGACGGUUU游离的核糖核苷酸游离的核糖核苷酸 (原料)原料)DNA DNA 解旋,以一条链为模板合成解旋,以一条链为模板合成RNARNA细胞核中细胞核中AG T AC T A A T AGCUGACGGUUU DNA与与RNA的碱基互补配对:的碱基互补配对:AU;TA;CG;GCRNA RNA 聚合酶聚合酶细胞核中细胞核中AG T

18、AC T A A T AGCGACGGUUU U 组成组成 RNA 的核糖核苷酸一个个连接起来的核糖核苷酸一个个连接起来细胞核中细胞核中AG T AC T A A T GCGACGGUUU UA细胞核中细胞核中AG T AC T A A T GCGACGUUGU UA细胞核中细胞核中AG T AC T A A T GCGACGUGU UAA细胞核中细胞核中AG T AC T A A T GCGACGGU UAA U细胞核中细胞核中AG T AC T A A T GCGACGGU UAA UA细胞核中细胞核中AG T AC T A A T GCGCGGU UAA UA U细胞核中细胞核中AG T

19、 AC T A A T GGCGGU UAA UA U C细胞核中细胞核中AG T AC T A A T GGCGGU UAA UA U CDNADNA上的遗传信息就传递到上的遗传信息就传递到mRNAmRNA上上mRNAmRNADNADNA细胞核中细胞核中AG T AC T A A T UCAUG A UUAmRNA 细胞质细胞质 细胞核细胞核 核孔核孔DNAmRNAmRNA在细胞核中合成在细胞核中合成AG T AC T A A T UCAUG A UUAmRNA 细胞质细胞质 细胞核细胞核mRNAmRNA通过核孔进入细胞质通过核孔进入细胞质UCAUG A UUAmRNAAG T AC T A

20、 A T UCAUG A UUAmRNA 细胞质细胞质 细胞核细胞核mRNAmRNA通过核孔进入细胞质通过核孔进入细胞质UCAUG A UUAmRNA 第三节第三节 蛋白质的生物合成(翻译)蛋白质的生物合成(翻译)在细胞质中,以mRNA为模板,合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质的过程。RNA在蛋白质合成中的作用:在蛋白质合成中的作用:一、一、mRNA与遗传密码与遗传密码遗传密码:指排列在遗传密码:指排列在DNA或或mRNA链上为蛋链上为蛋 白质氨基酸编码的核苷酸序列。白质氨基酸编码的核苷酸序列。密码子:在密码子:在mRNA分子中从分子中从5 3方向,方向,以以AUG开始,每三个碱基组开始,每三个碱

21、基组 成一组称为三联体,每个三成一组称为三联体,每个三 联体代表一种氨基酸,所以称联体代表一种氨基酸,所以称 之为密码子。之为密码子。UCAUG A UUAmRNA(模板)模板)密码子密码子 密码子密码子 密码子密码子 密码子 mRNA mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基密码子的性质:密码子的性质:1、简并性、简并性(终止密码子终止密码子UAA,UAG,UGA)2、兼职性(起始密码子、兼职性(起始密码子AUG,GUG)3、密码子的连续性、密码子的连续性4、通用性与例外(或半通用性)、通用性与例外(或半通用性)5、阅读方向与、阅读方向与mRNA编码方向一致编

22、码方向一致tRNA与解码系统与解码系统A A UAC UAUG转运转运 RNARNA(tRNA)tRNA)(运载工具)(运载工具)亮氨酸亮氨酸 天冬氨酸天冬氨酸 异亮氨酸异亮氨酸 氨基酸氨基酸(原料)(原料)A A U 亮氨酸亮氨酸AC U天冬氨酸天冬氨酸AUG 异亮氨酸异亮氨酸 tRNA的一端运载着氨基酸的一端运载着氨基酸 反密码子反密码子核糖体与蛋白质的合成场所核糖体与蛋白质的合成场所1、核糖体的结构2、核糖体的功能部位一、氨基酸的活化一、氨基酸的活化氨基酸氨基酸 tRNA+ATP氨基酰氨基酰tRNA合成酶合成酶氨基酰氨基酰tRNAATPPPI肽链合成过程:肽链合成过程:(一)起始:(一)

23、起始:1、形成30S起始复合物2、形成70S起始复合物(二)肽链的延长:(二)肽链的延长:1、进位2、肽键的形成3、移位需延伸因子需延伸因子EF-Tu和和GTP的协助的协助UCAUG A UUAA A U 亮氨酸亮氨酸AC U 天冬氨天冬氨酸酸 核糖体核糖体细胞质中的细胞质中的mRNA 与核糖体与核糖体结合结合.细胞质中细胞质中UCAUG A UUAA A U 亮氨酸亮氨酸AC U 天冬氨天冬氨酸酸 tRNA 上的反密码子与上的反密码子与 mRNA上的密码子互补配对上的密码子互补配对.细胞质中细胞质中UCAUG A UUAA A U 亮氨酸亮氨酸AC U 天冬氨天冬氨酸酸AUG 异亮氨酸异亮氨

24、酸细胞质中细胞质中 tRNA 将氨基酸转运到将氨基酸转运到 mRNA上的上的 相应位置相应位置.UCAUG A UUAA A U 亮氨酸亮氨酸AC U 天冬氨天冬氨酸酸AUG 异亮氨酸异亮氨酸缩合缩合细胞质中细胞质中 两个氨基酸分子缩合两个氨基酸分子缩合UCAUG A UUAA A U 亮氨酸AC U 天冬氨天冬氨酸酸AUG 异亮氨酸异亮氨酸 核糖体随着核糖体随着 mRNA滑动滑动.另一个另一个 tRNA 上的碱基与上的碱基与mRNA上的上的 密码子配对密码子配对.细胞质中细胞质中UCAUG A UUAA A U 亮氨酸AC U 天冬氨天冬氨酸酸AUG 异亮氨酸异亮氨酸 一个个氨基酸分子缩合成

25、链状结构一个个氨基酸分子缩合成链状结构细胞质中细胞质中UCAUG A UUAA A U 亮氨酸AC U 天冬氨酸AUG 异亮氨酸异亮氨酸 tRNA离开,再去转运新的氨基酸离开,再去转运新的氨基酸细胞质中细胞质中UCAUG A UUAAUG 亮氨酸亮氨酸 天冬氨天冬氨酸酸 异亮氨酸异亮氨酸以以mRNAmRNA为模板形成了有一定氨基酸顺序的蛋白质为模板形成了有一定氨基酸顺序的蛋白质 .细胞质中细胞质中(三)合成的终止(三)合成的终止1、当、当mRNA的终止密码子(的终止密码子(UAA、UAG、UGA)出现,终止因子识别)出现,终止因子识别并与之结合,肽链延长停止。并与之结合,肽链延长停止。2、终止

26、因子、终止因子RF1、RF2、RF3与与A位结合,位结合,肽酰转移酶转变为水解活性,使肽酰转移酶转变为水解活性,使tRNA从核糖体释放。从核糖体释放。3、核糖体释放因子、核糖体释放因子RRF,使核糖体从使核糖体从mRNA上释放,在上释放,在IF3作用下,大小亚基分离。作用下,大小亚基分离。合成的特点合成的特点1、每合成一个肽键需消耗、每合成一个肽键需消耗4个高能个高能 磷酸键。磷酸键。2、多聚核糖体:在合成蛋白质时每、多聚核糖体:在合成蛋白质时每 条条mRNA链上可同时连接几个到几链上可同时连接几个到几 十个核糖体,大大提高了蛋白质的十个核糖体,大大提高了蛋白质的 合成效率,这种多聚体称为多聚合成效率,这种多聚体称为多聚 核糖体。核糖体。

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