1、 生物技术、生物科学、生态专业生物技术、生物科学、生态专业 学时数：学时数：6学时学时 制作人：邰丽华制作人：邰丽华 实验内容：实验内容：（一）果蝇的单因子杂交实验（一）果蝇的单因子杂交实验 （二）果蝇的二对因子杂交实验（二）果蝇的二对因子杂交实验 （三）果蝇的连锁互换杂交实验（三）果蝇的连锁互换杂交实验 （四）果蝇的伴性遗传杂交实验（四）果蝇的伴性遗传杂交实验 （五）果蝇的三点测交实验（五）果蝇的三点测交实验 实验目的：实验目的：1、通过实验掌握果蝇的杂交实验方法。、通过实验掌握果蝇的杂交实验方法。2、验证和加深理解遗传定律的原理：、验证和加深理解遗传定律的原理：分离定律分离定律 自由组合定
2、律自由组合定律 连锁互换定律连锁互换定律 伴性遗传规律伴性遗传规律 绘制遗传图的原理。绘制遗传图的原理。3、记录实验结果，掌握统计处理的方法及、记录实验结果，掌握统计处理的方法及 求重组值的方法、绘制遗传图的方法。求重组值的方法、绘制遗传图的方法。实验原理：实验原理：分离定律：分离定律：同源染色体上等位基因的分离同源染色体上等位基因的分离 自由组合定律：自由组合定律：非同源染色体上非等位基因的非同源染色体上非等位基因的 自由组合自由组合 连锁互换定律：连锁互换定律：同源染色体上非等位基因间交换同源染色体上非等位基因间交换 重组重组 伴性遗传：伴性遗传：性性 染色体上的基因遗传行为与性别染色体上
3、的基因遗传行为与性别 有关（有关（F2中正反交结果不同）中正反交结果不同）三点测交：三点测交：连锁基因间的距离与重组值的大小连锁基因间的距离与重组值的大小 有关，则根据重组值可确定基因在有关，则根据重组值可确定基因在 染色体上的位置和排列顺序，从而染色体上的位置和排列顺序，从而 作出连锁图作出连锁图%100)(重组型数目亲组型数目重组型数目重组值 RF 实验材料、用具及试剂：实验材料、用具及试剂：*黑腹果蝇三隐性突变型黑腹果蝇三隐性突变型(w m sn3)X 黑腹果蝇黑檀体突变型黑腹果蝇黑檀体突变型(e)*双筒解剖镜、放大镜、培养瓶、麻醉瓶、双筒解剖镜、放大镜、培养瓶、麻醉瓶、死蝇瓶、白瓷板、
4、毛笔、镊子、烘干箱、死蝇瓶、白瓷板、毛笔、镊子、烘干箱、培养箱培养箱 *乙醚、乙醚、70%乙醇乙醇 实验说明：实验说明：1、单因子实验、单因子实验:P 长翅长翅+残翅残翅 vg vg F1 长翅长翅 +vg F2 1+:2+vg:1 vg vg(长长:残残=3:1)2、二对因子实验：、二对因子实验：P 黑檀体黑檀体 +ee vg vg+残翅残翅 F1 野生型野生型+e vg+F2 野生型野生型 ：黑檀体：黑檀体 ：残翅：残翅 ：黑檀体、残翅：黑檀体、残翅 9 ：3 ：3 ：1 3、连锁互换实验：连锁互换实验：P 黑体黑体 +b/+b vg+/vg+残翅残翅 F1 野生型野生型+b/vg+b v
5、g/b vg 野生型野生型 ：黑体：黑体 ：残翅：残翅 ：黑体、残翅：黑体、残翅 亲组型重组型亲组型重组型 交换交换重组重组 4、伴性遗传实验：、伴性遗传实验：正交：正交：P P 红眼红眼 X X+X X+白眼白眼X Xw wY Y F F1 1 红眼红眼 X X+X Xw w 、X X+Y Y（、）F F2 2 X X+X X+:X X+X Xw w :X X+Y:Y:X Xw wY Y 红眼：白眼红眼：白眼 =3 =3 ：1 1 雌性：雄性雌性：雄性 =1 =1 ：1 1%100)(重组型数目亲组型数目重组型数目重组值 RF 反交：反交：P P 白眼白眼X Xw wX Xw w 红眼红眼
6、X X+Y Y F F1 1 红眼红眼 X X+X Xw w 、白眼白眼X Xw w Y Y F F2 2 X X+X Xw w:X Xw w X Xw w:X X+Y:Y:X Xw wY Y 红眼：白眼红眼：白眼 =1 =1 ：1 1 雌性：雄性雌性：雄性 =1 =1 ：1 1 正反交结果不同正反交结果不同 5 5、三点测验、三点测验 P P 三隐性三隐性 w m snw m sn3 3 +野生型野生型 w m snw m sn3 3 F F1 1 w m sn w m sn3 3 w m sn w m sn3 3 +测交后代：测交后代：w m snw m sn3 3 +m snm sn3
7、3 w+snw+sn3 3 w m+w m+w+m+sn +w+m+sn3 3 根据测交后代根据测交后代8 8种表现型的相对频率可计算重组值，种表现型的相对频率可计算重组值，并确定基因排列顺序。并确定基因排列顺序。6 6、新的实验设计、新的实验设计 选用适当的果蝇突变品系作亲本，在一次杂交实选用适当的果蝇突变品系作亲本，在一次杂交实 验中包括并完成相关的验中包括并完成相关的5 5个果蝇杂交实验个果蝇杂交实验 正交：正交：P P 黑檀体黑檀体 e +e +w m sn+w m sn3 3三隐性三隐性 e +e +F F1 1 +w m sn+w m sn3 3 e +e +e +e +F F2
8、2 反交：反交：P P 三隐性三隐性+w m sn+w m sn3 3 e +e +黑檀体黑檀体 +w m sn+w m sn3 3 e e F F1 1 +w m sn+w m sn3 3 +w m sn+w m sn3 3 e +e e +e F F2 2 在在F F1 1的杂交中：的杂交中：对对e e基因（基因（）F F1 1自交自交 对对w m snw m sn3 3（X X）基因基因 F F1 1测交测交 实验步骤：实验步骤：1、分别培养三隐性和黑檀体果蝇，从子代中分、分别培养三隐性和黑檀体果蝇，从子代中分 别挑选出处女蝇和雄果蝇。别挑选出处女蝇和雄果蝇。2、三隐性和黑檀体果蝇进行正
9、反交，、三隐性和黑檀体果蝇进行正反交，23培养。培养。3、78天后移去亲本，待天后移去亲本，待F F1 1成蝇出来后观察记成蝇出来后观察记 录录F F1 1的性状。正反交产生的的性状。正反交产生的F F1 1不必挑处女蝇。不必挑处女蝇。4、将、将F F1 1雌雄果蝇进行自交（反交实际上是测交）雌雄果蝇进行自交（反交实际上是测交），把，把20 30对雌雄果蝇放到新的培养瓶中（对雌雄果蝇放到新的培养瓶中（正反交各正反交各5瓶，每瓶瓶，每瓶5 6对对)，23培养。培养。5、78天后移去天后移去F F1 1，待，待F F2 2成蝇出来后观察性成蝇出来后观察性 状，并记录统计数量（观察的性状为：眼色、状
10、，并记录统计数量（观察的性状为：眼色、翅形、刚毛、体色），连续统计翅形、刚毛、体色），连续统计8 10天。天。要求至少各统计要求至少各统计250只果蝇。只果蝇。实验结果的统计处理：实验结果的统计处理：待待F F1 1或或F F2 2成蝇开始出现后，检查其性状，将结果成蝇开始出现后，检查其性状，将结果 填入表填入表1和表和表2。表表1 1 F F1 1表型观察统计表表型观察统计表 表型表型 正交后代数目正交后代数目 反交后代数目反交后代数目 体、眼、刚毛、翅体、眼、刚毛、翅 合计合计 合计合计 灰、红、直、灰、红、直、长长 灰、白、焦、灰、白、焦、小小 表表 F F2 2表型观察统计表表型观察统
11、计表表型表型 正交正交F F2 2数目反交数目反交F F2 2数目数目（测交后代）（测交后代）合计合计 合计合计w sn mw sn m sn msn m w w w w m m snsn w sn w sn m m表表 F F2 2表型观察统计表（续表）表型观察统计表（续表）表型表型 正交正交F F2 2数目反交数目反交F F2 2数目数目（测交后代）（测交后代）合计合计 合合计计 9 9e e1010e w sn me w sn m1111e e sn m sn m1212e w e w 1313e we w m m1414e e sn sn 1515e w sn e w sn 1616e
12、 e m m 实验结果的分析：实验结果的分析：1、分离规律的验证、分离规律的验证 考虑常染色体上一对等位基因（考虑常染色体上一对等位基因（+e）所控所控 制的灰体和黑檀体这一对相对性状的杂交结果。制的灰体和黑檀体这一对相对性状的杂交结果。F F1 1的观察结果：体色的观察结果：体色灰体灰体/黑檀体黑檀体 F F2 2的观察结果：的观察结果：表表3 3 F F2 2表型观察统计表表型观察统计表 表表 型型 正交后代数目正交后代数目 反交后代数目反交后代数目 体体 色色 合计合计 合计合计 灰灰 体体 黑檀体黑檀体 F F2 2的表型产生的表型产生3 3：1 1的分离的分离 对实验结果（正反交）进
13、行对实验结果（正反交）进行2 2测验测验 2、自由组合规律的验证、自由组合规律的验证 只考虑正交实验中体色（只考虑正交实验中体色（ee+)和翅形（和翅形（+mm)两对相对性状的杂交结果。两对相对性状的杂交结果。F F1 1的观察结果：体色和翅形的观察结果：体色和翅形 F F2 2的观察结果：的观察结果：表表4 4 F F2 2表型观察统计表表型观察统计表 表表 型型 正正 交交 后后 代代 数数 目目 体色、翅形体色、翅形 合合 计计 灰体、长翅灰体、长翅 黑檀体、长翅黑檀体、长翅 灰体、小翅灰体、小翅 黑檀体、小翅黑檀体、小翅 F F2 2产生产生9 9：3 3：3 3：1 1的自由组合表型
14、比的自由组合表型比 对实验结果（正交）进行对实验结果（正交）进行2 2测验测验 3、连锁互换规律的验证、连锁互换规律的验证 只考虑反交实验中复眼颜色（只考虑反交实验中复眼颜色（+/w)和翅形（和翅形（+/m)两对相对性状的杂交结果。控制这两对性状的基两对相对性状的杂交结果。控制这两对性状的基 因均在因均在X染色体上，是连锁遗传。染色体上，是连锁遗传。F F1 1的观察结果：复眼颜色和翅形的观察结果：复眼颜色和翅形 表表5 5 F F1 1表型观察统计表表型观察统计表 表表 型型 反反 交交 后后 代代 数数 目目 复眼颜色、翅形复眼颜色、翅形 合合 计计 红眼、长翅红眼、长翅 白眼、小翅白眼、
15、小翅 F F2 2的观察结果：的观察结果：表表6 6 F F2 2表型观察统计表表型观察统计表 表表 型型 反反 交交 后后 代代 数数 目目 复眼颜色、翅形复眼颜色、翅形 合合 计计 红眼、长翅红眼、长翅 红眼、小翅红眼、小翅 白眼、长翅白眼、长翅 白眼、小翅白眼、小翅 F F2 2中：亲组合中：亲组合50%50%重组合重组合50%50%用重组值公式计算用重组值公式计算w和和m两个基因间的重组值和图距两个基因间的重组值和图距 4、伴性遗传规律的验证、伴性遗传规律的验证 考虑考虑X染色体上一对等位基因（染色体上一对等位基因（+w）所控制所控制 的红眼和白眼这一对相对性状的杂交结果。的红眼和白眼
16、这一对相对性状的杂交结果。F F1 1的观察结果：复眼的颜色的观察结果：复眼的颜色 表表7 7 F F1 1表型观察统计表表型观察统计表 表表 型型 正交后代数目正交后代数目 反交后代数目反交后代数目 复眼颜色复眼颜色 合计合计 合计合计 红红 眼眼 白白 眼眼 F F1 1中正反交的结果不同中正反交的结果不同 F F2 2的观察结果：的观察结果：表表8 8 F F2 2表型观察统计表表型观察统计表 表表 型型 正交后代数目正交后代数目 反交后代数目反交后代数目 复眼颜色复眼颜色 合计合计 合计合计 红红 眼眼 白白 眼眼 F F2 2中：中：正交正交 红眼：白眼红眼：白眼=3=3：1 1（都
17、是红眼，（都是红眼，一半红眼、一半白眼）一半红眼、一半白眼）反交反交 红：红：白：白红：红：白：白 =1 =1：1 1：1 1：1 1 对实验结果（正反交）进行对实验结果（正反交）进行2 2测验测验 5、三点测交分析、三点测交分析 考虑反交实验中复眼颜色（考虑反交实验中复眼颜色（+/w)、翅形（翅形（+/m)和焦刚毛（和焦刚毛（+/sn）三对相对性状的杂交结果。控三对相对性状的杂交结果。控 制这三对性状的基因均在制这三对性状的基因均在X染色体上，是连锁遗传。染色体上，是连锁遗传。F F1 1的观察结果：复眼颜色、翅形和刚毛的观察结果：复眼颜色、翅形和刚毛 表表9 9 F F1 1表型观察统计表
18、表型观察统计表 表表 型型 反反 交交 后后 代代 数数 目目 眼、翅、刚毛眼、翅、刚毛 合合 计计 红眼、长翅、直刚毛红眼、长翅、直刚毛 白眼、小翅、焦刚毛白眼、小翅、焦刚毛 反交中反交中F F1 1的自交就是测交的自交就是测交 F F2 2的观察结果：的观察结果：表表10 10 三点测交的三点测交的F F2 2表型观察统计表表型观察统计表 表表 型型 反反 交交 后后 代代 数数 目目 眼、翅、刚毛眼、翅、刚毛 合合 计计 w sn mw sn m w w sn msn m snsn w w m m m m w sn w sn 判断判断w、m和和snsn三个基因的排列顺序，计算三个基三个基
19、因的排列顺序，计算三个基因间的重组值和图距，用并发率测定干涉的大小因间的重组值和图距，用并发率测定干涉的大小 作业：作业：按实验指导的要求，在表格中填写实验结果，按实验指导的要求，在表格中填写实验结果，统计各种实验数据，进行统计各种实验数据，进行2 2测验、计算重组值、作测验、计算重组值、作 图。图。分离规律分离规律进行进行2 2测验（正反交）测验（正反交）自由组合规律自由组合规律进行进行2 2测验（正交）测验（正交）连锁互换规律连锁互换规律计算重组值、作图（反交）计算重组值、作图（反交）伴性遗传规律伴性遗传规律进行进行2 2测验（正反交）测验（正反交）三点测交三点测交计算重组值、并发率、作图（反交）计算重组值、并发率、作图（反交）
