1、血培养采集的方法及注意事项文档ppt血培养的概念血培养的概念u血血培养是一项实验室检查，是采集患者血液标本并接种到培养瓶，用培养是一项实验室检查，是采集患者血液标本并接种到培养瓶，用以发现、识别导致患者感染的病原微生物以发现、识别导致患者感染的病原微生物u是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法u对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义血培养的目的血培养的目的u 证实有感染性的病原体证实有感染性的病原体u 鉴定病原体，鉴定病原体，做药敏试验做药敏试验u 指导抗菌药物的使用指导抗菌药物的使用能
2、够更好的帮助医生合理用药，减少患者的死亡率能够更好的帮助医生合理用药，减少患者的死亡率目前血培养存在的主要问题-医生血培养重视程度不够，送检率低血培养重视程度不够，送检率低u 血培养用处不大，治疗费用增加，有指征不送检血培养用处不大，治疗费用增加，有指征不送检u 血培养时间长，不能适应临床需求血培养时间长，不能适应临床需求u 只做需氧培养，不同时做厌氧培养，病原菌检出率低只做需氧培养，不同时做厌氧培养，病原菌检出率低目前血培养存在的主要问题-检验员u血培养检测运输标准及接收标准不规范血培养检测运输标准及接收标准不规范 应室温储存的却低温储存应室温储存的却低温储存 标本没有及时检验，导致微生物检
3、测延迟标本没有及时检验，导致微生物检测延迟 实验室人员没有认真核查接收标本（采血量不够、培养瓶有破损等）实验室人员没有认真核查接收标本（采血量不够、培养瓶有破损等）u血培养阳性结果的处理不够及时血培养阳性结果的处理不够及时 没有及时将结果反馈给临床没有及时将结果反馈给临床“时间就是生命时间就是生命”目前血培养存在的主要问题-护理人员u 采血消毒不够严格，导致污染率偏高采血消毒不够严格，导致污染率偏高 皮肤皮肤消毒不够严格消毒不够严格 培养瓶的消毒问题培养瓶的消毒问题u 不规范的血培养不规范的血培养 采血量、采血时间、采血套数不符合规范采血量、采血时间、采血套数不符合规范 不规范的血培养导致病原
4、菌分离率低不规范的血培养导致病原菌分离率低 难以判断病原菌是污染造成还是感染造成的难以判断病原菌是污染造成还是感染造成的u标本没有及时送检，导致检测延迟标本没有及时送检，导致检测延迟血培养标本如何采集？血培养临床实践指南血培养临床实践指南nCLSI是美国【临床实验室标准化协会】的英文缩写，英文名为Clinical and Laboratory Standards Instituten美国CLSI的抗微生物药物敏感性试验操作方法和判断标准，是国内临床细菌检验遵循的标准。由于制订该项标准需要投入大量的人力、财力和物力，所以大多数国家包括中国都还没有建立自己的标准而依赖CLSI的方法和标准nCLSI
5、标准每年更新关键要点u采血指征采血指征u采血时间采血时间u采血套数采血套数u采血次数采血次数u接种血量接种血量u消毒灭菌消毒灭菌采血指征u不明原因的发热(38)或体温过低(36)u白细胞增多（10109/L），粒细胞减少（1.0109/L）u休克，寒颤u严重的局部感染(脑膜炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、感染)u心率异常加快u低血压或高血压u呼吸频率加快(20次/分或CO2分压32mmHg)怀疑血流感染时要做血培养怀疑血流感染时要做血培养发热发热要做血培养！要做血培养！03060时间(分钟)体温体温细菌浓度细菌浓度采血时间采集血培养时间的重要性采集血培养时间的重要性?9%+14%+9%+11%+
6、发热高峰前发热高峰前12-2.5小时小时发热高峰前发热高峰前2.5-0.5小时小时发热高峰期间发热高峰期间发热高峰后发热高峰后1-12小时小时166 病人病人105 病人病人199 病人病人258 病人病人Thomson et al.1991.ASCP.Mayo Clinic StudyMayo Clinic Study采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床90以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染证实有感染性的病原体洗必泰作用时间：1min推荐使用碘酊、碘伏或洗必泰作为皮肤消毒剂血培养检测运输标准及接收标准不规范采集1套无法判断是病原菌还是污染菌血培养用处不大，治疗费用增加，有指征不送检采血量不足
7、时应优先保证需氧瓶，因临床90以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染采集血培养时间的重要性?2007;40:445-449细菌是干死的，不是淹死的定植细菌“污染”血培养每次采集血液标本前一定要洗手23套血培养，有助于污染的判断皮肤消毒程序（三步法）不明原因的发热(38)或体温过低(36)血培养采集的方法及注意事项文档ppt70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒（但不能用于少于2个月婴儿皮肤消毒）采集标本前：室温保存，不需冷藏，更不能冷冻采血时间u在应用抗菌药物之前u如果患者已经应用抗菌药物治疗，应该在下一次用药之前采集血培养采血套数基本概念基本概念u成人成人“一套一套”血培养包括：需氧瓶和厌氧瓶各一
8、个血培养包括：需氧瓶和厌氧瓶各一个 注意：一次穿刺采血，算注意：一次穿刺采血，算“一套一套”，采集第二套应从另一，采集第二套应从另一穿刺穿刺点获得点获得u“双瓶双侧双瓶双侧”，是指从一个部位采血接种一套培养瓶，再从另，是指从一个部位采血接种一套培养瓶，再从另一部位一部位 采血接种另一套培养瓶，一次静脉采血注入到多个培养瓶中应采血接种另一套培养瓶，一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单视为单 个血培养个血培养u儿童一般只做需氧培养，特殊患者才考虑厌氧培养儿童一般只做需氧培养，特殊患者才考虑厌氧培养采血套数指南中强调：血培养至少送指南中强调：血培养至少送2 2套套u除外新生儿外，成人：任何时候，不
9、能只送一瓶！除外新生儿外，成人：任何时候，不能只送一瓶！2 23 3套血培养，有助于污染的判断套血培养，有助于污染的判断污染菌污染菌致病菌致病菌？采集采集1套无法判套无法判断是病原菌还断是病原菌还是污染菌是污染菌 血培养套数与阳性检出率（）血培养套数与阳性检出率（）65809699Weinstein et al.Detection of Bloodstream Infections in Adults:How Many Weinstein et al.Detection of Bloodstream Infections in Adults:How Many BloodCultures Are
10、 Needed J Clin Microbiol.2007;45:3546-3548BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol.2007;45:3546-3548血培养套数与检测灵敏度（）血培养套数与检测灵敏度（）u这些研究中，使用这些研究中，使用“配对需氧配对需氧/厌氧血培养瓶厌氧血培养瓶”比用比用“两个需氧两个需氧血培养瓶血培养瓶”能检出更多的金葡、肠杆菌科细菌和厌氧菌能检出更多的金葡、肠杆菌科细菌和厌氧菌u推荐常规血培养要包括配对的需氧推荐常规血培养要包括配对的需氧/厌氧血培养瓶厌氧血培养瓶CLSI 2007 M47-A厌氧瓶平均报阳时间快于需氧瓶
11、h厌氧瓶检出致病菌时间更短同样检出致病菌，BACTEC平均检测时间比Bact/Alert少少4.36小时小时Zadroga R et al.Clin Infect Dis.2013;56:790-797厌氧瓶、需氧瓶互相补充：提高检出率厌氧瓶、需氧瓶互相补充：提高检出率J Microbiol Immunol Infect.2007;40:445-449采血次数u对怀疑菌血症、真菌血症的患者，推荐同时或短时间内（对怀疑菌血症、真菌血症的患者，推荐同时或短时间内（10分钟内）分钟内）从不同部位（如双臂）采集从不同部位（如双臂）采集 23 套血培养标本，套血培养标本，做到做到“双瓶双侧双瓶双侧”，如
12、有必要可同时从下肢静脉采血接种第三套培养瓶，如有必要可同时从下肢静脉采血接种第三套培养瓶，采血后的采血后的 2 5 天内不需要重复采集血培养天内不需要重复采集血培养 u急性心内膜炎：急性心内膜炎：30分钟内完成分钟内完成3套血培养的采集，如果套血培养的采集，如果24小时内报告小时内报告阴性，则继续采集阴性，则继续采集2套血培养套血培养u亚急性心内膜炎：每间隔亚急性心内膜炎：每间隔30分钟至分钟至1h采集采集1套，连续采集套，连续采集3套标本，如套标本，如果果24小时内报告阴性，则继续采集小时内报告阴性，则继续采集2套血培养套血培养接种血量采血量与检出率的关系血量每增加1毫升，成年人菌血症阳性检
13、出率增加3 但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素），所以血液与肉汤的最佳比例为和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素），所以血液与肉汤的最佳比例为1：41：10接种血量u成人一套标本（需氧厌氧成人一套标本（需氧厌氧2个培养瓶），每瓶个培养瓶），每瓶810ml，共，共20ml，双侧双瓶即，双侧双瓶即40mlu婴幼儿推荐的采血量应少于患儿总血容量的婴幼儿推荐的采血量应少于患儿总血容量的 1%，每，每瓶不少于瓶不少于2mlu采血量不足时应优先保证需氧瓶，因
14、临床采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床90以上的以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染感染为需氧菌或兼性需氧菌感染 利用瓶身刻度准确采血规范采集血培养标本无菌操作：无菌操作：污染率的指标是3%u手卫生手卫生u皮肤消毒皮肤消毒u培养瓶的消毒培养瓶的消毒怀疑导管相关性血流感染时血培养的采集采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室同样检出致病菌，BACTEC平均检测时间比Bact/Alert少4.采集血培养时间的重要性?血培养用处不大，治疗费用增加，有指征不送检无菌操作：污染率的指标是3%采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室Clin Infect Dis 2004;39:3
15、33婴幼儿推荐的采血量应少于患儿总血容量的 1%，每瓶不少于2ml洗必泰作用时间：1min皮肤消毒程序（三步法）白细胞增多（10109/L），粒细胞减少（1.Weinstein et al.采集1套无法判断是病原菌还是污染菌Weinstein et al.洗必泰作用时间：1min血培养套数与检测灵敏度（）婴幼儿推荐的采血量应少于患儿总血容量的 1%，每瓶不少于2ml怀疑导管相关性血流感染时血培养的采集标志，另外的1套则从导管中心或硅酮隔膜无菌采获，两个来源的鉴定病原体，做药敏试验u每次采集血液标本前一定要洗手每次采集血液标本前一定要洗手u使用使用3-5ml抗菌皂液抗菌皂液u保证所有手部皮肤接触
16、皂液的时间保证所有手部皮肤接触皂液的时间超过超过15秒秒u注意指尖及指甲内侧注意指尖及指甲内侧u不要遗忘拇指不要遗忘拇指u纸巾干手并勿用手直接关闭水笼头纸巾干手并勿用手直接关闭水笼头你的手真得洗干净了吗？你的手真得洗干净了吗？严格执行手卫生严格执行手卫生皮肤凝固酶阴性葡萄球菌定植于输液管皮肤凝固酶阴性葡萄球菌定植于输液管严格执行皮肤消毒程序严格执行皮肤消毒程序定植细菌定植细菌“污染污染”血培养血培养u推荐使用碘推荐使用碘酊酊、碘伏碘伏或或洗必泰洗必泰作为皮肤消毒剂作为皮肤消毒剂u 碘碘酊酊作用时间：作用时间：1min1minu 碘伏作用时间：碘伏作用时间：1.5-2min1.5-2min u
17、洗必泰作用时间：洗必泰作用时间：1min1min （但不能用于少于（但不能用于少于2 2个月婴儿皮肤消毒）个月婴儿皮肤消毒）皮肤消毒皮肤消毒70%70%乙醇擦拭静脉穿刺部位，待干乙醇擦拭静脉穿刺部位，待干30秒秒1-2%1-2%碘酊碘酊3030秒或秒或10%10%碘伏消毒碘伏消毒6060秒，秒，从穿刺点向外画圈消毒从穿刺点向外画圈消毒,直径直径1.5-2cm1.5-2cm用用70%70%乙醇消毒乙醇消毒 6060秒（脱碘），待酒秒（脱碘），待酒精挥发干燥后采血精挥发干燥后采血细菌是细菌是死的死的，不是不是死的死的皮肤消毒程序（三步法）皮肤消毒程序（三步法）培养瓶的消毒程序培养瓶的消毒程序去掉培
18、养瓶口的塑料瓶盖70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒自然待干将标本注入培养瓶内5.颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝集 （儿童采血量少，更应注意颠倒混匀）细菌是细菌是死的死的，不是不是蝶翼针采血程序1皮肤消毒2 培养瓶消毒3 标注采血量4 准备采血针5 静脉穿刺6 负压采血血培养采血注意事项u血培养建议从外周静脉采血，不建议采动脉血血培养建议从外周静脉采血，不建议采动脉血u常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置取血常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置取血u注射器采血注射器采血，采好后注入血培养瓶之前采好后注入血培养瓶之前不不需要更换针头需要更换针头u标本采集部位标本采集部位：从两侧上肢静脉采血
19、：从两侧上肢静脉采血“双瓶双侧双瓶双侧”，必要时从下肢，必要时从下肢静脉采血做第三套血培养静脉采血做第三套血培养u采采多多种血液标本种血液标本时一定最先采集血培养标本时一定最先采集血培养标本u 无需保留的：从独立的外周静脉采集2套血培养，无菌状态下取出导管 并剪下5cm导管尖端或近心端于无菌试管内送实验室进行培养u 需要保留的：采取至少2套血培养，其中至少1套来自外周静脉，并做好 标志，另外的1套则从导管中心或硅酮隔膜无菌采获，两个来源的 采血时间必须接近（5min），各自做好标记怀疑导管相关性血流感染时血培养的采集怀疑导管相关性血流感染时血培养的采集培养瓶的储存与送检u采集标本前：室温保存，
20、采集标本前：室温保存，不需冷藏，更不能冷冻不需冷藏，更不能冷冻u采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室 温，不能置于冰箱或温箱温，不能置于冰箱或温箱Weinstein et al.采集血培养时间的重要性?怀疑血流感染时要做血培养需要保留的：采取至少2套血培养，其中至少1套来自外周静脉，并做好难以判断病原菌是污染造成还是感染造成的婴幼儿推荐的采血量应少于患儿总血容量的 1%，每瓶不少于2ml对怀疑菌血症、真菌血症的患者，推荐同时或短时间内（10分钟内）从不同部位（如双臂）采集 23 套血培养标本，做到“双瓶双侧”，如有必要可同时从
21、下肢静脉采血接种第三套培养瓶，采血后的 2 5 天内不需要重复采集血培养注射器采血，采好后注入血培养瓶之前不需要更换针头洗必泰作用时间：1min不规范的血培养导致病原菌分离率低保证所有手部皮肤接触皂液的时间超过15秒Mayo Clinic StudyCockerill,CID 2004碘酊作用时间：1min需要保留的：采取至少2套血培养，其中至少1套来自外周静脉，并做好注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套应从另一穿刺点获得23套血培养，有助于污染的判断婴幼儿推荐的采血量应少于患儿总血容量的 1%，每瓶不少于2ml白细胞增多（10109/L），粒细胞减少（1.难以判断病原菌是污染造成还是感
22、染造成的对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义听聆谢感（但不能用于少于2个月婴儿皮肤消毒）目前血培养存在的主要问题-医生厌氧瓶检出致病菌时间更短血培养采集的方法及注意事项文档pptZadroga R et al.厌氧瓶检出致病菌时间更短纸巾干手并勿用手直接关闭水笼头洗必泰作用时间：1min同样检出致病菌，BACTEC平均检测时间比Bact/Alert少4.怀疑导管相关性血流感染时血培养的采集In this study,use of paired aerobic/anaerobic blood culture bottles yielded more staphylococci,m
23、embers of the family Enterobacteriaceae,and anaerobes when compared to paired aerobic blood culture bottles.Tokars,JI.洗必泰作用时间：1min怀疑导管相关性血流感染时血培养的采集对怀疑菌血症、真菌血症的患者，推荐同时或短时间内（10分钟内）从不同部位（如双臂）采集 23 套血培养标本，做到“双瓶双侧”，如有必要可同时从下肢静脉采血接种第三套培养瓶，采血后的 2 5 天内不需要重复采集血培养实验室人员没有认真核查接收标本（采血量不够、培养瓶有破损等）难以判断病原菌是污染造成还是感
24、染造成的采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室Cockerill,CID 2004对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义血培养重视程度不够，送检率低急性心内膜炎：30分钟内完成3套血培养的采集，如果24小时内报告阴性，则继续采集2套血培养23套血培养，有助于污染的判断BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol.证实有感染性的病原体无菌操作：污染率的指标是3%保证所有手部皮肤接触皂液的时间超过15秒2007;45:3546-3548婴幼儿推荐的采血量应少于患儿总血容量的 1%，
25、每瓶不少于2ml采集血培养时间的重要性?目前血培养存在的主要问题-检验员同样检出致病菌，BACTEC平均检测时间比Bact/Alert少4.怀疑导管相关性血流感染时血培养的采集碘酊作用时间：1min能够更好的帮助医生合理用药，减少患者的死亡率厌氧瓶检出致病菌时间更短2013;56:790-797厌氧瓶平均报阳时间快于需氧瓶70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol.亚急性心内膜炎：每间隔30分钟至1h采集1套，连续采集3套标本，如果24小时内报告阴性，则继续采集2套血培养Weinstein et al.23套血培养，有
26、助于污染的判断采血消毒不够严格，导致污染率偏高Cockerill,CID 2004为何要送厌氧血培养瓶？由于制订该项标准需要投入大量的人力、财力和物力，所以大多数国家包括中国都还没有建立自己的标准而依赖CLSI的方法和标准J Microbiol Immunol Infect.怀疑导管相关性血流感染时血培养的采集对怀疑菌血症、真菌血症的患者，推荐同时或短时间内（10分钟内）从不同部位（如双臂）采集 23 套血培养标本，做到“双瓶双侧”，如有必要可同时从下肢静脉采血接种第三套培养瓶，采血后的 2 5 天内不需要重复采集血培养温，不能置于冰箱或温箱呼吸频率加快(20次/分或CO2分压32mmHg)血
27、培养重视程度不够，送检率低2007;45:3546-354870%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒你的手真得洗干净了吗？如果患者已经应用抗菌药物治疗，应该在下一次用药之前采集血培养Weinstein et al.对怀疑菌血症、真菌血症的患者，推荐同时或短时间内（10分钟内）从不同部位（如双臂）采集 23 套血培养标本，做到“双瓶双侧”，如有必要可同时从下肢静脉采血接种第三套培养瓶，采血后的 2 5 天内不需要重复采集血培养血培养套数与检测灵敏度（）70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒无菌操作：污染率的指标是3%并剪下5cm导管尖端或近心端于无菌试管内送实验室进行培养推荐使用碘酊、碘伏或洗必泰作为
28、皮肤消毒剂Cockerill,CID 2004血培养时间长，不能适应临床需求采集1套无法判断是病原菌还是污染菌Cockerill,CID 2004采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室同样检出致病菌，BACTEC平均检测时间比Bact/Alert少4.血培养时间长，不能适应临床需求怀疑导管相关性血流感染时血培养的采集为何要送厌氧血培养瓶？When less than the recommended volume of blood is drawn for culture,the blood should be inoculated into the aerobic vial fi
29、rst;any remaining blood should then be inoculated into the anaerobic vial.但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素），所以血液与肉汤的最佳比例为1：41：10厌氧瓶检出致病菌时间更短When less than the recommended volume of blood is drawn for culture,the blood should be inoculated into the aerobic vial first;any remaining blood should then be inoculated into the anaerobic vial.急性心内膜炎：30分钟内完成3套血培养的采集，如果24小时内报告阴性，则继续采集2套血培养颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝集 （儿童采血量少，更应注意颠倒混匀）采集标本前：室温保存，不需冷藏，更不能冷冻谢谢观看！
