1、兽医微生物与免疫学兽医微生物与免疫学第一单元第一单元 细菌的结构与生理细菌的结构与生理l 细菌的基本结构细菌的基本结构l 细菌的形态细菌的形态l 细菌的特殊结构细菌的特殊结构l 细菌的染色方法细菌的染色方法l 细菌的生长繁殖细菌的生长繁殖l 细菌的代谢细菌的代谢l 细菌的人工培养细菌的人工培养第第1节节 细菌的形态细菌的形态l一、细菌的个体形态一、细菌的个体形态细菌的各种形态示意图及电镜照片细菌的各种形态示意图及电镜照片球菌球菌杆菌杆菌螺形菌螺形菌螺旋体螺旋体l 球菌球菌（coccus）双球菌双球菌（Diplococcus）链球菌链球菌（Streptococcus）葡萄球菌葡萄球菌（Staph
2、ylococcus）四联球菌四联球菌（tetracoccus）八叠球菌八叠球菌（sarcina）l 杆菌杆菌（bacillus）l 螺形菌螺形菌（spiral bacterium）二、细菌的群体形态二、细菌的群体形态菌落菌落l 细菌在人工培养基中以菌落形式出现。在适宜的细菌在人工培养基中以菌落形式出现。在适宜的固体培养基中，经一定的时间培养，细菌在培养固体培养基中，经一定的时间培养，细菌在培养基表面或内部分裂增殖形成大量菌体细胞，形成基表面或内部分裂增殖形成大量菌体细胞，形成肉眼可见的、有一定形态的独立群体，称为菌落。肉眼可见的、有一定形态的独立群体，称为菌落。基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质
3、和核质等基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等第第2节节 细菌的基本结构细菌的基本结构壁磷壁酸OMP（脂蛋白）OMP（微孔蛋白）OMP表 层 蛋白肽聚糖LPS细胞壁细胞膜外膜细胞膜周质间隙A 革兰阳性菌革兰阳性菌 B 革兰阴性菌革兰阴性菌细菌细胞壁结构模式图（据细菌细胞壁结构模式图（据Salyers等）等）膜磷壁酸一、细胞壁一、细胞壁细胞壁细胞壁革兰阳性菌革兰阳性菌革兰阴性菌革兰阴性菌强度强度较坚韧较坚韧较疏松较疏松厚度厚度20-80nm20-80nm10-15nm10-15nm肽聚糖层数肽聚糖层数可多达可多达560560层层1-21-2层层肽聚糖含量肽聚糖含量占细胞壁干重占细胞壁干重50%
4、-80%50%-80%占细胞壁干重占细胞壁干重5%-20%5%-20%磷壁酸磷壁酸有有无无外膜外膜无无有有G+菌与菌与G-菌细胞壁的比较菌细胞壁的比较二、细胞膜二、细胞膜为于细胞壁内紧包细胞质，结构与真核细胞基本相同。为于细胞壁内紧包细胞质，结构与真核细胞基本相同。为脂层双层结构。为脂层双层结构。功功能能分泌呼吸分泌呼吸跨膜蛋白跨膜蛋白脂质双层脂质双层物质转运物质转运生物合成生物合成三、细胞质三、细胞质 细胞膜包裹的溶胶状物质细胞膜包裹的溶胶状物质 有水、蛋白质、脂类、核酸及少量糖和无机盐组成有水、蛋白质、脂类、核酸及少量糖和无机盐组成细胞质内含有许多重要结构细胞质内含有许多重要结构,常见有常
5、见有核糖体核糖体质粒质粒胞质颗粒胞质颗粒与真核细胞不同，抗菌素作用部位染色体外遗传物质，与遗传变异有关异染颗粒等，可鉴别细菌四、核体四、核体l是细菌的染色体，由裸露的双链是细菌的染色体，由裸露的双链DNADNA堆积而堆积而成，无核膜和核仁，又称拟核。成，无核膜和核仁，又称拟核。第第3节节 细菌的特殊结构细菌的特殊结构l某些细菌在一定条件下可形在一些特殊某些细菌在一定条件下可形在一些特殊结构，如结构，如鞭毛鞭毛、菌毛菌毛、荚膜荚膜和和芽孢芽孢等。等。肺炎链球菌肺炎链球菌荚荚 膜膜 是某些细菌在细胞壁外是某些细菌在细胞壁外包绕的一层黏液样物质包绕的一层黏液样物质l 化学组成化学组成多糖或多肽l 功
6、能：功能：抗吞噬作用粘附作用抗有害物质损伤作用炭疽杆菌炭疽杆菌鞭鞭 毛毛化学组成：化学组成：功能：功能：鞭毛蛋白鞭毛蛋白运动器官运动器官与致病有关与致病有关鉴定分类细菌鉴定分类细菌菌菌 毛毛种类与功能：种类与功能：化学组成：化学组成：菌毛蛋白菌毛蛋白与致病有关与致病有关与遗传变异有关与遗传变异有关菌毛鞭毛芽芽 胞胞功能与医学上意义：功能与医学上意义：脱水而成，为细菌休眠形式脱水而成，为细菌休眠形式对外界的抵抗力增加对外界的抵抗力增加可发芽成繁殖体有致病性可发芽成繁殖体有致病性有鉴别作用有鉴别作用应以杀死芽胞为灭菌效果的指标应以杀死芽胞为灭菌效果的指标一、革兰氏染色法一、革兰氏染色法l 细菌细胞
7、微小，无色半透明，经过染色后，才能细菌细胞微小，无色半透明，经过染色后，才能清楚地观察到细菌的形态和结构。清楚地观察到细菌的形态和结构。l 细菌的染色方法很多。最常用最重要的是细菌的染色方法很多。最常用最重要的是革兰染革兰染色法色法。初染初染初染初染媒染媒染脱色脱色复染复染结晶紫结晶紫碘液碘液酒精酒精沙黄沙黄第4节 细菌的染色方法l二、二、瑞氏染色法瑞氏染色法l三、三、特殊染色法特殊染色法l（一）抗酸染色法（一）抗酸染色法 一般对细胞壁中含有丰富蜡质的细菌（如一般对细胞壁中含有丰富蜡质的细菌（如结核分支杆菌）染色。结核分支杆菌）染色。l（二）芽孢、荚膜和鞭毛的染色法（二）芽孢、荚膜和鞭毛的染色
8、法第5节 细菌的生长繁殖l 一、细菌生长繁殖的一、细菌生长繁殖的基本条件基本条件l 营养物质营养物质l 酸碱度酸碱度：大多：大多7.2-7.67.2-7.6l 温度温度：嗜冷菌，嗜温：嗜冷菌，嗜温菌，嗜热菌菌，嗜热菌l 气体气体：专性需氧，微：专性需氧，微需氧，专性厌氧，兼需氧，专性厌氧，兼性厌氧性厌氧l 渗透压渗透压l 二、细菌个体的生长二、细菌个体的生长繁殖繁殖 二分裂式生长，时二分裂式生长，时间差别很大间差别很大l 三、细菌群体的生长三、细菌群体的生长繁殖繁殖l 迟缓期，对数期，稳迟缓期，对数期，稳定期，衰亡期定期，衰亡期第6节 细菌的代谢l一、细菌的基本代谢过程一、细菌的基本代谢过程l
9、二、细菌的合成代谢产物及其作用二、细菌的合成代谢产物及其作用热原质；毒素；侵袭性酶类；色素；细菌素；抗热原质；毒素；侵袭性酶类；色素；细菌素；抗生素；维生素生素；维生素l三、细菌的分解代谢与三、细菌的分解代谢与生化反应生化反应氧化发酵试验；氧化酶试验；过氧化氢酶试验；氧化发酵试验；氧化酶试验；过氧化氢酶试验；VPVP试验；甲基红试验；枸橼酸盐利用试验；吲哚试验；甲基红试验；枸橼酸盐利用试验；吲哚试验；硫化氢试验；尿素酶试验。试验；硫化氢试验；尿素酶试验。第7节 细菌的人工培养一、培养基的概念及种类一、培养基的概念及种类l基础培养基基础培养基l营养培养基营养培养基l选择培养基选择培养基l鉴别培养
10、基鉴别培养基l厌氧培养基厌氧培养基二、细菌在培养基中的生长现象l液体培养基液体培养基中：混浊、沉淀、菌膜中：混浊、沉淀、菌膜l半固体培养基半固体培养基中：有动力（即有鞭毛），中：有动力（即有鞭毛），呈放射状生长。呈放射状生长。l固体培养基中：看菌落形态固体培养基中：看菌落形态三、人工培养细菌的意义l细菌的鉴定细菌的鉴定l传染性疾病的诊断传染性疾病的诊断l分子流行病调查分子流行病调查l生物制品的制备生物制品的制备l饲料或畜产品降生学指标的检测饲料或畜产品降生学指标的检测第第2单元单元 细菌的感染细菌的感染 l 正常菌群正常菌群l 细菌的致病性细菌的致病性l 细菌的耐药性细菌的耐药性第1节 正常菌
11、群l一、正常菌群的概念一、正常菌群的概念在动物体各部分正常寄居而对动物无害的细菌称在动物体各部分正常寄居而对动物无害的细菌称为正常菌群为正常菌群l二、动物体内正常菌群的分布二、动物体内正常菌群的分布体表，消化道，呼吸道，泌尿生殖道体表，消化道，呼吸道，泌尿生殖道l三、正常菌群的生理作用三、正常菌群的生理作用生物颉颃作用；营养作用；免疫作用生物颉颃作用；营养作用；免疫作用l细菌的致病性是指细菌侵入动物体后突破细菌的致病性是指细菌侵入动物体后突破宿主的防御功能，并引起机体出现不同程宿主的防御功能，并引起机体出现不同程度病理变化的能力。度病理变化的能力。l通常把细菌这种不同程度的称为细菌的毒通常把细
12、菌这种不同程度的称为细菌的毒力，即致病力的强弱。力，即致病力的强弱。第第2节节 细菌的致病性细菌的致病性定性定性l 细菌是否有致病性，经典细菌是否有致病性，经典的依据是的依据是柯赫法则柯赫法则l 近年来提出的近年来提出的分子水平的分子水平的柯赫法则柯赫法则对此标准作了补对此标准作了补充和完善。充和完善。定量定量l 就某种病原菌而言，就某种病原菌而言，其致病性一般通过其致病性一般通过测测定定LD50LD50以及以及ID50ID50来定来定量。量。物质基础物质基础l 细菌的致病性在很大程度上取决于其细菌的致病性在很大程度上取决于其毒力因子毒力因子，包括，包括侵侵袭力袭力与与毒素毒素，以及，以及毒力
13、因子的分泌系统毒力因子的分泌系统。l 毒素有毒素有外毒素外毒素与与内毒素内毒素之分之分几个概念几个概念l 感染（感染（infectioninfection）是指病原微生物在宿主体内持是指病原微生物在宿主体内持续存在或增殖。续存在或增殖。l 发病（发病（diseasedisease）表示病原微生物感染之后，对宿表示病原微生物感染之后，对宿主造成明显的损害。主造成明显的损害。l 病原菌（病原菌（pathogenic bacteriapathogenic bacteria）是指那些导致是指那些导致机体发病的细菌。是一群高度特化了的微生物，机体发病的细菌。是一群高度特化了的微生物，为了自身的生存，已适
14、应而且必须在宿主生物体为了自身的生存，已适应而且必须在宿主生物体内持续存在或增殖，有时可造成宿主发病。内持续存在或增殖，有时可造成宿主发病。l微生物学研究侧重于感染微生物学研究侧重于感染。因为感染的范。因为感染的范围更广，发病仅仅是感染可能出现的后果围更广，发病仅仅是感染可能出现的后果之一。之一。l感染不一定都导致发病，感染不一定都导致发病，而发病则离不开而发病则离不开感染。感染。l如将防治传染病的重点转移到预防感染，如将防治传染病的重点转移到预防感染，则可收到事半功倍之效。则可收到事半功倍之效。细菌的致病性和毒力细菌的致病性和毒力 l 一定种类的病原菌在一定的条件下，能在宿主体内一定种类的病
15、原菌在一定的条件下，能在宿主体内引起感染的能力称为引起感染的能力称为致病性（致病性（pathogenicitypathogenicity）l 病原菌致病力的强弱程度称为病原菌致病力的强弱程度称为毒力（毒力（virulentvirulent），），同一细菌的不同菌株，其毒力不一样，因此，毒力同一细菌的不同菌株，其毒力不一样，因此，毒力是菌株的特征。是菌株的特征。科赫科赫一、细菌致病性的确定一、细菌致病性的确定 l 柯赫法则柯赫法则（Kochs Kochs postulatespostulates）由德国细）由德国细菌学家罗伯特菌学家罗伯特柯赫柯赫（Robert KochRobert Koch）于
16、）于18901890年提出，年提出，l 是确定某种细菌是否具是确定某种细菌是否具有有致病性致病性的主要依据的主要依据 柯赫法则要点柯赫法则要点 l特殊的病原菌应在同一疾病中查见，在健康特殊的病原菌应在同一疾病中查见，在健康者不存在者不存在 l此病原菌能被分离培养而得到纯种此病原菌能被分离培养而得到纯种 l此纯培养物接种易感动物，能导致同样病症此纯培养物接种易感动物，能导致同样病症 l自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养的纯培养 l 可以将可以将非感染性疾病与感染性疾病非感染性疾病与感染性疾病区分开区分开.中毒性疾病中毒性疾病营养缺乏性疾病营养缺乏
17、性疾病鱼类缺氧死亡鱼类缺氧死亡易与感染性疾病混淆易与感染性疾病混淆牛栎树叶中毒 维生素E缺乏鱼翻塘死亡 柯赫法则的不足之处柯赫法则的不足之处具一定的局限性，某些情况并不符合该法则具一定的局限性，某些情况并不符合该法则l健康带菌或隐性感染，健康带菌或隐性感染，例例:幽门螺杆菌幽门螺杆菌研究表明，超过研究表明，超过90%90%十二指肠溃疡和十二指肠溃疡和80%80%左右的胃左右的胃溃疡，都是由幽门螺杆菌感染所导致的。溃疡，都是由幽门螺杆菌感染所导致的。成人感染率成人感染率,无症状者可达无症状者可达50%50%左右左右 l有些病原菌迄今仍无法在体外人工培养有些病原菌迄今仍无法在体外人工培养 只有只有
18、1%1%不到不到的微生物可以人工培养的微生物可以人工培养l有的则没有可用的易感动物有的则没有可用的易感动物 主要是指只感染人类或大动物的疾病主要是指只感染人类或大动物的疾病二、细菌毒力的测定二、细菌毒力的测定 l半数致死量（半数致死量（median lethal dose,LD50median lethal dose,LD50）是指能使接种的实验动物在感染后一定时是指能使接种的实验动物在感染后一定时限内死亡一半所需的微生物量或毒素量。限内死亡一半所需的微生物量或毒素量。l 测定测定LD50LD50应选取品种、年龄、体重乃至性别等各应选取品种、年龄、体重乃至性别等各方面都相同的易感动物，分成若干
19、组，每组数量方面都相同的易感动物，分成若干组，每组数量相同，以递减剂量的微生物或毒素分别接种各组相同，以递减剂量的微生物或毒素分别接种各组动物，在一定时限内观察记录结果，最后以生物动物，在一定时限内观察记录结果，最后以生物统计学方法计算出统计学方法计算出LD50LD50。l 由于半数致死量采用了生物统计学方法对数据进由于半数致死量采用了生物统计学方法对数据进行处理，因而避免了动物个体差异造成的误差。行处理，因而避免了动物个体差异造成的误差。半数感染量（半数感染量（median infectious dose,ID50median infectious dose,ID50）l某些病原微生物只能感
20、染实验动物、鸡胚某些病原微生物只能感染实验动物、鸡胚或细胞，但不引致死亡，可用或细胞，但不引致死亡，可用ID50ID50来表示来表示其毒力。其毒力。l测定的方法与测定测定的方法与测定LD50LD50类似，只不过在统类似，只不过在统计结果时以感染者代替死亡者。计结果时以感染者代替死亡者。三、三、细菌的毒力因子细菌的毒力因子l构成细菌毒力的物质称构成细菌毒力的物质称毒力因子毒力因子（virulence virulence factorfactor），），主要有主要有侵袭力侵袭力和和毒素毒素，此外有些毒，此外有些毒力因子尚不明确。力因子尚不明确。l近年来的研究发现，细菌的许多重要毒力近年来的研究发现
21、，细菌的许多重要毒力因子的分泌与因子的分泌与细菌的分泌系统细菌的分泌系统有关。有关。（一）侵袭力（一）侵袭力（invasiveness）l病原菌在机体内定殖，突破机体的防御屏病原菌在机体内定殖，突破机体的防御屏障，内化作用，繁殖和扩散，这种能力称障，内化作用，繁殖和扩散，这种能力称为为侵袭力侵袭力。l与侵袭力有关的毒力因子包括与侵袭力有关的毒力因子包括黏附或定植黏附或定植因子因子、侵袭性酶侵袭性酶、IIIIII型分泌系统型分泌系统和和干扰宿干扰宿主的防御机制主的防御机制四类。四类。1.黏附或定植因子黏附或定植因子l凡具有粘附作用的细菌结构成份，统称为凡具有粘附作用的细菌结构成份，统称为粘附素粘
22、附素（adhesinadhesin），通常是细菌表面的一），通常是细菌表面的一些大分子结构成份，些大分子结构成份，l粘附素粘附素主要是革兰阴性菌的主要是革兰阴性菌的菌毛菌毛，其次是，其次是非菌毛粘附素，如某些非菌毛粘附素，如某些外膜蛋白外膜蛋白（OMPOMP）以）以及革兰阳性菌的及革兰阳性菌的脂磷壁酸脂磷壁酸（LTALTA）等。）等。l 某些粘附素无宿主特异性及组织嗜性某些粘附素无宿主特异性及组织嗜性 如如F1F1（1 1型菌毛）能与细胞表面的型菌毛）能与细胞表面的D D甘露糖残基结合甘露糖残基结合l 大多数粘附素具有宿主特异性及组织嗜性大多数粘附素具有宿主特异性及组织嗜性 如大肠杆菌的如大肠
23、杆菌的F4F4（K88K88）菌毛仅粘附于猪的小肠前段，）菌毛仅粘附于猪的小肠前段，F6F6（987P987P）仅粘附于猪的小肠后段）仅粘附于猪的小肠后段l 细胞或组织表面与粘附素相互作用的成份称为细胞或组织表面与粘附素相互作用的成份称为受受体（体（receptorreceptor），），多为细胞表面糖蛋白，部分粘多为细胞表面糖蛋白，部分粘附素受体为蛋白质，最有代表性的是细胞外基质附素受体为蛋白质，最有代表性的是细胞外基质（extracellular matrix,ECM)extracellular matrix,ECM)2.侵袭性酶侵袭性酶l多为胞外酶类，在感染过程中能协助病原多为胞外酶类，
24、在感染过程中能协助病原菌扩散。菌扩散。3.III型分泌系统l 细菌的分泌系统的发现是近年为细菌致病机制细菌的分泌系统的发现是近年为细菌致病机制研究的重要进展，其中的研究的重要进展，其中的型分泌系统与动植型分泌系统与动植物的许多物的许多革兰阴性病原菌革兰阴性病原菌的毒力因子的分泌有的毒力因子的分泌有关。关。l 在病原菌与宿主细胞接触后，这一系统得以启在病原菌与宿主细胞接触后，这一系统得以启动，具有接触介导的特征。动，具有接触介导的特征。l 启动后细菌分泌与毒力有关的多种蛋白质，与启动后细菌分泌与毒力有关的多种蛋白质，与相应的伴侣蛋白（相应的伴侣蛋白（chaperonechaperone）结合，）
25、结合，从细菌的从细菌的胞浆直接进入宿主细胞胞浆，胞浆直接进入宿主细胞胞浆，发挥毒性作用。发挥毒性作用。4.干扰或逃避宿主的防御机制干扰或逃避宿主的防御机制l荚膜荚膜 l细菌表面的一些蛋白：如细菌表面的一些蛋白：如SPASPAl蛋白酶蛋白酶l细胞内逃逸细胞内逃逸（二）毒素（二）毒素（toxin）l细菌毒素按其来源、性质和作用等的不同，细菌毒素按其来源、性质和作用等的不同，可分为可分为外毒素外毒素内毒素内毒素 在大多数情况下，外毒素一般简称毒素在大多数情况下，外毒素一般简称毒素外毒素（外毒素（exotoxin）l 定义：定义：是某些病原菌在生长繁殖过程中所产生的是某些病原菌在生长繁殖过程中所产生的
26、对宿主细胞有毒性的可溶性蛋白质。大多数外毒对宿主细胞有毒性的可溶性蛋白质。大多数外毒素在菌体内合成后必须分泌于胞外，故名素在菌体内合成后必须分泌于胞外，故名“外毒外毒素素”。但也有少数外毒素存在于菌体细胞的胞周。但也有少数外毒素存在于菌体细胞的胞周间隙，只有当菌体细胞裂解后才释放至胞外。间隙，只有当菌体细胞裂解后才释放至胞外。l 多种细菌能产生外毒素，如肉毒梭菌、破伤风杆菌、白喉棒状杆菌、炭疽杆菌、大肠杆菌、霍乱弧菌。特性特性l 通常具有通常具有菌种特异性菌种特异性，如破伤风梭菌产生破伤风毒素、炭，如破伤风梭菌产生破伤风毒素、炭疽杆菌产生炭疽毒素、霍乱弧菌产生霍乱毒素等。疽杆菌产生炭疽毒素、霍
27、乱弧菌产生霍乱毒素等。l 毒性强毒性强，如，如1mg1mg纯化的肉毒毒素能杀死纯化的肉毒毒素能杀死20002000万只小鼠。万只小鼠。l 外毒素的外毒素的毒性具有往往有高度的特异性毒性具有往往有高度的特异性。破伤风毒素选择性地作用于脊髓前角运动神经细胞，引起肌肉的破伤风毒素选择性地作用于脊髓前角运动神经细胞，引起肌肉的强直性痉挛强直性痉挛 肉毒毒素选择性地作用于眼神经和咽神经，引起眼肌和咽肌麻痹肉毒毒素选择性地作用于眼神经和咽神经，引起眼肌和咽肌麻痹l 也有一些毒素具有相同的作用，霍乱弧菌、大肠杆菌、金也有一些毒素具有相同的作用，霍乱弧菌、大肠杆菌、金葡菌等许多细菌均可产生作用类似的肠毒素。葡
28、菌等许多细菌均可产生作用类似的肠毒素。外毒素具有良好的免疫原性外毒素具有良好的免疫原性l 可刺激机体产生特异性的抗体，而使机体具有免可刺激机体产生特异性的抗体，而使机体具有免疫保护作用，这种抗体称为疫保护作用，这种抗体称为抗毒素（抗毒素（antitoxinantitoxin），），可用于紧急治疗和预防。可用于紧急治疗和预防。l 外毒素在外毒素在0.4%0.4%甲醛溶液作用下，经过一段时间可甲醛溶液作用下，经过一段时间可以脱毒，但仍保留原有抗原性，称之为以脱毒，但仍保留原有抗原性，称之为类毒素类毒素（toxoidtoxoid）。l 类毒素注入机体后，仍可刺激机体产生抗毒素，类毒素注入机体后，仍可
29、刺激机体产生抗毒素，可作为疫苗进行免疫接种。可作为疫苗进行免疫接种。l多数外毒素不耐热多数外毒素不耐热，一般在，一般在60806080经经10min80min10min80min即可失去毒性，但也有少数例即可失去毒性，但也有少数例外，如葡萄球菌肠毒素及大肠杆菌热稳定外，如葡萄球菌肠毒素及大肠杆菌热稳定肠毒素（肠毒素（STST）能耐）能耐100 30min100 30min。l外毒素与酶都是蛋白质外毒素与酶都是蛋白质，许多性质相似，许多性质相似，如易被热、酸及蛋白水解素酶灭活，具有如易被热、酸及蛋白水解素酶灭活，具有很高的生物学活性，并具特异性很高的生物学活性，并具特异性。l定义：定义：内毒素特
30、指革兰阴性菌外膜中的脂内毒素特指革兰阴性菌外膜中的脂多糖（多糖（LPSLPS）成分，细菌在死亡后破裂或用）成分，细菌在死亡后破裂或用人工方法裂解菌体后才释放。人工方法裂解菌体后才释放。内毒素（内毒素（endotoxin）组成组成 l LPSLPS由由O O特异特异多糖侧链多糖侧链、非特异核心多糖非特异核心多糖和和类脂类脂A A三个部分组成。三个部分组成。l 具有毒性的部分是类脂具有毒性的部分是类脂A Al 类脂类脂A A高度保守，肠杆菌高度保守，肠杆菌科细菌的类脂科细菌的类脂A A结构完全结构完全一样。一样。特性特性l 革兰阴性菌内毒素的革兰阴性菌内毒素的毒性作用都大致相同毒性作用都大致相同，
31、引致，引致发热发热、血循环中白细胞骤减、弥散性血管内凝血、血循环中白细胞骤减、弥散性血管内凝血、休克等，严重时亦可致死。休克等，严重时亦可致死。l 内毒素耐热，加热内毒素耐热，加热100100经经1h1h仍不被破坏，必须加仍不被破坏，必须加热热160160经经24h24h，或用强酸、强碱或强氧化剂煮沸，或用强酸、强碱或强氧化剂煮沸30min30min才失活。才失活。l 不能被甲醛脱毒成类毒素。不能被甲醛脱毒成类毒素。l 内毒素的抗原性较弱，将内毒素注入机体可产生内毒素的抗原性较弱，将内毒素注入机体可产生针对其中多糖抗原的相应抗体，但此抗体并无中针对其中多糖抗原的相应抗体，但此抗体并无中和内毒素
32、毒毒性的作用。和内毒素毒毒性的作用。特性特性外毒素外毒素内毒素内毒素化学性质化学性质蛋白质蛋白质脂多糖脂多糖产生产生由某些革兰阳性菌或阴性菌分泌由某些革兰阳性菌或阴性菌分泌由革兰阴性菌菌体裂解产生由革兰阴性菌菌体裂解产生耐热性耐热性通常不耐热通常不耐热极为耐热极为耐热毒性作用毒性作用特异性。为细胞毒素、肠毒素或神经特异性。为细胞毒素、肠毒素或神经毒素，对特定的细胞或组织发挥特定毒素，对特定的细胞或组织发挥特定作用作用全身性。致发热、腹泻、呕吐全身性。致发热、腹泻、呕吐毒性程度毒性程度高，往往致死高，往往致死弱，很少致死弱，很少致死致热性致热性对宿主不致热对宿主不致热致热性，常致宿主发热致热性，
33、常致宿主发热免疫原性免疫原性强，刺激机体产生中和抗体（抗毒素）强，刺激机体产生中和抗体（抗毒素）较弱，免疫应答不足以中和毒较弱，免疫应答不足以中和毒性性能否产生类毒素能否产生类毒素能，用甲醛处理能，用甲醛处理不能不能细菌外毒素和内毒素的基本特性比较细菌外毒素和内毒素的基本特性比较四、细菌的侵入数量、途径与感染四、细菌的侵入数量、途径与感染l病原菌侵入机体引起感染，除具有一定毒病原菌侵入机体引起感染，除具有一定毒力外，还需有足够的数量。一般来说，细力外，还需有足够的数量。一般来说，细菌毒力愈强，致病所需要菌量愈小。菌毒力愈强，致病所需要菌量愈小。五、感染的类型l 隐性感染隐性感染是指病原体侵入人
34、体后，仅引起机体发生特异性免疫应答，是指病原体侵入人体后，仅引起机体发生特异性免疫应答，不出现或只出现不明显的临床症状、体征。不出现或只出现不明显的临床症状、体征。但往往是传染但往往是传染源。源。l 显性感染显性感染指病原体侵入人体后，由于毒力强、入侵数量多，加之机指病原体侵入人体后，由于毒力强、入侵数量多，加之机体的免疫病理反应，导致组织损伤，生理功能发生改变，体的免疫病理反应，导致组织损伤，生理功能发生改变，并出现一系列临床症状和体征。并出现一系列临床症状和体征。l 带菌状态带菌状态显性或隐性感染后，病原菌在体内继续留存一段时间，与显性或隐性感染后，病原菌在体内继续留存一段时间，与机体免疫
35、力处于相对平衡状态，称为带菌状态。处于带菌机体免疫力处于相对平衡状态，称为带菌状态。处于带菌状态的动物称为带菌者。状态的动物称为带菌者。第第3节节 细菌的耐药性细菌的耐药性一、细菌耐药性的概念一、细菌耐药性的概念l耐药性是指微生物多次与药物接触发生敏耐药性是指微生物多次与药物接触发生敏感性降低的现象。感性降低的现象。二、细菌耐药性的检测方法二、细菌耐药性的检测方法l表型检测法：稀释法，纸片扩散法表型检测法：稀释法，纸片扩散法l耐药基因的检测法耐药基因的检测法第三单元第三单元 细菌感染的诊断细菌感染的诊断 l 样本的采集样本的采集l 细菌的分离鉴定细菌的分离鉴定第第1节节 样本的采集样本的采集l
36、 无菌操作无菌操作l 根据不同疾病或同一疾病不同时期采集不同的标本根据不同疾病或同一疾病不同时期采集不同的标本l 采集部位不要使用消毒剂采集部位不要使用消毒剂l 样本要新鲜，样本要新鲜，l 大多样样品可冷藏大多样样品可冷藏/冻输送，粪便样本常加入甘油冻输送，粪便样本常加入甘油缓冲液缓冲液l 对疑似烈性传染病或人畜共患病标本，要严格按相对疑似烈性传染病或人畜共患病标本，要严格按相关生物安全规定进行。关生物安全规定进行。l 做好标记。做好标记。第2节 细菌的分离鉴定一、常规细菌学检测一、常规细菌学检测l细菌形态与结构检查细菌形态与结构检查l分离培养分离培养l生化试验生化试验l药物敏感试验药物敏感试
37、验二、血清学检测二、血清学检测l抗原检测抗原检测l抗体检测抗体检测三、基因检测三、基因检测l聚合酶链式反应聚合酶链式反应PCRPCRl核酸杂交技术核酸杂交技术第第4单元单元 消毒与灭菌消毒与灭菌 l基本概念基本概念l物理灭菌法物理灭菌法l化学消毒灭菌化学消毒灭菌第1节 基本概念l 灭菌灭菌(sterilization)(sterilization)杀灭物体上所有微生物的杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽胞、霉菌孢子在内的全部方法，包括杀灭细菌芽胞、霉菌孢子在内的全部病原微生物和非病原微生物。病原微生物和非病原微生物。l 消毒消毒(disinfection)(disinfection)杀
38、灭物体上病原微生物的杀灭物体上病原微生物的方法，仅要求达到消除传染性的目的，而对非病方法，仅要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。l 防腐防腐(antisepsis)(antisepsis)阻止或抑制物品上微生物生阻止或抑制物品上微生物生长繁殖的方法，微生物不一定死亡。长繁殖的方法，微生物不一定死亡。l 无菌无菌(asepsis)(asepsis)意为不存在活的微生物。采取防意为不存在活的微生物。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其他物体的止或杜绝任何微生物进入动物机体或其他物体的方法，称为无菌法。以无菌法
39、进行的操作称为无方法，称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌技术或无菌操作。菌技术或无菌操作。第第2 2节节 物理灭菌法物理灭菌法一、热力灭菌法一、热力灭菌法(一一)湿热灭菌法湿热灭菌法l1.1.高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法l2.2.煮沸法煮沸法l3.3.流通蒸汽灭菌法流通蒸汽灭菌法l4.4.巴氏消毒法巴氏消毒法 （二）干热灭菌法（二）干热灭菌法l1.1.火焰灭菌法火焰灭菌法l2.2.热空气灭菌法热空气灭菌法二、辐射灭菌法二、辐射灭菌法l（一）紫外线（一）紫外线l（二）电离辐射：（二）电离辐射：X X射线等射线等三、滤过除菌法三、滤过除菌法第第3 3节节 化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法一、常用消毒剂的种类及应用一、常用消毒剂的种类及应用l 含氯消毒剂含氯消毒剂l 过氧化物类过氧化物类l 酚类酚类l 碱类碱类l 醛类醛类l 醇类醇类l 含碘消毒剂含碘消毒剂l 季铵盐类季铵盐类l 二、影响消毒剂的因素二、影响消毒剂的因素l 消毒剂的性质、浓度和作消毒剂的性质、浓度和作用时间用时间l 温度和酸碱度温度和酸碱度l 细菌的种类、数量和状态细菌的种类、数量和状态l 有机物有机物
