1、第二十三章第二十三章 临床常见病原体检测临床常见病原体检测第一节 标本的采集运送、实验室评价和检查方法第二节 抗感染药物的敏感性检测第三节 临床感染常见病原体免疫检测第四节 病毒性肝炎检测第五节 性传播疾病病原体检测第六节 医院感染常见病原体检查 3 3 第一节 标本的采集运送、实验室评价和检查方法一、标本采集与运送二、标本的实验室质量评估标准三、常用检查方法 4 4 临床常见标本v 血液及骨髓标本v 脑脊液标本v 尿液标本v 呼吸道标本v 粪便标本v 无菌体液标本v 生殖道标本v 眼、耳部标本v 创伤、组织和脓肿标本v 导管标本一、标本采集与运送 5 5 血培养采集及运送 当怀疑有菌血症或真
2、菌血症时,应在抗生素使用前立即采集血培养送检。标本采集应尽量在抗生素使用前,发热初期或寒战时;短时间内多个部位采集,24小时内采血一般不超过3次(亚急性心内膜炎应3-4次),成人推荐双瓶双套;严格无菌操作穿刺采集静脉血;骨髓标本采用骨髓穿刺法从髂骨采集;采集量10-20ml,全自动血培养仪应按公司推荐量采集;标本应立即送检,禁止冷藏保存。6 6 v 严格无菌操作,腰椎穿刺抽取标本送检;v 取第二管送检,如仅一管应首先做细菌学检查;v 引起脑膜炎的病原体脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等抵抗力弱,不耐冷、容易死亡,故应室温保存,并尽量在15分钟送检至微生物实验室,最多不能超过1小时,也可床
3、旁接种后送至微生物实验室脑脊液标本采集及运送 7 7 v 明显泌尿道感染症状(尿频、尿急、尿痛),尿常规感染表现(WBC、亚硝酸盐、细菌数等升高),应送检尿液培养以明确病原菌。v 采集前应清洁外阴及尿道口周围,取中段尿送检;v 排尿困难者可导尿,一般插入导尿管后将尿液弃去前面15ml后再留取培养标本;v 厌氧菌培养,采用膀胱穿刺法收集、无菌厌氧小瓶运送;v 24小时尿、尿袋内尿、导管末端尿不能用于培养;v 标本应立即送检,如不能立即送检应冷藏保存,但不能超过24小时。尿液标本采集及运送 8 8 v 患者应先清洁口腔,在医师或护士直视下采集标本;v 取痰方法:深咳、纤支镜、导管吸痰;v 抗生素使
4、用前采集,每天送检1次,连续2-3次;v 标本应2小时内送检;v 痰培养易受上呼吸道常居菌污染,推荐同时做血培养和痰涂片;呼吸道标本采集及运送 9 9 v 应挑取含脓、血或黏液的粪便送检;v 排便困难者或婴儿可用直肠拭子插入肛门2-3cm采集;v 传染性腹泻患者需3次送检粪便进行细菌培养;v 未置保存液标本应1小时内送到实验室粪便标本采集及运送 10 10 v 无菌体液标本严格无菌穿刺采集;v 生殖道标本拭子采集、穿刺采集;v 眼耳部标本拭子采集,标本少时可床旁接种;v 创伤、组织、脓肿标本清洁消毒后采集交界部位,组织可手术时采集;v 静脉导管取尖端5cm送检;v 尿导管不适合培养。无菌体液标
5、本采集及运送 11 11 二、标本的实验室质量评估标准 标本到达实验室后,应首先对标本的质量进行评估。不合格或者标记错误标本会导致错误的抗菌药物治疗,甚至可能会加重病情。12 12 v 标本信息:包括患者信息、采集日期、送检目的和标本来源等;v 容器完整性;v 储存及运送方式;v 送检标本量;v 标本送检的合理性评估;v 某些不适合做培养的标本或明显污染的标本应拒收;v 特殊情况应及时与临床沟通。13 13 三、常用检查方法v直接显微镜检查;v病原体的分离培养和鉴定;v病原体核酸检查;v病原体特异性抗原检查;v血清学实验。14 14 v 常采用的方法有压滴法、悬滴法或湿式涂片法;v 观察病原菌的生长、运动方式、螺旋体的形态和运动,及原虫的包囊和滋养体;v 观察细菌的形态、染色性、排列及特殊结构。15 15 病原体分离培养是病原学诊断的关键步骤,分离出病原菌后,才能进行鉴定和药敏实验。步骤如下:选择适当的培养基;适当的孵育条件;挑取可疑菌落;根据细菌镜下形态、染色形和生化反应确定细菌种属;需同时做药敏试验。