1、消毒剂效果验证消毒剂效果验证内容内容o法规要求o目的o参考方法o概述o消毒剂效力验证FDA FDA 无菌药品无菌药品 Guidance for IndustryGuidance for Industry里，里，X Laboratory Control X Laboratory Control 章，章，“disinfectant effecacydisinfectant effecacy”节提到：节提到：oThe suitability,efficacy and limitations of disinfectant The suitability,efficacy and limitation
2、s of disinfectant agents and procedures should be assessedagents and procedures should be assessed应评估消毒剂的适用性应评估消毒剂的适用性，效力及有限性；，效力及有限性；oThe effectiveness of these disinfectants and procedures should The effectiveness of these disinfectants and procedures should be measured by their ability to ensure
3、that potential be measured by their ability to ensure that potential contaminants are adequately removed from surfacescontaminants are adequately removed from surfaces 应测试这些消毒剂效力以确认潜在的污染已被充分移除应测试这些消毒剂效力以确认潜在的污染已被充分移除法规指南要求法规指南要求21CFR 211.4221CFR 211.42 无菌工艺包括适宜的房间与设备的清洁，消毒体系，无菌工艺包括适宜的房间与设备的清洁，消毒体系，以
4、提供维持无菌生产环境以提供维持无菌生产环境中国中国20102010版版GMPGMP附录，无菌药品附录，无菌药品 第第4343条条 应当定期进行环境监测，及时发现耐受菌株及污染情应当定期进行环境监测，及时发现耐受菌株及污染情况况 法规指南要求法规指南要求法规指南要求法规指南要求 消毒剂效力验证测试是FDA检查关注的项目，很多483是与该项验证测试有关：p根据消毒剂效果效力验证测试，选择适合于生产车间及实验室根据消毒剂效果效力验证测试，选择适合于生产车间及实验室洁净室的设备，洁净室的消毒剂洁净室的设备，洁净室的消毒剂p确认配制消毒剂能使用的有效期确认配制消毒剂能使用的有效期p根据消毒剂效力验证测试
5、，评价所使用的消毒剂的有效性根据消毒剂效力验证测试，评价所使用的消毒剂的有效性p及时发现消毒剂的适用性，以评估更新消毒方案及时发现消毒剂的适用性，以评估更新消毒方案目的目的参考方法参考方法用于消毒剂效力测试的标准方法参照AOAC official method 960.09“Germicidal and Detergent Sanitizing Acion of Disinfectants”用于灭菌剂或杀孢子效力测定的标准方法参见Method 966.04”Sporicidal Activity of Disinfectants”中国国家标准 GB15981 消毒与灭菌效果的评价方法与标准US
6、P Disinfectants and antiseptics概述概述 根据消毒剂对不同类别微生物的杀灭效果，可将消毒剂分为三个级别：o高效消毒剂：能杀灭一切细菌繁殖体（包括结核分枝杆菌），病毒，真菌及其孢子等各种微生物，对细菌芽孢杀灭达到消毒效果的消毒剂；o中效消毒剂：可以杀灭和去除细菌芽孢以外的各种病原微生物的消毒剂，包括碘类消毒剂，醇类，醇类与氯已定的复方，醇类与季铵盐类复方，酚类等；o低效消毒剂：只能杀灭细菌繁殖体和亲脂病毒的消毒剂，包括单链季铵盐类（苯扎溴铵等），双胍类消毒剂（氯己定等）概述概述USP对于不同消毒剂类型的分类概述概述不同微生物对于消毒剂抵抗力不同 USP 细菌芽胞分枝
7、杆菌亲水病毒真菌孢子，酵母菌，霉菌细菌亲脂病毒概述概述l影响消毒剂效力的主要因素影响消毒剂效力的主要因素1）pH值 影响消毒剂的作用，例如溶解程度，离解程度，分子结构等；二是影响微生物的生长情况2）配制消毒剂所使用的水 水的硬度，微生物含量，化学物质残留影响 3）被消毒表面的有机物残留情况 有机物存在阻碍消毒剂与微生物的接触；可能中和消毒剂造成消毒剂效果降低4）温度 概述概述洁净室消毒选择消毒剂需考虑的因素洁净室消毒选择消毒剂需考虑的因素洁净室内需要被消毒的微生物数量及类型？-不同的生产工艺，生产品种，洁净室构造等有不同的需求商业可购买的消毒剂的杀菌谱能否满足要求？关键区域是否对杀孢子剂或灭菌
8、剂有需求？将要选择的消毒剂是否经过EPA登记？-如满足FDA要求消毒剂浓度，被消毒表面材质，消毒剂接触时间，相互之间的兼容性，能否被腐蚀？消毒表面可能存在影响消毒剂效果的有机物残留？消毒剂之间的轮换使用对人员的安全性考虑 概述概述概述概述消毒剂消毒原理1）使蛋白质变性，凝固使蛋白质变性，凝固如某些重金属盐类，酸，碱等化学消毒剂，可以破坏微生物蛋白质结构，使其丧失生物学功能。2）破坏或损伤细胞膜破坏或损伤细胞膜二氧化氯和双氧水这类杀菌剂，都是强氧化剂，能全面破坏引起微生物细胞膜的结构与功能，导致细胞膜关键功能结构丧失，死亡。3）阻断食物摄取和废物排泄阻断食物摄取和废物排泄-如某些季铵盐类化合物，
9、他们在水溶液中带正电荷，能把自己附着在细胞膜某个特殊位置，供给细胞上带负电荷的部分，阻断营养物质输入及废物输出，导致微生物死亡。4）钝化酶活性钝化酶活性-如苯酚，酚醛类消毒剂能进入微生物细胞内并与其关键酶发生化学生物反应，导致酶活性丧失，微生物生长代谢受阻，达到消毒目的。消毒剂效力验证消毒剂效力验证选择标准菌株及特定广泛环境分离菌配制待选定不同消毒剂及其浓度根据不同消毒剂选择中和剂制备菌悬液浓度为11085108CFU/ml定量悬浮试验定量悬浮试验-可以决定消毒剂最佳作用时间，消毒剂消毒效果载体表面测试载体表面测试-实验室考察，模拟一切在洁净室有可能会消毒的表面，接种微生物，做考察环境考察环境
10、考察消毒前后对洁净室表面微生物做考察，应符合相应洁净级别要求消毒剂有效期考察消毒剂效力验证消毒剂效力验证 oUSP推荐使用的测试标准菌株消毒剂效力验证消毒剂效力验证 USP给出的模拟材质消毒剂效力验证消毒剂效力验证 可接受标准o表面模拟测试 细菌芽胞数量降低对数值应为23；细菌及霉菌数量降低对数值应为35o定量悬浮测试 试验重复5次，计算各组的活菌数，计算杀菌率。杀菌率（对照组平均活菌数-试验组活菌数）对照组平均活菌数100 5次试验的杀灭率均99.9%判为消毒合格。对枯草杆菌黑色变种芽胞5次试验均全部杀灭判为灭菌合格。标准来源-GB15981总结总结 o消毒剂效力确认应根据生产实际情况评估所使用的消毒剂o结合现场考察与实验室方法验证消毒剂效力o通过周期性环境检测结果，趋势分析，评估消毒剂效力持续性，并根据数据趋势总结更新消毒规程o无菌操作区域所使用的消毒剂应过滤除菌，或采用灭菌纯化水或灭菌注射用水配制o应联合使用消毒剂与杀孢子剂维持生产区域环境Open DiscussionAny Questions?20
