1、肺部感染的实验室检查肺部感染的实验室检查 PPT大家好大家好2肺部感染的临床特点肺部感染的临床特点肺部感染的发生过程肺部感染的发生过程肺部感染实验室检查肺部感染实验室检查实验室检查质量保证实验室检查质量保证报告提纲报告提纲大家好大家好3肺部感染的临床特点肺部感染的临床特点肺部感染临床症状相似，以咳嗽、咳痰为主肺部感染临床症状相似，以咳嗽、咳痰为主感染的病原体繁多，不同年龄，不同季节，不感染的病原体繁多，不同年龄，不同季节，不同环境，不同基础疾病感染的病原体不同同环境，不同基础疾病感染的病原体不同针对不同的病原体应采取针对性的治疗方法针对不同的病原体应采取针对性的治疗方法大家好大家好4肺部感染的
2、发生过程肺部感染的发生过程遗传因素遗传因素环境因素环境因素免疫因素免疫因素肺部感染肺部感染病原体病原体大家好大家好5病原体感染的易感基因病原体感染的易感基因Adrian VS Hill,Phil Trans R Soc B(2012)367,840849大家好大家好6肺部感染的环境因素肺部感染的环境因素 生物燃料生物燃料 吸烟吸烟 空气污染空气污染 滥用抗生素滥用抗生素 免疫抑制剂免疫抑制剂 气候变化气候变化Robert J.Laumbach,J Allergy Clin Immunol.2012 January;129(1):313Joon Young Song.J Korean Med S
3、ci 2013;28:4-15 大家好大家好8Effect of cigarette smoke on inflammation J.Lee,J Dent Res.2012;91(2):142149 大家好大家好9肺部感染的免疫因素肺部感染的免疫因素TLR on airway epithelial cellsYong Li,Clin Dev Immunol.2012;2012:791392大家好大家好10肺部感染的免疫因素肺部感染的免疫因素Epithelial cell produced chemokines and cytokines againstbacteria infectionsYo
4、ng Li,Clin Dev Immunol.2012;2012:791392大家好大家好11肺部感染常见病原体类型肺部感染常见病原体类型 细菌性肺炎细菌性肺炎 如肺炎链球菌、甲型溶血性链球菌、金黄色如肺炎链球菌、甲型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷白杆菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞葡萄球菌、肺炎克雷白杆菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、埃希大肠杆菌、结核杆菌等菌、埃希大肠杆菌、结核杆菌等 真菌性肺炎真菌性肺炎 如白念珠菌、曲霉菌、放射菌等如白念珠菌、曲霉菌、放射菌等 病毒性肺炎病毒性肺炎 如冠状病毒、腺病毒、流感病毒、巨细胞病如冠状病毒、腺病毒、流感病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等毒、单纯
5、疱疹病毒等 非典型性肺炎非典型性肺炎 如军团菌、支原体和衣原体等如军团菌、支原体和衣原体等 其它病原体所致的肺炎其它病原体所致的肺炎 如立克次体、弓形虫、原虫、寄如立克次体、弓形虫、原虫、寄生虫如肺包虫、肺吸虫、肺血吸虫）等生虫如肺包虫、肺吸虫、肺血吸虫）等大家好大家好12英国肺炎病原体英国肺炎病原体大家好大家好131、根据检验常规初步判定是否感染、根据检验常规初步判定是否感染2、根据感染部位推测可能的病原体、根据感染部位推测可能的病原体3、根据感染人群推测可能的病原体、根据感染人群推测可能的病原体4、根据可能的病原体选择检测方法、根据可能的病原体选择检测方法大家好大家好141、根据检验常规初
6、步判定是否感染、根据检验常规初步判定是否感染血常规血常规CRPPCT内毒素内毒素G试验，试验，GM试验试验大家好大家好15血常规检查血常规检查大家好大家好16CRP（C reactive Protein）与肺炎链球菌与肺炎链球菌C多糖体反应多糖体反应是一种重要的急性时相反应蛋白是一种重要的急性时相反应蛋白血清血清CRP由肝脏合成由肝脏合成,半衰期半衰期19小时小时IL-1、IL-6、TNF是其最重要的调节因子是其最重要的调节因子大家好大家好17Diagnostic accuracy of CRP in combination with IL-6 and IL-8Nora Hofer,Neona
7、tology 2012;102:2536大家好大家好18PCT（procalcitonin）Procalcitonin（降钙素原）由细菌内毒素诱导产生（降钙素原）由细菌内毒素诱导产生 升高：严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多升高：严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭脏器功能衰竭 不升高：自身免疫、过敏和病毒感染不升高：自身免疫、过敏和病毒感染 不升高：局部有限的细菌感染、轻微感染和慢性炎症不升高：局部有限的细菌感染、轻微感染和慢性炎症大家好大家好19PCT as to Guide Antibiotic Therapy in Adult Patients with Resp
8、iratory Tract InfectionsDavid N.Gilbert,Clinical Infectious Diseases 2011;52(S4):S346S350大家好大家好20G试验试验 G试验检测的是真菌的细胞壁成分试验检测的是真菌的细胞壁成分-(1,3)-D-葡聚糖，人体的吞噬细葡聚糖，人体的吞噬细胞吞噬真菌后，胞吞噬真菌后，能持续释放该物质，使血液及体液中含量增高（浅能持续释放该物质，使血液及体液中含量增高（浅部真菌感染无类似现象）。部真菌感染无类似现象）。1-3-D-葡聚糖可特异性激活鲎葡聚糖可特异性激活鲎（Limulus）变形细胞裂解物中的）变形细胞裂解物中的G因子
9、，引起裂解物凝固，故称因子，引起裂解物凝固，故称G试验。试验。适用于除隐球菌和接合菌（包括毛霉菌、根霉菌等）外的所有深部真适用于除隐球菌和接合菌（包括毛霉菌、根霉菌等）外的所有深部真菌感染的早期诊断，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能确定菌种。菌感染的早期诊断，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能确定菌种。以下情况可出现假阳性：（以下情况可出现假阳性：（1）使用纤维素膜进行血透，标本或患者）使用纤维素膜进行血透，标本或患者暴露于纱布或其他含有葡聚糖的材料；（暴露于纱布或其他含有葡聚糖的材料；（2）静脉输注免疫球蛋白、）静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；（白蛋白、凝血因子或血液制品；（3）链球菌
10、血症；（）链球菌血症；（4）操作者处理）操作者处理标本时存在污染。（标本时存在污染。（5）另外，使用多糖类抗癌药物、放化疗造成的）另外，使用多糖类抗癌药物、放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等也粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等也可能造成假阳性，食用菌类，如蘑菇等食物可以导致假阳性。可能造成假阳性，食用菌类，如蘑菇等食物可以导致假阳性。大家好大家好21GM试验试验 GM试验检测的是半乳甘露聚糖（试验检测的是半乳甘露聚糖（galactomannan)，曲霉菌特有的，曲霉菌特有的细胞壁多糖成分是细胞壁多糖成分是（1-5）呋喃半乳糖残基，菌丝
11、生长时，半乳甘露）呋喃半乳糖残基，菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断，主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断，GM释放量与菌量成正比，释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。连续检测可以反映感染程度。连续检测GM可作为治疗疗效的监测。在造血干可作为治疗疗效的监测。在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高。细胞移植患者中的诊断敏感性高。以下情况可出现假阳性：（以下情况可出现假阳性：（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林林/他唑巴坦；（他唑巴坦；（2）新生儿和儿童；
12、（）新生儿和儿童；（3）血液透析；（）血液透析；（4）自身免疫）自身免疫性肝炎等；（性肝炎等；（5）食用可能含有）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。等。以下情况可出现假阴性：（以下情况可出现假阴性：（1）释放入血循环中的曲霉）释放入血循环中的曲霉GM（包括甘露（包括甘露聚糖）并不持续存在而是会很快清除；（聚糖）并不持续存在而是会很快清除；（2）以前使用了抗真菌药物；）以前使用了抗真菌药物；（3）病情不严重；（）病情不严重；（4）非粒细胞缺乏的患者。）非粒细胞缺乏的患者。大家好大家好222 2、根据感染部位推测可能的病原体、根据感染部位推测可能的病原
13、体大家好大家好233、根据感染人群推测可能的病原体、根据感染人群推测可能的病原体 社区获得性感染：肺炎链球菌，流感嗜血杆菌，卡他莫拉菌，军团社区获得性感染：肺炎链球菌，流感嗜血杆菌，卡他莫拉菌，军团菌，肺炎支原体，沙眼衣原体，肺炎衣原体，金黄色葡萄球菌菌，肺炎支原体，沙眼衣原体，肺炎衣原体，金黄色葡萄球菌 医院获得性感染：肺炎克雷伯菌，大肠埃希菌，铜绿假单胞菌，医院获得性感染：肺炎克雷伯菌，大肠埃希菌，铜绿假单胞菌，鲍曼不动杆菌，嗜麦芽窄食单胞菌，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌鲍曼不动杆菌，嗜麦芽窄食单胞菌，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 免疫缺陷患者感染：卡氏肺孢子菌，结核分支杆菌，奴卡菌，曲霉免疫缺陷
14、患者感染：卡氏肺孢子菌，结核分支杆菌，奴卡菌，曲霉菌菌 肺部特殊病原体感染：鼠疫耶尔森菌，放线菌，炭疽杆菌，球孢子菌，肺部特殊病原体感染：鼠疫耶尔森菌，放线菌，炭疽杆菌，球孢子菌，组织胞浆菌，结核分支杆菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隐球菌，洋葱伯组织胞浆菌，结核分支杆菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隐球菌，洋葱伯克霍氏菌，马红球菌，立克次体克霍氏菌，马红球菌，立克次体大家好大家好24CAP、HAP的发病时间和病原体的发病时间和病原体构成构成48hHAP 早期早期5天天 肺炎链球菌肺炎链球菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌HAP 中期中期5天天HAP 晚期晚期MSSA or MRSA肠杆菌属肠杆菌属肺炎克雷伯菌肺炎克
15、雷伯菌,大肠杆菌大肠杆菌绿脓杆菌绿脓杆菌不动杆菌属不动杆菌属嗜麦芽窄食假单胞菌嗜麦芽窄食假单胞菌35101520CAP48h主要致病菌主要致病菌多为非多重耐多为非多重耐药菌，预后好药菌，预后好肺炎支原体肺炎支原体G菌为主菌为主,G菌比例较早发菌比例较早发性性HAP低低20入入 院院 时时 间（天）间（天）多为多重多为多重耐药菌株耐药菌株ATS.Am J Respir Crit Care Med.2005;171.38841嗜肺军团菌嗜肺军团菌大家好大家好254 4、根据可能的病原体选择检测方法、根据可能的病原体选择检测方法培养：培养：细菌、真菌细菌、真菌染色镜检：染色镜检：结核分枝杆菌、真菌、
16、肺孢子菌结核分枝杆菌、真菌、肺孢子菌病原体鉴定：病原体鉴定：生化鉴定、质谱分析（布鲁克、梅里埃）生化鉴定、质谱分析（布鲁克、梅里埃）抗原检测：抗原检测：肺炎链球菌（尿抗原）、军团菌（尿抗菌）、肺炎链球菌（尿抗原）、军团菌（尿抗菌）、病毒、支原体、衣原体、真菌病毒、支原体、衣原体、真菌抗体检测：抗体检测：立克次体、军团菌立克次体、军团菌PCRPCR：所有病原菌，尤其是难培养的细菌和病毒所有病原菌，尤其是难培养的细菌和病毒细胞因子检测：细胞因子检测：INF-INF-大家好大家好26培养基的选择培养基的选择 增菌培养基：肉汤、碱性蛋白胨水增菌培养基：肉汤、碱性蛋白胨水 基础培养基：营养琼脂、基础培养
17、基：营养琼脂、M-HM-H琼脂琼脂 选择培养基：麦康凯琼脂、选择培养基：麦康凯琼脂、SSSS琼脂琼脂 鉴别培养基：胆汁七叶苷琼脂鉴别培养基：胆汁七叶苷琼脂 厌氧培养基：厌氧血平板厌氧培养基：厌氧血平板 接种方法接种方法 肉汤增菌：血液、脑脊液等肉汤增菌：血液、脑脊液等 蛋白胨水增菌：粪便（弧菌）蛋白胨水增菌：粪便（弧菌）平板划线接种：其他标本（四区划线法）平板划线接种：其他标本（四区划线法）大家好大家好27染色镜检染色镜检直接镜检：湿片法或悬滴法，观察细菌动力直接镜检：湿片法或悬滴法，观察细菌动力革兰染色镜检：阳性（紫色）、阴性（红色）革兰染色镜检：阳性（紫色）、阴性（红色）抗酸染色镜检：抗酸
18、菌（红色）抗酸染色镜检：抗酸菌（红色）其它染色镜检：其它染色镜检：a.a.荚膜荚膜 b.b.鞭毛鞭毛 c.c.异染颗粒异染颗粒大家好大家好28流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌大家好大家好29六胺银染色（肺孢子菌）六胺银染色（肺孢子菌）PAS染色（肺诺卡菌）染色（肺诺卡菌）肺活检组织抗酸杆菌肺活检组织抗酸杆菌大家好大家好30生化鉴定生化鉴定 利用细菌可以分解、发酵不同的底物：利用细菌可以分解、发酵不同的底物：葡萄糖、乳糖等糖类，氨基酸、盐类等葡萄糖、乳糖等糖类，氨基酸、盐类等 产生不同的代谢产物的特性：产生不同的代谢产物的特性：酸性、碱性、产气等等酸性、碱性、产气等等大家好大家好
19、31质谱与传统细菌鉴定仪的区别质谱与传统细菌鉴定仪的区别大家好大家好32抗原抗体检测抗原抗体检测大家好大家好33分子诊断分子诊断 定性定性PCR PCR 实时荧光定量实时荧光定量PCRPCR 多指标检测平台多指标检测平台大家好大家好34呼吸道感染常见病原体及检测方法呼吸道感染常见病原体及检测方法肺炎病原体分子诊断平台肺炎病原体分子诊断平台Bhat N，Use and Evaluation of Molecular Diagnostics for Pneumonia Etiology Studies.Clinical Infectious Diseases 2012;54(S2):S1538大家
20、好大家好35肺炎病原体分子诊断平台的条件肺炎病原体分子诊断平台的条件大家好大家好36Antigen-specific T cellsLiu HY,Hepatobiliary Pancreat Dis Int 2006;5(1):129-132 大家好大家好37大家好大家好38实验室检查的质量保证实验室检查的质量保证u 分析前影响因素分析前影响因素 分析中影响因素分析中影响因素 分析后影响因素分析后影响因素大家好大家好39Review of laboratory errors大家好大家好40Bonini P，Errors in laboratory medicine.Clin Chem 2002;48(5):691大家好大家好41沟通与合作非常重要沟通与合作非常重要 正确的临床思维正确的临床思维是指导选择适当的临床检验方法的前提是指导选择适当的临床检验方法的前提 寻找病原体寻找病原体源头所在、多方协作、倾力寻找源头所在、多方协作、倾力寻找“对症对症”治疗治疗没有最好的药物，只有最正确的选择没有最好的药物，只有最正确的选择 临床疗效是最高的肯定和奖励临床疗效是最高的肯定和奖励病原菌越来越刁钻，每一个患者都是一本书，我们病原菌越来越刁钻，每一个患者都是一本书，我们从中学到知识，获得乐趣从中学到知识，获得乐趣大家好大家好42
