1、1/1 1/1 MD0 xxx.01MD0 xxx.01Miltenyi Biotec:Miltenyi Biotec:免疫磁珠分选技术及应用免疫磁珠分选技术及应用德国美天旎生物技术有限公司德国美天旎生物技术有限公司MD0197.02MD0197.02内容内容 MACSMACS技术原理技术原理 MACSMACS技术设备及分选策略技术设备及分选策略 几种特殊的几种特殊的MACSMACS分选分选 分选和分析分选和分析DCDC细胞细胞 分选各种分选各种T T细胞细胞 分选和分析细胞因子分泌细胞分选和分析细胞因子分泌细胞 分选造血干细胞分选造血干细胞 分选人类肿瘤细胞分选人类肿瘤细胞 分选和分析凋亡和
2、死亡细胞分选和分析凋亡和死亡细胞 分选转染细胞分选转染细胞 分子生物学和蛋白生化的分选分子生物学和蛋白生化的分选MD0347.01MD0347.01MACSMACS技术原理技术原理MACS(Magnetic Activated Cell Sorting)MACS(Magnetic Activated Cell Sorting):=免疫学免疫学+细胞生物学细胞生物学+磁力学磁力学 基于抗体对抗原的特异性识别基于抗体对抗原的特异性识别 磁性微珠直接或者间接偶联在抗体上,从而与细胞相连磁性微珠直接或者间接偶联在抗体上,从而与细胞相连 在高强度、梯度磁场中达到细胞磁性分离的目的在高强度、梯度磁场中达到
3、细胞磁性分离的目的MD0651.01MD0651.01MACSMACS 磁性分选磁性分选MACSMACS微珠进行磁微珠进行磁性标记性标记未标记的细胞未标记的细胞先行流出先行流出洗脱阳性分洗脱阳性分选的细胞选的细胞MD0197.02MD0197.02分选前标本制备:过滤分选前标本制备:过滤MACSMACS预选滤器:预选滤器:3030 m m MD0197.02MD0197.02MACS MACS 技术技术设备与试剂设备与试剂 MACSMACS微珠微珠 MACSMACS分选柱分选柱 MACS MACS 分选器分选器 详细分选方案详细分选方案*MACSMACS技术技术设备与试剂设备与试剂MACSMA
4、CS微珠:微珠:MACS MACS 微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒,可用于目的细胞的微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒,可用于目的细胞的磁性标记。磁性标记。特性:特性:5050nmnm大小大小 对细胞没有毒性对细胞没有毒性 可生物降解可生物降解 不影响细胞特性不影响细胞特性 MD0057.03MD0057.03MACSMACS技术分选的技术分选的CD8CD8+T T 细胞细胞微珠微珠MACSMACS微珠微珠直标微珠直标微珠多选微珠多选微珠间标微珠间标微珠MACSMACS技术技术设备与试剂设备与试剂MACSMACS分选柱:分选柱:填充有不同规格的铁珠。填充有不同规
5、格的铁珠。铁珠表面有亲水包被,不损伤细胞。铁珠表面有亲水包被,不损伤细胞。无菌包装。无菌包装。可用于分选多种细胞及亚细胞物质、可用于分选多种细胞及亚细胞物质、细菌、病毒、细菌、病毒、mRNAmRNA和蛋白质。和蛋白质。专利产品专利产品将磁场扩大将磁场扩大100010001000010000倍倍高纯度,高回高纯度,高回收率收率 MD0061.02MD0061.02在在MSMS柱中产生的强大磁场柱中产生的强大磁场 MACS分选柱:MACSMACS技术技术设备与试剂设备与试剂MACSMACS分选器:从手动到自动,从实验室到临床分选器:从手动到自动,从实验室到临床MACSMACS技术技术设备与试剂设备
6、与试剂MACS分选器MACSMACS技术技术设备与试剂设备与试剂autoMACSautoMACS分选仪分选仪 9 9种程序,一机完成所有细胞分选种程序,一机完成所有细胞分选 成本低,两个可重复使用的分选柱(成本低,两个可重复使用的分选柱(2 2周内周内100100次)次)快速(快速(3 31010分钟)分钟)重复性好重复性好 全自动分选,仪器操作简单全自动分选,仪器操作简单 适用范围广:适用范围广:从少量标本(从少量标本(105105)到大量标本()到大量标本(4 4X109X109),),进样量进样量0.50.5ml-50mlml-50ml 8 8种全血微珠,可以做常见细胞的全血分选,省去了
7、种全血微珠,可以做常见细胞的全血分选,省去了费时的提取单个核细胞过程费时的提取单个核细胞过程MACSMACS技术主要优势技术主要优势 小磁珠小磁珠:50:50 nmnm(快速、不活化细胞、不沉淀)快速、不活化细胞、不沉淀)保留细胞功能(直接进行后续实验;无毒性;保留细胞功能(直接进行后续实验;无毒性;氧化氧化 铁和多聚糖组成,可生物降解)铁和多聚糖组成,可生物降解)与流式细胞仪兼容(不影响细胞光学特性、不与流式细胞仪兼容(不影响细胞光学特性、不影响荧影响荧 光抗体标记、与流式细胞仪分选联合使用可以缩光抗体标记、与流式细胞仪分选联合使用可以缩短流短流 式分选时间)式分选时间)快速、简便、无菌快速
8、、简便、无菌 适用范围广(磁珠种类多、从少量到大量、适用适用范围广(磁珠种类多、从少量到大量、适用于分于分 选各种细胞、亚细胞物质)选各种细胞、亚细胞物质)MD0043.02MD0043.02MACSMACS 细胞分选策略细胞分选策略 阳性分选阳性分选 去除分选去除分选 去除分选后再阳性分选去除分选后再阳性分选 多重分选多重分选MD0044.02MD0044.02MACSMACS细胞分选策略细胞分选策略1 1、阳性分选:阳性分选:根据特异性标志分选细胞根据特异性标志分选细胞:阳性分选是指目的细胞磁性标记阳性分选是指目的细胞磁性标记 后,作为阳性的标记组分直接分选出来。后,作为阳性的标记组分直接
9、分选出来。优点:优点:高纯度,尤其是富集稀有的细胞高纯度,尤其是富集稀有的细胞 高回收率高回收率 操作简便、迅速操作简便、迅速MD0044.02MD0044.02MD016102MD016102阳性分选策略阳性分选策略MACSMACS 微珠磁性微珠磁性标记标记未标记细胞先行流出未标记细胞先行流出将分选柱移将分选柱移出磁场,洗出磁场,洗脱阳性分选脱阳性分选细胞细胞MACSMACS细胞分选策略细胞分选策略2 2、去除分选:去除分选:去除分选是磁性标记非目的细胞,并将其从细胞混合物中去去除分选是磁性标记非目的细胞,并将其从细胞混合物中去 除,即未磁性标记的细胞为目的细胞。除,即未磁性标记的细胞为目的
10、细胞。去除分选策略适用范围:去除分选策略适用范围:去除不需要的细胞去除不需要的细胞 缺乏针对目的细胞的特异性抗体(如肿瘤细胞)缺乏针对目的细胞的特异性抗体(如肿瘤细胞)不需要抗体和目的细胞结合不需要抗体和目的细胞结合 需进一步通过阳性选择分选细胞亚群需进一步通过阳性选择分选细胞亚群MD0044.02MD0044.02MD0160.02MD0160.02去除分选去除分选磁性标记磁性标记分选未磁性标记细胞分选未磁性标记细胞MACSMACS细胞分选策略细胞分选策略3 3、去除分选后再阳性分选:去除分选后再阳性分选:即先去除非目的细胞,再进行阳性分选。即先去除非目的细胞,再进行阳性分选。适用范围:适用
11、范围:非目的细胞也表达用来阳性选择目的细胞的抗原。非目的细胞也表达用来阳性选择目的细胞的抗原。要分选非常稀有细胞,先去除非目的细胞再行阳性分选,要分选非常稀有细胞,先去除非目的细胞再行阳性分选,可获得高纯度的目的细胞。可获得高纯度的目的细胞。MD0044.02MD0044.021.1.去除非去除非CD4CD4+T T 细胞细胞。用生物素化抗体混合物和抗生物素微珠间接磁性用生物素化抗体混合物和抗生物素微珠间接磁性标记非标记非CD4CD4+T T 细胞细胞 磁性分选去除标记细胞磁性分选去除标记细胞 先行流出为先行流出为 CD4CD4+T T 细胞细胞 2.CD252.CD25微珠直接磁性标记微珠直
12、接磁性标记CD25CD25+细胞细胞阳性分选靶细胞阳性分选靶细胞 CD4CD4+CD25 CD25+调节性调节性T T滞留在分选柱上,离开磁场后洗滞留在分选柱上,离开磁场后洗脱下来脱下来去除后再阳性分选去除后再阳性分选CD4CD4+CD25CD25+双阳性细胞双阳性细胞MD0652.01MD0652.01多选微珠标记多选微珠标记MACS MACS 分选分选磁性颗粒的酶解离磁性颗粒的酶解离终止解离反应终止解离反应根据第二标志根据第二标志进行磁珠标记进行磁珠标记MACS MACS 分选分选MACSMACS细胞分选策略细胞分选策略4 4、多选微珠:多选微珠:MACSMACS畅销机器与分选柱畅销机器与
13、分选柱 MiniMACS starting kitMiniMACS starting kit:1 1个分选架、个分选架、1 1个个MiniMACSMiniMACS分选器分选器、1 1盒盒MSMS分选柱、分选柱、1 1支价值支价值75007500元试剂元试剂(1508815088元):可做阳性分选、小量标本、元):可做阳性分选、小量标本、间标去除分选、分子生物学分选间标去除分选、分子生物学分选 Mini&MidiMACS starting kitMini&MidiMACS starting kit:1 1个分选架、个分选架、1 1个个MiniMACSMiniMACS分选器、分选器、1 1个个Mi
14、diMACSMidiMACS分选器、分选器、1 1盒盒MSMS分选柱、分选柱、1 1盒盒LS/LDLS/LD分选柱、分选柱、1 1支价值支价值75007500元试剂元试剂(2783827838元):可做阳性分选和去除分选元):可做阳性分选和去除分选 MSMS分选柱:分选柱:1 1盒盒2525个,个,27632763元元 LSLS分选柱:分选柱:1 1盒盒2525个,个,43564356元元 LDLD分选柱:分选柱:1 1盒盒2525个,个,51005100元元 uMACSuMACS与与u u或者或者M M分选柱分选柱:分子生物学分选:分子生物学分选 VarioMACSVarioMACS分选仪分
15、选仪 autoMACSautoMACS自动分选仪自动分选仪、CliniMACSCliniMACS分选仪分选仪 MD0044.02MD0044.02MACSMACS几种畅销磁珠与抗体几种畅销磁珠与抗体 专利产品:专利产品:CD133CD133、CD303CD303、CD304CD304 特殊产品:人类特殊产品:人类DCDC系列:系列:BDCA-1(CD1c)BDCA-1(CD1c)、BDCA-2(CD303)BDCA-2(CD303)、BDCA-3(CD141)BDCA-3(CD141)、BDCA-4(CD304)BDCA-4(CD304)小鼠小鼠DCDC系列:系列:mPDCAmPDCA微珠与抗
16、体微珠与抗体 干细胞产品:干细胞产品:CD133CD133、CD271CD271微珠与抗体微珠与抗体 细胞因子分泌细胞:细胞因子分泌细胞:CSACSA分选与分析分选与分析 TH2TH2细胞:细胞:CD294(CRTH)CD294(CRTH)微珠与抗体微珠与抗体 分选人类肿瘤细胞:上皮肿瘤:分选人类肿瘤细胞:上皮肿瘤:CKCK、HEAHEA 非血非血液肿瘤:液肿瘤:CD45CD45去除去除 死亡细胞去除试剂盒死亡细胞去除试剂盒 分选转染细胞分选转染细胞 分选分选HIVHIV病毒、病毒、mRNAmRNA、cDNAcDNA top ten top ten:CD133CD133、CD34CD34、人人
17、CD4+CD25+CD4+CD25+、小鼠小鼠CD4+CD25+CD4+CD25+CD303/CD304 CD303/CD304、人类人类NKNK、小鼠小鼠CD11cCD11c、anti-PE anti-PE 微珠微珠 小鼠干细胞试剂盒(系别阴性小鼠干细胞试剂盒(系别阴性CD117CD117)、)、CD4/CD8CD4/CD8 MD0044.02MD0044.02主要竞争对手分析主要竞争对手分析 DynalDynal:大磁珠大磁珠 主要市场:主要市场:CD4CD4、CD8CD8等高频细胞,等高频细胞,优势:价格优势:价格 劣势:回收率低(不能做低频细胞、弱表达细胞劣势:回收率低(不能做低频细胞
18、、弱表达细胞分选)分选)磁珠必需剪切(耗时磁珠必需剪切(耗时细胞状态细胞状态不佳)不佳)大磁珠(活化细胞)大磁珠(活化细胞)我们的优势:纯度高、回收率高、细胞活性好我们的优势:纯度高、回收率高、细胞活性好 不活化细胞,不改变细胞功能不活化细胞,不改变细胞功能 省时、省细胞省时、省细胞 产品品种最多,有专利产品产品品种最多,有专利产品 有手动、自动、临床级产品有手动、自动、临床级产品 有强大的技术支持队伍有强大的技术支持队伍 很好的声誉,市场占有率最高很好的声誉,市场占有率最高 MD0044.02MD0044.02主要卖点主要卖点 干细胞产品:人类:干细胞产品:人类:CD133CD133、CD3
19、4CD34、MSCMSC试剂盒(试剂盒(CD271CD271)小鼠:系别阴性试剂盒、小鼠:系别阴性试剂盒、CD117CD117微珠微珠 定向分化培养基定向分化培养基 DCDC产品:产品:人类:人类:BDCA-1BDCA-1、BDCA-2/4BDCA-2/4 小鼠:小鼠:CD11cCD11c NK NK产品:产品:人类:人类:NKNK细胞阴选试剂盒、细胞阴选试剂盒、CD3/CD56CD3/CD56 T T细胞产品:细胞产品:CD4+CD25+CD4+CD25+调节性调节性T T细胞(人和小鼠)细胞(人和小鼠)CSACSA系列系列 CD4CD4、CD8CD8微珠及阴选试剂盒微珠及阴选试剂盒 B B
20、细胞产品:细胞产品:CD19CD19微珠及阴选试剂盒微珠及阴选试剂盒 肿瘤细胞分选:癌细胞富集试剂盒、肿瘤细胞分选:癌细胞富集试剂盒、HEAHEA微珠、微珠、CD45CD45阴选阴选 单核细胞分选:单核细胞分选:CD14CD14微珠及阴选试剂盒微珠及阴选试剂盒 间标微珠间标微珠 死细胞去除试剂盒死细胞去除试剂盒 预选滤器、预选滤器、FCRFCR阻断剂、阻断剂、T T细胞活化与扩增试剂盒细胞活化与扩增试剂盒 流式细胞仪抗体(价廉、包装量大、优质)流式细胞仪抗体(价廉、包装量大、优质)MD0044.02MD0044.02识别识别DCDC和和DCDC亚群亚群 NewNew(CD3,CD14,CD16
21、,CD19,CD20,CD56)DC DC 亚群特异性标志亚群特异性标志:B Blood lood D Dendritic endritic C Cell ell A AntigensntigensPE PE FITCFITCAPCAPCMACSMACS 技术分选与分析小鼠技术分选与分析小鼠DCDC细胞细胞 NewNewMACSMACS 技术分选与分析大鼠技术分选与分析大鼠DCDC细胞细胞 NewNewMD0044.02MD0044.02Anti-DC(OX62)Anti-DC(OX62)微珠微珠 用于从大鼠外周血、淋巴和非淋巴组织中分选或者去除OX62+DC。单克隆抗体OX62识别表达于大部
22、分大鼠DC上的整合素E2亚单位(分子量150kDa)。两个主要的树突状细胞亚群:CD4/OX41双阳性和CD4/OX41双阴性亚群。该抗原也表达于表皮TCR/+或/+的T细胞亚群和垂体前叶星状滤泡样(S100+)细胞的一个亚群,但在朗格罕氏细胞和巨噬细胞上不表达。MACSMACS 技术分选与分析功能性技术分选与分析功能性T T细胞细胞MD0044.02MD0044.02NoImageT h 细 胞(C D 4)T c 细 胞(C D 8)调 节 性 T 细 胞(C D 4+C D 2 5+)T C R r/d 细 胞(T C R r/d 微 珠)N K/T 细 胞(C D 5 6 多 选 微
23、珠 C D 3 微 珠)T 细 胞 亚 群N a iv e T 细 胞(C D 4 5 R O 阴 选)活 化 T 细 胞(C D 6 9、C D 2 5、C D 3 0)效 应 T 细 胞(C D 2 7)记 忆 T 细 胞(C D 4 5 R A 阴 选、C D 4 5 R O 阳 选)T h 2 细 胞(a n ti-C R T H 2)T 细 胞 功 能 亚 群IF N-rIL-2IL-4IL-1 0T N F-a抗 原 特 异 性 T 细 胞T 细 胞 分 选MD0420.02MD0420.02MACSMACS 细胞因子分泌细胞分析与分选细胞因子分泌细胞分析与分选 NewNew抗原特
24、异性抗原特异性再刺激再刺激细胞因子细胞因子分泌阶段分泌阶段捕获试剂捕获试剂标记标记荧光标记和荧光标记和磁性分选磁性分选 Catch ReagentCatch ReagentDetection Detection AntibodyAntibodyAnti-PE Anti-PE MicroBeadsMicroBeadscytokine cytokine secreting secreting cellcellsecreted secreted cytokinecytokineMD0420.02MD0420.02MACSMACS 细胞因子分泌细胞分析与分选细胞因子分泌细胞分析与分选 NewNew分选
25、前分选前刺激组刺激组分选后分选后未刺激组未刺激组*百分比均为占百分比均为占CD4CD4细胞百分比细胞百分比MD0420.02MD0420.02MACSMACS 细胞因子分泌细胞分析细胞因子分泌细胞分析NewNew刺激组刺激组未刺激组未刺激组 使用PE-CMVpp65/HLA/A2-tetramers 和IFN-g Secretion Assay-Detection Kit(APC)or IL-2 Secretion Assay-Detection Kit(APC)检测 HLA/A2 CMV+患者PBMC。*百分比均为占CD8细胞百分比人类细胞因子分泌细胞分选与检测人类细胞因子分泌细胞分选与检测
26、试剂盒试剂盒IFN-g IFN-g 分泌细胞分泌细胞IL-2IL-2分泌细胞分泌细胞IL-4IL-4分泌细胞分泌细胞IL-10IL-10分泌细胞分泌细胞TNF-TNF-分泌细胞分泌细胞MACS MACS 细胞因子分泌细胞分析与分选细胞因子分泌细胞分析与分选 NewNew小鼠细胞因子分泌细胞分小鼠细胞因子分泌细胞分选与检测试剂盒选与检测试剂盒 IFN-g IFN-g 分泌细胞分泌细胞 IL-2IL-2分泌细胞分泌细胞 IL-4IL-4分泌细胞分泌细胞 IL-5IL-5分泌细胞分泌细胞 IL-10IL-10分泌细胞分泌细胞人类干细胞分选微珠与试剂盒人类干细胞分选微珠与试剂盒 CD34CD34微珠及
27、多选微珠:用于从骨髓、外周血、脐带血中分选微珠及多选微珠:用于从骨髓、外周血、脐带血中分选 造血干细胞、内皮前体细胞造血干细胞、内皮前体细胞 CD133CD133微珠微珠:用于从骨髓、外周血、脐带血中分选:用于从骨髓、外周血、脐带血中分选 造血干细胞、内皮前体细胞、多能成体干细胞(造血干细胞、内皮前体细胞、多能成体干细胞(MAPCMAPC)CD117CD117微珠:微珠:用于从骨髓、外周血、脐带血中分选用于从骨髓、外周血、脐带血中分选 造血干细胞、骨髓间充质细胞造血干细胞、骨髓间充质细胞 CD45/GlyACD45/GlyA去除分选试剂盒:用于从骨髓中阴选分选去除分选试剂盒:用于从骨髓中阴选分
28、选 多能成体干细胞(多能成体干细胞(MAPCMAPC)CD105CD105微珠:微珠:用于从骨髓中分选间充质细胞用于从骨髓中分选间充质细胞 抗成纤维细胞微珠:抗成纤维细胞微珠:用于从骨髓中分选间充质细胞用于从骨髓中分选间充质细胞 多能成体干细胞(多能成体干细胞(MAPCMAPC)MSCMSC分选工具(分选工具(CD271CD271)newnew:用于从骨髓中分选间充质细用于从骨髓中分选间充质细胞胞 MD0044.02MD0044.02MSC Research Tool Box-CD271(LNGFR)MSC Research Tool Box-CD271(LNGFR)newnew成分成分:分选
29、分选:CD271(LNGFR)-APCAnti-APC MicroBeadsFcR Blocking 培养培养:NH Expansion Medium(2x500 mL)CytoMix-CD271(LNGFR)质量控制质量控制:NH AdipoDiff Medium(12x8 mL)NH OsteoDiff Medium(12x5 mL)Introductory offerIntroductory offerAds in Blood(April&Mai)MSC Research Tool Box-CD271(LNGFR)MSC Research Tool Box-CD271(LNGFR)人类人
30、类MSCMSC的标准化研究的标准化研究CD271CD271又叫做低亲和力神经生长因子受体又叫做低亲和力神经生长因子受体(LNGFR),(LNGFR),是迄今为是迄今为止发现的最佳止发现的最佳MSCMSC分选标志,可用于直接从人类骨髓中分选分选标志,可用于直接从人类骨髓中分选MSCMSC。分选后分选后CD271(LNGFR)+MSCsCD271(LNGFR)+MSCs是一群均一的是一群均一的MSCMSC细胞群,而细胞群,而CD271CD271阴性细胞成分中没有成纤维细胞克隆形成单位阴性细胞成分中没有成纤维细胞克隆形成单位 (CFU-(CFU-F)F)活性。活性。与贴壁培养的与贴壁培养的MSCMS
31、C相比,相比,CD271CD271分选的分选的MSCMSC增殖能力增强增殖能力增强101010001000倍。倍。CD271CD271分选和扩增的分选和扩增的MSCMSC保留了多系分化潜能,具有保留了多系分化潜能,具有分化为脂肪细胞和成骨细胞、软骨细胞、内皮细胞的可塑性分化为脂肪细胞和成骨细胞、软骨细胞、内皮细胞的可塑性。cumulative population doubling(CPD)cumulative population doubling(CPD)Ads in Blood(April&Mai)MSC Research Tool Box-CD271(LNGFR)MSC Researc
32、h Tool Box-CD271(LNGFR)人类人类MSCMSC的标准化研究的标准化研究Nadia QuiriciNadia Quirici等,等,Experimental Hematology 30(2002)783791Experimental Hematology 30(2002)783791MACSMACS小鼠干细胞分选试剂盒:小鼠干细胞分选试剂盒:Lineage Cell Depletion Kit:Lineage Cell Depletion Kit:去除成熟和分化的造血细去除成熟和分化的造血细胞,预富集造血干祖细胞。胞,预富集造血干祖细胞。CD117 MicroBeadsCD1
33、17 MicroBeads:分选早期和晚期干祖细胞分选早期和晚期干祖细胞。Anti-Sca-1 MicroBeadsAnti-Sca-1 MicroBeads:分选造血干细胞和早期造血祖分选造血干细胞和早期造血祖细胞。细胞。CD117+Sca-1+linCD117+Sca-1+lin细胞也有非造血分化潜能,如分化为细胞也有非造血分化潜能,如分化为肌细胞、内皮细胞、肝细胞、神经系统细胞。肌细胞、内皮细胞、肝细胞、神经系统细胞。CD45/Ter119CD45/Ter119微珠去除分选骨髓细胞,可以得到微珠去除分选骨髓细胞,可以得到MAPCs,MAPCs,也也有体外分化为多种细胞的潜能。有体外分化为
34、多种细胞的潜能。小鼠骨髓造血干细胞小鼠骨髓造血干细胞(HSC)(HSC)定义为定义为 Sca-1+Sca-1+、CD117+(c-kit)CD117+(c-kit)、Thy-1low Thy-1low 和和lin-lin-细胞细胞.MACSMACS 技术分选人类肿瘤细胞技术分选人类肿瘤细胞 NewNewMD0044.02MD0044.02上皮肿瘤细胞上皮肿瘤细胞 根据表面抗原进行分选与分析:根据表面抗原进行分选与分析:Anti-HEA(EpCAM)MicroBeads Anti-HEA(EpCAM)MicroBeads Anti-ErbB-2(HER-2/neu)MicroBeads Anti
35、-ErbB-2(HER-2/neu)MicroBeads根据细胞内细胞角蛋白分选与分析:根据细胞内细胞角蛋白分选与分析:cytokeratincytokeratin黑色素瘤细胞分选:黑色素瘤细胞分选:Anti-Anti-melanoma MicroBeadsmelanoma MicroBeads其它非造血系统肿瘤细胞其它非造血系统肿瘤细胞:CD45 MicroBeadsCD45 MicroBeads去除白细胞去除白细胞骨髓瘤细胞:骨髓瘤细胞:CD138 MicroBeadsCD138 MicroBeads霍奇金氏淋巴瘤霍奇金氏淋巴瘤/RSRS细胞:细胞:CD30 MicroBeadsCD30
36、MicroBeadsMACSMACS 技术分选凋亡细胞技术分选凋亡细胞 NewNewMD0044.02MD0044.02刺激、分化、凋亡、脱颗粒、坏死刺激、分化、凋亡、脱颗粒、坏死PSPS暴露暴露PSPS暴露细胞被暴露细胞被AnnexinVAnnexinV微珠磁性标记微珠磁性标记磁性标记细胞滞留在分选柱上磁性标记细胞滞留在分选柱上PSPS暴露细胞被洗脱下来暴露细胞被洗脱下来MACSMACS 技术分选转染细胞技术分选转染细胞 NewNewMD0044.02MD0044.02应用于功能基因、信号转导研究、药物筛选和标记技术。应用于功能基因、信号转导研究、药物筛选和标记技术。MACSelect4MA
37、CSelect4转染细胞分转染细胞分选试剂盒使用选试剂盒使用pMACS4.1pMACS4.1和自己的质粒和自己的质粒转染细胞转染细胞用用MACSelect4MACSelect4微珠微珠标记转染细胞标记转染细胞MACSMACS分选转染分选转染细胞细胞分选后细胞可分选后细胞可用于培养或者用于培养或者分析分析MACSMACS 技术分选转染细胞技术分选转染细胞 NewNewMD0044.02MD0044.02优点:优点:省时:只需省时:只需2-32-3小时小时(建立一个稳定的细胞系需数周)(建立一个稳定的细胞系需数周)纯度高,纯度高,背景低背景低 不影响转染细胞功能和活力不影响转染细胞功能和活力 分选
38、的细胞可直接用于培养或功能检测分选的细胞可直接用于培养或功能检测 可用于:原代细胞可用于:原代细胞&细胞系细胞系 贴壁贴壁&悬浮细胞悬浮细胞 稳定稳定&短暂转染短暂转染MACSMACS 分子生物学和蛋白生化的分选分子生物学和蛋白生化的分选 表位蛋白分选:表位蛋白分选:MACS MACS 抗抗His-,HA-,His-,HA-,c-myc-,c-myc-,GFP-,GST-GFP-,GST-蛋白分选蛋白分选.生物素化分子及其靶位分选:生物素化分子及其靶位分选:MACS MACS 链霉亲和素微珠链霉亲和素微珠 MACS MACS 免疫沉淀:免疫沉淀:MACS MACS 蛋白蛋白A A、蛋白蛋白G
39、G微珠微珠 mRNAmRNA分选:分选:从细胞、组织、外周从细胞、组织、外周血、血、总总RNARNA中分选中分选mRNAmRNA 一步法一步法cDNAcDNA合成合成newnewMD0044.02MD0044.02MACSMACS 分子生物学和蛋白生化的分选分子生物学和蛋白生化的分选优点:优点:分选柱上固定分选柱上固定:高纯度利于灵敏的后续实验高纯度利于灵敏的后续实验 作用温和,可获得理想的作用温和,可获得理想的分子复合物分子复合物 分选柱上分子修饰,可以减少细胞损失分选柱上分子修饰,可以减少细胞损失 MACSMACS微珠微珠:敏感,可用于极少量的目的分子敏感,可用于极少量的目的分子 快速:快速:分选分选mRNAmRNA仅需仅需1515分钟分钟 免疫沉淀只需免疫沉淀只需1-21-2小时小时 一步法一步法cDNAcDNA合成仅需合成仅需9090分钟分钟 MD0044.02MD0044.02Miltenyi Biotec GmbH(headquarter)Miltenyi Biotec GmbH(headquarter)