1、CK简介肌酸激酶(CK)广泛分布于体内需要大量能量供应的组织中,如心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中,是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要能量调节酶,它可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应。第1页/共14页CK是由M和B两个亚基组成,并以此分为三个最基本的同工酶即CK-MM、CK-MB、CK-BBCK-MM主要存在于骨骼肌组织中CK-MB主要存在于心肌组织中CK-BB主要存在于脑组织、胃肠道及子宫平滑肌中,脑组织中几乎全为CK-BB在正常血清中,主要为CK-MM和少量的CK-MB,几乎不见CK-BB。第2页/共14页CK与CK-MB的临床应用CK与CK-MB在
2、临床运用中价值最大的就是诊断急性心肌梗死(AMI)在AMI发生后46小时即可出现增高,24小时达峰值4872小时回复正常,若未回复,表明梗死持续发展两者结合使用即可用于AMI的较早期诊断可用于评估梗死范围或判断再梗死观察再灌注的效果(冲洗现象)第3页/共14页 CK增高还可见于进行性肌营养不良、横纹肌溶解症、剧烈活动后、脑血管意外、呼吸道感染、病毒性腹泻等,特别是呼吸道感染、病毒性腹泻等疾病时,CK-MB也常增高。临床应用中除测定CK和CK-MB的活性外,还注意CK-MB占总CK的比值。第4页/共14页若CK200U/L,CK-MB15U/L,但%CK-MB200U/L,%CK-MB在4%25
3、%之间,则AMI可能性大若CK200U/L,%CK-MB25%,考虑有CK-BB或巨型CK存在第5页/共14页CK检测方法(DGKC法)HNADPHPDGNADPADPHKATPATPCKADP磷酸葡萄糖内酯葡萄糖磷酸葡萄糖磷酸葡萄糖肌酸磷酸肌酸6666第6页/共14页正常情况下人体内CK-BB很少,可忽略不计,而免疫抑制法就是建立在忽略CK-BB的基础上的。用抗CK-M单体的抗体将M亚基完全抑制,CK-MM会完全失去活性,而CK-MB活性失去一半,所以CKMB的活性应该为测定结果的2倍。CKMB检测方法(免疫抑制法)第7页/共14页鉴于方法学的原因,CK-MB会出现假阳性,甚至于CK-MB活
4、性超过总CK活性。抛除试剂失效、定标失败等质量控制原因和偶然误差,可见于以下几种情况:第8页/共14页血清中存在多量CK-BB,如颅脑损伤时,CK-BB中B亚基的活性同CK-MB中B亚基活性累加并被乘以2,其干扰被放大两倍,造成CK-MB检测假性增高,但其数值绝不可能大于2倍的总CK活性。举个例子血清中有10个CK分子,2个是来源于心脏的CK-MB,5个是来源于脑组织的CK-BB,检测结果是:CK10,CK-MB2(心脏的CK-MB)+5(脑的CK-BB)X2=12(1)第9页/共14页血清中存在巨CK,其M亚基不能被抗人CK-MM抗体封闭,其活性累加于B亚基,造成CK-MB假性增高。见于恶性
5、肿瘤、肝硬化等。同样其数值绝不可能大于2倍的总CK活性(2)见于一些O型或B型血的癌症患者,原因可能是其免疫系统紊乱,其中的一些免疫球蛋白充当辅酶的作用(3)第10页/共14页溶血因素,红细胞中含有大量的腺甘酸激酶,催化ADP生成ATP,从而对CK和CK-MB产生正干扰,但是由于CK-MB的参考范围较CK狭窄,并且在CK-MB的检测中,干扰被放大2倍,因此溶血对CK-MB的影响远显著于对CK的影响,但CK-MB测定值绝不可能大于CK测定值的2倍。(4)严重的脂血,因为其增加漫反射,使透光度减低,对所有的以比色法为基础的实验都会产生影响,即便是速率法也难以摒除干扰(5)第11页/共14页CK过高,不能完全被抗人CK-MM抗体封闭,从而造成CK-MB测定值高于其真值(6)第12页/共14页注意:上述情况均不适用于婴幼儿!因为,CK-BB是CK中唯一随年龄变化的CK亚型,且在1周岁以内的幼儿中水平最高。对于儿童来说,其B亚基在总CK中的比例较成人高(表现为MB亚型或BB亚型)。由于儿童B亚基在CK中比例高,因此采用免疫抑制法测定儿童CK-MB的绝对活性在总CK中的比例均高于成人,对于婴幼儿来说可能会出现倒置现象第13页/共14页感谢您的欣赏!第14页/共14页