1、资料仅供参考,不当之处,请联系改正。掌握豚鼠过敏实验的原理;一、实验目的一、实验目的2熟悉超敏反应的分类。熟悉超敏反应的分类。1资料仅供参考,不当之处,请联系改正。二、原理二、原理超敏反应超敏反应 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。速发型超敏反应I I型超敏反应型超敏反应超敏反应分型超敏反应分型IIII型超敏反应型超敏反应IIIIII型超敏反应型超敏反应型超敏反应型超敏反应细胞毒型超敏反应细胞毒型超敏反应免疫复合物型超敏反应免疫复合物型超敏反应迟发型超敏反应迟发型超敏反应资料仅供参考,不当之处,请联系改正。型超敏反应型超敏反应又称为又称为速发型超敏反应速发型超敏反应,是由特异性的,是由特异性
2、的IgEIgE抗体抗体介导的,其主要特征为:介导的,其主要特征为:出现快,消退也快;出现快,消退也快;出现功能紊乱性疾病,不出现严重组织细胞损伤;出现功能紊乱性疾病,不出现严重组织细胞损伤;有明显个体差异和遗传背景。有明显个体差异和遗传背景。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。静息肥大细胞静息肥大细胞激活后激活后 5 分钟分钟激活后激活后 60 分钟分钟资料仅供参考,不当之处,请联系改正。荨麻疹荨麻疹哮喘病发作患儿哮喘病发作患儿资料仅供参考,不当之处,请联系改正。先给豚鼠注射小量异种蛋白,经过一定的潜伏期,动物处于致敏状态。当第二次用较大剂量相同抗原注射豚鼠
3、时,抗原激发豚鼠体内的肥大细胞或嗜碱性粒细胞,致使这些细胞释放多种生物活性介质,豚鼠迅速产生严重的过敏反应及至过敏性休克或死亡。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。1.1.豚鼠:体重豚鼠:体重200g200g左右的幼小豚鼠;左右的幼小豚鼠;2.2.变应原:马血清、鸡蛋清;变应原:马血清、鸡蛋清;3.3.其他:生理盐水、无菌注射器、针头、碘酒、酒其他:生理盐水、无菌注射器、针头、碘酒、酒精、棉球等。精、棉球等。三、主要实验材料三、主要实验材料资料仅供参考,不当之处,请联系改正。四、实验步骤四、实验步骤1.取豚鼠三只,编号标记;抓取方法:先用右手掌轻轻扣住豚鼠背部,抓住其肩胛下方,以拇指和食指抓住
4、颈部将其轻轻提起。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。2.2.致敏:按致敏:按1 1:1010分别稀释马血清,按照下表操作分别稀释马血清,按照下表操作腹腔注射腹腔注射0.1ml0.1ml。第一次注射第一次注射12 3马血清马血清生理盐水生理盐水马血清马血清资料仅供参考,不当之处,请联系改正。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。3.3.发敏:按发敏:按1 1:1010分别稀释马血清,鸡蛋清,按照分别稀释马血清,鸡蛋清,按照下表,心内注射下表,心内注射2ml2ml。2-3周后第二周后第二次注射次注射12 3鸡蛋清鸡蛋清马血清马血清马血清马血清资料仅供参考,不当之处,请联系改正。资料仅供参考,不当之
5、处,请联系改正。豚鼠豚鼠1在注射马血清在注射马血清1-5分钟会出现不安、抓鼻、喷嚏、分钟会出现不安、抓鼻、喷嚏、呼吸困难、竖毛、大小便失禁、痉挛性跳跃,症状严重者在呼吸困难、竖毛、大小便失禁、痉挛性跳跃,症状严重者在数分钟内死亡。数分钟内死亡。而豚鼠而豚鼠2、3无任何症状。无任何症状。五、结果判断五、结果判断资料仅供参考,不当之处,请联系改正。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。将死亡豚鼠解剖,可见肺脏极度水肿,胀满整个胸腔。将死亡豚鼠解剖,可见肺脏极度水肿,胀满整个胸腔。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。1、心脏注射时,首先要固定好动物,然后于心跳、心脏注射时,首先要固定好动物,然后于心跳最明显之处进针,感觉有搏动、注射器内有回血时最明显之处进针,感觉有搏动、注射器内有回血时再注射过敏原;再注射过敏原;2、由于动物个体反应性不同,有的反应较轻,可、由于动物个体反应性不同,有的反应较轻,可幸免死亡。如果再注射马血清也不出现反应,此称幸免死亡。如果再注射马血清也不出现反应,此称为脱敏状态。但脱敏状态是暂时的,大约为脱敏状态。但脱敏状态是暂时的,大约2周后又周后又处于致敏状态。处于致敏状态。六、注意事项六、注意事项