1、动物细胞工程动物细胞融合和动物细胞融合和单克隆抗体单克隆抗体 1.1.动物细胞工程常用的技术手段有?最基础的是哪动物细胞工程常用的技术手段有?最基础的是哪个技术?个技术?2.2.动物细胞培养的过程;原理。动物细胞培养的过程;原理。3.3.动物细胞体外生长的特点;什么是细胞株和细胞动物细胞体外生长的特点;什么是细胞株和细胞系。系。4.4.体细胞核移植技术的过程和原理。体细胞核移植技术的过程和原理。回顾复习回顾复习2生物种间杂交生物种间杂交想像图想像图3温故知新温故知新问题思考Q1Q2获得白菜获得白菜-甘蓝利甘蓝利用了什么技术?用了什么技术?植物体细胞杂交植物体细胞杂交此技术的过程?此技术的过程?
2、4?再分化再分化?植物细胞杂交植物细胞杂交技术利用什么技术利用什么原理?原理?用什么方法可用什么方法可以诱导植物细以诱导植物细胞融合?胞融合?一、原理:细胞膜具有流动性细胞的全能性二、诱导方式:物理法、化学法植物细胞杂交植物细胞杂交技术最终获得技术最终获得什么?什么?三、用途:获得杂种植株温故知新温故知新脱分化脱分化5思考思考 不同种动物体细胞能否杂交?过程如何?与植物体细胞杂交相比有何不同?已成功的动物细胞融合实例有很多,如人已成功的动物细胞融合实例有很多,如人小鼠、小鼠、人人兔、人兔、人鸡、鸡鸡、鸡鼠等上百种融合细胞。甚鼠等上百种融合细胞。甚至已成功完成了酵母菌至已成功完成了酵母菌鸡鸡、人
3、、人胡萝卜胡萝卜 等细胞等细胞的融合。的融合。请阅读课本P52,填写下表6获得杂交细胞获得杂种植株物理、化学方法(同左)灭活的病毒物理(离心、振动、电激)化学(聚乙二醇)使细胞分散后诱导细胞融合去壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交比较项目结果诱导方法7 8:9单克隆抗体 什么是抗体?由什么细胞分泌产生?是否具有特异性?10动物体内动物体内抗体抗体 (抗原不纯)(抗原不纯)血清抗体(抗体不纯)血清抗体(抗体不纯)筛选单一浆细胞筛选单一浆细胞不能无限增殖不能无限增殖 抗原抗原 浆细胞浆细胞血清血清
4、人们获得抗体的传统方法:11人们获得抗体的传统方法 小结向动物体内注射向动物体内注射_,使之产生抗体,使之产生抗体。抗原从动物从动物_中分离抗体中分离抗体。血清(1)(1)方法:(2)(2)缺点:产量低、纯度低,特异性差12思考思考 怎样大量获得化学性质单一、特异性强的抗体呢?B B淋巴细胞淋巴细胞 能分泌特异性抗体能分泌特异性抗体小鼠小鼠骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 能无限增殖能无限增殖杂交细胞杂交细胞设计方案:(不能无限增殖)不能无限增殖)(不能产生抗体)不能产生抗体)13杰出的成果杰出的成果-单克隆抗体单克隆抗体14单克隆抗体单克隆抗体15B,瘤,瘤,BB,B瘤瘤 ,瘤瘤瘤瘤 ,1.细胞融合后培
5、养液中有几种细胞?思考:3 3.制备过程中应用哪些细胞工程技术手段?2.为什么要对小鼠注射抗原?获得产生相应抗体的获得产生相应抗体的B淋巴细胞(浆细胞)淋巴细胞(浆细胞)细胞融合技术、细胞培养技术细胞融合技术、细胞培养技术16单克隆抗体单克隆抗体4.此过程中至少进行了几次筛选?目的相同吗?5.单克隆抗体的优点?特异性强,灵敏度高,特异性强,灵敏度高,可大量制备可大量制备。17最广泛应用最广泛应用 准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用18 单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用191 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,、科学家用小鼠骨髓瘤细
6、胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是()A.A.经过免疫的经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞 B.B.没经过免疫的没经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞C.C.经过免疫的经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 D.D.没经过免疫的淋巴细胞没经过免疫的淋巴细胞A2.2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中,正确的是动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中,正确的是()A.诱导融合的方法完全相同诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同所用的技术手段基本相同 C.操作步骤基本相同操作步骤基本相同 D.都能形成杂
7、种细胞都能形成杂种细胞 D考考你考考你203.3.单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是()A.A.由小鼠能产生抗体的由小鼠能产生抗体的B B淋巴细胞与肝细胞融合淋巴细胞与肝细胞融合 B.B.由小鼠一个由小鼠一个B B淋巴细胞诱导融合而成淋巴细胞诱导融合而成 C.C.由小鼠一个由小鼠一个B B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.D.由小鼠一个由小鼠一个B B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D4.4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是(只能使动物细胞融合的常用诱导方法是()A APEGPEG B B灭活的病毒灭活的病毒 C C电刺激电刺激 D D离心离心B考考你考考你215.5.单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B B淋巴细胞诱导融合后,淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是殖的细胞是 ()淋巴细胞淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞 B B淋巴细胞自身融合细胞小淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞A.A.B.B.C.C.D.D.C C考考你考考你22Thank You!