1、第十一章 消毒与灭菌 公元公元325325年年,古希腊出现世界上以在传染病流行时收容病古希腊出现世界上以在传染病流行时收容病人和为穷人提供医务服务的首家医院。由于医院的客观条件人和为穷人提供医务服务的首家医院。由于医院的客观条件极差，医院感染情况非常严重。极差，医院感染情况非常严重。产褥热是当时欧洲医院感染中造成损失最大、问题最严产褥热是当时欧洲医院感染中造成损失最大、问题最严重、研究最多、并最终得到解决的问题。重、研究最多、并最终得到解决的问题。Thomas LightfootThomas Lightfoot曾认为曾认为“产院是引导产妇走向死亡之门产院是引导产妇走向死亡之门”。由于产褥热的危
2、。由于产褥热的危害和影响，直至害和影响，直至19401940年，在某些发达国家仍有年，在某些发达国家仍有50%50%的产妇不的产妇不愿到医院分娩。愿到医院分娩。18431843年，年，HolmesHolmes发现产褥热与医生在尸检后发现产褥热与医生在尸检后不洗手就检查产妇与接生有关。不洗手就检查产妇与接生有关。英国外科医生英国外科医生Lister(1827-1912)Lister(1827-1912)首先简明细菌与感首先简明细菌与感染的关系，并提出消毒的概念，并于染的关系，并提出消毒的概念，并于18671867年发表了著名年发表了著名的有关外科无菌操作技术的论文，其中大部分原则仍沿的有关外科无
3、菌操作技术的论文，其中大部分原则仍沿用至今。用至今。Halstead Halstead在在John Hopkinks John Hopkinks 医院工作时，因其未婚医院工作时，因其未婚妻（手术室护士）对升汞洗手过敏，便请妻（手术室护士）对升汞洗手过敏，便请GoodyearGoodyear公司公司于于18891889年制作了两付橡胶手套，从此开创了外科手术时年制作了两付橡胶手套，从此开创了外科手术时戴手套的新纪元戴手套的新纪元。消毒与灭菌消毒与灭菌消毒消毒(disinfection)disinfection)：杀死物体上病原微生物的方法，并不杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽胞的细
4、菌或非病原微生物。用以消毒的药品称为一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。用以消毒的药品称为消毒剂消毒剂(disinfectant)disinfectant)。灭菌灭菌(sterilization)sterilization)：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。原微生物。抑菌抑菌(bacteriostasis)bacteriostasis)：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂为各种抗生素。常用的抑菌剂为各种
5、抗生素。防腐防腐(antisepsis)antisepsis)：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。细防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。菌一般不死亡。无菌无菌(asepsis)asepsis)：不存在活菌。不存在活菌。无菌操作（无菌操作（antiseptic technique)antiseptic technique)指在进行外科手术指在进行外科手术或分离、转种及培养时防止其他微生物污染实验材料的或分离、转种及培养时防止其他微生物污染实验材料的操作方法。操作方法。Carbolic Steam Spray热力灭菌法热力灭菌法辐射杀菌法辐射杀菌法滤过除菌法滤过除菌法超声波杀菌法超声
6、波杀菌法干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法一一.热力灭菌法热力灭菌法湿热湿热80经经5-10min可杀死所有细菌繁殖体和真菌可杀死所有细菌繁殖体和真菌多数无芽胞细菌经多数无芽胞细菌经55-60作用作用30-60min后死亡后死亡干热灭菌法、干热灭菌法、湿热灭菌法湿热灭菌法焚烧：废弃物品、动物尸体。焚烧：废弃物品、动物尸体。烧灼：接种环、试管口灭菌。烧灼：接种环、试管口灭菌。干烤：干烤：160-1702h 玻璃器皿、瓷器等。玻璃器皿、瓷器等。红外线：红外线：1-10 m波长最强，但只在照射波长最强，但只在照射 到的物体表面产生热效，医疗到的物体表面产生热效
7、，医疗 器械的灭菌。器械的灭菌。脱水干燥，使脱水干燥，使大分子变性大分子变性湿热灭菌比干热效果好湿热灭菌比干热效果好1.湿热灭菌时，菌体蛋白质较易凝固。湿热灭菌时，湿热灭菌时，菌体蛋白质较易凝固。湿热灭菌时，菌体吸收水分，蛋白质含水愈多，凝固所需温度降菌体吸收水分，蛋白质含水愈多，凝固所需温度降低。低。2.湿热穿透力比干热大，可使被灭菌物品内部温度迅湿热穿透力比干热大，可使被灭菌物品内部温度迅速上升。速上升。3.湿热蒸气可放出潜热，这种潜热迅速提高被灭菌物湿热蒸气可放出潜热，这种潜热迅速提高被灭菌物体的温度体的温度。干热灭菌与湿热灭菌穿透力及灭菌效干热灭菌与湿热灭菌穿透力及灭菌效果比较果比较
8、透过布层的温度（）灭菌方式 温度（）时间（h）20层 40层 100层 灭菌效果 干热 130140 4 86 72 70以下 不完全 湿热 105.3 3 101 101 101 完全 湿热灭菌法（一）湿热灭菌法（一）1.巴氏消毒法：巴氏消毒法：杀灭液体中的病原菌或特定微生物，不耐杀灭液体中的病原菌或特定微生物，不耐热成分不被破坏。热成分不被破坏。61.162.830min或或71.11530s，。2.煮沸法：煮沸法：1005min杀灭繁殖体，杀灭繁殖体，1-2h杀灭芽胞，加入杀灭芽胞，加入2%的碳酸氢钠，促进芽胞的杀灭，防止金属器皿生锈，的碳酸氢钠，促进芽胞的杀灭，防止金属器皿生锈，3.流
9、动蒸汽消毒法：常压蒸汽消毒法，流动蒸汽消毒法：常压蒸汽消毒法，1001530min杀杀灭繁殖体，但芽胞不被全部杀灭。灭繁殖体，但芽胞不被全部杀灭。4.间歇蒸汽灭菌法：间歇蒸汽灭菌法：100加热加热1530min，37过夜，连过夜，连续三次，续三次，5.5.超高温杀菌（超高温杀菌（UHTUHT）：）：135135150150和和 2 28s8s对牛乳或其他液态食品（如果汁及果汁饮料、豆乳、茶、对牛乳或其他液态食品（如果汁及果汁饮料、豆乳、茶、酒及矿泉水等）酒及矿泉水等）最大优点是既能杀死产品中的微生物，又能较好地保持食最大优点是既能杀死产品中的微生物，又能较好地保持食品品质与营养价值。品品质与营
10、养价值。6.高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法压力压力103.4kPa（1.05kg/cm2)，121.3，1520min，杀灭包括杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。细菌芽胞在内的所有微生物。利用水的沸点随水蒸汽压力的增加利用水的沸点随水蒸汽压力的增加而上升的原理而上升的原理在低温状态下真空抽去水分在低温状态下真空抽去水分用途：保存菌种的最好方法用途：保存菌种的最好方法冷冻真空干燥法：冷冻真空干燥法：二二.低温低温（一）非电离辐射（紫外线）（一）非电离辐射（紫外线）波长波长200300200300n nm m，以，以260-266nm260-266nm最强，最强，此波长的紫外线易被细胞中核酸吸收此波
11、长的紫外线易被细胞中核酸吸收杀菌机理：杀菌机理：诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNADNA链的交联，从而抑制了链的交联，从而抑制了DNADNA的的复制复制 杀菌效率与强度和时间的乘积成正比杀菌效率与强度和时间的乘积成正比紫外线灯距离照射物以不超过紫外线灯距离照射物以不超过1.2 m1.2 m为宜。为宜。三三 辐射杀菌法辐射杀菌法空气消毒空气消毒手术室、传染病房、细菌实验室手术室、传染病房、细菌实验室 不耐热物品的表面消毒不耐热物品的表面消毒紫外线穿透力较弱，对皮紫外线穿透力较弱，对皮肤、眼睛有损伤肤、眼睛有损伤特点：特点：应用范围应用范围：杀菌机理：杀菌机理：应用范围
12、应用范围：（二）电离辐射（二）电离辐射包括高速电子、包括高速电子、X射线和射线和 射线射线：60Co 干扰干扰DNA合成，破坏细胞膜，合成，破坏细胞膜，产生游离基产生游离基一次性医用塑料制品的消毒一次性医用塑料制品的消毒食品、药品、生物制品的消毒，食品、药品、生物制品的消毒，不破坏其营养成分不破坏其营养成分 波长波长1-1000mm的电磁波的电磁波热效应，但不均匀，灭菌效果不可靠热效应，但不均匀，灭菌效果不可靠食品、非金属器械、检验室食品、非金属器械、检验室用品、无菌室和病室中食品用品、无菌室和病室中食品用具、药杯及其他物品的消用具、药杯及其他物品的消毒。毒。四、超声波杀菌 机制：不被人耳朵感
13、受的高于机制：不被人耳朵感受的高于20千赫千赫/秒的声秒的声波，称为超声波。由于超声波频率高，可裂解许波，称为超声波。由于超声波频率高，可裂解许多细菌，多细菌，G-菌尤敏感，但裂解并不彻底。菌尤敏感，但裂解并不彻底。用途：主要用于粉碎细胞，提取细胞组分以及用途：主要用于粉碎细胞，提取细胞组分以及制备制备Ag，洗涤等。，洗涤等。四四 超声波超声波主要用于防腐主要用于防腐五五.渗透压渗透压机制机制 利用特殊的滤器以去除液体或空气利用特殊的滤器以去除液体或空气中的细菌，以达到无菌目的。中的细菌，以达到无菌目的。用途用途 主要用于不耐高温无菌的血清、毒素、主要用于不耐高温无菌的血清、毒素、抗生素、药液
14、，以及空气的除菌抗生素、药液，以及空气的除菌 。特点特点仅能除去细菌，不能去除病毒、支原体、仅能除去细菌，不能去除病毒、支原体、衣原体和有些衣原体和有些L L型细菌等。型细菌等。三三.滤过除菌法滤过除菌法滤菌器的种类滤菌器的种类薄膜滤菌器：孔径薄膜滤菌器：孔径0.22 0.22 m m 玻璃滤菌器玻璃滤菌器石棉滤菌器石棉滤菌器素陶瓷滤菌器素陶瓷滤菌器滤过除菌法滤过除菌法用物理阻留的方法用物理阻留的方法 将液体或空气中的细菌除去将液体或空气中的细菌除去,以达到除菌目的以达到除菌目的滤菌器滤菌器含有微细小孔含有微细小孔0.220.22微米微米,只允许液体或气体通过只允许液体或气体通过,而大于孔径的
15、细菌等颗粒不能通过而大于孔径的细菌等颗粒不能通过 适用范围适用范围血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌 滤菌器消毒剂的种类：消毒剂的种类：酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂。面活性剂、烷化剂。消毒剂的应用：消毒剂的应用：病人排泄物与分泌物、皮肤、粘膜、饮病人排泄物与分泌物、皮肤、粘膜、饮水、厕所、空气、手。水、厕所、空气、手。（常用的化学消毒剂及防腐剂（常用的化学消毒剂及防腐剂对人体组织都有危害，所以只限于外用或环境消毒。）对人体组织都有危害，所以只限于外用或环境消毒。）第二节第二节 化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法
16、一、消毒剂的主要类型及应用一、消毒剂的主要类型及应用 类别类别作用机制作用机制 常用种类常用种类 酚类酚类蛋白变性，细胞膜损伤蛋白变性，细胞膜损伤 石炭酸石炭酸 醇类醇类蛋白变性蛋白变性 乙醇乙醇 氧化剂氧化剂氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白沉淀高锰酸钾、过氧乙酸高锰酸钾、过氧乙酸 重金属盐重金属盐 氧化、蛋白、酶变性氧化、蛋白、酶变性 红汞、硫柳汞红汞、硫柳汞 烷化剂烷化剂蛋白、核酸烷基化蛋白、核酸烷基化 甲醛甲醛表面活性剂表面活性剂 蛋白变性，细胞膜损伤蛋白变性，细胞膜损伤 新洁而灭新洁而灭 染料染料干扰氧化、抑制繁殖干扰氧化、抑制繁殖 龙胆紫龙胆紫消毒剂的应用消毒剂的应用种类种类使用浓度使用浓度
17、 用途用途石炭酸石炭酸3-5%3-5%地面、器具表面、皮肤消毒地面、器具表面、皮肤消毒乙醇乙醇70-75%70-75%皮肤、体温计消毒皮肤、体温计消毒高锰酸钾高锰酸钾 0.1%0.1%皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒红汞红汞 2%2%皮肤、粘膜、小创伤消毒皮肤、粘膜、小创伤消毒硫柳汞硫柳汞0.1%0.1%皮肤消毒、手术部位消毒皮肤消毒、手术部位消毒过氧乙酸过氧乙酸 0.2-0.3%0.2-0.3%塑料、玻璃器材消毒塑料、玻璃器材消毒碘酒碘酒2-2.5%2-2.5%皮肤消毒皮肤消毒新洁而灭新洁而灭 0.05-0.1%0.05-0.1%手术洗手、浸泡手术器械手术洗手、浸泡手术器
18、械龙胆紫龙胆紫2-4%2-4%浅表创伤消毒浅表创伤消毒消毒剂的应用（一）消毒剂的应用（一）病人排泄与分泌物病人排泄与分泌物：一般用等量的：一般用等量的20%漂白粉、漂白粉、5%石石炭酸或炭酸或2%来苏，搅拌均匀放来苏，搅拌均匀放2h。皮肤：皮肤：70%酒精、酒精、2.5%碘酒、碘酒、2%红汞。红汞。粘膜：粘膜：3%H2O2用于口腔粘膜消毒、用于口腔粘膜消毒、0.01%-0.1%洗必泰洗必泰或高猛酸钾用于冲洗尿道、阴道、膀胱等；或高猛酸钾用于冲洗尿道、阴道、膀胱等；1%硝酸银给硝酸银给新生儿滴眼以预防淋球菌感染。新生儿滴眼以预防淋球菌感染。饮水：自来水用氯气、少量的饮水可用漂白粉饮水：自来水用氯
19、气、少量的饮水可用漂白粉。消毒剂的应用（二）消毒剂的应用（二）手：手：一般用一般用2%来苏；来苏；0.2%-0.4%过氧乙酸浸泡过氧乙酸浸泡2%碘酊碘酊涂擦后用涂擦后用70%酒精擦洗。酒精擦洗。厕所、阴沟：厕所、阴沟：生石灰。生石灰。空气：空气：甲醛（实验室）甲醛（实验室）12.525ml/m3加热熏蒸加热熏蒸1224hr或甲醛或甲醛40ml+高锰酸钾高锰酸钾30g/m3混合熏蒸混合熏蒸1224hr，肝炎病房用过氧乙酸肝炎病房用过氧乙酸3g/m3熏蒸熏蒸90min。二、二、影响消毒剂作用的因素影响消毒剂作用的因素消毒剂消毒剂微生物微生物 环境环境性质性质 浓度浓度数量数量种类种类有机物有机物温度温度酸硷度酸硷度作用时间作用时间选择适当的消毒剂低毒低毒价廉价廉低破坏低破坏方便方便易贮藏易贮藏有效有效感谢下感谢下载载感谢下感谢下载载
