1、乙肝病毒乙肝病毒“两对半两对半”血清学血清学检测的临床意义检测的临床意义HBVHBV的流行的流行n乙型肝炎病毒（乙型肝炎病毒（HBVHBV）感染是世界上最常见）感染是世界上最常见的感染性疾病之一的感染性疾病之一n全球超过全球超过3.53.5亿人存在慢性亿人存在慢性HBVHBV感染感染,有三分有三分之一居住在中国之一居住在中国 n中国每年约有五十万人死于因乙肝病毒导中国每年约有五十万人死于因乙肝病毒导致的肝癌或肝衰竭，乙肝已成为中国人的致的肝癌或肝衰竭，乙肝已成为中国人的无声杀手无声杀手 HBVHBV的的传播方式和途径传播方式和途径 n输血传播n母-婴传播n其他传播n医源性传播n接触传播 HBV
2、HBV感染过程感染过程乙肝难治的机制乙肝难治的机制 nHBVHBV抵抗力很强，在抵抗力很强，在6060经经4 4小时及一般浓度的消毒剂中均小时及一般浓度的消毒剂中均不能使其灭活不能使其灭活 nHBVHBV有坚硬的蛋白质外壳有坚硬的蛋白质外壳,药物很难直接对病毒产生作用药物很难直接对病毒产生作用 nHBVHBV感染早期血液中大量病毒导致外周免疫器官的免疫耐感染早期血液中大量病毒导致外周免疫器官的免疫耐受受 nHBVHBV发生基因变异，产生耐药或免疫逃避发生基因变异，产生耐药或免疫逃避nHBVHBV必须是小分子物质才能进入肝细胞内发挥抗病毒作用必须是小分子物质才能进入肝细胞内发挥抗病毒作用 nHB
3、VHBV与肝细胞的基因产生整合与肝细胞的基因产生整合 n新生儿被新生儿被HBVHBV感染易形成免疫耐受感染易形成免疫耐受乙肝病毒乙肝病毒“两对半两对半”血清学检测的血清学检测的广泛应用广泛应用n临床诊断n乙肝疫苗效果考核n科研工作n药物治疗n血源筛选乙肝的血清标志物及临床意义乙肝的血清标志物及临床意义 n乙肝表面抗原乙肝表面抗原(HBsAg)(HBsAg)n乙肝核心抗体乙肝核心抗体(抗抗-HBc)HBc)n乙肝乙肝e e抗原抗原(HBeAg)(HBeAg)n乙肝前乙肝前S1S1抗原抗原(HBpre-S1Ag)(HBpre-S1Ag)n乙肝前乙肝前S2S2抗原抗原(HBpre-S2Ag)(HBp
4、re-S2Ag)n乙肝核心抗体乙肝核心抗体IgM(IgM(抗抗-HBc IgM)-HBc IgM)n乙肝表面抗体乙肝表面抗体(抗抗-HBs)-HBs)n乙肝乙肝e e抗体抗体(抗抗-HBe)-HBe)n乙肝前乙肝前S1S1抗体抗体(抗抗-HBpre-S1)-HBpre-S1)n乙肝前乙肝前S2S2抗体抗体(抗抗-HBpre-S2)-HBpre-S2)乙肝表面抗原乙肝表面抗原(HBsAg)(HBsAg)n感染了乙肝病毒的一个特异性标志感染了乙肝病毒的一个特异性标志n急性乙肝的潜伏期和急性期急性乙肝的潜伏期和急性期n慢性乙肝病毒感染状态，包括无症状慢性乙肝病毒感染状态，包括无症状HBsAgHBsA
5、g携带者、慢性乙型肝炎、与乙肝病毒有关携带者、慢性乙型肝炎、与乙肝病毒有关的肝硬化和原发性肝癌的肝硬化和原发性肝癌乙型肝炎表面抗体乙型肝炎表面抗体(抗抗HBs)HBs)n一种保护抗体，表示曾经感染过乙肝病毒一种保护抗体，表示曾经感染过乙肝病毒,现已恢复，并对乙肝病毒具有免疫力现已恢复，并对乙肝病毒具有免疫力 n注射乙肝疫苗后，产生抗注射乙肝疫苗后，产生抗HBsHBs表示具有免疫表示具有免疫力力 n若急性感染期后若急性感染期后HBsAgHBsAg阳性存在阳性存在,无相应抗无相应抗体产生体产生,常发展成慢性肝炎或无症状的携常发展成慢性肝炎或无症状的携带者带者乙型肝炎核心抗体乙型肝炎核心抗体(抗抗H
6、Bc)HBc)n出现于急性乙型肝炎的急性期，恢复后可出现于急性乙型肝炎的急性期，恢复后可持续数年或更长，滴度则逐渐下降持续数年或更长，滴度则逐渐下降 n慢性乙肝病毒感染者，抗慢性乙肝病毒感染者，抗HBcHBc持续阳性持续阳性 n单项抗单项抗HBcHBc阳性表示过去可能感染过乙肝病阳性表示过去可能感染过乙肝病毒毒 乙型肝炎乙型肝炎e e抗原抗原(HBeAg)(HBeAg)n急性乙肝时急性乙肝时HBeAgHBeAg呈短暂阳性，如持续阳性呈短暂阳性，如持续阳性则提示转为慢性则提示转为慢性 n慢性乙肝时，慢性乙肝时，HBeAgHBeAg阳性常表示肝细胞内有阳性常表示肝细胞内有HBVHBV活动性复制，当
7、活动性复制，当HBeAgHBeAg转阴，伴有乙型转阴，伴有乙型肝炎肝炎e e抗体抗体(抗抗HBe)HBe)转阳，常提示转阳，常提示HBVHBV停止复停止复制制乙型肝炎乙型肝炎e e抗体（抗抗体（抗HBe)HBe)n出现于急性乙肝的恢复期，可持续较长时出现于急性乙肝的恢复期，可持续较长时间间 n慢性乙肝病毒感染时，如抗慢性乙肝病毒感染时，如抗HBeHBe阳性，表示阳性，表示乙肝病毒无明显活动性复制，传染性较弱，乙肝病毒无明显活动性复制，传染性较弱，临床上慢性肝病的活动性较低临床上慢性肝病的活动性较低 乙肝前乙肝前S1,S2S1,S2抗原抗原nHBVHBV感染早期即可检测到感染早期即可检测到,大大
8、缩短窗口期大大缩短窗口期nHBVHBV感染、复制及传染性强弱的重要指标感染、复制及传染性强弱的重要指标n弥补由于弥补由于HBVHBV基因突变导致基因突变导致HBsAgHBsAg缺失而给缺失而给临床诊断和治疗带来的临床诊断和治疗带来的“误导误导”n在乙肝患者全病程中检测有重要价值在乙肝患者全病程中检测有重要价值乙肝核心抗体乙肝核心抗体IgM(IgM(抗抗-HBc IgM)-HBc IgM)n是是HBVHBV新近感染或持续复制的标志，是用来新近感染或持续复制的标志，是用来评价乙型肝炎病情的较好指标评价乙型肝炎病情的较好指标 n乙型肝炎核心抗体乙型肝炎核心抗体IgMIgM和和IgGIgG平行检测，有
9、平行检测，有助于区分急性乙型肝炎与慢型乙型肝炎和助于区分急性乙型肝炎与慢型乙型肝炎和乙型肝炎病毒携带者乙型肝炎病毒携带者急性与慢性乙型肝炎患者的急性与慢性乙型肝炎患者的HBVMHBVM模式模式B 慢性慢性HBV感染感染抗原或抗体水平Weeks since exposureYears since exposure0510152048246810HBV DNAHBeAgAnti-HBsHBsAgAnti-HBcAnti-HBeALTA 急性急性HBV感染感染抗原或抗体水平Weeks since exposureYears since exposure0510152048246810HBV DNAH
10、BeAgAnti-HBsHBsAgAnti-HBcAnti-HBeALT乙肝乙肝“两对半两对半”常见模式的临床意常见模式的临床意义义 HBsAg HBsAg HBsAbHBsAbHBeAgHBeAgHBeAbHBeAbHBcAbHBcAb临床意义临床意义+-急性乙型肝炎病毒感染的潜伏期后期急性乙型肝炎病毒感染的潜伏期后期+-+-急性乙型肝炎的早期，传染性很强急性乙型肝炎的早期，传染性很强+-+-+俗称俗称“大三阳大三阳”，这种情况说明是急、慢性，这种情况说明是急、慢性乙型肝炎，乙型肝炎，此时病毒复制活跃，传染性很强此时病毒复制活跃，传染性很强+-+急、慢性乙型肝炎急、慢性乙型肝炎+-+俗称俗称
11、 小三阳小三阳，说明是急、慢性乙型肝炎，说明是急、慢性乙型肝炎，但传染性较弱但传染性较弱-+乙型肝炎病毒的隐性携带者或处于感染的窗乙型肝炎病毒的隐性携带者或处于感染的窗口期，口期，也说明曾经感染过乙型肝炎病毒也说明曾经感染过乙型肝炎病毒-+急性乙型肝炎病毒感染的恢复期，急性乙型肝炎病毒感染的恢复期，或曾经感或曾经感染过乙型肝炎病毒染过乙型肝炎病毒-+-+乙型肝炎的恢复期，已有免疫力乙型肝炎的恢复期，已有免疫力-+-+接种了乙肝疫苗后，或是乙型肝炎病毒感染接种了乙肝疫苗后，或是乙型肝炎病毒感染后已康复了，后已康复了，已有免疫力已有免疫力化学发光相对于化学发光相对于ELISAELISA在乙肝五项在
12、乙肝五项检测上的优势检测上的优势n传统的传统的ELISAELISA法灵敏度低、批间批内差异大、法灵敏度低、批间批内差异大、线性范围窄、线性范围窄、样本测定的重复性差样本测定的重复性差,不适于不适于作定量测定，只能通过显色得到阴、阳性作定量测定，只能通过显色得到阴、阳性结果对血清标志物进行定性检测结果对血清标志物进行定性检测n化学发光分析定量检测技术具有化学发光分析定量检测技术具有灵敏度高灵敏度高、线性范围宽线性范围宽、操作简便操作简便、结果快捷结果快捷、量化量化可靠可靠、批间批内差异小批间批内差异小、易实现自动化易实现自动化的的优点优点,与与ELISAELISA定性检测相比，通过定量分定性检测
13、相比，通过定量分析病毒浓度变化，不但可以反映乙肝病情析病毒浓度变化，不但可以反映乙肝病情的变化和治疗效果，还可以预见乙肝是否的变化和治疗效果，还可以预见乙肝是否处于康复期，是否会发展为慢性乙肝或病处于康复期，是否会发展为慢性乙肝或病毒携带者，对治疗起到指导作用毒携带者，对治疗起到指导作用乙肝表面抗原（乙肝表面抗原（HBsAgHBsAg）n提高了检测的灵敏度提高了检测的灵敏度,化学发光技术检测化学发光技术检测HBsAgHBsAg灵灵敏度可达敏度可达0.1ng/ml,0.1ng/ml,而酶标而酶标(ELISA)(ELISA)检测检测HBsAgHBsAg灵灵敏度是敏度是1ng/ml1ng/ml 1.
14、1.变异病毒的检测变异病毒的检测 2.2.急性乙肝的早期诊断急性乙肝的早期诊断 3.3.慢性乙肝慢性乙肝 4.4.发现低浓度发现低浓度HBsAgHBsAg携带者携带者n以动态观察疗效和病情监测以动态观察疗效和病情监测n抑制抑制HBVHBV的药物筛选的药物筛选 乙肝表面抗体（乙肝表面抗体（HBsAbHBsAb）n对机体是否真正具有对机体是否真正具有“中和中和”HBVHBV的免疫力的免疫力作出正确评价。作出正确评价。HbsAbHbsAb量在量在10mIU/ml10mIU/ml时，定时，定性检测可呈阳性结果，性检测可呈阳性结果，100mIU/ml100mIU/ml以上时才以上时才具有真正意义上抵抗具
15、有真正意义上抵抗HBVHBV入侵的作用入侵的作用n疫苗免疫效果考察疫苗免疫效果考察乙肝乙肝e e抗原（抗原（HBeAgHBeAg）和）和e e抗体（抗体（HBeAbHBeAb）n定量分析定量分析HBeAgHBeAg和抗和抗-HBe-HBe的浓度变化的浓度变化,可以可以反映病情变化和治疗效果反映病情变化和治疗效果n对对HBeAgHBeAg的定量监测还可用来定个体对治疗的定量监测还可用来定个体对治疗的反应，做出是否的反应，做出是否延长治疗的决定延长治疗的决定乙肝核心抗体（乙肝核心抗体（HBcAbHBcAb）nHBcAbHBcAb浓度的高低可反映病毒感染的状态。浓度的高低可反映病毒感染的状态。高浓度
16、的抗高浓度的抗-HBc-HBc提示乙肝急性感染，如果提示乙肝急性感染，如果血清的乙肝核心抗体浓度降低，则表示进血清的乙肝核心抗体浓度降低，则表示进入了恢复期。而慢性乙肝则呈抗入了恢复期。而慢性乙肝则呈抗-HBc-HBc持续持续高浓度。对核心抗体的定量检测有利于对高浓度。对核心抗体的定量检测有利于对慢性肝炎活动性和非活动性的判断，并可慢性肝炎活动性和非活动性的判断，并可以用于慢性乙肝的分类以用于慢性乙肝的分类总结：目前运用于临床乙肝标志物检测 方法优缺点对比胶体金法优点：检测时间短，操作简单，不需要特出设备，没有HOOK效应。缺点：灵敏度低，无法实现定量分析，容易出现假阴性和假阳性。不能进行严格
17、的室内控制，不能保证结果的有效性和溯源性。不适合低浓度的表抗的检测以及乙肝常规确认实验，适合门诊急诊项目检测。ELISA法n优点：n操作简单，适合大批量标本的检测成本低，灵敏度可以满足一般体检及门诊的要求。n缺点：只能做定性分析，灵敏度低，无法解决前滞效应，异污染。无法完成HBV感染的动态观察及低水平HBV指标的检测。只能对室内质控进行阴阳性的分析。不利于质量控制发光定量检测与HBV DNA定量之间的关系HBV DNA检测n优势：n是HBV感染最直接，灵敏及特异性的指标，可以直接反映出病毒的载量和复制情况，为临床提供可靠依据。n缺点：病毒基因检测不能完全反映病毒静息期肝细胞内HBV病毒状态HB
18、VDNA阴性并不完全代表体内HBV已被清除，结合“两对半”各项定量指标更能客观反映体内HBV病毒状态，正确判断预后及治疗 不适合大规模体检，对于一些HBSAg携带者及低浓度的表面抗原人群 HBV DNA检测阴性 化学发光定量检测n优势：灵敏度高，试剂稳定，操作简单可以进行定量分析可以对被感染者进行病情，治疗反映，预后，以及对流行病学调查提供重要依据HBsAg和HBeAg和HBV DNA检测具有很好的相关性可反映出病毒的载量和复制情况。缺点：试剂成本相比较高，半自动仪器对操作者要求较高从某种意义上讲基因检测和定量检测两者应该互补共存n总之，同人们从接受肿瘤标志物定性到定n量的过渡一样，随着现代乙肝临床诊治的n需要，乙肝血清学标志物定量检测的临床n应用价值将显现出来。
