1、第四章鱼类的人工繁殖技术第一节鱼类人工繁殖场的建设第一节鱼类人工繁殖场的建设第二节亲鱼培育第二节亲鱼培育第三节催情产卵第三节催情产卵第四节受精与授精第四节受精与授精第五节第五节 孵化孵化第六节鱼类人工繁殖的生物学指标第六节鱼类人工繁殖的生物学指标 课堂要求课间要求课后要求第一节鱼类人工繁殖场的建设 一、场址的选择一、场址的选择 二、繁殖场的规划与设计二、繁殖场的规划与设计 三、繁殖场建设的主要内容三、繁殖场建设的主要内容一、场址的选择 1、地理因素、地理因素 靠近鱼类主养区靠近鱼类主养区 落差取水,落差取水,地势平坦地势平坦 海水鱼繁殖场要水源盐度稳定在海水鱼繁殖场要水源盐度稳定在25以上。以
2、上。2、自然条件、自然条件 水源充足、方便,水质良好,无污染;光水源充足、方便,水质良好,无污染;光照充足;海水鱼繁殖场要尽量不受台风影照充足;海水鱼繁殖场要尽量不受台风影响,海水潮差小,易于抽取水。响,海水潮差小,易于抽取水。3、基础设施、基础设施 交通便利,电力、通讯条件完备;治安状交通便利,电力、通讯条件完备;治安状况良好;生活条件便利。况良好;生活条件便利。二、繁殖场的规划与设计 1、规划、规划 因地制宜,留有余地;因地制宜,留有余地;节约成本,重视配套;节约成本,重视配套;力求适用,勿贪大求洋。力求适用,勿贪大求洋。2、设计、设计(1)先确定鱼池或生产车间的水平位置和)先确定鱼池或生
3、产车间的水平位置和标高,再确定附属建筑的位置,绘出平面标高,再确定附属建筑的位置,绘出平面规划图。规划图。(2)根据鱼池、生产车间和附属建筑的设)根据鱼池、生产车间和附属建筑的设计形状、大小和使用功能,分别绘制施工计形状、大小和使用功能,分别绘制施工图。图。(3)设计要求)设计要求 三、繁殖场建设的主要内容 1、鱼苗孵化区、鱼苗孵化区 (1)产卵池 圆形产卵池椭圆形产卵池(3)孵化桶 (4)孵化池 2、亲鱼、苗种培育区、亲鱼、苗种培育区 (1)亲鱼培育池 (2)鱼种培育池(3)鱼苗培育池 室内水泥池 室外土池 2、蓄水、处理区、蓄水、处理区 (1)取水口埋管式和栈桥式取水埋管式和栈桥式取水 (
4、2)过滤系统过滤系统 (3)充气系统 3、饵料培育区(1)单胞藻培养池 (2)轮虫培养池 (3)卤虫孵化桶 (4)大型浮游动物培养池 4、办公、实验区:水质分析及生物观察室、办公、实验区:水质分析及生物观察室 第二节亲鱼培育一、亲鱼的选择 1、亲鱼的来源、亲鱼的来源 (1)捕捞天然亲鱼(2)捕捞天然幼鱼+人工蓄养(3)全人工繁殖后代+人工选择 2、繁殖期雌雄鉴别、繁殖期雌雄鉴别(1)婚姻色和追(珠)星)婚姻色和追(珠)星 色泽绚丽的的雄性粗首鱲有十条浅蓝色光泽的横带雄鱼鳃盖和胸鳍上的珠星(2)雌雄个体大小差异 (3)雌雄个体外观差异 (4)繁殖期腹部 表表4-1 4-1 四大家鱼繁殖期的雌雄特
5、征四大家鱼繁殖期的雌雄特征雄鱼特征雌鱼特征鲢鱼1、在胸鳍前面的几根鳍条上,特别在第一鳍条上明显的生有一排骨质的细小栉齿,用手抚摸,有粗糙、刺手感觉。这些栉齿生成后,不会消失。1、只在胸鳍末梢很小部分才有这些栉齿,其余部分比较光滑。2、腹部较小,性成熟时轻压精巢部位有精液从生殖孔流出。2、腹部大而柔软,泄殖孔常稍突出,有时微带红润。鳙鱼1、在胸鳍前面的几根鳍条上缘各生有向后倾斜的锋口,用手向前抚摸有割手感觉。1、胸鳍光滑,无割手感觉。2、腹部较小,性成熟时轻压精巢部位有精液从生殖孔流出。2、腹部膨大柔软,泄殖孔常稍突出,有时稍带红润。草鱼1、胸鳍鳍条较粗大而狭长自然张开呈尖刀形。1、胸鳍鳍条较细
6、短,自然张开略呈扇形。2、在生殖季节性腺发育良好时,胸鳍内侧及鳃盖上出现追星,用手抚摸有粗糙感觉。2、一般无追星,或在胸鳍上有少量追星。3、性成熟时轻压精巢部位有精液从生殖孔流出。3、腹部比雄体膨大而柔软,但比鲢、鳙雌体一般较小。青鱼1、基本同草鱼。在生殖季节性腺发育良好时除胸鳍内侧及鳃盖上出现追星外,头部也明显出现迫星1、胸鳍光滑,无追星。3、选择一般标准、选择一般标准(1)种质优良(2)适龄个体(3)生长性能良好、个体硕大、体质健壮。表表4-2 不同纬度四大家鱼的性成熟年龄和体重不同纬度四大家鱼的性成熟年龄和体重 种类 华南(广东、广西)华东、华中(江、浙、两湖)东北(黑龙江)年龄 体重(
7、公斤)年龄 体重(公斤)年龄 体重(公斤)鲢232左右343左右565左右鳙345左右457左右6710左右草344左右455左右676左右青5715左右8以上20左右二、亲鱼的培育 1 1、亲鱼放养的密度、亲鱼放养的密度 表表4-3 四大家鱼亲鱼培育的放养四大家鱼亲鱼培育的放养 种类放养密 度(Kg/667m2)搭养其它鱼类数量青鱼1015尾(总重200250公斤)可搭养鲢亲鱼810尾或鳙亲鱼45尾草鱼1520尾(总重125公斤左右)可搭养鲢亲鱼510尾、鳙亲鱼12尾,池内螺蛳多时,搭养青鱼23尾鲢鱼1525尾(总重60100公斤)可搭养鳙亲鱼23尾,池内水草多时可搭养草亲鱼23尾或后备草鱼
8、1015尾鳙鱼1015尾(总重75125公斤)可搭养鲢亲鱼12尾(或不搭养),池内水草多时搭养草亲鱼23尾或后备亲鱼1015尾 2、亲鱼培育的方法(1)淡水池塘培育 鲢、鳙亲鱼的培育 草亲鱼的培育 水质清瘦、精青搭配、适时注水 青亲鱼的培育水质清瘦、荤精结合、适时注水 长吻鮠亲鱼培育营养强化、激素促熟、注水刺激大水、小肥大水、大肥大水、小肥小水、大肥大水、小肥大水、不肥(2)海水亲鱼培育 海水亲鱼培育一般在网箱中进行,也有些种类在池塘中进行。网箱水质条件好,有水流刺激,有利于促进性腺发育。目前养殖亲鱼的网箱多为浮动式网箱,便于观察、挑选亲鱼,也利于对亲鱼进行注射催产等操作。放养亲鱼时,可根据亲
9、鱼的体长来选择合适的网箱规格。体长50cm以下的亲鱼,可放养于规格333m3的网箱;体长大于50cm的亲鱼,要放养于规格553m3以上的网箱,为亲鱼的成熟发育提供自由空间。网箱的网目,越大越好,以最小的亲鱼鱼头不能伸出网目为宜。暗纹东方鲀的亲鱼培育 一般在温室水泥池中进行,池深2m,水深11.5m,35kg(46尾)/m2。水温控制在2225之间,不得低于20。培育期间保持微流水,前期每天冲水45h,后期保持持续冲水。培育期间投喂以蚌、虾肉为主,每天34次,投35%,后期可适当增加投喂量和次数。注意换水、吸污。黄鳍鲷的亲鱼培育 亲鱼池面积以6671334m2为宜,水深11.5m左右,沙泥底质,
10、池底平坦,进排水方便,放养前清淤,150Kg生石灰消毒。也可在海上网箱(2.53m)中培育。专池培育放养80110尾/667m2,同时放养数尾鲻鱼,籍以清理池中剩饵及有机碎屑。海上网箱以10Kg/m3为宜。每天投喂饲料2次,上午78时,下午34时各喂一次,日投喂量为36%。如有条件,池塘中可适当放养少量罗非鱼,利用该鱼繁殖的幼鱼作为亲鱼饵料。每710天冲注新水一次,每次加水15cm左右,保持水质请新。适时开增氧机,定期施放微生物水质改良剂,调节水质,降解亲鱼养殖代谢产物。石斑鱼的亲鱼培育 人工繁殖的效果很大程度上取决于亲鱼性腺的成熟度,所以在诱导产卵前,加强亲鱼的培育,促其性腺发育至关重要。在
11、室内水泥池中蓄养或暂养石斑鱼亲鱼,通过人工强化培育,每日换水和吸污,亲鱼不用激素催产就能自然产卵受精,可获得优质的受精卵。亲鱼培育也可在土池或网箱中进行。当水温上升至18,摄食完全正常后,于饲料中加入强化剂,促进亲鱼性腺发育。当卵巢发育到期末,即可移入产卵池进行产前强化培育。在产卵前期,投饲量按照亲鱼体重的510%投喂,每周34次。产卵期间,每天一次。亲鱼培育一般使用新鲜的下杂鱼,并适量添加小虾、鱿鱼等。在饲料中添加2%的磷脂和0.2%的维生素E,有利提高卵子质量。正常情况下,经过2030天的强化培育卵巢便可发育至期末,在水温达到21.5时开始自然产卵。军曹鱼的亲鱼培育 通常采用网箱培育,7K
12、g/m3左右,投喂新鲜的小杂鱼,每天的投饵量约为体重的1216%,早晚各一次,视摄食情况,决定下次投饵的增减数量。当年的11月开始至翌年的4月,隔35天在饲料中添加适量维生素E、复合维生素B和矿物质,加强营养,进行强化培育,提高精卵质量。经常清洗附在网箱上的污损物,定期换网,保证网箱水流畅通。卵形鲳的亲鱼培育 亲鱼培育一般多在海水网箱中进行。饲养亲鱼的网箱为333m3的浮动式网箱,网目为30cm,每个网箱放养亲鱼4045尾,放养密度为34Kg/m3。以新鲜或冷冻的小杂鱼为饵料,主要种类有卵圆鲹、青鳞鱼、金色小沙丁鱼等,日投饵两次,日投饵率为58%。每年12月下旬至次年3月上旬,为亲鱼的越冬期,
13、每日投饵很少或不投饵。同时,定期更换网箱,并对鱼体进行消毒处理。每年越冬期过后的45月期间,要对亲鱼进行强化培育,以保证亲鱼的正常生长发育。一些地方在海上网箱进行强化培育,有些地方侧将亲鱼移入室内进行强化培育。在室内强化培育期间,亲鱼的放养密度为22.5Kgm3,每日投喂2次,饵料为牡蛎,蓝圆鲹,鳗鱼饵料等并不时添加适量多种维生素。日投饵率为78,每日换水2次,换水量为180200%,每半个月,以LRH-A催熟。第三节催情产卵 一、亲鱼成熟度鉴定 一看二摸三挤:成熟度好的雌鱼腹部膨大,轮廊明显,生殖孔松驰,腹部松弛而富弹性;轻压腹部,有乳白色精液流出,遇水散开,即为成熟度好的雄鱼。四挖:采用挖
14、卵观察,可更准确地判断亲鱼成熟的程度。将挖卵器轻轻插入亲鱼生殖孔,然后偏向左侧或右侧,旋转几圈抽出,便可得到少量卵粒。若挖卵器在靠近生殖孔就能得到卵粒,且卵粒大小整齐、饱满、光泽好、易分散,大多数卵核已极化或偏位,则表明雌亲鱼性腺发育进入最佳催产期。若亲鱼后腹部小而硬,卵巢轮廓不明显,生殖孔不红润,卵粒不易挖出,且大小不整齐,不易分散,则表明性腺成熟度不够。反之,若亲鱼腹部过于松软,无弹性,卵粒扁塌或呈糊状,则表明亲鱼性腺已退化。这里需说明的是青鱼雌鱼往往腹部膨大不明显,只要略感膨大,有柔软感即可。还要注意检查草亲鱼时,需停食23天,以免过食后形成假象。二、人工催产(一)催产激素种类(一)催产
15、激素种类 1、脑垂体、脑垂体(PG)2、绒毛膜促性腺激素、绒毛膜促性腺激素(HCG)3、促黄体生成素释放、促黄体生成素释放激素类似物激素类似物(LRH-A)4、高效催产合剂、高效催产合剂 5、A、B型混合催产型混合催产剂剂 1脑垂体(Pg)脑垂体中促性腺激素的含量,随鱼类的生殖周期变化,而呈现出极大的差别。垂体中GTH含及最大的时间,是在鱼类产卵前的两个月之内。鱼类产过卵后,垂体中的GTH就基本排出。采摘鲤、细鱼脑下垂体的方法在黑龙江省都已普迫采用从鳃盖内蝶骨的侧面摘取,采用此法仍可保持鱼体外型的完好无损不至形响商品价值。同时,此法摘取垂体操作容易,速度快,摘取技术较熟练的每人每小时可摘取卿鱼
16、垂体200-300个以上。在鳃盖内摘取脑下垂体的操作方法是:用左手握鱼,头向前,背向外,然后用拇指将鳃盖支开,用右乎持垂体摘取刀(用l0cm左右的3-10号铁丝,将一端砸成舌状,略有弯曲即成)。先将鳃片剥离,然后将摘取刀插入蝶骨缝内,把蝶骨去掉,即可看到呈乳白色的脑下垂体用摘取刀尖轻轻托出放在左手背上。接着再摘取下一尾鱼的垂体,当左手背上垂体达一定量后,就可将垂体除去粘附的污血和污物,分别大小完整程度等放到丙酮或酒梢中,进行脱水,脱脂。纯丙酮或纯酒精的用量为脑下垂体的15-20倍,将垂体径2一3次浸泡每次浸泡5一8小时,浸泡液不再浑浊时,就可取出保存备用。脑垂体的保存方法有三种:第一种是干燥保
17、存法,将经丙酮或酒抽处理过的垂体。放在滤纸上经20-30min的吸干后,装入棕色的干净小瓶内,加盖用蛤将瓶口密封,贮放在阴凉干操处保存。第二种是放在纯丙酮或纯酒精中保存,将脱水、脱脂后的脑下垂体,浸泡在相当垂体重20倍的纯丙酮或纯酒精中,然后加盖密封,贮放在阴凉干燥的地方。第三种保存法是甘油浸渍法,把定最的干操脑下垂体研成粉状,浸在一定体积的甘油中,浸渍三个月以上。需要时,只耍取出定量的脑下垂体甘油浸出液,按所需要的浓度用生理盆水稀释后即可用。贮存的脑下垂体质量鉴别:质且好的垂体外形完整,呈白色或微黄色,干燥后轻压则可成粉状而质旦不好的垂体常呈棕黑色,外形扁瘪,干燥后软而不脆不易压成粉状。青、
18、草、鲢、鳙、鲮亲鱼使用鲤、鲫鱼的脑下垂体催情皆有效,所用剂量也基本一致,雌鱼的一般剂量为4-6mg/。摘取体重为1-1.5鲤鱼的脑下垂体,干燥后平均重约2mg,体重在1.5-2的垂体千重,平均约为3mg,体重在3-5鲤鱼的垂体,平均干重约为4mg左右。而摘取体重为4-5鲢鱼的脑下垂体,平均每个干重约为5mg.摘取体重为0.15-0.25鲫鱼的脑下垂体,平均每个干重为0.3-0.5mg。依此计算一尾10重的鲢亲鱼,催情时就需要用1.5-2重鲤鱼的垂体14-20个,或4-5重鲢鱼的垂体8-12个,也可用0.5-0.25 kg重鲫鱼的垂体80-120个如果催情体重为5的鲢亲鱼,就需1.5-2重鲤鱼的
19、垂体7-10个。或用上述的鲢鱼垂体4-6个,也可用上述鲫鱼垂体40-60个。2绒毛膜促性腺激素(HCG)一般为市售成品,商品名称为“鱼用(或兽用)促性腺激素”。为白色、灰白色或淡黄色粉末,易溶于水,遇热易失活,使用时现配现用。它是从孕妇尿中提取的,主要成份是促黄体激素(Lh),主要作用是促进亲鱼排卵,也有一定的促性腺发育作用。这种激素催熟作用不及垂体和释放激素类似物,对鲢、鳙催产效果与脑垂体相同,催产草鱼时,单独使用效果不佳。3促黄体生成素释放激素类似物(LRh-a)为市售成品,是人工合成的,目前市售的商品名称叫鱼用促排卵素2号(LRh-a2)和鱼用促排卵素3号(LRha3)。为白色粉末,易溶
20、于水,阳光直射会使其变性。它不象垂体和绒毛膜激素那样直接作用于性腺,而是作用于鱼类脑垂体使其分泌促性腺激素,进一步促使卵母细胞发育成熟并排卵。它对主要养殖鱼类的催熟催产效果都很好,草鱼效果最好。对已催产过几次的鲢、鳙鱼效果不及绒毛膜促性腺激素和脑垂体,对鲤、鲫、鲂、鳊等鱼类的有效剂量也较草鱼大。它还具有副作用小,可人工合成,药源丰富等优点,现已成为主要的催产剂。其对草鱼催产效果较明显,用量为每千克亲鱼1040 g。LRH-A2对促性腺激素释放的活性比LRH-A高10多倍;LRH-A3是一种比LRH-A效果更好的促排卵素,尤其适用子鲢、鳙亲鱼的催产,而且其使用剂量可为LRH-A的1/10。4高效
21、催产合剂 由利血平(RES)或地欧酮(DOM)与LRH-A组成,能显著增强LRH-A刺激鱼类PG促性腺激素的分泌。(1)高效鱼类催产剂I号(RES+促排卵素2号)近年对鱼类生殖机理研究证明下丘脑神经分泌细胞产生多巴胺物质,它既抑制脑垂体分泌促性腺激素(GTH).也抑制促排卵素2号促进GTH分泌:也证明多巴胶排除剂RES能将多巴胺对GTH分泌的抑制作用减弱以至消除从而显若增强排卵素2号的催产作用。本合剂由促排卵素2号和多巴胶排除剂组成用于鱼类人工繁殖,效果优于单一使用促排卵素2号、人绒毛膜促性腺激素等催产剂,具有鱼垂体同等的功效剂量剂量:链、鳙、草鱼若二次注射第一次RES 5 mgkg-促排卵素
22、2号1 g/kg-1.5 g/kg.雄鱼不注针距3h-4h,第二次注射促排卵素2号1 pg/kg-1.5 pg/kg体重,雄鱼减半。也可一次注射RES 5 mg+促排卵素2号1.5 g/kg3 g/kg体重,雄鱼不注RES,但注射促排卵素2号(剂量减半)。配制及用法配制及用法 须根据催产对象分别称取RES所需重量,加0.7%生理盐水,在研钵中研磨制成:悬浮液注射前需摇匀。由于RES在悬浮液中易氧化须现配现用。促排卵素2号仍用0.7生理盐水配制。使用方法是分别在鱼的两侧胸鳍腹腔注射也可将两种药先混合后单侧进行胸鳍腹腔注射;本品保存于阴凉、干燥、避光处,有效期为3年。5A、B型混合催产剂(1)A型
23、催产剂是由HCG和适量的LRH-A2混合而成,主要用于催产鲢;(2)B型催产剂是由HCG和适量LRH-A3组成,用于催产鳙效果较好。6.影响催情剂量的因素 确定催情剂的剂量大小,应根据催产期的迟早、亲鱼性腺发育情况、亲鱼个体的大小、环境条件以及催情剂的种类和质量等具体情况灵活掌握。一般在催产的早期,剂量可适当偏高,早期水温偏低,卵巢膜的敏感度亦低,常发生排卵与产卵脱节现象,因此,增加催情剂的用量,可加强对卵巢的刺激作用,一般在繁殖早期可比他产盛期增加剂量25左右。另外,在早期亲鱼的成熟度一般还较差故可以增加脑垂体的用量,或用LRII-A先低剂量催熟一次。在催产的中期也就是繁殖盛期,剂量位一般要
24、稍为减少,而在催产的后期,剂量可稍大。亲鱼个体较小的一般剂量相对较大,大个体的亲鱼则剂量要偏低。对腹部特别膨大松软的亲鱼,要降低剂量,一般可减少1/3的用量,以免造成亲鱼难产致死,此种亲鱼最好用LRH-A为催情剂。产卵池生态条件良好好,对水质、水温、流速等易控制催情剂量可稍偏低反之则否。采取一次注射的剂量,一般比多次注射的为小。根据北方地区的生产实践经验,催情所使用的剂量,一般都要比南方的剂量高,特别是对催产多年的老龄亲鱼,由于对催情剂的敏感性下降,必需增大剂量才能使亲鱼顺利排卵。(二)常用催产用具1亲鱼网 用于在亲鱼池捕亲鱼,要求网目不能太大,23厘米即可,且材料要柔软较粗,以免伤鱼。一般用
25、尼龙网。网目为23cm。网的宽度一般为67米,长度一般为亲鱼池宽的14倍左右,设有浮子和沉子。用于产卵池的亲鱼网可不设浮子和沉子。2亲鱼夹和采卵夹 亲鱼夹是提送及注射亲鱼时用的,采卵夹为人工授精时提鱼用的。两种夹规格完全相同,只是采卵夹在夹的后端开了一个洞,使亲鱼的生殖孔露出来 3其他工具 注射器(1毫升、5毫升、10毫升)、注射针头(6、7、8号)、消毒锅、镊子、研钵、量筒、温度计、秤、托盘天平、解剖盘、面盆、毛巾、纱布、药棉等。(左为亲鱼夹,右为采卵夹)亲鱼夹 采卵夹(三)催产期的确定 在最适宜的季节进行催产,是家鱼人工繁殖取得成功的关键之一。因为雌鱼卵巢发育到能够有效催产期后,它有一段“
26、等待”的时期,这段时期就个体来说大约是半个月,若就鱼群来说大约为一个半月。不到这一时期,雌鱼卵巢对催产剂敏感度不高,催产效果不佳;过了这一时期,雌鱼得不到产卵的适合条件,卵巢就逐渐退化,催产效果也不会好。雌鱼等待催产这一段时期,就是最适宜的催产季节,必须集中力量,不失时机地抓好催产工作。长江中、下游地区适宜催产的季节是5月上中旬至6月中旬。华南地区约提早一个月。鲮的催情产卵时期相对比较集中,每年5月上中旬进行,过了此时期卵巢即趋向退化。华北是5月底至6月底。东北地区是至7月上旬。催产水温1830,而以 2228最适宜(催产率、出苗率高)。(三)催产期的确定在实践中可结合下列因素来进行判断:(1
27、)气候及水温变化:天气睛好,气温回升就快,当早晨最低水温能持续稳定在18以上,就预示催产期到来。只有经过7-10天平均水温达20C以上的刺激后,其卵巢膜和卵细胞才能过渡到催产敏感期,即进入适当的催产期,为催产顺利的时期。亲鱼可能维持此期的天数是很短的,根据水温变动情况,整个产卵群体所能待续的时问也仅为15-20天左右,因此,必须严密注意亲鱼成熟情况及水温的变化,及时检查,抓紧时机进行配组催产,这也是提高生产的一个重要环节。(2)亲鱼食量明显减退,甚至不吃东西,便是性腺成熟的表现。(3)临催产前期发育成熟好的亲鱼,在无风或微风的早晨或傍晚,以及无风晴天的中午到水上层成群迫逐,频繁而激烈的活动(应
28、与患鱼虱病急燥激烈游动区别开来)另外,成熟好的亲鱼,特别是草亲鱼食量减少或停食,或2-3次间断性停食(间隔时间约3-d天)有经验的同志见到这种情况就果断决定拉网催情。四大家鱼中一般鲢、草鱼催产期稍早,鳙鱼次之,青鱼最晚。此外,已多次成熟的鱼,催产期可能提前,初产鱼催产期则较晚。当然这种顺序不是固定不变的要依几种鱼性腺成熟的具体切况而定,如有的渔场最先催产鲢、鳙等。(4)根据当地的物候 当年当地的积温高低,对植物生长发育影响最大,因此以当地农作物生长情况作为物侯指标,能比较可靠地确定适宜催产日期。一般大麦发黄、野玫瑰花盛开、青蚕豆大量上市季节,蝌蚪和摇蚊大批出现、鲤鲫鱼大批产卵已结束,一般正是人
29、工繁殖最适宜的时候。(5)根据历年进行催产的时间,约提前10-15天进行亲鱼检查,选择一个有代表性的亲鱼培育池,如果同一池的大多数雄鱼,用两指轻压生殖孔前斜上方3cm处,即有浓稠的精液流出,那么说明此池的雌鱼一般也已成熟了。在判断亲鱼成熟度的过程中,还必须注众多从饲养管理、水温、气候等方面进行综合分析,要尽量避免多次拉网检查,以免亲鱼性腺发育受到影响。如果检查时,雄鱼的精液尚不浓稠,可再等7-10天,该池的亲鱼即可考虑进行催产其间就不要再拉网检查了,至于检查时雄鱼无精,雌鱼腹部不膨大,一般本年度就不要再指望催产了。(四)催产亲鱼的选择 1催产用雄亲鱼的选择标准挤:挤:就是用手挤腹部,肛门有否类
30、便(有粪便,就是用手挤腹部,肛门有否类便(有粪便,说明鱼还吃食,晚几天催产较适)。说明鱼还吃食,晚几天催产较适)。从头向尾方向轻挤腹部即有精液流出,若精液浓稠,呈乳白色,入水后能很快散开,为性成熟的优质亲鱼;若精液量少,入水后呈线状不散开,则表明尚未完全成熟,若精液呈淡黄色近似膏状,表明性腺已过熟。2、催产用雌亲鱼的选择标准看:看:鱼腹部明显膨大,后腹部生殖孔附近饱满、松软且有弹性,生殖孔红润。使鱼腹朝上并托出水面,可见到腹部两侧卵巢轮廓明显。在鲢、鳙亲鱼能隐约见其肋骨,如此时将尾部抬起,则可见到卵巢轮廓隐约向前滑动;在草亲鱼可见到体侧有卵巢下垂的轮廓,腹中线处呈凹陷状。摸 就是摸摸腹部柔软程
31、度,腹壁厚度就是摸摸腹部柔软程度,腹壁厚度。若亲鱼后腹部小而硬,卵巢轮廓不明显,生殖孔不红润,卵粒不易挖出,且大小不整齐,不易分散,则表明性腺成熟度不够。反之,若亲鱼腹部过于松软,无弹性,卵粒扁塌或呈糊状,则表明亲鱼性腺已退化。这里需说明的是青鱼雌鱼往往腹部膨大不明显,只要略感膨大,有柔软感即可。还要注意检查草亲鱼时,需停食23天,以免过食后形成假象。3、亲鱼成熟度的判断 挖:挖:挖卵观察,可更准确地判断亲鱼成熟的程度。在选择亲鱼时,也可用挖卵器从卵巢挖出几粒鱼卵,用肉眼现察乱粒是否成熟,作为外形鉴定的辅助手段,能使判断更为准确。挖卵器可用金属、塑料、竹或鸡的羽毛等做成,柄长10-20cm,柄
32、部直径0.3一0.4 cm,前端略粗而圆滑,在近前端处挖一长2一2.5cm宽0.3 cm,深 0.25cm 盛卵槽,槽的边缘呈刀刃状,便于刮取卵。挖卵时,将挖卵器的前端自生殖孔内略向左或向右轻轻插人卵巢,伸人约45cm,旋转几次,轻轻抽出,即可得到少量卵粒。用肉眼观察或用透明固定液处理后观察。A.直接观察直接观察将挖出的卵粒放在拿心或玻璃片上,观察、鉴别卵子的成熟程度。若卵粒分散,大小均匀有光泽、饱满、全部或大部分卵核(即鱼卵里面的一个灰黑色小圆点)已偏位,即表明亲成熟较好。B.药物处理后观察药物处理后观察将挖出的卵粒放在凹玻片上,加人几滴透明固定液浸饱2-3min.,因核呈透明状态的时间较细
33、胞质和卵黄迟,故此时可清楚地看到白色的卵核。若卵核居中,表明亲鱼成熟差,卵核已偏位,表明亲鱼成熟较好,无核象,表明如巳过熟或已退化。能用镜检则更准确。透明固定液的配方很多,这更列举几个配方,可任选其中一种:a.95%酒精5份,冰醋酸I份混合。用此液透明应尽快观察,时间一长核也会透明。b.95%酒精4份,冰酷酸1份松节油透醇4份混合,此液透明能长期保存核相。C.95%酒精19份,10%福尔马林2份,冰醋酸1份。观察时应注意如下事项 A生殖孔发炎红肿,甚至溃烂的亲鱼,不能选用。雌雄鱼有时会出现这种情况,容易造成难产,即使性腺成熟也不能选用。这些亲鱼可注射青露素,一般10kg以下的注射5万单位,10
34、kg以上的注射10万单位,然后将亲鱼放回原池或暂养池,5一7天再进行催产,效果较好。B催产初期,应先选择性腺成熟最好的亲鱼催产。若亲鱼腹部虽然膨大,但手摸不够松软,缺乏弹性,或生殖孔紧闭的,说明不够成熟,暂时不宜选用。C.催产中期,只要腹部稍微膨大、松软的亲鱼,就可选用。因这时水温适宜,大部分亲鱼都已成熟,可适当放宽条件。D.催产后期,繁殖季节将过,凡是未经催产、腹部稍为膨大的就可催产,但腹部过分膨大,松软,且缺乏弹性,生殖孔充血、红肿的往往是性腺过熟或开始退化的表现,一般催产的效果不好,不宜选用。应将亲鱼放回原池继续培育,留待翌年再来催产。表表4-4 常用鱼用催产剂的种类及作用常用鱼用催产剂
35、的种类及作用名称来源靶器官作用剂量HCG2-4月孕妇的尿性腺促进性腺发育;诱导排卵800-1200IU/Kg脑垂体鱼脑性腺促进性腺发育;诱导排卵;控制性激素分泌10ug/KgLRHA化学合成脑垂体刺激脑垂体合成释放LH、FSH和GtH;刺激排卵30-50ug/KgDOM化学合成多巴胺抑制或消除GRIH对GnRH的影响,促进GtH的分泌0.2-0.3mg/Kg(和LRH-A配合使用)(二)催情(二)催情 1、针数和针距、针数和针距 2、配制注射液、配制注射液 3、注射时间、注射时间 4、注射、注射 (1)体腔注射 (2)肌肉注射 三、效应时间 亲鱼注射完最后一针催产剂后到开始发情所需的时间叫效应
36、时间(effective time)。表4-5 两次注射家鱼催情、发情及人工授精时间控制表水温()针距(h)效应时间(h)第二针注射到适宜人工授精的时间(h)20-211010-1111-1222-2389-1010-1124-2587-88-1026-2766-77-828-2965-66-7注:水温低或亲鱼成熟度差时应延长针距,并进行微流水刺激;通常上午注射第一针,夜晚注射第二针,产卵时间控制在次日凌晨。四、产卵设施1、产卵池2、鱼巢(1)植物型人工鱼巢(2)洞穴型人工鱼巢(3)担架(鱼夹)(4)脸盆、毛巾、羽毛杆等第四节受精与授精 一、受精过程一、受精过程 亲鱼经过催产处理后,移入产卵池
37、,不间断流水。由于受激素的作用,经过一定的时间,雌雄亲鱼出现相互追逐的现象,水面常出现大的波纹或浪花,并不时露出水面,多尾雄亲鱼紧紧追着雌亲鱼,有时并用头部顶撞雌鱼的腹部,发情高潮时,雌雄鱼尾部弯曲并颤抖着胸、腹鳍产卵、射精。让亲鱼自行把卵产在池中自行受精的称之为自然产卵受精。在产卵池收卵槽上挂上一个收卵网箱,通过水流的带动,将受精卵集于收卵池中,再将收卵网箱中的受精卵用小盒或手抄网移到孵化池中孵化。当网箱中出现大量鱼卵时,要及时捞卵,以防鱼卵在网箱中沉积太多而导致窒息死亡。二、授精方法二、授精方法 用人工方法采取成熟的卵子和精子,将它们混合后使之完成受精过程即叫人工授精。进行人工授精需密切注
38、意观察发情鱼的动态,当亲鱼发情至高潮即将产卵之际,迅速捕起亲鱼采卵采精,并立即进行人工授精。1、干法人工授精、干法人工授精 将普通脸盆擦干,然后用毛巾将捕起的亲鱼和鱼夹上的水擦干。将鱼卵挤入盆中,并马上挤入雄鱼的精液,用羽毛搅动,使精卵混匀,再加少量清水拌和,静置分钟,慢慢加入半盆清水,继续搅动,使其充分受精,然后倒去浑浊水,再用清水洗34次,待卵膜吸水膨胀后移人孵化器中孵化。2、湿法人工授精、湿法人工授精 脸盆内装少量清水,由两人分别同时将卵和精液挤入盆内,并由另一人同时用羽毛轻轻搅动或摇动,使精卵充分混匀,其他同干法人工授精。3、半干法人工授精、半干法人工授精 将精液先用生理盐水稀释后再与
39、挤出的卵混合的授精方法。三、影响受精率的主要因素三、影响受精率的主要因素 受精率受精卵数检查卵的总数100 1、精卵质量、精卵质量 精卵质量高,受精率自然较高,精卵不成熟或过熟,都会影响到受精率。2、精子数量(雌雄鱼配比)、精子数量(雌雄鱼配比)一般情况下精子的数量远无高于卵子数量,能保证卵子都能受精,但当雌雄比例严重失调或雄鱼产精量严重不足时,会制约受精率。3、授精过程、授精过程 授精的每个环节都有可能影响到受精率,比如挤精挤卵同步性、光照、避免血污、擦干水分、混匀等。第五节 孵化 一、漂流性卵的孵化(以家鱼为例)一、漂流性卵的孵化(以家鱼为例)漂流性卵在静水中为半浮性,在流水中呈漂流状,故
40、名。漂流性卵一般在环道中冲水孵化,放卵密度为100万粒/m3。环道中安装一圈鸭嘴喷头,持续向环道内注水,水流速度不要太快(0.150.30m/s),以卵刚好呈漂浮状为宜,在仔鱼脱膜后要尤其注意调节水流。孵化过程中会产生污物,和后期脱落的卵膜一起聚集在过滤纱窗上,导致水流不畅,要注意清除,防止溢出。孵化过程中要遮阳。出膜后并不立即移出,而是待到鳔充气(出现“腰点”),卵黄囊基本消失、能开口摄食后再出苗。二、黏性卵的孵化(以鲤鱼为例)二、黏性卵的孵化(以鲤鱼为例)1、池塘孵化、池塘孵化 目前生产上多直接使用鱼苗培育池进行孵化,以减少鱼苗转塘的麻烦和损失。将粘有鱼卵的鱼巢放人池中水面下10厘米并固定
41、,每亩水面可放2530万粒卵左右,若以60的成活率计算,每亩鱼苗的密度为1518万尾。鱼苗刚孵出时,不可立即将鱼巢取出,此时鱼苗大部分时间附着在鱼巢上,靠卵黄囊提供营养,为鱼苗能主动游泳觅食时,才能去掉鱼巢。2、淋水孵化、淋水孵化 将着卵的鱼巢放在室内悬吊或平铺在架子上,用淋水的方法使鱼巢保持湿润。此法能人为控制孵化时室内温度、湿度,观察胚胎发育情况,具有孵化速度一致,减少水霉危害,孵化不受气象变化影响等优点。当胚胎发育到发眼期时应立即将鱼巢移到孵化池内孵化,注意室内与水池温度相差不超过5。3、脱粘流水孵化、脱粘流水孵化 (1)泥浆脱粘法 先用黄泥土合成稀泥浆水,一般5公斤水加0.51公斤黄泥
42、,经40目网布过滤。将受精卵缓慢倒入泥浆水中,不停地翻动泥浆水23分钟,将脱粘后的卵移入网箱中洗去泥浆,即可放入孵化器中流水孵化。(2)滑石粉脱粘法 将1.00克滑石粉即硅酸镁再加2025克食盐溶于10升水中,搅拌成混合悬浮液,即可用来脱粘鲤卵11.5公斤。操作时一面向悬浮液中慢慢倒卵,一面用羽毛轻轻搅动,经半小时后,受精卵呈分散颗粒状,漂洗后放入孵化器中进行流水孵化。三、浮性卵的孵化(以石斑鱼为例)三、浮性卵的孵化(以石斑鱼为例)石斑鱼产浮性卵,可以在环道中进行孵化,不过大多采用孵化桶在室内孵化。孵化密度为50100粒/升,在桶中央放置一气石,气流速度以能使鱼卵或仔鱼较均匀悬浮在水中为度。由
43、于为静水孵化,孵化用水必须清新,需经过沙滤,并最好用紫外光杀菌。孵化过程中的污物漂浮在水面上,可以用塑料管收集并吸附清除。海水鱼在孵化时需要注意调节盐度,在不同盐度条件下,卵的沉浮状态不同。水温2526条件下,当盐度低于25.6时,鞍带石斑的卵沉底;盐度高于27.1时,卵上浮。3、溶氧与流水、溶氧与流水 表表4-10 4-10 不同溶氧量对鲻鱼卵的影响(水温不同溶氧量对鲻鱼卵的影响(水温19.519.520.520.5、盐度、盐度3232)平均含氧量及范围(mg/L)试验时间(h)平均成活率及其范围(%)1.0(0.21.8)2404802.5(2.03.0)2404803.5(2.74.3)
44、245(28)4804.5(3.75.3)2417(1321)483(15)5.0(4.55.5)2485(8194)4885(8387)6.0(7.65.6)2490(8694)4885(8288)8.0(7.68.4)2490(8496)4890(8298)4、光线、光线 鱼类胚胎发育对光的反应具有遗传因素。因此,光线对不同生态类群的鱼类胚胎发育有着不同的影响。鲟鱼卵在有光线条件比在黑暗条件下胚胎发育速度平均要快1826小时。而且在有光线下发育孵化出的仔鱼个体长,重量大。比目鱼卵的发育需要有光的条件,在阴暗处卵的发育比有光线时满一天到两天。但是,直射的光线对于产卵于石砾中的鲑鳟鱼的胚胎发育
45、是不利的,引起胚胎畸形率的增加。一般地说,浮性卵发育所需的光照强度比沉性卵、尤其是比埋在砂下的卵要强一些。因此,我国几种家鱼卵在自然光照下胚胎发育十分良好,若将卵置于黑暗环境中,胚胎正常发育受到干扰,只有15%左右孵化出,且畸形率高,出膜的仔鱼不久即相比相继死亡。5、混浊度、混浊度 在海水含泥沙量大于10010-6时,真鲷受精卵的孵化率显著下降。6、敌害生物、敌害生物 鱼卵对抵抗敌害生物能力极低,海水有桡足类、原生动物、细菌等都能侵袭受精卵的孵化,其中尤其细菌在水温1824时,更适合其繁殖,对孵化影响较大,要采取措施预防。因此,孵化时的海水要经过沙过滤,用具及孵化池要用药物严格消毒。Nash(
46、1974)在鲻鱼卵孵化中,海水经过滤、辐射和抗生素处理,用青霉素19IUml和链霉素0.01mgml,有效减少海水中的细菌生长。Oppenheimer(1955)通过显微镜照相证实鱼卵上有细菌生长,用青霉素和四环素混合物加以控制。在孵化槽中使用抗生素的作用,是减少细菌在卵膜上活动,防止卵的粘结,也防止细菌粘液覆盖卵膜而破坏卵与海水间的渗透平衡。纳斯等(1974)结合紫外线灭菌和阻菌过滤海水来处理孵化卵。在原肠期,移出产卵槽,在紫外线下照射,用过滤海水洗涤,在涤水中添加微量抗生素,即每ml海水国青霉素G钾18IUml和硫酸链霉素0.05mgml,然后将卵放到克氏孵化器,大约密度为250粒升。孵化
47、连续进行,每天加入低剂量的抗生素以减少细菌污染。六、受精卵孵化时应注意事项六、受精卵孵化时应注意事项 1、溶氧和充气、溶氧和充气 鱼卵在孵化过程中,应密切注意氧气供给。因为孵化容器中卵的密度很大,一定要保持一定氧气供给。充氧量大一点,但也不能过大,过大会破坏卵膜,影响孵化率。2、水流调节、水流调节 漂流性卵在环道中孵化时,在一定水流条件下,卵漂浮在水面孵化。但水流过速时,导致卵、初孵仔鱼易粘附于内环的纱窗上,尤其是仔鱼逆水游泳时会耗费过多能量。3、及时清理卵膜和代谢产生的污物,保持、及时清理卵膜和代谢产生的污物,保持水质清新水质清新 4、及时将仔鱼移出、及时将仔鱼移出 对于某些在产卵池中孵化的
48、种类,要及时将仔鱼移出。尤其是罗非鱼,避免亲鱼吞食仔鱼。第六节鱼类人工繁殖的生物学指标 1 1、怀卵量(、怀卵量(brood amountbrood amount)水产动物产卵前卵巢中所怀成熟卵子的数量。又分为绝对怀卵量(absolute brood amount)和相对怀卵量(relative brood amount)。2 2、繁殖力(、繁殖力(fecundityfecundity)在一个繁殖季节中,水产动物一雌体或一种群雌体产卵的数量。可分为个体繁殖力(individual fecundity)、种群繁殖力(population fecundity)。3 3、受精率、受精率(fertilization rate)(fertilization rate)胚胎发育至高囊胚期时(有的以胚胎尾芽期时计算),其发育正常成活的受精卵数占总卵数的百分比。4 4、孵化率、孵化率(hatchability)(hatchability)水产动物胚胎发育阶段中,从卵内破膜而出的个体数量与受精卵数量之比值。5 5、出苗率、出苗率 在生产上真正的孵化率比较困难统计的,所以生产上也有采用出苗率来统计,其计算方法为出苗数占孵化卵的百分数。