生物分离工程5(细胞破碎技术)课件.ppt

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资源描述

1、 在电子显微镜下,可观察到革兰阳性菌细胞壁较厚,具有2080 nm的肽聚糖层,约占细胞壁干重的50。而革兰阴性菌的肽聚糖层较薄,仅23 nm,占细胞壁干重的10左右。在肽聚糖层外还有一较厚的外壁层,约810 nm,主要为脂蛋白、脂多糖和其他脂类,含量为细胞壁干重的80。革兰氏革兰氏染色法染色法革兰氏染色法 用革兰氏染色剂进行染色破壁的酵母呈粉红色,而未破壁的酵母呈兰紫色,分别计数,并采用相同的稀释度用血球记数板进行镜检记数,计算破壁率。-破壁率(破壁率(100%)C-破壁前的细胞数(相同稀释倍数)破壁前的细胞数(相同稀释倍数)C-破壁后的细胞数(相同稀释倍数)破壁后的细胞数(相同稀释倍数)n1

2、-染色后呈紫色细胞数染色后呈紫色细胞数n2-染色后呈粉红色细胞数染色后呈粉红色细胞数细胞破碎方式细胞破碎方式高压匀浆高压匀浆 高速珠磨高速珠磨 纳米磨破碎纳米磨破碎撞击破碎撞击破碎 渗透压冲击渗透压冲击超声破碎超声破碎冻融法冻融法低温玻璃化低温玻璃化酶溶法酶溶法-溶菌酶、纤维素酶等溶菌酶、纤维素酶等机械法机械法化学法化学法-化学渗透化学渗透物理法物理法从高压室(几十兆帕)压出的细胞悬浮液经过阀座D的中心孔道,从D和阀C之间的小环隙中喷出,速度可达每秒几百米。这种高速喷出的浆液又射到静止的撞击环E上,被迫改变方向从出口管流出。细胞在这一系列过程中经历了高速造成的剪切、碰撞以及由高压到常压的变化,

3、从而造成细胞的破碎。高高压压细细胞胞破破碎碎机机如:株磨式组织研磨器(图);小型株磨器(图)微生物细胞悬浮液与极细的研磨剂(通常是直径1 mm的无铅玻璃珠)在搅拌桨作用下充分混合,珠子之间以及珠子和细胞之间的互相剪切、碰撞促进细胞壁破裂,释出内含物。在珠液分离器的协助下,珠子被滞留在破碎室内,浆液流出,从而实现连续操作。破碎中产生的热量由夹套中的冷却液带走 利用微细玻璃珠,在高速运转下的相互碰撞,造成组织细胞的破裂与分散。适合珍贵样品液的研磨,例如蛋白质、酶及细胞液等。微细玻璃珠可回收使用。样品处理量,含玻璃珠可达350ml。样品量可达样品量可达80 小型珠磨器小型珠磨器l 密闭容器可容纳1至

4、1.5ml的组织液或是一些细胞悬浊液,通过1至3分钟的剧烈搅拌,能使细胞彻底的破裂,甚至一些骨头、微生物的孢子通过玻璃珠的研磨也能有效的磨碎。l玻璃珠适用性:玻璃珠适用性:细菌用0.1mm的玻璃珠 酵母、藻类和组织培养细胞用0.5mm的玻璃珠 动植物的组织用1mm的玻璃珠1 1、基本、基本原理原理2 2、影响因素影响因素 3 3、实验室、实验室连续破碎池连续破碎池结构示意图结构示意图型号L50L65L80L80FL100乳化细度(um)2 222调节范围(mm)1-0.01 1-0.011-0.011-1.01产量(T/h)0.01-0.05 0.01-0.050.5-10.5-3电机功率(KW)1.11.53.04.05.5电压(V)380 380380380转速(r/min)29002900 29002900磨片直径(mm)506580100出口直径(寸)5/8 5/83/2 3/2进口直径(寸)5/4 5/4 25/2冷却水管径(寸)1/4 1/4重量(kg)4050100200150

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