1、天天 然然 药药 物物 化化 学学第三章第三章 提取分离方法提取分离方法开始提取分离前的准备开始提取分离前的准备:1.了解分离对象了解分离对象(动、植物动、植物)的学名、产地、药用部位、采的学名、产地、药用部位、采集时间和方法。集时间和方法。2.了解被提取化学成份的结构类型。充分查阅工具书、文了解被提取化学成份的结构类型。充分查阅工具书、文献，借鉴前人的工作。献，借鉴前人的工作。3.明确分离的任务明确分离的任务-系统分离还是单体化合物的分离。系统分离还是单体化合物的分离。专业期刊：专业期刊：Natural Product Report(Nat.Prod.Rep.);J.Natural Prod
2、uct(J.Nat.Prod.);Phytochemistry;Planta Medica;Tetrahedron;Tetrahedron Lett.;Chemical&Pharmaceutical Bulletin (Chem.Pharm.Bull.);Organic Letters(Org.Lett.)Carbohydrate Research(Carbohydr.Res.);Steroid 药学学报；中草药；有机化学；化学学报药学学报；中草药；有机化学；化学学报 Chinese Chemical Letters(Chin.Chem.Lett.).网络：中国期刊全文数据库；中国博士，硕士论
3、文数网络：中国期刊全文数据库；中国博士，硕士论文数 据库据库.数据库数据库:SCI Finder;CA(美国化学文摘美国化学文摘).各国专利各国专利 一一.中草药有效成分的提取中草药有效成分的提取1.溶剂法：溶剂法：相似相溶原则相似相溶原则溶剂性质溶剂性质环己烷环己烷 石油醚石油醚 苯苯 氯仿氯仿 乙醚乙醚 乙酸乙酯乙酸乙酯 正丁醇正丁醇 丙酮丙酮 乙醇乙醇 甲醇甲醇 极极 性性亲脂性亲脂性亲水性亲水性溶解范围最广的有机溶剂：溶解范围最广的有机溶剂：乙醇乙醇与水分层的有机溶剂：与水分层的有机溶剂：环己烷环己烷 正丁醇正丁醇能与水分层的极性最大的有机溶剂：能与水分层的极性最大的有机溶剂：正丁醇正
4、丁醇与水可以以任意比例混溶的有机溶剂：与水可以以任意比例混溶的有机溶剂：丙酮丙酮 甲醇甲醇极性最大的有机溶剂：极性最大的有机溶剂：甲醇甲醇极性最小的有机溶剂：极性最小的有机溶剂：环己烷环己烷介电常数最小的有机溶剂：介电常数最小的有机溶剂：石油醚石油醚比水重的有机溶剂：比水重的有机溶剂：氯仿氯仿v石油醚或汽油石油醚或汽油-低极性：低极性：油脂、腊、叶绿素、挥发油、游离甾体及三萜类成分油脂、腊、叶绿素、挥发油、游离甾体及三萜类成分v氯仿或乙酸乙酯氯仿或乙酸乙酯-中等极性中等极性:游离生物碱、有机酸及黄酮、香豆素苷元等中性成分游离生物碱、有机酸及黄酮、香豆素苷元等中性成分v丙酮或乙醇、甲醇丙酮或乙醇
5、、甲醇-强极性强极性:苷类、生物碱盐以及鞣质等极性成分苷类、生物碱盐以及鞣质等极性成分提取氨基酸、糖类、无机盐等水溶性成分提取氨基酸、糖类、无机盐等水溶性成分v水水-强极性强极性:提取提取方法方法 溶剂溶剂 操作操作提取提取效率效率 使用范围使用范围 备注备注浸渍法浸渍法水或水或有机溶剂有机溶剂不加热不加热效率低效率低各类成分，各类成分，尤遇热不稳尤遇热不稳定成分定成分出膏率低，易出膏率低，易发霉，需加防发霉，需加防腐剂腐剂渗漉法渗漉法有机溶剂有机溶剂不加热不加热脂溶性脂溶性成分成分消耗溶剂量大，消耗溶剂量大，费时长费时长煎煮法煎煮法水水直火直火加热加热水溶性水溶性成分成分易挥发、热不易挥发、
6、热不稳定不宜用稳定不宜用回流提取回流提取法法有机溶剂有机溶剂水浴水浴加热加热脂溶性脂溶性成分成分热不稳定不宜热不稳定不宜用，溶剂量大用，溶剂量大连续回流连续回流提取法提取法有机溶剂有机溶剂水浴水浴加热加热节省溶剂、节省溶剂、效率最高效率最高亲脂性较亲脂性较强成分强成分用索氏提取器，用索氏提取器，时间长时间长提取方法提取方法3.升华法升华法 适用于具有挥发性、能随水蒸汽蒸馏而不被破坏、适用于具有挥发性、能随水蒸汽蒸馏而不被破坏、难溶或不溶于水的成分的提取，难溶或不溶于水的成分的提取，如挥发油如挥发油、小分子的香、小分子的香豆素类、小分子的醌类成分。豆素类、小分子的醌类成分。固体物质受热不经过熔融
7、，直接变成蒸汽，遇冷后固体物质受热不经过熔融，直接变成蒸汽，遇冷后又凝固为固体化合物，称为升华。中草药中有一些成分又凝固为固体化合物，称为升华。中草药中有一些成分具有升华的性质，可以利用升华法直接自中草药中提取具有升华的性质，可以利用升华法直接自中草药中提取出来。如出来。如樟脑、咖啡因樟脑、咖啡因。2.水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法(二二)根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离1.液液-液萃取与分配系数液萃取与分配系数K值值2.分配难易与分离因子分配难易与分离因子 b b1.温温 度：重结晶度：重结晶2.混合溶剂：沉淀混合溶剂：沉淀3.酸碱性：酚，酸，生物碱
8、酸碱性：酚，酸，生物碱 (酸溶碱沉酸溶碱沉)4.可逆化学反应可逆化学反应b bK AK B=b b 100 1001 1100 100 b b 10 10萃取次数萃取次数10 1210 12b b 2 2 100100二二.中草药有效成分的分离与精制中草药有效成分的分离与精制(一一)根据物质溶解度差别进行分离根据物质溶解度差别进行分离3.分配比与分配比与pH样品水溶液样品水溶液水相水相有机相有机相水相水相有机相有机相水相水相有机相有机相水相水相有机相有机相水相水相有机相有机相水相水相有机相有机相pH 3pH 2pH 9pH 3pH 13pH 6强极性，强极性，中性物质中性物质碱性物质碱性物质酸
9、性物质酸性物质中性物质中性物质酸性物质酸性物质4.逆流分溶法逆流分溶法(CCD)5.液液-液萃取与纸层析液萃取与纸层析6.液液-液分配柱色谱液分配柱色谱7.液滴逆流色谱（液滴逆流色谱（DCCC）及高速逆流色谱）及高速逆流色谱(三三)根据物质的吸附性差别进行分离根据物质的吸附性差别进行分离1.1.物理吸附物理吸附吸附剂吸附剂溶质溶质溶剂溶剂极性吸附剂：极性吸附剂：硅胶硅胶、氧化铝氧化铝待分离成分待分离成分水水、有机溶媒有机溶媒相似相溶相似相溶官能团的极性官能团的极性可根据溶剂的介电常数可根据溶剂的介电常数(e)(e)判断极性大小判断极性大小四四.柱柱 层层 析析Column Chromatogr
10、phy 常压柱层析常压柱层析(0.150g)（Ordinary Column Chromatogr.）吸附性柱色谱吸附性柱色谱 分配性柱色谱分配性柱色谱 植物有效植物有效 柱色谱柱色谱 离子交换柱色谱离子交换柱色谱 成分分离成分分离 凝胶过滤柱色谱凝胶过滤柱色谱 主要手段主要手段 聚酰胺柱色谱聚酰胺柱色谱 大孔吸附树脂大孔吸附树脂(一一).吸附柱色谱法吸附柱色谱法(硅胶、氧化铝）硅胶、氧化铝）1）样品量与吸附剂用）样品量与吸附剂用量：量：一般：一般：1 30 60细分离：细分离：1 100 2002）柱径与柱长：）柱径与柱长：3）装柱和上样：）装柱和上样：一般：一般：1 15 20A.湿法上样
11、湿法上样B.干法上样干法上样5）洗脱：梯度洗脱）洗脱：梯度洗脱4）吸附剂和洗脱条件的选择：）吸附剂和洗脱条件的选择：2 上样上样 1)湿法湿法 溶剂溶解上样（少量），低极性溶剂溶解上样（少量），低极性 2)干法干法 低极性溶剂溶解性差低极性溶剂溶解性差 3 洗脱洗脱 常压常压 低压低压 梯度洗脱梯度洗脱 4 收集与检查收集与检查 等份等份 TLC UV（二）（二）.聚酰胺（聚酰胺（Polyamide）1 原理原理 a 氢键吸附原理氢键吸附原理 酰胺键酰胺键 酚类、酸类、醌类、硝基化合物酚类、酸类、醌类、硝基化合物 成氢键能力与溶剂有关成氢键能力与溶剂有关 水水甲醇甲醇乙醇乙醇丙酮丙酮稀氨液稀氨
12、液稀稀NaOH 氢键吸附规律：基团多少；基团位置；芳香核，氢键吸附规律：基团多少；基团位置；芳香核，共轭双键；分子内氢键共轭双键；分子内氢键 b 极性吸附原理极性吸附原理 非极性脂肪链非极性脂肪链 萜类、甾体、生物碱萜类、甾体、生物碱 黄酮苷与苷元黄酮苷与苷元 非水（正相）非水（正相）含水（反相）含水（反相）2 聚酰胺粉的制备聚酰胺粉的制备 国产（国产（1530目）目）层析用（层析用（80100目）目）粗粉蒸馏水浸泡过夜，磨细，混悬液直接使用粗粉蒸馏水浸泡过夜，磨细，混悬液直接使用 抽滤后，抽滤后，6080度烘干度烘干23小时备用小时备用 3 操作操作 a 装柱装柱 细粉水浸泡装柱，自然沉降细
13、粉水浸泡装柱，自然沉降 b 上样上样 2030%水溶液上样水溶液上样 40-60:1 c 洗脱洗脱 水水 含水醇含水醇 95%醇醇 3%NaOH 5%NaOH 4 再生再生 5%NaOH(三三).分配性柱层析分配性柱层析 1 原理原理 利用混合物在两相互不混溶中分配系数不同，而达利用混合物在两相互不混溶中分配系数不同，而达 到分离的一种柱层析方法。分配系数差异愈大，分到分离的一种柱层析方法。分配系数差异愈大，分 离效果愈好。离效果愈好。2 支持剂支持剂 硅胶、硅藻土、纤维粉硅胶、硅藻土、纤维粉 3 溶剂系统的选择溶剂系统的选择 PC层析选择层析选择 4 操作操作 a 装柱装柱 b 上样上样 c
14、 洗脱洗脱 四、凝胶柱层析（四、凝胶柱层析（Sephadex LH-20）1 葡聚糖凝胶简介葡聚糖凝胶简介 由葡聚糖凝胶由葡聚糖凝胶Sephadex G-25交联亲脂性羟丙基交联亲脂性羟丙基而制备，是同时具备吸附层析、分配色谱和分子筛功而制备，是同时具备吸附层析、分配色谱和分子筛功能的独特层析介质，溶剂系统没有限制，包括水相缓能的独特层析介质，溶剂系统没有限制，包括水相缓冲液、丙酮、乙酸乙脂、氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃、冲液、丙酮、乙酸乙脂、氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯和各种混合溶剂，大量文献证明它非常适合于天甲苯和各种混合溶剂，大量文献证明它非常适合于天然产物纯化，特别是中草药有效成分如甙类
15、、生物碱、然产物纯化，特别是中草药有效成分如甙类、生物碱、黄酮、蒽醌、内酯、帖类、甾类、多酚的分离。德国黄酮、蒽醌、内酯、帖类、甾类、多酚的分离。德国科学家科学家Hans Henke著有著有Sephadex LH-20凝胶色谱分凝胶色谱分离专著，详尽叙述了离专著，详尽叙述了Sephadex LH-20在植物化学研在植物化学研究中的应用。究中的应用。2 原理 分子筛：分子的大小和形状 吸附层析：被分离化合物与凝胶间的氢键 分配层析：被分离化合物在流动相（溶剂）和固定 相（凝胶）之间的分配 3 操作 a 装柱 洗脱剂溶胀后悬浮液搅拌装柱 b 上样 c 洗脱 水溶性好 水或电解质溶液 水溶性差 醇水
16、或丙酮水 极性较小 丙酮、氯仿 d 浓缩浓缩 视情况而定视情况而定 e 再生再生 洗脱剂平衡洗脱剂平衡 有污染：有污染：0.2N NaOH-0.5N HCl 浸泡浸泡 水洗净水洗净-平衡平衡 保存：保存：50%丙酮水溶液丙酮水溶液 4 应用实例应用实例 例如，例如，Sephadex LH-20层析分离川穹里的腺嘌呤，贝母里层析分离川穹里的腺嘌呤，贝母里的腺苷浙贝宁、茄啶，日本附子里的乌头碱，银杏黄酮甙，夏枯的腺苷浙贝宁、茄啶，日本附子里的乌头碱，银杏黄酮甙，夏枯草中的夏枯草黄酮苷、皂苷，升麻中的酰胺苷，水蔓菁中的水蔓草中的夏枯草黄酮苷、皂苷，升麻中的酰胺苷，水蔓菁中的水蔓菁萜苷，鹿衔草中的鹿蹄
17、草苷，淫羊霍中的羊霍苷，多种中草药菁萜苷，鹿衔草中的鹿蹄草苷，淫羊霍中的羊霍苷，多种中草药中的芦丁芸香苷，红花中的槲皮素、芦丁、山柰酚、红色素等多中的芦丁芸香苷，红花中的槲皮素、芦丁、山柰酚、红色素等多种黄酮，麦冬中的麦冬黄酮，鹿蹄草中的儿茶素，紫草中的萘醌种黄酮，麦冬中的麦冬黄酮，鹿蹄草中的儿茶素，紫草中的萘醌、多酚。、多酚。（四）（四）.大孔吸附树脂大孔吸附树脂1 简介简介 大孔树脂吸附技术是上世纪七十年代发展起来的一大孔树脂吸附技术是上世纪七十年代发展起来的一种新工艺，是由苯乙烯、二乙烯或种新工艺，是由苯乙烯、二乙烯或a-a-甲基丙烯酸酯等甲基丙烯酸酯等聚合而成的高分子网状孔穴结构。药聚
18、合而成的高分子网状孔穴结构。药液通过大孔树脂液通过大孔树脂吸附，其中的有效成分吸附在树脂上，再经洗脱回收吸附，其中的有效成分吸附在树脂上，再经洗脱回收，可除掉药液中杂质，是一种纯化精制药的有效方法，可除掉药液中杂质，是一种纯化精制药的有效方法。非极性吸附树脂在吸附药液中成分时。非极性吸附树脂在吸附药液中成分时,主要是依靠物主要是依靠物理结构（如比表面、孔径等）起作用，不同的树脂有理结构（如比表面、孔径等）起作用，不同的树脂有不同的针对性。其操作的基本程序大多是：提取液不同的针对性。其操作的基本程序大多是：提取液通过大孔树脂吸附上有效成分的树脂洗脱洗脱通过大孔树脂吸附上有效成分的树脂洗脱洗脱液回
19、收洗脱液干燥半成品。该技术目前已较广应液回收洗脱液干燥半成品。该技术目前已较广应用于新药的开发和生产中用于新药的开发和生产中,主要用在分离和提纯过程中主要用在分离和提纯过程中。2 大孔吸附树脂的优点大孔吸附树脂的优点 经大孔树脂吸附技术处理后，可有效地去除经大孔树脂吸附技术处理后，可有效地去除水煎液中大量的糖类、无机盐、黏液质等吸潮成分水煎液中大量的糖类、无机盐、黏液质等吸潮成分，有利于多种中药剂型的生产，增强产品的稳定性，有利于多种中药剂型的生产，增强产品的稳定性。大孔树脂吸附技术还能缩短生产周期。大孔树脂吸附技术还能缩短生产周期,所需设备所需设备简单。免去了静置沉淀、浓缩等耗时多的工序。简
20、单。免去了静置沉淀、浓缩等耗时多的工序。3 大孔吸附树脂吸附机理大孔吸附树脂吸附机理 4 操作操作 a 树脂预处理树脂预处理 b 装柱装柱 c 上样上样 d 洗脱洗脱 e 树脂再生树脂再生 5 实际应用实际应用 适合中等程度的水溶性化合物 中药、天然色素，从 发酵液中得到抗生素、（青霉素先锋霉素螺旋霉素）蛋白质（胰岛素肽系抗生素）功能性食品添加剂 （维生素）等 聚苯乙烯合成吸附树脂吸附 含有电子的化合物如 含有苯环和共轭双键的化合物 甲基丙烯酸甲酯类吸附剂吸附 含羧基、酯基、氨基、酰胺基等与H可结合的官能团的化合物 (五五)根据物质的分子大小进行分离根据物质的分子大小进行分离葡聚糖凝胶葡聚糖凝
21、胶(sephadex G):水做溶剂水做溶剂羟丙基葡聚糖凝胶羟丙基葡聚糖凝胶(sephadex LH-20):水或有机溶剂水或有机溶剂1 葡聚糖凝胶简介葡聚糖凝胶简介 由葡聚糖凝胶由葡聚糖凝胶Sephadex G-25交联亲脂性羟丙基而交联亲脂性羟丙基而制备，是同时具备吸附层析、分配色谱和分子筛功能的制备，是同时具备吸附层析、分配色谱和分子筛功能的独特层析介质，溶剂系统没有限制，包括水相缓冲液、独特层析介质，溶剂系统没有限制，包括水相缓冲液、丙酮、乙酸乙脂、氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯和丙酮、乙酸乙脂、氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯和各种混合溶剂，大量文献证明它非常适合于天然产物纯各种混合溶
22、剂，大量文献证明它非常适合于天然产物纯化，特别是中草药有效成分如甙类、生物碱、黄酮、蒽化，特别是中草药有效成分如甙类、生物碱、黄酮、蒽醌、内酯、帖类、甾类、多酚的分离。德国科学家醌、内酯、帖类、甾类、多酚的分离。德国科学家Hans Henke著有著有Sephadex LH-20凝胶色谱分离专著凝胶色谱分离专著，详尽叙述了，详尽叙述了Sephadex LH-20在植物化学研究中的应在植物化学研究中的应用。用。2 原理 分子筛：分子的大小和形状 吸附层析：被分离化合物与凝胶间的氢键 分配层析：被分离化合物在流动相（溶剂）和固定 相（凝胶）之间的分配 3 操作 a 装柱 洗脱剂溶胀后悬浮液搅拌装柱
23、b 上样 c 洗脱 水溶性好 水或电解质溶液 水溶性差 醇水或丙酮水 极性较小 丙酮、氯仿 d 浓缩浓缩 视情况而定视情况而定 e 再生再生 洗脱剂平衡洗脱剂平衡 有污染：有污染：0.2N NaOH-0.5N HCl 浸泡浸泡 水洗净水洗净-平衡平衡 保存：保存：50%丙酮水溶液丙酮水溶液 4 应用实例应用实例 例如，例如，Sephadex LH-20层析分离川穹里的腺嘌呤，贝母里层析分离川穹里的腺嘌呤，贝母里的腺苷浙贝宁、茄啶，日本附子里的乌头碱，银杏黄酮甙，夏枯的腺苷浙贝宁、茄啶，日本附子里的乌头碱，银杏黄酮甙，夏枯草中的夏枯草黄酮苷、皂苷，升麻中的酰胺苷，水蔓菁中的水蔓草中的夏枯草黄酮苷
24、、皂苷，升麻中的酰胺苷，水蔓菁中的水蔓菁萜苷，鹿衔草中的鹿蹄草苷，淫羊霍中的羊霍苷，多种中草药菁萜苷，鹿衔草中的鹿蹄草苷，淫羊霍中的羊霍苷，多种中草药中的芦丁芸香苷，红花中的槲皮素、芦丁、山柰酚、红色素等多中的芦丁芸香苷，红花中的槲皮素、芦丁、山柰酚、红色素等多种黄酮，麦冬中的麦冬黄酮，鹿蹄草中的儿茶素，紫草中的萘醌种黄酮，麦冬中的麦冬黄酮，鹿蹄草中的儿茶素，紫草中的萘醌、多酚。、多酚。(六六)根据物质解离程度不同进行分离根据物质解离程度不同进行分离离子交换树脂离子交换树脂:提供可供交换的离子提供可供交换的离子阳离子交换树脂阳离子交换树脂阴离子交换树脂阴离子交换树脂1 原理原理 利用大分子树脂
25、网状结构内存在的交换基团而进行利用大分子树脂网状结构内存在的交换基团而进行 的交换性柱层析方法。的交换性柱层析方法。2 影响离子交换的因素影响离子交换的因素 PH值值 欲交换化合物的性质欲交换化合物的性质 欲交换化合物的浓度欲交换化合物的浓度 温度温度 交换溶剂交换溶剂 交换流速交换流速 树脂用量树脂用量 3 树脂的选择树脂的选择 4 操作操作 a 树脂预处理树脂预处理 b 装柱装柱 c 上样上样 d 交换交换 e 洗脱洗脱 f 树脂再生树脂再生 第四章第四章 结构研究法结构研究法二二.化合物的纯度测定化合物的纯度测定1.外观外观2.熔点熔点3.色谱色谱A.TLCB.HPLC三三.结构研究的主
26、要程序结构研究的主要程序一一.手段手段:光谱光谱(主主)+化学化学未未知知物物物理物理常数常数TLC分分子子式式取取代代基基定定性性定定量量骨骨架架特特征征取取代代基基定定位位平平面面结结构构立立体体结结构构全全合合成成mp a aDMS+元素元素分析分析(EA)IR;UV;1H(13C)-NMR植化植化分类分类光谱光谱特征特征NMRMS 化学化学方法方法NMRMS解析解析CD O R D N M R(NOE)已已知知物物化化学学关关联联结结构构测测定定单晶单晶X-射线衍射射线衍射数数 据据 获获 取取光光 谱谱 特特 征征化学化学证明证明与已知物与已知物对照对照三三.结构研究中采用的主要方法
27、结构研究中采用的主要方法（一）（一）确定分子式，计算不饱和度确定分子式，计算不饱和度1.元素定量分析配合分子量测定确定分子式元素定量分析配合分子量测定确定分子式分子式确定：分子式确定：2.同位素丰度比法确定分子式同位素丰度比法确定分子式3.高分辨质谱（高分辨质谱（HR-MS)不饱和度计算：不饱和度计算：12III2IIVu+-=1.电子轰击质谱（EI-MS）（二）（二）质谱质谱（MS）2.化学电离质谱（CI-MS）3.场解析电离质谱（FD-MS)质谱的类型：质谱的类型：（根据电离方式分类）（根据电离方式分类）4.快速原子轰击质谱（FAB-MS）5.电喷雾电离质谱（ESI-MS)v普通质谱（普通
28、质谱（MS）v高分辨质谱高分辨质谱(HR-MS):同时给出分子式和分子量同时给出分子式和分子量质谱图质谱图OOCH2CH3相对丰度相对丰度质荷比质荷比分子离子峰分子离子峰基峰基峰碎片离子峰碎片离子峰（三）（三）红外光谱红外光谱（IR）伸缩振动-键长的改变弯曲振动弯曲振动-键角的改变键角的改变：IR图谱图谱特征频率区特征频率区:官能团官能团指纹区指纹区UV图谱b-臧茴香酮的UV图谱（四）（四）紫外光谱紫外光谱(UV)-判断骨架类型判断骨架类型（五）（五）核磁共振谱核磁共振谱（NMR）1H-NMR图谱图谱化学位移化学位移 d d内标内标积分曲线积分曲线偶合常数偶合常数J1)化学位移化学位移 分子中
29、不同化学环境的同种磁性核由于屏蔽效应所引分子中不同化学环境的同种磁性核由于屏蔽效应所引起的共振使磁场强度发生改变的现象称为化学位移。起的共振使磁场强度发生改变的现象称为化学位移。2)影响化学位移的因素影响化学位移的因素(1)化学等价质子化学等价质子HHHHHHSiCH3CH3CH3H3CH3CCH3CH3CH2ClHHH3CBrCH3CHCH3Cl(2)影响化学位移的因素影响化学位移的因素A.诱导效应诱导效应不同电负性原子对不同电负性原子对CH3质子的化学位移的影响质子的化学位移的影响B.共轭效应共轭效应CCH2ROCCH2RCCH2ORd d4.34.44.85.95.96.51H-NMR图谱图谱化学位移化学位移 d d内标内标积分曲线积分曲线偶合常数偶合常数J
