1、2 实验原理实验原理 在在24小时内一次或多次给予受试化学物，小时内一次或多次给予受试化学物，观察和了解实验动物产生的急性毒性及其观察和了解实验动物产生的急性毒性及其强度、中毒死亡特征以及可能原因。强度、中毒死亡特征以及可能原因。根据受试物引起实验动物死亡与染毒根据受试物引起实验动物死亡与染毒剂量之间的剂量剂量之间的剂量-反应关系，计算半数致反应关系，计算半数致死量死量(LD50)。3 实验目的实验目的 掌握化学物毒性评价试验方法掌握化学物毒性评价试验方法 掌握经口灌胃技术掌握经口灌胃技术 学习中毒症状观察方法。学习中毒症状观察方法。4 实验内容实验内容 试验动物的选择和性别鉴定。试验动物的选
2、择和性别鉴定。试验动物的称重、编号以及随机分组方法。试验动物的称重、编号以及随机分组方法。急性毒性试验常用染毒途径和方法。急性毒性试验常用染毒途径和方法。急性毒性反应的观察和急性毒性反应的观察和LD50计算。计算。5 材料和试剂材料和试剂实验动物实验动物：健康小鼠：健康小鼠器器 材材：小鼠灌胃针、电子天平：小鼠灌胃针、电子天平 动物体重计、外科剪刀和镊子动物体重计、外科剪刀和镊子 试试 剂剂：受试物：受试物6 实验动物编号的标记方法实验动物编号的标记方法 颜料涂擦被毛编号法（常用于大小鼠）：颜料涂擦被毛编号法（常用于大小鼠）：红色：红色：0.5%中性红或品红溶液中性红或品红溶液 咖啡色：咖啡色
3、：2%硝酸银硝酸银 黑色：煤焦油的酒精溶液黑色：煤焦油的酒精溶液 7 实验动物编号的标记方法实验动物编号的标记方法单单 色色 法法大小鼠标记方法（单色法大小鼠标记方法（单色法n10）单色法标记原则：单色法标记原则：单单色法编大于色法编大于1010的号码的号码时，我们规定顺时针时，我们规定顺时针旋转，旋转，后一位必需大后一位必需大于前一位数，于前一位数，例如：例如：可以编，可以编，1212，1313，14141919，但不能编，但不能编1010，1111，2020，2121，2222，3030，3131，3232，3333，等，等，以此类推。以此类推。100100以内最以内最大能编大能编8989
4、号。号。9 实验动物编号的标记方法实验动物编号的标记方法大小鼠标记方法（双色法大小鼠标记方法（双色法n10）红色表示十位数：红色表示十位数：头部染红色为头部染红色为10 10 左前肢为左前肢为20 20 左腰部为左腰部为30 30 黄色表示个位数黄色表示个位数。11 实验动物编号的标记方法实验动物编号的标记方法 烙印编号法；烙印编号法；体内埋号编号法；体内埋号编号法；耳孔编号法；耳孔编号法；挂牌编号法；挂牌编号法；其它标记方法其它标记方法12 实验步骤实验步骤秤体重秤体重编号编号分组分组（随机数字表法）（随机数字表法）灌胃操作灌胃操作中毒症状观察和死亡纪录中毒症状观察和死亡纪录实验动物实验动物
5、预实验预实验组数和剂量组数和剂量确定大致的确定大致的LD0和和LD100计算计算LD5013 确定组距的方法确定组距的方法d=lgLD100 lgLD0n-1式中：式中：d-为组距为组距 n-为设计时确定的剂量组数为设计时确定的剂量组数14 急性毒性实验记录急性毒性实验记录受试物 名称：提供单位：染毒剂量：mg/kg 染毒途径：动物种属品系：动物来源：合格证号：室温：相对湿度：组别染毒剂量(mg/kg)动物编号性别体重(g)染毒时间症状及出现时间死亡时间体重记录(g)15 LD50的计算的计算寇氏法寇氏法16 LD50的计算的计算寇氏法寇氏法lgLD50=1/2(Xi+Xi+1)(Pi+1-P
6、i)式中式中:(Xi+Xi+1)-为相邻两个试验组剂量之和为相邻两个试验组剂量之和 (Pi+1-Pi)-为相邻两组死亡率之差。为相邻两组死亡率之差。各组剂量为等比级数时简化为各组剂量为等比级数时简化为 lgLD50=Xm-d/2(pi+1+pi)式中式中Xm为最高剂量对数；为最高剂量对数；d为相邻两组剂量对数之和。为相邻两组剂量对数之和。17 LD50标准差和标准差和95%可信限计算方法可信限计算方法式中式中:Pi-死亡率，死亡率，n-每组动物数每组动物数 LD5095%可信区间可信区间=Lg-1(lgLD501.96S lgLD50 SlgLD50=d Pi(1-Pi)n-118 急性毒性评
7、价急性毒性评价 根据实验动物的中毒症状、出现死亡的根据实验动物的中毒症状、出现死亡的时间和时间和LD50，参照化学物质毒性分级标准，参照化学物质毒性分级标准，评价受试物的急性毒性大小及毒性特征。评价受试物的急性毒性大小及毒性特征。19 注意事项注意事项 灌胃染毒时要求动物保持空腹状态，因此染毒前应禁食（不禁灌胃染毒时要求动物保持空腹状态，因此染毒前应禁食（不禁水）水）610小时。灌胃后至少小时。灌胃后至少23小时后才能喂食。油剂比水小时后才能喂食。油剂比水溶液要求限制喂食的时间更长些。溶液要求限制喂食的时间更长些。相同剂量的受试物，若以不同浓度给药，死亡情况会有所不同相同剂量的受试物，若以不同浓度给药，死亡情况会有所不同。常用的方法是将受试物体积固定，根据实验设计的剂量将受。常用的方法是将受试物体积固定，根据实验设计的剂量将受试物配制成不同浓度的溶液进行灌胃。试物配制成不同浓度的溶液进行灌胃。通常灌胃体积以体重的通常灌胃体积以体重的1%2%计算，最多不超过计算，最多不超过3%，即每，即每100g体重溜胃体重溜胃l2ml，最多不超过，最多不超过3ml。根据实际经验得出的。根据实际经验得出的各种实验动物灌胃量的极限是各种实验动物灌胃量的极限是:小鼠小鼠0.51ml，大鼠，大鼠45m1。20 思考与讨论思考与讨论急性毒性资料在评价环境污染物毒性中的意义？Thank You!
