1、标本采集的意义标本采集的意义明确诊断真正致病菌病情追踪指导制定治疗措施抗生素选择抗生素更换预后推测减少细菌耐药性结果无意义结果无意义规范化采集规范化采集不符合要求不符合要求提供重要临床提供重要临床感染信息感染信息处理失当造成处理失当造成 污染污染误导临床误导临床标本标本检验前误检验前误差差检验前误差:病人准备、标本采集、标本储存及运送不规范Clin Chem.2007 Jul;53(7):1338-42.Epub 2007 May 24Clin Chem Lab Med.2006;44(6):750-9检验前误差是导致检验结果失真的最主要原因之一细菌诊断标本采集原则细菌诊断标本采集原则用抗菌素
2、前采集,不同时期、不同标本采样时严格执行无菌操作,避免污染采集真正病灶处且足量标本避免假阴性标本需新鲜,不可添加防腐剂立即送检愈新鲜标本愈容易分离病原菌痰痰液液标本标本采集采集采集时间:晨痰,因晨痰量多,且含菌量也多先以冷开水漱口刷牙,有假牙者应取下假牙做深呼吸数次后收腹用力深咳将痰吐到宽口无菌加盖容器2小时内送达检验室(未能及时送检于4保存)(苛养菌如肺炎链球菌减少,正常菌过度生长)年老体弱、无力咳痰、下呼吸道分泌物不多时痰标本痰标本采集采集耐心宣讲,取得患者合作翻身叩背,附着痰液松动易于排出雾化吸入生理盐水或高渗盐水,使痰液稀薄,痰液增多,而易于排出带血痰带血痰唾液唾液脓痰脓痰白色粘液痰白
3、色粘液痰黄色粘液样痰黄色粘液样痰唾液痰唾液痰粘液丝卫生部医政司全国临床检验操作规程鳞状上皮细胞SBC25 白细胞WBC10/每低倍视野 为不合格痰=拒收鳞状上皮细胞SBC25/每低倍视野为合格痰=接受培养卫生部医政司全国临床检验操作规程鳞状上皮细胞SBC25 白细胞WBC25/每低倍视野鳞状上皮细胞SBC10-25 白细胞WBC25/每低倍视野卫生部医政司全国临床检验操作规程白细胞吞噬革兰阴性杆菌/革兰阳性球菌未见白细胞吞噬血液血液标本标本采集采集采集时机消毒规范双侧双瓶最佳采血时机最佳采血时机-1-1研究指出:研究指出:在使用抗生素前采血,在使用抗生素前采血,阳性率是用药后采血的阳性率是用药
4、后采血的2.22.2倍!倍!最佳采血时机最佳采血时机-2-2病人准备:正确消毒方式病人准备:正确消毒方式培养瓶消毒:以75%酒精消毒瓶口皮肤消毒:1.采血点由内往外,以75%酒精用力涂抹皮肤2.内往外划圈用力用力涂抹皮肤,待干燥干燥以达杀菌效果(等待等待时间:碘伏时间:碘伏约约1 1-3-3分钟分钟,碘酊约碘酊约3030秒秒)3.75%酒精由内往外去除碘液,避免污染血培养采集血培养采集绿色盖子:含活性炭需氧橘色盖子:含活性炭厌氧紫色盖子:普通厌氧蓝色盖子:普通需氧黄色盖子:普通小儿瓶血培养采集血培养采集双侧双瓶血培养的组合与检出率血培养的组合与检出率J Clin Microbiol.2007;
5、45:3546-3548致病菌和污染菌的鉴别致病菌和污染菌的鉴别真正菌血症:分离有毒力的菌株肺炎链球菌克雷伯菌属假单胞菌属金黄色葡萄球菌肠杆菌科念珠菌属存在危险因素免疫抑制假体手术留置导管多部位分离相同菌株污染菌培养时间长后续培养没有可重复性分离多种微生物临床情况不提示存在感染分离皮肤定植菌凝固酶阴性葡萄球菌:类白喉杆菌杆菌属3 3天阴性的血培养天阴性的血培养-需重送检需重送检有临床意义的分离菌:有临床意义的分离菌:在在2 2天内被检出占天内被检出占94%94%,在,在3 3天内被检出占天内被检出占97%97%J Clin Microbiol.2005;43:2506-25099797做厌氧血
6、培养的价值?做厌氧血培养的价值?只做需氧瓶不做厌氧瓶培养19%-29%19%-29%的菌株不能发现5 5%的血培养延迟1天报告阳性结果采集厌氧瓶同时增加采血量每增加1 ml血液阳性率增加3%ClinClin Infect Dis,1999,29:1309-1311Infect Dis,1999,29:1309-1311中华检验医学杂志,中华检验医学杂志,20002000,2323:285285EurEur J J ClinClin MicrobiolMicrobiol Infect Infect DDisDDis,2001,20:217-2192001,20:217-219采集方式严格无菌皮肤
7、消毒穿刺针穿刺抽取无菌试管或针筒直接送检(亦可直接打入血瓶内送检-同时具增菌功能,缩短TAT)即时送检、不能冷藏做厌氧培养输送过程严禁接触环境氧无菌无菌体液体液采集采集脑脊液脑脊液采集采集采集方式:碘酒、酒精消毒皮肤L3,L4间穿刺入蜘蛛膜穿刺后分装3-5 ml至无菌试管检测细菌、病毒 1 ml检测真菌、抗酸菌 2 ml注意事项:迅速送至实验室细菌培养保存于35温箱或室温,因嗜血杆菌及奈瑟氏菌对温度敏感检测病毒、真菌、分支杆菌4保存L3 L4 L5尿液尿液清洁中段尿(自然排尿)直接导尿可能下尿道细菌引入膀胱,导致继发感染常规法消毒尿道外围以无菌方式将导管插入膀胱耻骨上膀胱穿刺法(厌氧检查适用)
8、导管消毒后以空针抽取5-10ml尿液有尿路感染症状但中段尿培养菌数很少小儿收集包留置尿导管收集法O 穿刺导尿管吸取尿液X 尿液收集袋中采集女性女性肥皂清洗尿道外围以无菌纱布擦拭用手分开大阴唇先排出前段尿液,再以无菌宽口容器收集中段尿液男性男性肥皂清洗尿道外围以无菌纱布擦拭扶起茎阴翻上包皮先排出前段尿液,再以无宽口容器收集中段尿液最好最好留取早晨清洁中段尿标本留取早晨清洁中段尿标本自然排尿自然排尿-中段尿中段尿尿标本采集注意事项尿标本采集注意事项留取尿培养标本时需以无菌操作注明是否使用抗生素注明是否使用抗生素女患者月经期不宜留取尿标本会阴部分泌物过多,应先清洁冲洗再收集4-8保存不可超过24小时
9、标本如不能立即送检,应存放于冰箱生殖泌尿道生殖泌尿道标本标本依不同感染种类和病变特征采集不同标本尿道标本,用生理盐水局部清洗,无菌棉拭子插入尿道口1-2 cm停留十余秒,轻轻旋转拭子外阴部糜烂、溃疡,生理盐水清洗后取病灶边缘分泌物阴道和宫颈口分泌物须在窥阴器下用长拭子采集子宫内分泌物用无菌导管外套一层保护膜,插入子宫后再刺穿该膜予负压吸引,可减少阴道菌群污染女性盆腔脓肿,应局部消毒阴道由子宫陷凹处进针抽取生殖泌尿道生殖泌尿道标本标本2支无菌棉花拭子分2次收集,其中一支直接涂片发育期或成年妇女抹片:尿道口、子宫颈或直肠年幼女童:外阴部位取标本男性:前列腺液需进行前列腺按摩获取怀疑急性淋病:尿道分
10、泌物怀疑慢性淋病:前列腺或精囊注意事项:淋菌等病原菌检测需避免正常菌污染,取时尽量小心淋菌低温会死亡淋菌低温会死亡,采取后请勿延误,速送细菌室培养伤伤口、脓疡、脓口、脓疡、脓以70%酒精消毒采检表面开放式伤口:以棉棒采取深部标本封闭式伤口:以空针抽取(约1ml)如需厌氧培养,避免接触空气并及时送检,最好床边接种,可直接打入厌氧血瓶(增菌效果佳)打入厌氧血瓶(增菌效果佳)粪便粪便自然排便挑取带脓或血部分(2g)液状粪便取絮状物(2ml)置于无菌容器或置于保存液或增菌液送检直肠拭子肥皂、水和70%的酒精清洁肛门周围棉棒插入括约肌约 4-5cm(幼儿约2-3cm)轻轻的旋转数圈后送检注意事项注意事项
11、注意事项:调取粪便的粘液、组织、脓或血液部分送检前与微生物科联络,注明培养项目。沙门和志贺菌、致病性大肠杆菌、弧菌、念珠菌、菌群失调(难辨梭菌)怀疑沙门菌感染应在发病2周后采集标本标本运送标本运送、储存温度、储存温度储存、运送温度标本种类41.尿液、粪便、鼻腔、咽喉及存在共生菌标本2.所有TB检查标本3.病毒培养25(室温)1.耳朵、眼睛、血管导管、生殖道、组织、体液、血培养瓶、骨髓培养2.厌氧菌培养3.真菌培养:指甲、毛发、皮肤刮取物等351.阿米巴、CSF细菌培养2.淋菌培养(最好放35)标本送检时间限制标本送检时间限制15 分钟导管CSF眼结膜/角结膜检体体液胃液羊水鼻咽组织标本送检时间
12、限制标本送检时间限制2小时脓疡、伤口、浓血液培养耳直肠拭子生殖道标本痰、呼吸道标本尿液所有送检的检体都不要超过所有送检的检体都不要超过2 2小时小时的时间的时间病原微生物送检是感染控制的基础经验用药:依据以往准确的流行病学数据!如果临床送检标本太少如果临床送检标本太少,就无法进行流行病学调查和跟踪就无法进行流行病学调查和跟踪;如果送检标本比例失衡如果送检标本比例失衡,就无法获得准确的调查结果就无法获得准确的调查结果!谢谢您的参与聆听谢谢您的参与聆听 人有了知识,就会具备各种分析能力,明辨是非的能力。所以我们要勤恳读书,广泛阅读,古人说“书中自有黄金屋。”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识,培养逻辑思维能力;通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平,培养文学情趣;通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。有许多书籍还能培养我们的道德情操,给我们巨大的精神力量,鼓舞我们前进。