1、lClonal originlImmortality and telomereslGenetic instabilitylLoss of contact inhibition and anchorage-dependent growthlProgressive independence of proliferation from growth factors and nutrientslMetastasisCause of overproduction of cancer cellslFailure of abnormal cells to undergo apoptosislGenetic
2、abnormalities that inappropriately stimulate cell proliferationlAbnormalities of tumor-suppressor geneslTumor angiogenesisThe essence of malignant tumorl肿瘤的发生是环境因素和遗传因素共同作用的结果l环境因素只有改变遗传物质的结构和功能才能使正常细胞转变为癌细胞l肿瘤发生的本质是体细胞遗传物质的改变The essence of malignant tumorDriver mutation definitionl驱动突变被定义为可增加肿瘤细胞的适
3、应性（增殖潜能），同时导致癌症发生发展的基因突变。常见的驱动突变形式:活化突变；短片段插入或缺失突变；基因的重排或扩增l从统计学角度：某一位点上非沉默突变的频率显著高于背景突变/passenger mutations的频率（沉默突变因不改变基因编码的氨基酸；不影响蛋白质功能和活性，因而被认为是passenger mutations）l与passenger mutations区别在于：passenger mutations通常为无功能突变，不导致肿瘤的发生发展 driver mutations可影响癌症的表型；passenger mutations与肿瘤发展无关，随DNA复制而不断累积lOnco
4、gene Addiction：驱动突变常发生于与细胞信号传导和调节通路有关的基因；突变的基因驱动肿瘤形成并维持肿瘤的生长。因此，即便是在抑癌基因正常表达的情况下，癌细胞也可依赖于这种单个突变基因的异常表达而得以生长 Driver mutation definitionNSCLC中 BRAF突变率约1%-3%，大多与KRAS、EGFR突变不共存；BCR-ABL基因异位与慢性粒细胞性白血病：Driver mutation-HER2小分子EGFR TKIs可阻断ATP结合至EGFR铬氨酸激酶区域催化位点，从而抑制EGFR信号通路的活化。血浆VeriStrat与EGFR TKIs疗效G469A（39%
5、）Paik PK,et al.I-II期临床试验发现该药在具有ERBB2突变的肺腺癌患者中具有显著的抗肿瘤活性8%，中位PFS 9.Victoria Zazulina,Paul Smith,Ian Smith,Lucio CrinPanomics:genomics,proteomics,epigenomics,etcIV期BRAF V600E-突变阳性的NSCLC(N=17)大多数突变发生于编码催化亚单位的PIK3CA检测KRAS,EGFR,HER2,BRAF,PIK3CA,AKT1,MEK1，NRAS 突变，ALK 重排和 MET扩增吉非替尼+水飞蓟素 840mg/day(280mg po
6、tid)+培美曲塞在西方高加索肺癌患者中，10-15%存在EGFR活化突变，在亚裔人群，这一突变比例更高是EGFR TKIs疗效的负性预测分子从血浆DNA检测EGFR活化突变作为FAST-ACT2研究中有利的生存预测标志物肿瘤发生的本质是体细胞遗传物质的改变How to identify driver mutations?l统计学检测+体内、体外实验证实l癌症相关的驱动突变多集中于有限的一些涉及重要生物功能的信号通路，近年来不少学者主张采用信息网络、数据整合分析的方法来探索驱动突变并已获得初步成功l三类 A 基于对突变影响功能的预测 B 基于对已知driver/passenger mutati
7、ons参数的机器设置用以发现新的突变 C 基于driver/passenger mutations不同的突变频率Big step in NSCLC based on driver mutationPasi A Jne,Alice T Shaw,Jos Rodrigues Pereira,Gale Jeannin,Johan Vansteenkiste,Carlos Barrios,Fabio Andre Franke,Lynda Grinsted,2007年，Nature上首次报道在肺癌中发现一种新的驱动基因EML4-ALK；次要观察终点：PFS，缓解持续时间，OS，安全性，耐受性，人体药代动
8、力学Selumetinib plus docetaxel for KRAS-mutant advanced2011年11月，PRdriver mutations可影响癌症的表型；Loss of contact inhibition and anchorage-dependent growthVictoria Zazulina,Paul Smith,Ian Smith,Lucio Crin仍有30%左右存在EGFR敏感突变的NSCLC患者TKIs无效Carbone,et al.733例行多重基因组检测的患者中，465例检测到至少一个基因状态改变EGFR mutations and EGFR TK
9、IsA 基于对突变影响功能的预测从血浆DNA检测EGFR活化突变作为FAST-ACT2研究中有利的生存预测标志物Driver mutations in other tumors 不同瘤种的共同“分子分型”17%),而K-RAS突变则在白种人群的发生率远高于亚裔人群2013年，韩国的学者在胃腺癌中证实了ROS1基因重排的存在，从而为具有这一分子亚型的胃癌患者采取相应的靶向药物治疗奠定了基础是EGFR TKIs疗效的负性预测分子Driver mutation-EGFROncogene Addiction：驱动突变常发生于与细胞信号传导和调节通路有关的基因；突变多见于正在吸烟或既往吸烟者首个评估生物
10、标志物配对治疗疗效的前瞻性临床研究lEGFR（ERBB-1），是表皮生长因子受体(HER)家族成员之一，通过影响细胞增殖、凋亡等在癌症发生发展中发挥重要作用l在西方高加索肺癌患者中，10-15%存在EGFR活化突变，在亚裔人群，这一突变比例更高lEGFR突变多见于肺腺癌、不吸烟或轻度吸烟、女性、亚裔。l突变可导致EGFR通路不依赖配体的持续激活，同时对EGFR TKIs治疗敏感l小分子EGFR TKIs可阻断ATP结合至EGFR铬氨酸激酶区域催化位点，从而抑制EGFR信号通路的活化。Driver mutation-EGFRDriver mutation-EGFREGFR mutations a
11、nd EGFR TKIsEGFR mutations and EGFR TKIsEGFR mutations and EGFR TKIs“Individualized Therapy”OR“Precision Therapy”“Individualized Therapy”OR“Precision Therapy”Typical PFS/OS in EGFR mutant NSCLC treated with EGFR TKIsSLCG=Spanish Lung Cancer GroupRR=response rate;MUT+=mutation positiveCR=complete res
12、ponse;PR=partial responseSD=stable disease;PD=progressive diseaseDCR=CR+PR+SD;TTP=time to progressionRosell,et al.NEJM 2009ClinicalHistory+ClinicalHistory+ClinicalHistory+=Lung Cancer+=Adenocarcinomaof lung+Cancer diagnosis model shift首个评估生物标志物配对治疗疗效的前瞻性临床研究肿瘤发生的本质是体细胞遗传物质的改变DDR2基因第768位点的突变导致丝氨酸被替换为
13、精氨酸（S768R）统计学检测+体内、体外实验证实Dabrafenib治疗BRAF V600E突变NSCLCProblems and Challenge Emerge of new driver mutationsPatients with same diagnosis,but different Molecular Profiles统计学检测+体内、体外实验证实当靶向治疗后出现耐药时，临床上面临众多治疗困惑，也是当今肺癌个体化治疗的研究热点之一MET扩增活化肺癌、头颈部鳞癌、胃癌、结直肠癌等RET融合基因肺癌、甲状腺癌、少数乳腺癌、肉瘤等KRAS突变胰腺癌、结直肠癌、肺癌、头颈鳞癌、黑色素瘤
14、等Jouranl of Thoracic Oncol.Jouranl of Thoracic Oncol.脑转移在鳞癌中不常见，但在癌症相关的驱动突变多集中于有限的一些涉及重要生物功能的信号通路，近年来不少学者主张采用信息网络、数据整合分析的方法来探索驱动突变并已获得初步成功规模最大的生物标志物研究以驱动基因分型进行个体化靶向治疗仍然是研究热点关注，几个常见驱动基因的研究已经比较深入，开始探索罕见的驱动基因，哪些人能够获益？怎么来找到这种病人？可能这是我们在未来几年中需要回答的问题NSCLC中 BRAF突变率约1%-3%，大多与KRAS、EGFR突变不共存；=Lung CancerBCR-AB
15、L基因异位与慢性粒细胞性白血病：Problems and Challenge同一突变在不同病种中的差异Current clinical trials on driver mutations in SCCCancer diagnosis model shiftCancer treatment model shiftDriver mutations in NSCLCModified from Kris M,et al.IASLC 2012 Targeted Therapies Conference.KRASEGFR未知60%KRAS未知75%200419992005-2013未知25%KRASEG
16、FRRETROS1MEKHER2METBRAFPIK3CAALKNRASNTRK1Driver mutation-EML4-ALKl棘皮动物微管相关蛋白4-间变性淋巴瘤酶（EML4-ALK）融合基因由第2号染色体短臂插入引起，由ALK基因的3端与EML4基因的5端倒位融合形成l2007年，Nature上首次报道在肺癌中发现一种新的驱动基因EML4-ALK；肺癌患者中EML4-ALK的阳性率约为3%-8%。不吸烟或轻度吸烟的腺癌患者中比例更高lEML4-ALK统和基因通常与EGFR、KRAS突变不共存，其存在常常预示着EGFR TKIs耐药l迄今为止，在肺腺癌中至少已发现11种EML4-ALK融
17、合基因变异体l克唑替尼（Crizotinib）是一口服的ALK/MET抑制剂，在针对具有ALK重排肿瘤患者的I期临床实验中客观有效率（ORR）达60.8%，中位PFS 9.7个月。随后的II期临床实验（PROFILE）证实了前期临床实验的良好疗效，在III期临床试验结果尚未公布时，美国FDA就于2011年批准了克唑替尼的临床应用。l针对EML4-ALK的最佳检测方法？IHC,FISH,RT-PCRDriver mutation-EML4-ALKDriver mutation-KRASlNSCLC中最常见的驱动突变之一（5%-30%），多见于吸烟的腺癌NSCLC。97%的KRAS突变发生在cod
18、on12、13的exon2。突变导致RAS信号通路持续处于激活状态l在25%-35%的EGFR TKIs无效患者中存在KRAS突变；是EGFR TKIs疗效的负性预测分子l目前该突变仍然是undruggable，未来？Driver mutation-KRASSelumetinib plus docetaxel for KRAS-mutant advancednon-small-cell lung cancer:a randomised,multicentre,placebo-controlled,phase 2 studyPasi A Jne,Alice T Shaw,Jos Rodrigue
19、s Pereira,Gale Jeannin,Johan Vansteenkiste,Carlos Barrios,Fabio Andre Franke,Lynda Grinsted,Victoria Zazulina,Paul Smith,Ian Smith,Lucio CrinDriver mutation-KRAS Findings 44 patients to receive selumetinib and docetaxel(selumetinib group)and 43 to receive placebo and docetaxel(placebo group）Median o
20、verall survival was 94 months in the selumetinib group and 52 months in the placebo group。MEK1/2抑制剂抑制剂Trametinib治疗治疗KRAS突变晚期突变晚期NSCLCMEK1/2抑制剂抑制剂Trametinib治疗治疗KRAS突变晚期突变晚期NSCLCDriver mutation-HER2lHER2(ERBB2/EGF2)是一跨膜的酪氨酸激酶受体家族成员lHER2扩增 发生频率10%-35%(在NSCLC中)腺癌比鳞癌多见 常表现为对EGFR TKIs敏感 lHER2突变（1%-2%），在非吸
21、烟、亚裔、腺癌、女性患者中突变比率更高。l具有HER2突变的肿瘤细胞对同时靶向EGFR和/或HER2信号通路的酪氨酸激酶抑制剂敏感Selumetinib plus docetaxel for KRAS-mutant advanced某些在肿瘤发展晚期阶段如转移，发挥生物学功能的驱动突变不易被发现，要求临床扩大样本进行研究癌症相关的驱动突变多集中于有限的一些涉及重要生物功能的信号通路，近年来不少学者主张采用信息网络、数据整合分析的方法来探索驱动突变并已获得初步成功Dabrafenib治疗BRAF V600E突变NSCLC从血浆DNA检测EGFR活化突变作为FAST-ACT2研究中有利的生存预测标
22、志物Wu YL,et al.Problems and ChallengePlanchard D,et al.2007年，Nature上首次报道在肺癌中发现一种新的驱动基因EML4-ALK；B 基于对已知driver/passenger mutations参数的机器设置用以发现新的突变Driver mutation-KRAS次要观察终点：PFS，缓解持续时间，OS，安全性，耐受性，人体药代动力学首个评估生物标志物配对治疗疗效的前瞻性临床研究仍有30%左右存在EGFR敏感突变的NSCLC患者TKIs无效Driver mutations in other tumors 不同瘤种的共同“分子分型”PI
23、3K(Phosphatidylinositol-3 kinases,磷脂酰肌醇(-3)激酶)将PIP2转化为PIP3，后者激活下游的AKT/mTOR通路，调节细胞生长、存活和迁徙(EGFR,KRAS,ALK,ROS1)克唑替尼（Crizotinib）是一口服的ALK/MET抑制剂，在针对具有ALK重排肿瘤患者的I期临床实验中客观有效率（ORR）达60.仍有30%左右存在EGFR敏感突变的NSCLC患者TKIs无效从血浆DNA检测EGFR活化突变作为FAST-ACT2研究中有利的生存预测标志物同一个体，同一肿瘤内部的异质性单臂，开放性，2期临床研究lBIBW 2992，小分子酪氨酸激酶抑制剂，同
24、时抑制EGFR和HER2下游信号通路。I-II期临床试验发现该药在具有ERBB2突变的肺腺癌患者中具有显著的抗肿瘤活性l在化疗抵抗的具有ERBB2 Gly776Leu位点突变的肺癌患者中，曲妥珠单抗（抗ERBB2抗体）联合紫杉醇的方案有效。Driver mutation-HER2Driver mutation-BRAFlBRAF基因编码的蛋白在KRAS信号通路的下游发挥作用突变导致激酶活性增加并激活MAPK2和MAPK3lNSCLC中 BRAF突变率约1%-3%，大多与KRAS、EGFR突变不共存；突变多见于正在吸烟或既往吸烟者l目前有多种B-RAF的抑制剂正在肺癌患者中进行相关临床试验。Da
25、brafenib治疗治疗BRAF V600E突变突变NSCLCl主要观察终点：研究者评估的ORRl次要观察终点：PFS，缓解持续时间，OS，安全性，耐受性，人体药代动力学 IV期BRAF V600E-突变阳性的NSCLC(N=17)既往至少接受过一线化疗且失败第一阶段N=20Planchard D,et al.2013 ASCO Abstract 8009.Dabrafenib，150mg op BID第二阶段N=20单臂，开放性，2期临床研究BRF113928中期结果：中期结果：最初前最初前20例患者最佳确认疗效病灶直径总和的最大减少例患者最佳确认疗效病灶直径总和的最大减少结论：Dabraf
26、enib治疗复治BRAF V600E突变阳性NSCLC有早期抗肿瘤活性，ORR达52%且最长缓解持续49周，耐受性良好。满足前20例患者中至少出现3例缓解，已扩大样本量进入第2阶段，并纳入一线患者 这是NSCLC治疗中首个证明BRAF可作为治疗靶点的研究lMET基因位于染色体7q21，编码一跨膜酪氨酸激酶，激活信号可通过RAS、PI3K/AKT、STAT通路传递。突变/扩增均可导致激酶异常活化lMET突变在NSCLC中发生率较低（1%），鳞癌中更为少见lMET扩增与EGFR TKIs耐药有关，在有EGFR敏感突变的耐药NSCLC中20%与MET扩增有关l阻断MET通路（MET 抑制剂/单克隆抗
27、体）可抑制具有MET异常活化的肿瘤细胞生长。相关药物正处於临床试验中Driver mutation-METMET and EGFR-TKIs resistance NSCLC(N=44)EGFR-TKI治疗收集细针穿刺或胸腔积液样本评估EGFR和其他受体酪氨酸激酶(RTKs 如ErbB2,ErbB3,cMET,IGF1R,ALK等)，和下游AKT和MAPK通路蛋白的表达和激活研究目的：1)根据RTKs和通路蛋白的表达/激活比较ORR2)评价EGFR-TKI治疗期间RTK和通路蛋白的调节3)在接受EGFR-TKI治疗的患者中，评估EGFR基因突变的激活和RTK激活的相关性RTK=络氨酸激酶E/M
28、-指数E/M-指数(n)/E/M-指数(n)mPFS(月)P值10010/1912.2/50.0548011/1812.2/50.0266014/1511.2/1.10.00014019/109.8/1.10.0012025/46.1/0.10.018Ahn MJ,et al.2013 ASCO Abstract 11113.l无论EGFR突变状态如何，EGFR/cMET相对水平高的患者PFS显著更好l随着cMET参与的程度越高或E/M指数越低，NSCLC的临床获益越差结论：cMET在NSCLC患者对EGFR-TKI产生耐药过程中具有重要作用 E/M指数及其活化可作为选择EGFR抑制剂和cME
29、T抑制剂的预测标志物，但还需要前瞻性临床研究的验证Ahn MJ,et al.2013 ASCO Abstract 11113.MET and EGFR-TKIs resistanceI-II期临床试验发现该药在具有ERBB2突变的肺腺癌患者中具有显著的抗肿瘤活性单臂，开放性，2期临床研究2013年，韩国的学者在胃腺癌中证实了ROS1基因重排的存在，从而为具有这一分子亚型的胃癌患者采取相应的靶向药物治疗奠定了基础HER2(ERBB2/EGF2)是一跨膜的酪氨酸激酶受体家族成员2007年，Nature上首次报道在肺癌中发现一种新的驱动基因EML4-ALK；SCC中DDR2突变比例3%-4%，较Ad
30、高Johnson BE,et al.SLCG=Spanish Lung Cancer GroupRR=response rate;MUT+=mutation positiveCR=complete response;PR=partial responseSD=stable disease;PD=progressive diseaseDCR=CR+PR+SD;TTP=time to progression68例 IV期 肺鳞癌患者的FFPE肿瘤标本1007例至少一个基因检测的患者中，622例检测到至少一个驱动基因状态的改变；单臂，开放性，2期临床研究在化疗抵抗的具有ERBB2 Gly776Leu
31、位点突变的肺癌患者中，曲妥珠单抗（抗ERBB2抗体）联合紫杉醇的方案有效。733例行多重基因组检测的患者中，465例检测到至少一个基因状态改变Patients with the same Diagnosis&Clinical Features475例已行手术切除的I-III期NSCLCSelumetinib plus docetaxel for KRAS-mutant advanced2013 ASCO Abstract 8023.统计学检测+体内、体外实验证实某些在肿瘤发展晚期阶段如转移，发挥生物学功能的驱动突变不易被发现，要求临床扩大样本进行研究不吸烟或轻度吸烟的腺癌患者中比例更高收集EG
32、FR-TKI治疗前及EGFR-TKI耐药后的FFPE标本，使用NGS进行398个肿瘤相关基因的外显子测序评估EGFR和其他受体酪氨酸激酶(RTKs 如ErbB2,ErbB3,cMET,IGF1R,ALK等)，和NTRK1基因融合作为肺癌新的癌基因靶点基因融合作为肺癌新的癌基因靶点l结论l在肺腺癌中通过NGS/FISH发现了一种新的癌基因NTRK1融合融合l需要开展更多研究以明确NTRK1融合在肺癌中的发生率和特征l我们的发现提示需要在NTRK1融合阳性患者中开展前瞻性Trk抑制剂的临床研究35例泛阴性(EGFR,KRAS,ALK,ROS1)肺腺癌样本新的Break-Apart FISH检测 第
33、2代测序技术(CLIA认证实验室)对表现为新NTRK1基因融合的细胞进行转录及药理抑制分析56 例泛阴性(EGFR,KRAS,ALK,ROS1,RET)肺腺癌样本Doebele RC,et al.2013 ASCO Abstract 8023.3/91(3.3%)法国生物标志物研究法国生物标志物研究驱动突变驱动突变通过驱动基因选择靶向治疗可以延长患者通过驱动基因选择靶向治疗可以延长患者OS14家LCMC成员单位入组1102例转移性肺腺癌患者检测KRAS,EGFR,HER2,BRAF,PIK3CA,AKT1,MEK1，NRAS 突变，ALK 重排和 MET扩增1007例至少一个基因检测的患者中，
34、622例检测到至少一个驱动基因状态的改变；733例行多重基因组检测的患者中，465例检测到至少一个基因状态改变Johnson BE,et al.2013 ASCO Abstract 8019.通过驱动基因选择靶向治疗可以延长患者通过驱动基因选择靶向治疗可以延长患者OSl279例(28%)伴驱动基因突变患者的数据用于选择靶向治疗或入组靶向研究l在有后续临床随访信息的938例患者中，总生存分析如下：中位生存时间(年)伴驱动突变没有接受靶向治疗的患者(n=313)伴某种驱动突变接受靶向治疗的患者(n=264)不伴驱动突变的患者(n=361)P0.0001结论：伴有已确定驱动突变的患者中，接受靶向治疗
35、者的生存时间较未接受靶向治疗者明显延长 多重基因组检测有助于临床医生选择适当的患者进行靶向治疗和入组靶向治疗临床研究Johnson BE,et al.2013 ASCO Abstract 8019.Disparity in driver mutationsl驱动突变在不同人种中的差异l驱动突变在同一病种，不同病理类型之间的差异：NSCLC 腺癌 VS 鳞癌l同一突变在不同病种中的差异NSCLC腺癌驱动突变谱：欧美人群腺癌驱动突变谱：欧美人群迄今晚期NSCLC患者中开展的规模最大的生物标志物研究Barlesi F,et al.2013 ASCO Abstract 8000;Giaccone G,
36、et al.2013 ASCO Abstract 7513.首个评估生物标志物配对治疗疗效的前瞻性临床研究NSCLC腺癌驱动突变谱：亚洲研究腺癌驱动突变谱：亚洲研究EGFR依然是亚裔腺癌最常见的驱动基因Koh Y,et al.2013 ASCO Abstract 7572.Wu YL,et al.2011.140例日本肺腺癌370例中国肺腺癌BRAF M+2%PI3K M+4%C-MET Amp5$PTENM+6%EML4-ALK7%KRAS7%EGFR M+40%未知29%KRAS17.6%EGFR43%PIK3CA14.1%MLH14.9%STK116.3%CTNNB15.6%GNAS0.
37、7%PTPN110.7%VHL11.4%SMAD41.4%l即使同样的病理类型中，东方人群与西方国家人群(高加索人种)并不完全相同l常见的突变基因方面，EGFR突变在亚裔(包括中国)人群中的发生率明显高于白种人群(30%vs.17%),而K-RAS突变则在白种人群的发生率远高于亚裔人群Disparity in driver mutations-RaceDriver mutations in SCC：鳞癌患者的基因型较腺癌或更加复杂，其对生存的预后预测作用更加明显Disparity in driver mutations-PathologyFGFR1lFGFR1(Fibroblast growt
38、h factor receptor type 1 gene,纤维母细胞生长因子受体)l20%-40%SCC患者 中存在FGFR1的扩增l具有FGFR1扩增的肿瘤对FGFR抑制剂治疗敏感FGFR1基因拷贝数增加基因拷贝数增加475例已行手例已行手术切除的术切除的I-III期期NSCLCl多因素分析，在校正吸烟、性别和肿瘤大小后，伴FGFR1基因扩增的I/II期肺鳞癌患者的OS显著短于FGFR1未扩增的患者（HR=0.26;95%CI:0.08-0.84,P=0.02）l18%的脑转移出现FGFR1拷贝数增加Tang XM,et al,et al.2013 ASCO Abstract 7552.F
39、ISH&IHC检测检测FGFR1基因扩增基因扩增Driver mutation definitionPatients with the same Diagnosis&Clinical FeaturesBRAF突变肺癌、黑色素瘤、结直肠癌等不同组织来源的肿瘤有可能越来越多地依据共同“分子分型”，采取同一靶向治疗模式突变/扩增均可导致激酶异常活化在有后续临床随访信息的938例患者中，总生存分析如下：733例行多重基因组检测的患者中，465例检测到至少一个基因状态改变吉非替尼+水飞蓟素 840mg/day(280mg po tid)+培美曲塞统计学检测+体内、体外实验证实FGFR1(Fibrobla
40、st growth factor receptor type 1 gene,纤维母细胞生长因子受体)在人类H3255NSCLC细胞株(携带EGFR L858R，但无BRAF V600E，对厄洛替尼敏感)中，BRAF V600E的过表达会导致耐药性的产生癌症相关的驱动突变多集中于有限的一些涉及重要生物功能的信号通路，近年来不少学者主张采用信息网络、数据整合分析的方法来探索驱动突变并已获得初步成功恶性黑色素瘤 V600E（90%）Driver mutation definitionBRAF、KIT与恶性黑色素瘤Genetic instability68例 IV期 肺鳞癌患者的FFPE肿瘤标本The
41、 essence of malignant tumorDriver mutation-HER2Dabrafenib治疗BRAF V600E突变NSCLCPTEN 突变(外显子测序)通过驱动基因选择靶向治疗可以延长患者OSPI3K/PTEN/AKT/mTOR pathwaylPI3K(Phosphatidylinositol-3 kinases,磷脂酰肌醇(-3)激酶)将PIP2转化为PIP3，后者激活下游的AKT/mTOR通路，调节细胞生长、存活和迁徙lPI3K包括调节和催化亚单位，分别由不同基因编码。大多数突变发生于编码催化亚单位的PIK3CAlPIK3CA扩增（3q26位点，SCC中近43
42、%），较PIK3CA突变常见。PI3K/AKT途径的激活与EGFR敏感的NSCLC对EGFR TKIs抵抗有关lPIK3CA突变常与EGFR突变共存，在EGFR TKIs抵抗的EGFR敏感突变NSCLC中5%存在PI3KCA突变PI3Kl通过使PIP3去磷酸化，PTEN负向调节PI3K/AKT通路，从而抑制肿瘤生长lPTEN的失活可导致PI3K/PTEN/AKT/mTOR 通路活性增加，促进肿瘤生长lPTEN失活使EGFR敏感突变NSCLC患者对EGFR TKIs敏感性降低lPTEN失活可增加PI3K/AKT抑制剂和mTOR抑制剂的疗效Impact of PI3K pathway in the
43、 model of metastases and survival in stage IV SCCl68例 IV期 肺鳞癌患者的FFPE肿瘤标本lFGFR1 扩增(FISH)lPIK3CA 突变(Sequenom)lPTEN 缺失(IHC)lPTEN 突变(外显子测序)l采用Kaplan-Meier法估算生存率l采用Log-rank检验和Cox比例风险法 进行组间比较Paik PK,et al.2013 ASCO Abstract 8022.lOS单因素分析：lOS多因素分析：考虑到年龄、性别、KPS因素后，仍然显示PI3K与生存期短相关lHR=3.3，(95%CI:1.5-7,p=0.03)
44、l转移部位的驱动基因分析l脑转移在鳞癌中不常见，但在 PI3K异常肿瘤高达22%l脑转移仅出现在PI3K异常肿瘤Paik PK,et al.2013 ASCO Abstract 8022.OS 95%CIP值(vs 其他)FGFR1扩增19.510.8-NR0.059PI3K9.498.1-NR0.004其他13.79.7-NR结论：IV期PI3K异常肺鳞癌患者的生存较差 脑转移在PI3K异常的患者中更常见，且仅出现在PI3K异常的患者中 PI3K通路活化具有不同的生物学特点，以该通路为靶点的治疗方法可能是伴脑转移的肺鳞癌患者的一种有效治疗策略Impact of PI3K pathway in
45、 the model of metastases and survival in stage IV SCCDDR2lDDR2(discoidin domain th receptor 2,盘状结构域受体 2)通过与丝状胶原结合激活下游信号通路lDDR2下游信号通路包括Shp-2、Src、STAT、MAPKlDDR2基因第768位点的突变导致丝氨酸被替换为精氨酸（S768R）DDR2lSCC中DDR2突变比例3%-4%，较Ad高lDasatinib，商品化的多靶点激酶抑制剂，可阻断DDR2通路l体内、体外实验证实dasatinib对DDR2突变细胞有效l前期临床实验初步证实了在SCC中的疗效Cu
46、rrent clinical trials on driver mutations in SCClBRAF突变位点 恶性黑色素瘤 V600E（90%）NSCLC：V600E（50%）；G469A（39%）D594G（11%）Disparity in driver mutations-different mutations of BRAFDriver mutations in other tumorslBCR-ABL基因异位与慢性粒细胞性白血病基因异位与慢性粒细胞性白血病：相应靶向药物伊马替尼（格列卫）lROS1与胃癌与胃癌 2013年，韩国的学者在胃腺癌中证实了ROS1基因重排的存在，从而为具
47、有这一分子亚型的胃癌患者采取相应的靶向药物治疗奠定了基础lBRAF、KIT与恶性黑色素瘤与恶性黑色素瘤 相应靶向药物BRAF:伊匹单抗（Ipilimumab，抗CTLA4单克隆抗体）、vemurafenib（BRAF抑制剂）KIT-CML（慢性粒粒细胞性白血病）和GIST（胃肠间质瘤）的治疗靶点之一，同样也是恶性黑色素瘤的驱动突变，在3%左右的恶黑患者中有KIT突变存在，为相应靶向药物在恶性黑色素瘤患者的使用奠定了基础。2013 ASCO Abstract 8023.NSCLC腺癌驱动突变谱：欧美人群迄今晚期NSCLC患者中开展的Modified from Kris M,et al.在肺腺癌中
48、通过NGS/FISH发现了一种新的癌基因NTRK1融合B 基于对已知driver/passenger mutations参数的机器设置用以发现新的突变placebo-controlled,phase 2 studyDriver mutation-HER2EGFR mutations and EGFR TKIs迄今晚期NSCLC患者中开展的需要开展更多研究以明确NTRK1融合在肺癌中的发生率和特征8%，中位PFS 9.主要观察终点：研究者评估的ORR在化疗抵抗的具有ERBB2 Gly776Leu位点突变的肺癌患者中，曲妥珠单抗（抗ERBB2抗体）联合紫杉醇的方案有效。Impact of PI3K
49、 pathway in the model of metastases and survival in stage IV SCC耐药后驱动基因图谱发生了变化，且这种变化在靶向治疗的同时不断演变。突变可导致EGFR通路不依赖配体的持续激活，同时对EGFR TKIs治疗敏感97%的KRAS突变发生在codon12、13的exon2。不影响蛋白质功能和活性，因而被认为是passenger mutations）driver mutations可影响癌症的表型；统计学检测+体内、体外实验证实PI3K(Phosphatidylinositol-3 kinases,磷脂酰肌醇(-3)激酶)将PIP2转化为P
50、IP3，后者激活下游的AKT/mTOR通路，调节细胞生长、存活和迁徙Driver mutations in other tumors 不同瘤种的共同不同瘤种的共同“分子分型分子分型”lALK变异肿瘤，日本学者最早称之为ALK肿瘤（ALKoma）l已经在多种肿瘤中检测到ALK变异活化，例如炎症肌母细胞瘤、三阴性乳腺癌、胃肠道肿瘤、少数神经母细胞瘤、间编大细胞淋巴瘤、前列腺癌等lCrizotinib是否有效？针对这些ALKoma的ALK靶向治疗研究将会建立基于分子分型的多瘤种统一个体化治疗模式lROS1融合在肺癌中的变异频率约为1%，并对crizotinib也有很好的反应。crizotinib对R
