1、（Analysis of Chinese Preparation）中药学衔接班第一章第一章 绪论绪论熟悉中药制剂中各类成分的分熟悉中药制剂中各类成分的分析方法、原理和特点。析方法、原理和特点。熟悉中药制剂中各类成分的理熟悉中药制剂中各类成分的理化性质化性质掌握常见生物碱类、黄酮类、掌握常见生物碱类、黄酮类、三萜皂苷类、醌类化学成分的三萜皂苷类、醌类化学成分的分析分析学习目的：生物碱是生物界除生物体必须的含氮化合生物碱是生物界除生物体必须的含氮化合物（如氨基酸、蛋白质和物（如氨基酸、蛋白质和B B族维生素等）之外族维生素等）之外的所有含氮有机化合物，因其结构中氮原子的所有含氮有机化合物，因其结构
2、中氮原子上的未共享电子对而大多具有碱性。上的未共享电子对而大多具有碱性。生物碱绝大多数具有显著的生物活性生物碱绝大多数具有显著的生物活性,因此因此中药制剂中有含有生物碱类成分的中药时，中药制剂中有含有生物碱类成分的中药时，常选择该中药含有的生物碱成分作为定性定常选择该中药含有的生物碱成分作为定性定量的依据。量的依据。结构特征结构特征 生物碱大多由生物碱大多由C C、H H、N N、O O元素组成，极元素组成，极少数分子中尚含有其他元素；大多结构复少数分子中尚含有其他元素；大多结构复杂，结构类型较多。杂，结构类型较多。结构中的氮原子有多种形式：脂氮、芳结构中的氮原子有多种形式：脂氮、芳氮；季胺、
3、叔胺、仲胺及伯胺；游离状态氮；季胺、叔胺、仲胺及伯胺；游离状态和与酸结合状态；还有以氮氧配位键形式和与酸结合状态；还有以氮氧配位键形式存在的。存在的。此外，结构中除烷烃、羟基取代外还有此外，结构中除烷烃、羟基取代外还有羧基、酚羟基等酸性官能团及酯键的取代。羧基、酚羟基等酸性官能团及酯键的取代。溶解性溶解性 大多数生物碱成分极性较小，游离状态大多数生物碱成分极性较小，游离状态下难溶于水下难溶于水,易溶氯仿、乙醚、乙醇、丙酮易溶氯仿、乙醚、乙醇、丙酮及苯等有机溶剂，及苯等有机溶剂，与酸结合生成生物碱盐后水溶性增加，与酸结合生成生物碱盐后水溶性增加，但与生物碱结合的酸不同，生成的盐水溶但与生物碱结合
4、的酸不同，生成的盐水溶性也有差异，一般含氧无机酸及小分子有性也有差异，一般含氧无机酸及小分子有机酸的生物碱盐水溶性较大。机酸的生物碱盐水溶性较大。溶解性溶解性 季铵碱和某些含氮季铵碱和某些含氮-氧化物（氧化物（氮氧配位键氮氧配位键）可溶于水、甲醇、乙醇，难溶于亲脂性有可溶于水、甲醇、乙醇，难溶于亲脂性有机溶剂。机溶剂。液体生物碱及一些小分子固体生物碱则既液体生物碱及一些小分子固体生物碱则既溶于水也可溶于有机溶剂。（烟碱、槟榔溶于水也可溶于有机溶剂。（烟碱、槟榔碱）碱）含有酸性官能团或酯键的生物碱还可溶于含有酸性官能团或酯键的生物碱还可溶于一些碱液或热苛性碱液。一些碱液或热苛性碱液。OMeOMe
5、NMeOMeONNOOOMeOMeOH12345678910111213+-原小檗碱原小檗碱 小檗碱小檗碱 延胡索乙素延胡索乙素 NNONNOO苦参碱苦参碱 氧化苦参碱氧化苦参碱NHNCOOCH3CH3+_ 水苏碱水苏碱定性鉴别定性鉴别 生物碱沉淀反应生物碱沉淀反应 生物碱在酸性水或稀醇中与某些试剂生物碱在酸性水或稀醇中与某些试剂生成难溶于水的复盐或络合物的反应。生成难溶于水的复盐或络合物的反应。碘化铋钾：生成橘红色至黄色无定形沉淀碘化铋钾：生成橘红色至黄色无定形沉淀 碘化汞钾：生成类白色沉淀。碘化汞钾：生成类白色沉淀。硅钨酸：生成类白色或淡黄色沉淀。硅钨酸：生成类白色或淡黄色沉淀。雷氏铵盐试
6、剂：季铵型生物碱反应生成红雷氏铵盐试剂：季铵型生物碱反应生成红色沉淀或结晶。色沉淀或结晶。注意事项：注意事项：1 1 反应一定要在酸性条件下，生物碱成盐溶于水方可反应。反应一定要在酸性条件下，生物碱成盐溶于水方可反应。2 2 对生物碱的有无定性时，应用三种以上试剂分别进行反对生物碱的有无定性时，应用三种以上试剂分别进行反应，均阳性或阴性方有可信性。应，均阳性或阴性方有可信性。3 3 仲胺一般不与生物碱沉淀试剂反应。如麻黄碱。仲胺一般不与生物碱沉淀试剂反应。如麻黄碱。4 4 水溶液中如有蛋白质、鞣质亦可与此类试剂产生阳性反水溶液中如有蛋白质、鞣质亦可与此类试剂产生阳性反应，应在被检液中除掉这些成
7、分。除掉方法工艺如下：应，应在被检液中除掉这些成分。除掉方法工艺如下：定性鉴别定性鉴别 薄层色谱鉴别薄层色谱鉴别固定相：硅胶、氧化铝；固定相：硅胶、氧化铝；流动相：多以氯仿、苯等低极性溶剂，加流动相：多以氯仿、苯等低极性溶剂，加入其他溶剂调整展开剂的极性；入其他溶剂调整展开剂的极性；注意事项：注意事项：由于硅胶显弱酸性，强碱性的生物碱由于硅胶显弱酸性，强碱性的生物碱在硅胶色谱板上能形成盐，使在硅胶色谱板上能形成盐，使RfRf值很小或值很小或拖尾、形成复斑等。拖尾、形成复斑等。定性鉴别定性鉴别 薄层色谱鉴别薄层色谱鉴别 显色剂：常用改良碘化铋钾试剂，有时显色剂：常用改良碘化铋钾试剂，有时喷碘化铋
8、钾试剂之后再喷硝酸钠试剂，可喷碘化铋钾试剂之后再喷硝酸钠试剂，可使样品斑点更加清晰。如有荧光，不用显使样品斑点更加清晰。如有荧光，不用显色。亦可用碘蒸汽、硫酸铈、碘铂酸等其色。亦可用碘蒸汽、硫酸铈、碘铂酸等其他的试剂显色。他的试剂显色。定性鉴别定性鉴别 纸色谱法纸色谱法 可用于生物碱盐或游离碱的鉴别可用于生物碱盐或游离碱的鉴别 4 4、HPLCHPLC：保留时间定性保留时间定性 5 5、GCGC：可用于小分子生物碱的鉴别可用于小分子生物碱的鉴别总生物碱的含量测定总生物碱的含量测定 化学分析法化学分析法 化学分析法包括重量分析法和容量分化学分析法包括重量分析法和容量分析法。目前主要使用酸碱滴定法
9、。析法。目前主要使用酸碱滴定法。强碱滴定生物碱盐时强碱滴定生物碱盐时,在在70%-90%70%-90%的乙的乙醇介质中终点比在水中明显醇介质中终点比在水中明显,因此常将生因此常将生物碱盐溶于物碱盐溶于90%90%乙醇乙醇,再用标准碱乙醇液滴再用标准碱乙醇液滴定定.酸碱滴定法指示反应终点可用指示剂酸碱滴定法指示反应终点可用指示剂和各种电位法。和各种电位法。总生物碱的含量测定总生物碱的含量测定 分光光度法分光光度法直接测定直接测定 不经过化学反应不经过化学反应,利用生物碱物质自身利用生物碱物质自身的光吸收直接进行比色测定的方法的光吸收直接进行比色测定的方法;一般用于药味较少、干扰不大的中药一般用于
10、药味较少、干扰不大的中药制剂中总生物碱的含量测定制剂中总生物碱的含量测定;总生物碱的含量测定总生物碱的含量测定 分光光度法分光光度法离子对萃取比色法离子对萃取比色法（1 1）酸性染料比色法（直接测定）酸性染料比色法（直接测定）原理：原理：BH BH+In+In-BH BH+InIn-BH BH+InIn-pHpH值的选择：值的选择：一元碱一元碱5.2-6.4 5.2-6.4 二元碱二元碱3.0-5.83.0-5.8 有机溶剂的选择：一般用氯仿、二氯甲烷有机溶剂的选择：一般用氯仿、二氯甲烷 水分的干扰及消除水分的干扰及消除：脱水剂：脱水剂总生物碱的含量测定总生物碱的含量测定 分光光度法分光光度法
11、离子对萃取比色法离子对萃取比色法（2 2）雷氏盐比色法（直接或间接测定）雷氏盐比色法（直接或间接测定）BHBH+Cr(NHCr(NH3 3)2 2(SCN)(SCN)4 4-BH BH Cr(NHCr(NH3 3)2 2(SCN)(SCN)4 4 复盐沉淀复盐沉淀溶于丙酮（或甲醇）溶于丙酮（或甲醇）直接比色测定直接比色测定 样品定量过量的雷氏盐样品定量过量的雷氏盐过滤过滤滤液滤液比色测定比色测定 滤液在滤液在520-526nm520-526nm处测定，溶于甲醇时用处测定，溶于甲醇时用427nm427nm。（3 3）异羟肟酸铁比色法。）异羟肟酸铁比色法。单体单体生物碱的含量测定生物碱的含量测定
12、HPLCHPLC 多用反相色谱多用反相色谱 ODS ODS柱柱 硅醇基对生物碱影响硅醇基对生物碱影响 流动相改进：硅醇基抑制剂（二乙胺、流动相改进：硅醇基抑制剂（二乙胺、三乙胺等）；离子对试剂（十二烷基磺酸三乙胺等）；离子对试剂（十二烷基磺酸钠）；季铵盐试剂等。钠）；季铵盐试剂等。黄酮类化合物（黄酮类化合物（flavonoidsflavonoids）是广泛）是广泛存在于自然界的一大类化合物。多具有颜存在于自然界的一大类化合物。多具有颜色，在植物体内大部分与糖结合成苷，一色，在植物体内大部分与糖结合成苷，一部分以游离形式存在。部分以游离形式存在。黄酮类化合物最集中的是被子植物，黄酮类化合物最集中
13、的是被子植物，类型最全，结构最复杂，含量也高。由这类型最全，结构最复杂，含量也高。由这些中药参与配伍的中药制剂也较多见。些中药参与配伍的中药制剂也较多见。结构特征结构特征 黄酮类化合物是指基本母核为黄酮类化合物是指基本母核为2-2-苯基苯基色原酮（色原酮（2-phenylchromone2-phenylchromone）类化合物，）类化合物，现在则是泛指两苯环通过中央三碳链相互现在则是泛指两苯环通过中央三碳链相互联结而成的一系列化合物。联结而成的一系列化合物。12345678OOABC234561结构特征结构特征 多数黄酮结构中存在有桂皮酰基及苯多数黄酮结构中存在有桂皮酰基及苯甲酰基组成的交叉
14、共轭体系，故在甲酰基组成的交叉共轭体系，故在200-200-400nm400nm波长区域内有强烈的吸收带，此是光波长区域内有强烈的吸收带，此是光谱法及色谱谱法及色谱光谱法分析的基础。光谱法分析的基础。大多黄酮及其苷类含有游离酚羟基，大多黄酮及其苷类含有游离酚羟基，可与聚酰胺形成氢键，可用聚酰胺色谱法可与聚酰胺形成氢键，可用聚酰胺色谱法进行分析。进行分析。溶解性溶解性 黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态（苷或苷元，单糖苷、双糖苷或三糖苷）（苷或苷元，单糖苷、双糖苷或三糖苷）不同而有很大差异。不同而有很大差异。游离苷元难溶或不溶于水，易溶于甲醇、游离苷元难溶或
15、不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂及稀碱乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂及稀碱液中。液中。黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等强黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等。极性溶剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等。酸碱性酸碱性酸性：酸性：黄酮类化合物因分子中多有酚羟基，黄酮类化合物因分子中多有酚羟基，故显酸性，可溶于碱性水溶液、吡啶、甲故显酸性，可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。酰胺及二甲基甲酰胺中。碱性碱性:OOOOHClClHOH2+-所生成的盐极不稳定，加水后即可分解。定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应 黄酮类化合物分子中多有下列结构，故
16、黄酮类化合物分子中多有下列结构，故常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐等试剂反常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐等试剂反应，生成有色络合物。应，生成有色络合物。OOOHOOOHOHOH定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应盐酸盐酸镁粉反应（镁粉反应（HCl-MgHCl-Mg）样品/EtOHMg粉HCl+浓橙红紫紫红红色色查耳酮橙酮儿茶素大多数异黄酮HCl-Mg不不 呈呈 色色定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应四氢硼钠反应（四氢硼钠反应（NaBHNaBH4 4）二氢黄酮类NaBH4+红红紫紫色色其它黄酮类不呈色定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应金属盐金属盐（1）铝盐）铝盐 可用于定性及定量分析样品+1%AlCl3
17、或硝酸铝络络合合物物（黄色）max 415 nm（有荧光）样品+1 1%醋醋酸酸铅铅或碱式醋酸铅/H2O黄黄 红红色色 沉沉淀淀（2 2）铅盐）铅盐（3 3）镁盐）镁盐样样品品+醋醋酸酸镁镁/M Me eO OH H呈呈色色可可滴滴在在滤滤纸纸上上（3 3）锆盐）锆盐（ZrOCl2）OOOHOOOHOOOZrClOOOZrClOOH2OOH22%ZrOCl2黄绿色络合物2 2%枸枸橼橼酸酸不不变变褪褪色色总黄酮含量测定总黄酮含量测定黄酮类化合物具有特定的紫外吸收，中药黄酮类化合物具有特定的紫外吸收，中药制剂可经过提取纯化后，以芦丁等为对照制剂可经过提取纯化后，以芦丁等为对照品采用紫外分光光度法
18、计算其含量。品采用紫外分光光度法计算其含量。黄酮类化合物与金属盐试剂生成配合物，黄酮类化合物与金属盐试剂生成配合物，常用铝盐，常用铝盐，FeClFeCl3 3或或Al(NOAl(NO3 3)3 3。单体黄酮的测定单体黄酮的测定 TLC HPLC TLC HPLC 由由3030个碳原子组成的萜类化合物，分个碳原子组成的萜类化合物，分子中有子中有6 6个异戊二烯单位。个异戊二烯单位。三萜类在自然界分布广泛，有的游离三萜类在自然界分布广泛，有的游离存在于植物体，称为三萜皂苷元存在于植物体，称为三萜皂苷元 ；有的；有的以与糖结合成苷的形式存在，称为三萜皂以与糖结合成苷的形式存在，称为三萜皂苷苷 。游离
19、的三萜类通常不溶于水，与糖。游离的三萜类通常不溶于水，与糖结合成三萜皂苷后大多均可溶于水。结合成三萜皂苷后大多均可溶于水。因三萜皂苷多溶于水，振摇后可生成因三萜皂苷多溶于水，振摇后可生成胶体溶液，并有持久性似肥皂溶液的泡沫，胶体溶液，并有持久性似肥皂溶液的泡沫，故有此名。三萜皂苷多具有羧基，故又称故有此名。三萜皂苷多具有羧基，故又称其为酸性皂苷。其为酸性皂苷。主要分布于菊科、石竹科、五加科、主要分布于菊科、石竹科、五加科、豆科、远志科、桔梗科及玄参科。含有三豆科、远志科、桔梗科及玄参科。含有三萜类成分的主要中药如人参、甘草、柴胡、萜类成分的主要中药如人参、甘草、柴胡、黄芪、桔梗、川楝皮、泽泻、
20、灵芝等。黄芪、桔梗、川楝皮、泽泻、灵芝等。溶解性溶解性 可溶于水，易溶于热水、含水稀醇、热甲可溶于水，易溶于热水、含水稀醇、热甲醇和热乙醇中，几不溶于或难溶于乙醚、醇和热乙醇中，几不溶于或难溶于乙醚、苯等极性小的有机溶剂；苯等极性小的有机溶剂；在含水丁醇或戊醇中溶解度较好，且又能在含水丁醇或戊醇中溶解度较好，且又能与水分成二相，可利用此性质从水溶液中与水分成二相，可利用此性质从水溶液中用正丁醇或戊醇提取皂苷，借以与亲水性用正丁醇或戊醇提取皂苷，借以与亲水性的糖、蛋白质等分离。的糖、蛋白质等分离。三萜皂苷元能溶于石油醚、苯、乙醚、氯三萜皂苷元能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等有机溶剂，而不溶于水。仿
21、等有机溶剂，而不溶于水。定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应醋酐醋酐-浓硫酸反应；浓硫酸反应；样品溶于冰醋酸，加浓硫酸样品溶于冰醋酸，加浓硫酸-醋酐醋酐(1:20)(1:20)，产生黄，产生黄红红 紫紫 蓝等颜色变蓝等颜色变化，最后褪色。化，最后褪色。甾体皂苷也有此反应，但颜色变化快，甾体皂苷也有此反应，但颜色变化快，在颜色变化的最后呈现污绿色；而三萜皂在颜色变化的最后呈现污绿色；而三萜皂苷颜色变化稍慢，且不出现污绿色。苷颜色变化稍慢，且不出现污绿色。定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应五氯化锑反应；五氯化锑反应；将样品醇溶液点于滤纸上，喷以将样品醇溶液点于滤纸上，喷以20%20%三三氯化锑（或五
22、氯化锑）氯仿溶液（不应含氯化锑（或五氯化锑）氯仿溶液（不应含乙醇和水）干燥后，乙醇和水）干燥后，60-70 60-70 加热，显黄加热，显黄色、灰蓝色、灰紫色斑点，在紫外灯下显色、灰蓝色、灰紫色斑点，在紫外灯下显蓝紫色荧光（甾体皂苷则显黄色荧光）。蓝紫色荧光（甾体皂苷则显黄色荧光）。三氯醋酸反应；三氯醋酸反应；样品溶液点于滤纸上，喷样品溶液点于滤纸上，喷25%25%三氯醋酸乙三氯醋酸乙醇溶液，加热至醇溶液，加热至100100，显红色，显红色紫色斑点。紫色斑点。定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应冰醋酸冰醋酸-乙酰氯反应；乙酰氯反应；样品溶于冰醋酸，加乙酰氯数滴及氯化样品溶于冰醋酸，加乙酰氯数滴及
23、氯化锌锌 结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。紫红色。氯仿氯仿-浓硫酸反应。浓硫酸反应。将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在氯将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在氯仿层呈现红色或兰色，硫酸层有绿色荧光仿层呈现红色或兰色，硫酸层有绿色荧光出现。出现。定性鉴别定性鉴别 TLCTLC 三萜皂苷类成分进行薄层层析时通常采三萜皂苷类成分进行薄层层析时通常采用硅胶为吸附剂，也有采用氧化铝、硅藻用硅胶为吸附剂，也有采用氧化铝、硅藻土等为吸附剂。土等为吸附剂。薄层层析后，可选用三氯醋酸、氯磺酸薄层层析后，可选用三氯醋酸、氯磺酸-醋酸、醋酸、50%50%及及10%10%硫酸乙醇液、三
24、氯化锑、硫酸乙醇液、三氯化锑、磷钼酸、浓硫酸磷钼酸、浓硫酸-醋酸酐、碘蒸气等显色剂醋酸酐、碘蒸气等显色剂进行显色，其中以不同浓度的硫酸乙醇液进行显色，其中以不同浓度的硫酸乙醇液为最常用。为最常用。总皂苷含量测定总皂苷含量测定测定方法测定方法重量法重量法 该方法主要用于含皂苷的原料药质量该方法主要用于含皂苷的原料药质量控制。控制。在中药制剂中，如处方中药味含皂苷在中药制剂中，如处方中药味含皂苷类成分较多时，常用正丁醇作溶剂，测定类成分较多时，常用正丁醇作溶剂，测定正丁醇浸出物。正丁醇浸出物。总皂苷含量测定总皂苷含量测定测定方法测定方法比色法比色法 常用三萜皂苷显色剂有香草醛常用三萜皂苷显色剂有香
25、草醛-硫酸、硫酸、香草醛香草醛-高氯酸、醋酐高氯酸、醋酐-硫酸、高氯酸、浓硫酸、高氯酸、浓硫酸以及亚甲蓝等。硫酸以及亚甲蓝等。用比色法测定中药制剂中总皂苷或总苷用比色法测定中药制剂中总皂苷或总苷元的含量时，可选用单体皂苷或皂苷元作元的含量时，可选用单体皂苷或皂苷元作对照品，但要注意测定单体皂苷或皂苷元对照品，但要注意测定单体皂苷或皂苷元与总皂苷的换算系数。与总皂苷的换算系数。中药中醌类化合物主要有苯醌、萘醌、中药中醌类化合物主要有苯醌、萘醌、菲醌和蒽醌四种类型。菲醌和蒽醌四种类型。其中以蒽醌类化合物最为多见，包括其中以蒽醌类化合物最为多见，包括蒽醌及其不同还原程度的产物和二聚物，蒽醌及其不同还
26、原程度的产物和二聚物，如蒽酚、氧化蒽酚、蒽酮、二蒽酮、二如蒽酚、氧化蒽酚、蒽酮、二蒽酮、二蒽醌等。蒽醌等。这些化合物在中药中可游离存在，也这些化合物在中药中可游离存在，也可与糖结合成苷，称为蒽苷。可与糖结合成苷，称为蒽苷。结构特点结构特点 醌类化合物是指分子内具有不饱和环二酮醌类化合物是指分子内具有不饱和环二酮结构（醌式结构）或容易转变成这样结构结构（醌式结构）或容易转变成这样结构的天然有机化合物。的天然有机化合物。OOOO对苯醌对苯醌邻苯醌邻苯醌OOOCH3H3COOO(CH2)12CH3HO2,6-二甲氧基对苯醌二甲氧基对苯醌密花醌密花醌OOOOOO1234567812612-(1,4)-
27、(1,2)amphi-(2,6)萘醌萘醌萘醌OHOOOHCHCH2CHCCH3CH3OHOOCH33H紫草素紫草素维生素维生素K1OO123456789108a9a10a4a1,4,5,8位为-位2,3,6,7位为-位9,10位为meso-位OOOHOHR1R2大黄酚 R1=CH2 R2=H大黄素 R1=CH3 R2=OH大黄素甲醚 R1=CH3 R2=OCH3芦荟大黄素 R1=H R2=CH2OH大黄酸 R1=H R2=COOHOOOHR1R2茜草素 R1=OH R2=H R3=H羟基茜草素 R1=OH R2=H R3=OH伪羟基茜草素 R1=OH R2=COOH R3=OHOHCH3OOO
28、OCH(CH3)CH2OHOH丹参醌丹参醌A(丹参酮丹参酮A)丹参新醌甲丹参新醌甲 蒽醌类成分包括蒽醌衍生物及其不同蒽醌类成分包括蒽醌衍生物及其不同还原程度的产物，如氧化蒽酚、蒽酚、蒽还原程度的产物，如氧化蒽酚、蒽酚、蒽酮及蒽酮的二聚物等。酮及蒽酮的二聚物等。OOOOHHO蒽醌蒽酮蒽酚互变异构体溶解性溶解性 苯醌及萘醌多以游离状态存在；而蒽醌苯醌及萘醌多以游离状态存在；而蒽醌类则往往结合成苷存在于植物体中；类则往往结合成苷存在于植物体中；游离的醌类多具有升华性；游离的醌类多具有升华性；小分子的苯醌及萘醌类具有挥发性，能小分子的苯醌及萘醌类具有挥发性，能随水蒸气蒸馏，可据此进行提取、精制随水蒸气
29、蒸馏，可据此进行提取、精制工作。工作。溶解性溶解性 游离醌类多溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿游离醌类多溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂，微溶于或不溶于水。等有机溶剂，微溶于或不溶于水。结合成苷后极性增大，易溶于甲醇、乙结合成苷后极性增大，易溶于甲醇、乙醇中，在热水中也可溶解，几乎不溶于醇中，在热水中也可溶解，几乎不溶于乙醚、苯、氯仿等非极性溶剂中。乙醚、苯、氯仿等非极性溶剂中。定性鉴别定性鉴别 酸性酸性蒽醌类化合物分子中多具有酚羟基，故具蒽醌类化合物分子中多具有酚羟基，故具有一定酸性，在碱性水溶液中易溶，但加有一定酸性，在碱性水溶液中易溶，但加酸酸化时又可重新沉淀析出，所谓碱提酸酸化时又可重新沉淀
30、析出，所谓碱提取取酸沉淀即是根据这个道理进行的。酸沉淀即是根据这个道理进行的。根据以上性质，醌类化合物的提取可采根据以上性质，醌类化合物的提取可采用碱提取用碱提取-酸沉淀法。酸沉淀法。定性鉴别定性鉴别 酸性酸性 苯醌和萘醌醌核上的羟基的酸性类似于苯醌和萘醌醌核上的羟基的酸性类似于羧酸，酸性较强。羧酸，酸性较强。萘醌和蒽醌的苯环上的羟基酸性：萘醌和蒽醌的苯环上的羟基酸性：-羟羟基基 -羟基羟基OOOHOOOHOOO.-定性鉴别定性鉴别 酸性酸性 OOHOOHOOCOOHOOOHOOOOHHOOOH定性鉴别定性鉴别 酸性酸性OOOHOHOOOHOHOOOOHHpKa 10.4pKa 10.4pKa
31、 9.5pKa 9.5pKa 8.1pKa 8.1定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应醌类的颜色反应主要取决于其氧化还原性醌类的颜色反应主要取决于其氧化还原性质以及存在的酚羟基的性质。质以及存在的酚羟基的性质。碱性碱性（保恩特来阁）（保恩特来阁）反应：羟基蒽醌类在反应：羟基蒽醌类在碱性溶液碱性溶液显红显红-紫红色紫红色。蒽酚、蒽酮、二蒽酮类化合物需氧化蒽酚、蒽酮、二蒽酮类化合物需氧化成羟基蒽醌类化合物后才能显色。成羟基蒽醌类化合物后才能显色。定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应OOOHOH-OOO-OOO-OOOHOOO-OOO-OH-红色红色红色红色定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应与金属离子的
32、反应与金属离子的反应 蒽醌类化合物结构中，如果有蒽醌类化合物结构中，如果有-酚羟酚羟基或具有邻位二酚羟基时，则可与基或具有邻位二酚羟基时，则可与Pb2+Pb2+、Mg2+Mg2+等金属离子形成络合物。与等金属离子形成络合物。与Pb2+Pb2+形成形成的络合物在一定的络合物在一定pHpH条件下能沉淀析出，故条件下能沉淀析出，故可用于该化合物的精制。可用于该化合物的精制。定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应与金属离子的反应与金属离子的反应OOOOOOMgOOOOOOOOMgHH定性鉴别定性鉴别 显色反应显色反应与对亚硝基二甲基苯胺反应与对亚硝基二甲基苯胺反应 9 9位或位或1010位未取代的羟基蒽酮
33、类化合物，位未取代的羟基蒽酮类化合物，尤其是尤其是1 1，8-8-二羟基衍生物，酮基对位的亚二羟基衍生物，酮基对位的亚甲基上的氢很活泼，可与对亚硝基二甲基甲基上的氢很活泼，可与对亚硝基二甲基苯胺反应，缩合产生各种颜色。苯胺反应，缩合产生各种颜色。定性鉴别定性鉴别 升华法升华法游离的蒽醌及其他醌类衍生物多具有升华游离的蒽醌及其他醌类衍生物多具有升华性。中药制剂中如含有这类成分量较大，性。中药制剂中如含有这类成分量较大，可采用升华法得到升华物，可见光下观察可采用升华法得到升华物，可见光下观察或加碱性试液显色定性。如大黄流浸膏的或加碱性试液显色定性。如大黄流浸膏的鉴别。鉴别。定性鉴别定性鉴别TLCT
34、LC吸附剂：多用硅胶吸附剂：多用硅胶展开剂：极性较大的混合溶剂系统展开剂：极性较大的混合溶剂系统显色方法：主要有喷碱性试剂或醋酸镁甲显色方法：主要有喷碱性试剂或醋酸镁甲醇液、氨气熏及在紫外灯下观察荧光，亦醇液、氨气熏及在紫外灯下观察荧光，亦可在可见光下直接观察色斑。可在可见光下直接观察色斑。定量分析（定量分析（HPLCHPLC）挥发性成分是指中药中一类具有芳挥发性成分是指中药中一类具有芳香气并易挥发的成分，其化学组成复杂，香气并易挥发的成分，其化学组成复杂，主要包括挥发油类成分和其他分子量较主要包括挥发油类成分和其他分子量较小、易挥发的化合物。挥发油为易流动小、易挥发的化合物。挥发油为易流动的
35、油状液体，具香味和挥发性，可随水的油状液体，具香味和挥发性，可随水蒸汽蒸馏。蒸汽蒸馏。常存在于菊科、芸香科、伞形科、常存在于菊科、芸香科、伞形科、唇形科、樟科、木兰科等植物中。具有唇形科、樟科、木兰科等植物中。具有止咳、平喘、发汗、祛痰、镇痛、抗菌、止咳、平喘、发汗、祛痰、镇痛、抗菌、抗癌等药效。抗癌等药效。化学组成化学组成 萜类：单萜、倍半萜及其含氧衍生物。萜类：单萜、倍半萜及其含氧衍生物。O OH HH HH HH HO OH HH HH HH HH HO Ol l-薄薄荷荷醇醇 l l-m me en nt th ho ol ld d-新新薄薄荷荷醇醇 d d-n ne eo om me
36、 en nt th ho ol l薄薄荷荷酮酮 m me et th ho on ne eO OH HO OH HO Ol l-龙龙脑脑 l l-b bo or rn ne eo ol ld d-龙龙脑脑 d d-b bo or rn ne eo ol l樟樟脑脑 c ca am mp ph ho or r化学组成化学组成芳香族小分子化合物，多为苯丙素酚类。芳香族小分子化合物，多为苯丙素酚类。C CH H C CH HC CH HO OC CH H2 2C CH HC CH H2 2O OH HO OC CH H3 3C CH H C CH HC CH H3 3O OC CH H3 3桂桂皮皮
37、醛醛丁丁香香酚酚茴茴香香醚醚C Ci in na am ma al ld de eh hy yd de ee eu ug ge en no ol la an ne et th ho ol le e化学组成化学组成 脂肪族小分子化合物。脂肪族小分子化合物。C CH H3 3(C CH H2 2)8 8C CH H3 3C CH H3 3(C CH H2 2)7 7C CH H2 2O OH H正正癸癸烷烷（n n-d de ec ca an ne e）正正壬壬醇醇(n n-n no on ny yl l a al lc co oh ho ol l)物理性质物理性质为无色或淡黄色透明液体。为无色或
38、淡黄色透明液体。常温下易挥发，具有浓烈的香味，涂在纸常温下易挥发，具有浓烈的香味，涂在纸上不留痕迹，可与脂肪油区别。少数有颜上不留痕迹，可与脂肪油区别。少数有颜色，薁类多显蓝色。色，薁类多显蓝色。挥发油易溶于各种有机溶剂，难溶于水。挥发油易溶于各种有机溶剂，难溶于水。挥发油比水轻，具有光学活性，并具有折挥发油比水轻，具有光学活性，并具有折光性。光性。定性鉴别定性鉴别显色反应显色反应含有酚类成分，加入三氯化铁的乙醇溶液，含有酚类成分，加入三氯化铁的乙醇溶液，可产生蓝色、蓝紫色或绿色反应；可产生蓝色、蓝紫色或绿色反应；若含有羰基化合物，加入苯肼或苯肼衍生若含有羰基化合物，加入苯肼或苯肼衍生物、羟胺
39、等试剂，可生成结晶性的衍生物；物、羟胺等试剂，可生成结晶性的衍生物；若含有醛类化合物，加入硝酸银氨试液，若含有醛类化合物，加入硝酸银氨试液，可发生银镜反应；可发生银镜反应；定性鉴别定性鉴别显色反应显色反应含有内酯类化合物，于样品的吡啶溶液中含有内酯类化合物，于样品的吡啶溶液中加入亚硝酰铁氰化钠及氢氧化钠溶液，出加入亚硝酰铁氰化钠及氢氧化钠溶液，出现红色并逐渐消失；现红色并逐渐消失；含有奥类衍生物，加入浓硫酸，可产生蓝含有奥类衍生物，加入浓硫酸，可产生蓝色或紫色反应。色或紫色反应。大多数挥发油能在浓硫酸存在下和香草醛大多数挥发油能在浓硫酸存在下和香草醛形成各种颜色的化合物。形成各种颜色的化合物。
40、定性鉴别定性鉴别TLCTLC 挥发油成分薄层色谱的条件主要是根挥发油成分薄层色谱的条件主要是根据极性大小加以分离的。油中所含各类化据极性大小加以分离的。油中所含各类化合物的极性顺序为：合物的极性顺序为：烃（萜）醚酯醛、酮醇、酚酸烃（萜）醚酯醛、酮醇、酚酸 定性鉴别定性鉴别TLCTLC 吸附剂：吸附剂：硅胶、氧化铝等，其中以硅胶常用。硅胶、氧化铝等，其中以硅胶常用。展开剂：展开剂：为石油醚或正己烷，可使不含氧的为石油醚或正己烷，可使不含氧的 烃类成分展开，而含氧化合物一般留在烃类成分展开，而含氧化合物一般留在 原点。原点。含量测定含量测定 GCGC 木脂素木脂素是一类由苯丙是一类由苯丙素氧化聚合
41、而成的天然素氧化聚合而成的天然产物。产物。通常是指其通常是指其二聚物二聚物，少，少数是三聚物和四聚物。数是三聚物和四聚物。二聚物碳架多数是由二聚物碳架多数是由-碳原子碳原子(8-8)(8-8)连接连接而成的。而成的。123456789123456789理化性质理化性质形态：形态：木脂素多数为无色结晶，新木脂素不木脂素多数为无色结晶，新木脂素不易结晶。易结晶。溶解性：溶解性：游离型偏亲脂性，易溶于有机溶剂。游离型偏亲脂性，易溶于有机溶剂。少数与糖结合成苷，水溶性增大。少数与糖结合成苷，水溶性增大。旋光性：旋光性：大部分具有旋光性，遇酸易异构化。大部分具有旋光性，遇酸易异构化。定性鉴别定性鉴别 理
42、化鉴别理化鉴别通用型显色剂：磷钼酸乙醇、硫酸乙醇通用型显色剂：磷钼酸乙醇、硫酸乙醇LabatLabat反应：反应：+硫酸硫酸+没食子酸没食子酸蓝绿蓝绿 EcgrineEcgrine反应：反应：+硫酸硫酸+变色酸变色酸蓝紫蓝紫定性鉴别定性鉴别 TLC TLC 吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶 展开剂：亲脂性溶剂（苯、氯仿，加甲展开剂：亲脂性溶剂（苯、氯仿，加甲醇等）醇等）显色：香草醛试液，浓硫酸试液，磷钼显色：香草醛试液，浓硫酸试液，磷钼酸乙醇溶液、碘熏酸乙醇溶液、碘熏含量测定含量测定 总木脂素分：变色酸比色法总木脂素分：变色酸比色法 单体成分：单体成分：TLCS HPLCTLCS HPLC提取分离方法
43、提取分离方法 有机溶剂提取法有机溶剂提取法 离子交换法离子交换法 水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法定性鉴别定性鉴别 TLC TLC含量测定含量测定 酸碱滴定酸碱滴定 HPLC HPLC TLCS TLCS 分光光度法分光光度法 SFC SFC、HPCEHPCEu环烯醚萜：一类特殊的单萜，由二个环烯醚萜：一类特殊的单萜，由二个异戊二烯构成，含有异戊二烯构成，含有1010个碳原子，其母个碳原子，其母核都为环状，具有烯键和醚键，常与糖核都为环状，具有烯键和醚键，常与糖结合成苷。结合成苷。u溶解性：易溶于水和甲醇溶解性：易溶于水和甲醇,可溶于乙可溶于乙醇、丙酮和正丁醇，难溶于氯仿、乙醚醇、丙酮和正丁醇，难溶于
44、氯仿、乙醚和苯等亲脂性有机溶剂。和苯等亲脂性有机溶剂。HOH2CHHOC6H11 O5OOHCOOCH3HHOC6H11 O5OCOORHOH2C桅子苷京尼平苷 京尼平苷酸 R=CH3R=HHHOC6H11 O5OCH3 SCOOH2COO鸡屎藤苷 OOHOH2CglcOOH梓醇OOHOH2CglcOOOHCO梓苷HHOHglcHOH2COO桃叶珊瑚苷定性鉴别定性鉴别 利用薄层色谱可对环烯醚萜苷类成分利用薄层色谱可对环烯醚萜苷类成分进行定性鉴别。进行定性鉴别。薄层板：薄层板：（1 1）硅胶）硅胶G G；（；（2 2）硅胶）硅胶GF254GF254；（3 3）聚酰胺薄膜。）聚酰胺薄膜。显色剂：显
45、色剂：（1 1）硫酸乙醇溶液；（）硫酸乙醇溶液；（2 2）茴香）茴香醛试液；（醛试液；（3 3）香草醛硫酸试液；（）香草醛硫酸试液；（4 4）对）对二甲氨基苯甲醛二甲氨基苯甲醛-硫酸溶液。硫酸溶液。含量测定含量测定u高效液相色谱法：对于有紫外吸收的环烯高效液相色谱法：对于有紫外吸收的环烯醚萜苷类成分可用该项法进行分析。醚萜苷类成分可用该项法进行分析。u薄层扫描法：可用硅胶薄层扫描法：可用硅胶GFGF254254薄层，检测荧薄层，检测荧光熄灭斑点；也可用硅胶光熄灭斑点；也可用硅胶G G薄层，用显色剂薄层，用显色剂显色后测定。显色后测定。u分光光度法：利用环烯醚萜苷与某些试剂分光光度法：利用环烯醚
46、萜苷与某些试剂的呈色反应，于分光光度计上测定吸收度进的呈色反应，于分光光度计上测定吸收度进行定量分析。行定量分析。香豆素是一类内酯衍生物，具有芳香香豆素是一类内酯衍生物，具有芳香气，分子中苯环或吡喃酮环上常有取代基气，分子中苯环或吡喃酮环上常有取代基存在，按其基本的环状结构形式，分为简存在，按其基本的环状结构形式，分为简单香豆类、呋喃香豆素类、吡喃香豆素类、单香豆类、呋喃香豆素类、吡喃香豆素类、其他香豆素类。其他香豆素类。其结构是邻羟基桂皮酸的内酯，基本其结构是邻羟基桂皮酸的内酯，基本骨架为苯骈骨架为苯骈-吡喃酮，吡喃酮，7-7-位常有羟基或醚位常有羟基或醚基。基。OHCOOHOO顺邻 羟 基
47、桂皮 酸香 豆 素12345678 在植物体内，香豆素类化合物常常以游离在植物体内，香豆素类化合物常常以游离状态或与糖结合成苷的形式存在，大多存在状态或与糖结合成苷的形式存在，大多存在于植物的花、叶、茎和果中，通常以幼嫩的于植物的花、叶、茎和果中，通常以幼嫩的叶芽中含量较高。叶芽中含量较高。溶解性溶解性 游离香豆素：易溶于甲醇、乙醇、氯仿游离香豆素：易溶于甲醇、乙醇、氯仿和乙醚，能溶于沸水，难溶于冷水。和乙醚，能溶于沸水，难溶于冷水。香豆素苷：能溶于水、甲醇、乙醇，难香豆素苷：能溶于水、甲醇、乙醇，难溶于氯仿、苯。溶于氯仿、苯。定性鉴别定性鉴别异羟肟酸铁反应异羟肟酸铁反应 内酯环在碱性条件下开
48、环，与盐酸羟内酯环在碱性条件下开环，与盐酸羟胺缩合成异羟肟酸，然后再在酸性条件下胺缩合成异羟肟酸，然后再在酸性条件下与三价铁离子配合成盐而显红色。与三价铁离子配合成盐而显红色。定性鉴别定性鉴别与酚羟基反应与酚羟基反应 具有酚羟基取代的香豆素类在水溶液中具有酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与可与FeClFeCl3 3试剂产生颜色。试剂产生颜色。若香豆素化合物的若香豆素化合物的C6C6位上（即酚羟基位上（即酚羟基的对位）没有取代基，则能与的对位）没有取代基，则能与GibbsGibbs试剂反试剂反应显蓝色。应显蓝色。香豆素类成分在碱性溶液中加热，使香豆素类成分在碱性溶液中加热，使内酯环开裂，若酚羟基
49、对位无取代基，则内酯环开裂，若酚羟基对位无取代基，则可与重氮化试剂反应生成红色偶氮染料。可与重氮化试剂反应生成红色偶氮染料。定性鉴别定性鉴别荧光法荧光法 羟基香豆素大多能产生荧光，利用此羟基香豆素大多能产生荧光，利用此性质可进行定性鉴别。可直接观察提取溶性质可进行定性鉴别。可直接观察提取溶液的荧光，也可观察薄层斑点荧光。液的荧光，也可观察薄层斑点荧光。薄层色谱法薄层色谱法 具有荧光的香豆素类成分，可用薄层具有荧光的香豆素类成分，可用薄层色谱荧光法进行鉴别色谱荧光法进行鉴别 不具荧光或荧光强度较弱的香豆素可不具荧光或荧光强度较弱的香豆素可用显色剂或喷洒碱溶液以增强荧光再进行用显色剂或喷洒碱溶液以
50、增强荧光再进行观察。观察。含量测定含量测定分光光度法分光光度法荧光光度法荧光光度法薄层色谱法薄层色谱法高效液相色谱法高效液相色谱法气相色谱法气相色谱法含芍药甙中药制剂的分析含芍药甙中药制剂的分析薄层色谱薄层色谱高效液相色谱高效液相色谱含穿心莲内酯中药制剂的分含穿心莲内酯中药制剂的分析析薄层色谱薄层色谱回滴法回滴法比色法比色法总内酯总内酯薄层扫描或高效液相色谱薄层扫描或高效液相色谱法法单体成分单体成分HOCH2OHCH2CH2CHOOOH穿心莲内酯穿心莲内酯理化理化性质性质物理性状（存在形式，还原性）物理性状（存在形式，还原性）溶解性：溶于水，低浓度的酸碱，盐溶解性：溶于水，低浓度的酸碱，盐溶液
