1、指示微生物的定义与种类指示微生物的应用实例指示微生物的研究进展定义:指示微生物或称指示菌是在 常规环境监测中,用以指示环境样品污染性质与程度,并评价环境卫生状况的具有代表性的微生物。种类:1、一般污染指示微生物 2、粪便污染指示微生物 3、其他指示微生物 细菌总数:是指环境中被检样品,在一定条件下培养后所得的1ml或1g检样中所含的细菌总数霉菌和酵母菌数:是指环境中被检样品经过处理,在一定条件下培养后,所得的1ml或1g检样中所含的霉菌和酵母菌菌落总数一般污染指示微生物一般污染指示微生物通过检测环境中的细菌总数与霉菌和酵母菌总数指标,并与公共环境卫生标准(GB9663-9673-1996)相比
2、较即可评判被检测环境是否达标。例如我国公共场所空气细菌总数标准规定35星级以下宾馆、饭店通过撞击法测得的细菌总数不得大于1000。总大肠菌群总大肠菌群在饮用水的微生物安全监测中,普遍采用正常的肠道细菌作为粪便污染指标,而不是直接测定肠道致病菌。总大肠菌群系指一群需氧及兼性厌氧的,在37生长时能使乳糖发酵,在24h内产酸产气的革氏阴性无芽胞杆菌。总大肠菌群系指每升水样中所含有的总大肠菌群数目。总大肠菌群可用多管发酵法或滤膜法检验。粪便污染指示菌粪便污染指示菌大肠杆菌菌落大肠杆菌菌落粪大肠菌群由于占总大肠杆菌粪大肠菌群由于占总大肠杆菌群的群的94%,而且在环境中其不,而且在环境中其不宜繁殖,因此,
3、粪大肠杆菌群宜繁殖,因此,粪大肠杆菌群交总大肠杆菌群作为粪便污染交总大肠杆菌群作为粪便污染指示菌意义更大。指示菌意义更大。粪便污染指示菌粪便污染指示菌粪大肠菌群是大肠菌群的一种,又名耐热大肠菌群,粪大肠菌群是生长于人和温血动物肠道中的一组肠道细菌,随粪便排出体外,约占粪便干重的1/3以上,故称为粪大肠菌群。受粪便污染的水、食品、化妆品和土壤等物质均含有大量的这类菌群。若检出粪大肠菌群即表明已被粪便污染。粪大肠菌群粪大肠菌群 是短链状的革兰氏阳性球菌。其作为粪便污染指示菌的优点是在水中不会自行繁殖,但抵抗力弱于病菌。由于人粪便中大肠杆菌群数多于粪链球菌,动物粪便中则相反,因此,在水质检测中可根据
4、两菌菌数比值不同来推测粪便污染的来源。粪大肠菌群粪链球菌的比值大雨或等于4,则认为污染主要来自人类;如果小于或等于0.7则认为污染主要来自温血动物的粪便;如比值小于4而大于2,则为混合污染但人粪便为主;如比值小于1而大于0.7,则为混合污染但以动物粪便为主 粪便污染指示菌粪便污染指示菌粪链球菌粪链球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌铜绿假单胞杆菌铜绿假单胞杆菌沙门氏菌沙门氏菌志贺氏菌志贺氏菌破伤风杆菌破伤风杆菌沙门氏菌沙门氏菌志贺氏菌志贺氏菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌破伤风杆菌破伤风杆菌I 指示水体的病原污染II指示活性污泥法运行情况指示水体的病原污染水体病原微生物污染的指示微生物及适用范围水体
5、病原微生物污染的指示微生物及适用范围作为指示病原微生物的指示微生物应具有以下特征 3 :(1)在未被污染的水中不存在,而存在于受病原体污染的水体中;(2)数量上高于待测定的病原体;(3)与病原菌对自然条件和污染处理过程的抗性相似;(4)易于通过简单、经济的方法来分离、鉴定和计数。由于水体病原微生物污染主要来自人畜的粪便,鉴定水体病原微生物污染的指示微生物可选用存在于人体和动物肠道的易于检测的微生物(表1),最早使用的指示微生物是总大肠菌群和粪大肠菌群。钟虫钟虫固着型纤毛虫固着型纤毛虫寡毛虫轮虫轮虫变形虫变形虫栉毛虫栉毛虫线虫线虫草履虫草履虫游泳型纤毛虫游泳型纤毛虫 桡足虫桡足虫 漫游虫漫游虫
6、吸管虫吸管虫 旋口虫属喇叭虫喇叭虫简便虫属鳞壳虫属鳞壳虫属游仆虫游仆虫1.双岐杆菌属双岐杆菌属双岐杆菌(B if idobacterium spp.)是严格厌氧、革兰氏阴性、不能运动、无芽孢的不规则杆状菌,是人体肠道的主要组成菌而很少存在于动物中。尽管双岐杆菌的存活率变化非常大,在环境中仅仅2周就会减少3到4个数量级,利用双岐杆菌还是能比较可靠地指示人类的粪便污染。另一方面,双歧杆菌是厌氧微生物,在环境中不易生长繁殖,所以通过它们可以检测出最新的粪便污染。2.脆弱拟杆菌噬菌体脆弱拟杆菌噬菌体脆弱拟杆菌(B.fragilis)是一种严格厌氧、革兰氏阴性的杆状菌,在人类和动物的肠道中大量存在,但菌
7、株却有明显的差别:脆弱拟杆菌的HSP40菌株在10%的人粪样品中被发现,而在其他动物中却检测不到;RYC4023 和HSP40 的表型特征几乎相同并且受噬菌体侵染的敏感程度相近,但其噬菌体比HSP40 的噬菌体有更强的检测能力。感染脆弱拟杆菌这些菌株的特定噬菌体不会在环境中复制,而且其存在与人类肠道病毒的存在高度相关,所以利用这些噬菌体可以用来指示一些地区的人粪污染。3.人类的肠道病毒人类的肠道病毒有100多种不同的肠道病毒和人类肠胃有关,通过直接检测人类肠道病毒可以避免粪便指示菌预测污染的不确定性。利用巢式聚合酶链反应(nes2ted PCR)、细胞培养和PCR扩增技术对加利福尼亚海滨和韩国
8、的饮用水水样进行检测,发现了腺病毒和传染性的肠道病毒,直接反映了水体受人类病原微生物污染的情况。.1 唐晓丹.肠球菌感染研究现状.中国感染与化疗杂志,2007,7(3):221-223.2 Gray J,Marsh D etall,b Hosp infect,1994;27:179-1863 马立艳,许淑珍,马纪平,肠球菌致病机制的研究进展,中华医院感染学杂志,2005,15(3):356-3604 李光辉,肠球菌感染研究进展,国外医学内科学分册,1999,26:4715 赖晓全,王洪波,儿童肠球菌感染及耐药性分析,中国妇幼保健,2005,20(3):3113136 侯美荣,76例肠球菌耐药菌感染的临床分析,中国社区医师,2004,6(19):72-737 郑颖,李从容,李艳,668株肠球菌的耐药性分析,实验与检验医学,2008,26(2):157-1588 欧阳范献,徐秀华,耐万古霉素肠球菌的流行现状、治疗及预防对策.中国热带医学,2002,2(1):5659