1、乳腺癌术后病理报告的解读1目录1.乳癌术后病理大体标本解读2.乳腺病理免疫组化3.Her-2的意义及检测方法2总体要求肿瘤的分化程度 力求全面、规范、报告内容集体包括：肉眼检查肿块部位、大小、形状；显微镜下组织学类型、分级、癌周围组织病变，血管、淋巴管受侵，淋巴结是否转移、切除个数、阳性个数（淋巴结转移个数/切除淋巴结个数），直径1cm应注明其大小；免疫组化检查：ER、PR、c-erB-2(Her-2)、Ki-67等。高分化中分化低分化乳腺癌术后病理报告的解读3 分化分化差，预后差，预后差差高分高分化化低分低分化化中分中分化化G1：细胞分裂：细胞分裂慢慢G3：细胞分裂：细胞分裂快快G2：细胞分
2、裂：细胞分裂居中居中肿瘤的分化程度4病理分病理分型型浸润性特殊癌浸润性非特殊癌非浸润性癌导管内癌、小叶原位癌、粉刺癌等小管癌、粘液癌、浸润性乳头状癌、Paget病等浸润性导管癌、浸润性小叶癌肿瘤的病理类型5腋淋巴结的转移数目腋淋巴结的转移部位 至少检测10个淋巴结才能准确评价腋淋巴结转移的状态：无淋巴结转移：13个淋巴结转移：49个淋巴结转移：10个淋巴结转移腋上组（Level I）:胸小肌外侧组腋中组（Level II）:胸小肌后组腋后组（Level III）:胸小肌内侧组腋淋巴结转移情况67腋窝的淋巴引流8高度恶高度恶性：性：5年生年生存率存率（0%）III级I级II级中度恶中度恶性：性：
3、5年生年生存率存率（32%）低度恶低度恶性：性：5年生年生存率存率（68%）肿瘤细胞的分级：根据核分裂像及异型性9免疫组化免疫组化临床常用指标：雌激素受体（ER）孕激素受体（PR）人表皮生长因子-2基因（C-erb-2/Her-2）核蛋白Ki-67：细胞核内与细胞增殖有关的非组蛋白性核蛋白10ER的分类及ER、PR的意义ERER（50%-80%positive）PR(主要显示了主要显示了ER的功能性途径的功能性途径)ER（与乳癌的预后有关）（与乳癌的预后有关）11绝经后绝经后来曲唑、阿拉曲唑来曲唑、阿拉曲唑三苯氧胺三苯氧胺（他莫昔（他莫昔芬）芬）绝经前绝经前依西美坦依西美坦氟维司群氟维司群托瑞
4、米芬托瑞米芬内分泌治疗原则及药物12 三、乳腺癌中三、乳腺癌中HER-2HER-2的检测的检测 及其临床意义及其临床意义13（一）HER-2概况Her-2:又名C-erbB-2,Her-2/neu 定位于17q12.1-21 Her-2属于EGFR家族成员为原癌基因,编码185KD的跨膜型酪氨酸激酶生长因子受体现有研究表明,在30%以上的人类肿瘤中存在Her-2基因的扩增/过度表达(如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、输卵管癌、胃癌和前列腺癌等）其中2530%的乳腺癌为 Her-2基因的扩增/过度表达。14国外文献报道的乳腺肿瘤HER2阳性情况 HER2 Study n Stage positive
5、,%Ross(2003)5003 -22Owens(2004)6556 -24Ross(2003)279 26Penault-Llorca(2005)699 30 15（三）、乳腺癌中（三）、乳腺癌中HER-2HER-2扩扩增增/过度表达的临床意义过度表达的临床意义161987年年Slamon等等首次报道乳腺癌原癌基因首次报道乳腺癌原癌基因HER-2的扩增，导致肿瘤易复发，与患者总生存期短密切的扩增，导致肿瘤易复发，与患者总生存期短密切相关相关 17HER2HER2阳性患者的生存期比正常者缩短一半以上阳性患者的生存期比正常者缩短一半以上转移性乳腺癌患者的中位生存期转移性乳腺癌患者的中位生存期H
6、ER2 HER2 阳性阳性8-108-10个月个月HER2 HER2 阴性阴性17-2217-22个月个月Slamon DJ et al.Science 1987;235:177Slamon DJ et al.Science 1987;235:177828218（一）无病生存期和总生存期短相关,肿瘤预后差.在多变量分析结果中，HER2是肿瘤复发和总生存期长短的独立预后因素复发率(P=0.001)总生存(P=0.02)至今为止已有国内外数百篇文献研究至今为止已有国内外数百篇文献研究HER-2 HER-2 与乳腺癌的关系，与乳腺癌的关系，国外八十多篇文献报道报道国外八十多篇文献报道报道HER-2H
7、ER-2扩增过表达与患者预后扩增过表达与患者预后差相关差相关Her-2是目前公认的一个乳腺癌重要的预后是目前公认的一个乳腺癌重要的预后/预测预测因子因子191.001.000.750.750.500.500.250.25 0 0累计生存率累计生存率0 24 48 72 96 120 0 24 48 72 96 120 144144无扩增无扩增扩增扩增基因扩增基因扩增:10:10 拷贝数拷贝数无基因扩增无基因扩增:3:3拷贝数拷贝数临界值临界值:不包括不包括死亡时间死亡时间 (月数月数)Log rank p0.001Log rank p0.001Ross JS,Fletcher JA.Stem
8、Cells 1998;16:413428HER2阳性状态的患者无病生存期缩短阳性状态的患者无病生存期缩短Seshadri R et al.J Clin Oncol 1993;11:1936421008060402000 12 24 36 48 60 72无病生存概率无病生存概率死亡时间死亡时间 (月数月数)HER2 HER2 基因基因 3 3 拷贝数拷贝数HER2HER2基因基因 3 3 拷贝数拷贝数对数秩检验对数秩检验 p=0.001p=0.0012020052005年年St.GallenSt.Gallen指南乳腺癌危险度分级指南乳腺癌危险度分级 低度危险 LN（-）且 标本中病灶大小（pT
9、）2CM 分级1级 瘤周脉管未见肿瘤侵犯 HER2基因没有过度表达或扩增 年龄35岁 2120052005年年St.GallenSt.Gallen指南乳腺癌危险度分级指南乳腺癌危险度分级 中度危险中度危险 LN（-）阴性且有下列至少一条 标本中病灶大小（pT）2CM 分级2-3级 有瘤周脉管肿瘤侵犯 HER2过度表达或扩增 年龄35岁 LN1-3个（+）且未见HER2过度表达或扩增 高度危险高度危险 LN1-3个（+）且HER2过度表达或扩增 LN4个及以上（+）22(二)HER2阳性状态可以预示肿瘤对常规治疗的反应情况 内分泌治疗 HER2阳性患者相对耐药 CMF方案 HER2阳性患者相对耐
10、药 蒽环类 对大剂量蒽环类相对敏感 紫杉类药物 相对敏感23 （三）、靶向（三）、靶向Her-2Her-2的人源化单抗的人源化单抗 赫赛汀赫赛汀2425 （四）（四）.Her-2阳性状态的检测方法阳性状态的检测方法26常用检测方法常用检测方法1.1.免疫组化（免疫组化（IHCIHC）检测检测Her-2Her-2蛋白表达蛋白表达（1 1）抗原修复：）抗原修复：95-9995-99 EDTA EDTA（1mM pH801mM pH80）或枸橼酸钠或枸橼酸钠 （0.05M pH6.00.05M pH6.0）27（2）常用IHC 检测的抗体/试剂盒HercepTest:美国美国FDA批准用于临床诊断批
11、准用于临床诊断 公司名Novacastra(newcastle,upon tyne,UK)Genentech(San Francisco,CA)Zymed(San Francisco,CA)DAKO(San Francisco,CA)DAKO(San Francisco,CA)28抗体阳性率Hercept Test(DAKO)31/86(38.1%)AO485(DAKO)25/66(37.8%)4D5(Genetech)15/86(17.4%)CB11(Biogenex Novocastra)25/86（9.1%）29 CB11 或4D5（+）Hercept Test（+）;Hercept T
12、est（+）CB11 或4D5（-）30（3 3）结果判读）结果判读注意点：计数胞膜完全着色的细胞比例及着色强度胞浆着色忽略不计评定浸润部位的着色情况正常上皮细胞不应着色31染色形态染色形态 评分评分染色染色图图例例完全没有染色或是肿瘤细胞中完全没有染色或是肿瘤细胞中 0 0少于少于10%10%肿瘤细胞有细胞膜染色肿瘤细胞有细胞膜染色大于大于10%10%的肿瘤细胞有呈现清淡地的肿瘤细胞有呈现清淡地/1+1+稍稍微地并且是不完整的细胞膜染色微地并且是不完整的细胞膜染色 这些细胞只染在部分的细胞膜这些细胞只染在部分的细胞膜大于大于10%10%的肿瘤细胞有呈现的肿瘤细胞有呈现 2+2+轻度至中度的完
13、整的细胞膜染色轻度至中度的完整的细胞膜染色大于大于10%10%的肿瘤细胞有呈现的肿瘤细胞有呈现 3+3+强度的完整的细胞膜染色强度的完整的细胞膜染色 HercepTestTM判读标准3201+3+2+免疫组织化学法免疫组织化学法0-3+评分系统评分系统Immunohistochemistry(IHC)333+CerbB2343+CerbB2352+CerbB2362+CerbB2371+CerbB238394041422.2.显色原位杂交（显色原位杂交（CISHCISH）一种用碱性磷酸酶标记的探针，在甲醛固定、一种用碱性磷酸酶标记的探针，在甲醛固定、石蜡包埋组织切片上进行杂交，再用鼠抗地高辛抗
14、石蜡包埋组织切片上进行杂交，再用鼠抗地高辛抗体和辣根过氧化物酶抗鼠抗体进行免疫结合，体和辣根过氧化物酶抗鼠抗体进行免疫结合，DABDAB显显色，普通光学显微镜观察有无基因扩增的异常信号色，普通光学显微镜观察有无基因扩增的异常信号的方法。的方法。CISHCISH技术比技术比FISHFISH简单，试剂较便宜，不需简单，试剂较便宜，不需昂贵的仪器设备，且可长期保存切片。昂贵的仪器设备，且可长期保存切片。43（1 1）所需主要设备）所需主要设备电炉、带温度计的高压锅或微波炉电炉、带温度计的高压锅或微波炉原位原位PCRPCR仪或原位杂交炉仪或原位杂交炉 3737温箱温箱亮视野显微镜亮视野显微镜44（2
15、2）检测三大关键步骤）检测三大关键步骤标本的加热预处理标本的加热预处理 用电炉，用电炉，15 15 分钟分钟98 98 100100 所有载玻片必需全部浸入缓冲液所有载玻片必需全部浸入缓冲液酶消化酶消化 室温室温 10 10 分钟分钟 或或37 337 3分钟分钟严格冲洗严格冲洗 0.5x SSC,75-80,5 0.5x SSC,75-80,5 分钟分钟45过度酶消化过度酶消化46 酶消化不够酶消化不够47恰当的酶消化恰当的酶消化 48 A diploid-triploid HER2 copy number is usually clear CISHCISH检测无检测无HER2HER2基因扩
16、增样本基因扩增样本 49CISHCISH检测低扩增样本检测低扩增样本 50Gene copy clusters:100%evidence of gene amplification CISH检测高扩增样本 51 HER2/CISHNo HER2 amplificationHER2 amplification 523.3.荧光原位杂交（荧光原位杂交（FISHFISH）是一种通过荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交，在荧光显微镜下能原位显示细胞核内杂交信号的分子细胞遗传学技术。FISH技术用于检测基因扩增的准确性比其他检测技术高，可以避免由于染色体的多体而呈现的假阳性，故被誉为“金标准
17、金标准”。但FISH技术操作较复杂，试剂(荧光标记的探针试剂盒)和仪器设备(荧光显微镜)昂贵，目前在国内只有少数实验室具有相应技术条件进行该技术的检测。53（1 1）两种探针）两种探针应用应用Her-2Her-2和和1717号染色体双荧光标记探号染色体双荧光标记探针，两种信号的比值（针，两种信号的比值（2=2=2）Her-2Her-2是否扩增是否扩增应用单一针对应用单一针对Her-2Her-2的地高辛标记探针，的地高辛标记探针，直接定量直接定量Her-2Her-2的扩增程度的扩增程度54（2）FISH主要设备：主要设备：荧光显微镜 原位杂交仪 细胞遗传分析工作站 高压消毒炉55（3 3）结果观
18、察）结果观察 75%75%以上癌细胞核中都有杂交信号以上癌细胞核中都有杂交信号 细胞核大小一致、边界完整、染色均一、细胞核大小一致、边界完整、染色均一、无重叠无重叠56FISH:PathVysionTM无扩增无扩增扩增扩增比值比值 2提示提示Her-2无扩增无扩增比值比值 2提示提示Her-2有扩增有扩增57FISH:INFORM低扩增低扩增高扩增高扩增58Ki-67的意义Ki-67(增殖细胞相关的核抗原)功能：与细胞有丝分裂密切相关，在细胞增殖中是不可缺少，Ki-67作为标记细胞增殖状态的抗原,阳性说明癌细胞增殖活跃判读标准：以14%为界限 阳性（14%）阴性（14%）596061谢谢观赏Make Presentation much more fun
