1、实验 叶绿素的提取和分离2植物体进行光合作用的场所？植物体进行光合作用的场所？水水345 一、叶绿体 形态：形态：椭圆球形椭圆球形 结构：结构：外膜、内膜、外膜、内膜、叶绿体基质、叶绿体基质、基粒基粒(由由单层膜单层膜的类囊体垛叠构成的类囊体垛叠构成)6一、叶绿体 叶绿体内的物质：叶绿体内的物质：酶（光合作用有关）酶（光合作用有关）光反应的酶光反应的酶叶绿体基粒叶绿体基粒 暗反应的酶暗反应的酶叶绿体基质叶绿体基质少量少量DNADNA和和RNARNA色素色素7二、叶绿体色素 分布：分布：叶绿体叶绿体类囊体膜类囊体膜上上 分类：分类：色素色素叶绿素叶绿素类胡萝卜素类胡萝卜素叶绿素叶绿素a a（蓝绿
2、色蓝绿色）叶绿素叶绿素b b（黄绿色黄绿色）叶黄素叶黄素（黄色黄色）胡萝卜素胡萝卜素（橙黄色橙黄色）8二、叶绿体色素 功能：功能：选择吸收光能，传递和转化光能选择吸收光能，传递和转化光能叶绿素：主要吸收红橙光和蓝紫光主要吸收红橙光和蓝紫光类胡萝卜素：主要吸收蓝紫光主要吸收蓝紫光叶绿素叶绿素a a叶绿素叶绿素b b叶黄素叶黄素胡萝卜素胡萝卜素叶绿素叶绿素a a光合作用光合作用直接用于直接用于(转化光能转化光能)吸收和传递光能吸收和传递光能9101112一、实验原理叶绿体色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的叶绿体色素。纸层析法不同的叶绿体色素随层析液在滤纸上扩散速度不同。（不
3、同的色素会在扩散过程中分离开来，形成条带）（不同的色素会在扩散过程中分离开来，形成条带）13一、实验原理p 不同的色素不同的色素会在扩散过会在扩散过程中分离开程中分离开来，形成条来，形成条带带14二、实验材料材料：材料：菠菜绿叶菠菜绿叶药品：药品：混合的混合的层析液层析液，无水乙醇无水乙醇，石英砂，碳酸钙，石英砂，碳酸钙用具：用具：干燥滤纸，干燥滤纸，带塞层析管带塞层析管，研钵，玻璃漏斗，纱布，滴，研钵，玻璃漏斗，纱布，滴管，管，载玻片，盖玻片载玻片，盖玻片，剪刀，试管，培养皿，药匙，剪刀，试管，培养皿，药匙15二、实验步骤16提取叶绿体色素取取2-32-3片菠菜叶，撕去叶脉，尽量剪碎，放入研
4、钵。片菠菜叶，撕去叶脉，尽量剪碎，放入研钵。向研钵中放入少量石英砂和碳酸钙，加入向研钵中放入少量石英砂和碳酸钙，加入一滴管一滴管无无水乙醇，边加无水乙醇边研磨，进行充分地研磨至匀浆状态。水乙醇，边加无水乙醇边研磨，进行充分地研磨至匀浆状态。在玻璃漏斗上放入单层纱布，将研磨液倒入漏斗，在玻璃漏斗上放入单层纱布，将研磨液倒入漏斗，漏斗下端放置培养皿，过滤制备得到滤液。漏斗下端放置培养皿，过滤制备得到滤液。【注注】p加石英砂是为了使研磨充分加石英砂是为了使研磨充分p加碳酸钙是为了防止叶绿体色素被破坏加碳酸钙是为了防止叶绿体色素被破坏p加入加入CaCOCaCO3 3和石英砂的量均很少，无水乙醇的量不应
5、太少和石英砂的量均很少，无水乙醇的量不应太少17分离叶绿体色素将干燥的定性滤纸制成如右图将干燥的定性滤纸制成如右图所示，用铅笔划线（已准备好）。所示，用铅笔划线（已准备好）。用盖玻片蘸取少量滤液，沿铅笔线均匀用盖玻片蘸取少量滤液，沿铅笔线均匀压出细线。待滤液干后，重复画线压出细线。待滤液干后，重复画线3-43-4次。次。【注注】p画滤液线时尽量画直、画细、画浓画滤液线时尽量画直、画细、画浓p每次画完，要等滤液干时再重复画，以防滤液扩散开使滤液每次画完，要等滤液干时再重复画，以防滤液扩散开使滤液线过宽，影响结果线过宽，影响结果18分离叶绿体色素将将4mL4mL层析液倒入层析管中，层析液倒入层析管
6、中，将画好线的滤纸条固定于右图装置中。将画好线的滤纸条固定于右图装置中。10min10min后，将滤纸条取出，后，将滤纸条取出，风干。观察色素带及其颜色，作好记录。风干。观察色素带及其颜色，作好记录。【注注】p放滤液条时，要避免放滤液条时，要避免滤液细线滤液细线浸没到层析液。不要让浸没到层析液。不要让滤纸条贴在层析管壁上。滤纸条贴在层析管壁上。p层析液中一些成分易挥发，要避免开放在空气中。层析液中一些成分易挥发，要避免开放在空气中。滤液细线滤液细线19三、注意事项v 实验中各种用液很多有毒（丙酮、苯等）且易燃，属危险实验中各种用液很多有毒（丙酮、苯等）且易燃，属危险试剂，实验时保持通风，安全操
7、作试剂，实验时保持通风，安全操作v 实验注重团队合作，组员们共同完成实验。实验注重团队合作，组员们共同完成实验。202122一、实验结果可以看出：可以看出：v色素扩散距离不同。色素扩散距离不同。v色素带宽度不同；色素带宽度不同；？23二、实验总结p 最宽（最多）：最宽（最多）：叶绿素叶绿素a ap 最窄（最少）：最窄（最少）：胡萝卜素胡萝卜素p 相邻距离最近：相邻距离最近：叶绿素叶绿素a a和和叶绿素叶绿素b bp 色素在滤纸上自上而下分布依次为：色素在滤纸上自上而下分布依次为：胡萝卜素胡萝卜素叶黄素叶黄素叶绿素叶绿素a a 叶绿素叶绿素b bp 色素含量最多的是：色素含量最多的是：叶绿素叶绿
8、素a a24二、课堂反馈v 如果没有无水乙醇和菠菜叶片，要保证分离后的色素带清晰，可以用来代替的最佳实验材料是（）A丙酮和麦苗 B丙酮和大白菜 C蒸馏水和大白菜 D蒸馏水和麦苗v 在叶绿体色素的提取实验中，研磨绿叶时要加入无水乙醇，其目的是（）A防止叶绿素被破坏 B使叶片充分磨碎C使各色素充分溶解于乙醇 D使各色素在滤纸上扩散开来25二、课堂反馈v 叶绿体中的色素能够在滤纸上彼此分离的原因是（）A色素提取液中色素已经分层B阳光的照射使不同色素彼此分开C乙醇有使色素溶解并彼此分离的特性D各种色素在滤纸上随层析液扩散的速度不同v 加SiO2、加CaCO3的目的分别是：研磨充分；保护叶绿素研磨充分；保护叶绿素。v 为什么滤液细线越细、越齐越好？防止色素带之间部分重叠。防止色素带之间部分重叠。v 为什么层析液不能没及滤纸条的滤液细线？防止色素溶解在层析液中，影响实验结果。防止色素溶解在层析液中，影响实验结果。
