1、Aflatoxin-detoxifizyme Application Development广州科仁生物工程有限公司广州科仁生物工程有限公司Guangzhou Co-win Bioengineering Co.,Ltd国家国家863高科技项目高科技项目National 863 Key Project 黄曲霉毒素黄曲霉毒素l是一类由黄曲霉和寄生曲霉产生的真菌毒素；是一类由黄曲霉和寄生曲霉产生的真菌毒素；lA kind of mycotoxin produced by Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus Spearel已发现已发现B1、B2
2、、G1、G2、M1、M2等十几种，其中以黄曲霉毒素等十几种，其中以黄曲霉毒素B1（AFB1）的毒性最强）的毒性最强.lIncluding Aflatoxin B1,B2,G1,G2,M1and M2 etc,among which AFB1 is the most toxic.黄曲霉菌黄曲霉菌(Aspergillus flavus)AFB1的化学结构的化学结构Structure of AFB1AFT的污染广泛的污染广泛 contamination is wide-spreadl黄曲霉和寄生曲霉适宜在温暖潮湿的环境下生长并产生毒素，广泛污染饲料、黄曲霉和寄生曲霉适宜在温暖潮湿的环境下生长并产生毒
3、素，广泛污染饲料、粮食和食品，例如花生、玉米、大米、小麦、牛奶等。粮食和食品，例如花生、玉米、大米、小麦、牛奶等。lAspergillus flavus prefer warm and moist conditions to grow and produce toxins;Most feed and food could be contaminated,such as peanut,corn,rice and milk.发霉的玉米发霉的玉米(b)发霉的大米发霉的大米(c)发霉的棉籽发霉的棉籽(a)Contaminated cottonseed(a),corn(b)and rice(c)AFT的
4、毒性巨大的毒性巨大 AFT is very toxicl被国际癌症研究机构（被国际癌症研究机构（IARC）列为天然存在的）列为天然存在的1类（类（Group-A）致癌物，）致癌物，人类摄入被污染食品可诱发原发性肝癌、胃癌、肺癌等。人类摄入被污染食品可诱发原发性肝癌、胃癌、肺癌等。lAFT had been classified as carcinogen of Group A by IARC,could cause human gastric carcinoma,Iiver cancer and lung cancer etc.l毒性毒性()是氢氰酸的是氢氰酸的10倍，砒霜的倍，砒霜的68倍。
5、倍。lToxicity of AFT is 10 times of hydrocyanic acid and 68 times of arsenic.l0.294毫克毫克/公斤剂量的公斤剂量的AFB1就能引起敏感动物的急性中毒死亡。就能引起敏感动物的急性中毒死亡。l0.294mg/kg AFB1 could cause susceptive animals die of acute toxicityAFT毒性的危害毒性的危害 AFT污染饲料污染饲料feed contamination禽、畜禽、畜Birds and beasts污染食品污染食品food contamination人类人类huma
6、n食物链食物链food chain死亡死亡death体重下降、生病体重下降、生病lose weight,get sick诱发肿瘤诱发肿瘤tumor严重中毒严重中毒Serious poisoning轻度中毒轻度中毒毒素蓄积毒素蓄积Light poisoning毒素蓄积毒素蓄积Toxin accumulation各国食品中各国食品中AFT含量的标准含量的标准 Standards of AFT in Food食品名称（食品名称（Name of FoodName of Food）国家（国家（countrycountry）标准标准(standard)(standard)(g/kg）玉米、花生、花生油玉米
7、、花生、花生油Corn,peanut,peanut oilCorn,peanut,peanut oil中国中国(CHA)(CHA)、美国、美国(USA)(USA)20欧盟欧盟(EU)(EU)2、4、5、8、10、15玉米及花生仁制品（按原料折算）玉米及花生仁制品（按原料折算）Food made of corn and peanutFood made of corn and peanut中国中国(CHA)(CHA)、美国、美国(USA)(USA)20欧盟欧盟(EU)(EU)2、4、5、8、10、15大米、其他食用油大米、其他食用油（香油、大豆油等）（香油、大豆油等）Rice,other edib
8、le oilRice,other edible oil中国中国(CHA)(CHA)、美国、美国(USA)(USA)10欧盟欧盟(EU)(EU)2、4其他粮食（麦类其他粮食（麦类wheatwheat，面粉，面粉flourflour）发酵食品（酱油发酵食品（酱油saucesauce，食用醋，食用醋vinegarvinegar）淀粉类食品（糕点淀粉类食品（糕点cakecake，饼干饼干cookiecookie）中国中国(CHA)(CHA)、美国、美国(USA)(USA)5欧盟欧盟(EU)(EU)不得检出不得检出(undetectable)牛乳及其制品、黄油牛乳及其制品、黄油Milk and milk
9、-made food,butterMilk and milk-made food,butter中国中国(CHA)(CHA)、美国、美国(USA)(USA)0.5欧盟欧盟(EU)(EU)0.05我国的我国的AFT污染情况污染情况AFT contamination in Chinal污染广泛，形势严峻污染广泛，形势严峻lWide-spread and Serousl2004年，我国年，我国31个储藏稻谷样品检测真菌毒素含量，结果显示个储藏稻谷样品检测真菌毒素含量，结果显示AFT阳性率达阳性率达 90.32%。lIn 2004,AFT contamination ratio of 31 examin
10、ed stored paddy samples is 90.32%l1999年，韶关钢铁集团花生油调查年，韶关钢铁集团花生油调查,AFT大于大于20 g/kg的检出率为的检出率为20.7%。lIn 1999,among examined peanut oil,percentage of samples with AFT concentration above 20 g/kg is 20.7%l2000年，某地区市售部分有品牌酱油抽样检查年，某地区市售部分有品牌酱油抽样检查,结果：样品结果：样品30个，个，AFB1呈阳性呈阳性10个个。lIn 2000,results of a spot che
11、ck of 30 samples of soy sauce for certain brand showed that 10 of 30 was AFT positive.GRAIN STORAGE。2004 Vol.33 No.4 P.49-51 Journal of Jinan University（Natural Science&Medicine Edition）2002，23（5）：）：95-100 过往常用的过往常用的AFT 去毒方法去毒方法Common Methods to detoxify AFTl一、物理方法（一、物理方法（physical）l1.筛选法筛选法(pick out
12、)(pick out)2.漂洗法漂洗法(rinse)(rinse)3.热处理法热处理法(heat)(heat)l局限性局限性：去毒不彻底；经过处理的食物保存时间短去毒不彻底；经过处理的食物保存时间短，易产生二易产生二次污次污染染lShortage:not thoroughly;shorter reserve time,easy to secondary contamination l二、化学方法二、化学方法（chemical）l1.氨化处理氨化处理(amination)2.粘土或沸石处理粘土或沸石处理(clay or zeolite)l3.生石灰处理生石灰处理(calces)l局限性：局限性：
13、成本高；去毒不彻底成本高；去毒不彻底lShortage:high cost;not thoroughlyl三、生物学方法三、生物学方法（biological）l1.1.乳酸菌发酵法乳酸菌发酵法(lactobacillus fermentation)l局限性：局限性：仅适用于轻度发霉的饲料；处理后的饲料禁止作为主要饲料喂用仅适用于轻度发霉的饲料；处理后的饲料禁止作为主要饲料喂用lShortage:only for lightly contaminated feed;treated feed can only be used as supplement 黄曲霉毒素解毒酶黄曲霉毒素解毒酶（Aflat
14、oxin-detoxifizyme,ADTZ）A new fungi-found enzyme:ADTZ l从食用真菌中提取出来的一种蛋白质。从食用真菌中提取出来的一种蛋白质。lProtein extracted from a kind of edible fungil在温和的作用条件下，可以与在温和的作用条件下，可以与AFB1作用，破坏毒性结构双呋喃环，使其开作用，破坏毒性结构双呋喃环，使其开环而起到解毒作用。环而起到解毒作用。lunder mild conditions,ADTZ could interact with AFB1 to break the toxic structure b
15、ifuran and function as antidote against AFTl是国际上首先发现并分离到的针对黄曲霉毒素的解毒酶是国际上首先发现并分离到的针对黄曲霉毒素的解毒酶,是一种新蛋白质酶；是一种新蛋白质酶；lFirst discovered and isolated in international wide,was proved to be a new enzyme。l为我国源头创新性的发现；为我国源头创新性的发现；lAn innovative,China-source discoveryl具有完全独立的自主知识产权。具有完全独立的自主知识产权。lIndependent In
16、tellectual Property Rights重组黄曲霉毒素解毒酶（重组黄曲霉毒素解毒酶（rADTZ）Our recombinant enzyme：rADTZ l利用分子生物学技术获得了真菌利用分子生物学技术获得了真菌ADTZ的全长基因序列，并将该基因转的全长基因序列，并将该基因转入酵母中表达，构建了酵母基因工程菌入酵母中表达，构建了酵母基因工程菌lfull-length ADTZ gene had been cloned from the fungi and expressed in the gene engineer yeast reconstructed.新蛋白质酶新蛋白质酶ADT
17、ZNew enzyme ADTZ重组蛋白质酶重组蛋白质酶rADTZRecombinant enzyme rADTZ真菌培养真菌培养,蛋白提纯蛋白提纯基因克隆技基因克隆技术术基因重组技基因重组技术术工程菌发工程菌发酵酵产酶起始真菌产酶起始真菌Original fungiADTZ基因基因ADTZ geneFungi cultivation protein purification Gene cloningGene recombinationfermentation产产ADTZ工程菌工程菌Gene engineer yeastrADTZ的研究背景的研究背景Research background of
18、 rADTZ l本项目研究历时本项目研究历时10年，先后获得过国家年，先后获得过国家“863”计划、国家自然科学基计划、国家自然科学基金、广东省自然科学重点项目和科技攻关计划项目等资助金、广东省自然科学重点项目和科技攻关计划项目等资助lResearch lasted 10 years;obtained financial supports from“863”project,national science foundation,key science projects of Guangdong province etc.l申请了国内发明专利申请了国内发明专利6项，国际发明专利项，国际发明专利1
19、项，部分已获授权项，部分已获授权lApplied 6 national patents and 1 international patent,part of which have been licensed.l已经成功构建已经成功构建rADTZ的重组酵母基因工程菌的重组酵母基因工程菌lSuccessfully constructed rADTZ-producing gene engineering yeastl目前已经完成目前已经完成20升小试规模的发酵工艺升小试规模的发酵工艺lSmall-scale of 20L fermentation technology of gene enginee
20、ring yeast has been achieved.rADTZ的应用领域的应用领域What can rADTZ do?l饲料脱毒添加剂饲料脱毒添加剂 detoxifying additive for feedl食品脱毒添加剂食品脱毒添加剂 detoxifying additive for foodl酶生物传感器酶生物传感器 enzyme biosensorl药用酶制剂药用酶制剂 pharmaceuticals enzymel农作物转基因改造农作物转基因改造 Transgenic reconstruction of special cropsrADTZ的应用开发技术平台的应用开发技术平台P
21、latform of rADTZ application development rADTZ的应用前景的应用前景Promising prospects of rADTZl一、一、饲料行业饲料行业(Feed Industry)l全世界每年平均至少约有全世界每年平均至少约有2%的粮食因污染霉菌发生霉变而不能食用和饲用。的粮食因污染霉菌发生霉变而不能食用和饲用。lEvery year about 2%of foodstuff cannot be fed or eaten because of mustiness in the world.l全世界供应的谷物中有全世界供应的谷物中有25受到霉菌毒素污染
22、。受到霉菌毒素污染。l25%of the worlds grain supply was polluted by mycotoxin.l目前市场上还没有一种有效的办法对霉菌毒素的污染进行安全而廉价的脱毒目前市场上还没有一种有效的办法对霉菌毒素的污染进行安全而廉价的脱毒处理处理;lCurrently no method can detoxify mycotoxin effectively,safely and economically.l除本项目拟研发的重组黄曲霉毒素解毒酶产品，是特异性的针对毒性最强的除本项目拟研发的重组黄曲霉毒素解毒酶产品，是特异性的针对毒性最强的霉菌毒素霉菌毒素-黄曲霉毒素
23、之外，目前没有同类产品黄曲霉毒素之外，目前没有同类产品.lNo product except ours has been developed to specifically detoxify AFB1,the most toxic mycotoxin.l本项目拟开发的产品具有巨大的市场前景。本项目拟开发的产品具有巨大的市场前景。lOur products have great market prospect.rADTZ的应用前景的应用前景Promising prospects of rADTZl一、一、饲料行业饲料行业(Feed Industry)l2005年全国饲料总产量年全国饲料总产量1.
24、07亿吨，工业总产值为人民币亿吨，工业总产值为人民币2742亿元。用于脱毒的工业酶亿元。用于脱毒的工业酶成本占饲料生产成本的成本占饲料生产成本的1%，本项目产品在国内饲料市场的总价值为人民币，本项目产品在国内饲料市场的总价值为人民币27亿元亿元/年。年。lFeed output of China was 107 million in 2005,with the industry value of 274.2 billion RMB.The cost of industrial enzyme was 1%of the total cost of feed,thus our enzyme will
25、 have the total value of 2.7 billion per year in the domestic feed market.l目前饲料用酶已成为世界工业酶产业中增长速度最快、势头最强劲的一部分，目前饲料用酶已成为世界工业酶产业中增长速度最快、势头最强劲的一部分，2000年年饲料用酶的市场值达到了饲料用酶的市场值达到了2.5亿美元，近亿美元，近5年的年增长率达到年的年增长率达到11，远远高于别的酶种，远远高于别的酶种，预计到预计到2010年，饲料用酶的市场值将达到年，饲料用酶的市场值将达到8亿美元。亿美元。lEnzymes used for feed has been t
26、he fastest increasing one in the world industrial enzyme industry,whose market value was 250 million dollar in 2000,with a increasing speed of 11%in the recent 5 years.It was said that in 2010,its market value will be 800 million dollar.l由于本项目产品已获国际专利，故本项目产品在国际工业酶市场上发展潜力无可限量，由于本项目产品已获国际专利，故本项目产品在国际工
27、业酶市场上发展潜力无可限量，盈利前景极为可观。盈利前景极为可观。lOwing to the patents we had applied,our product has infinite developing potential and promising prospect the international industrial enzyme market.rADTZ的应用前景的应用前景promising prospects of rADTZl二、食品行业二、食品行业(food industry)l我国食物和花生油的黄曲霉污染水平达我国食物和花生油的黄曲霉污染水平达23500g/kglThe
28、 AFB1 contamination level of food and peanut oil in China was 23500g/kg.l牛奶目前尚没有现成可供使用的脱毒方法。牛奶目前尚没有现成可供使用的脱毒方法。lCurrently no method can be used to detoxify AFT-polluted milk.l常用脱毒方法如碱处理法和紫外线照射法等对花生油的品质和保质都有一定常用脱毒方法如碱处理法和紫外线照射法等对花生油的品质和保质都有一定的影响。的影响。lMethods used to detoxify peanut oil such as alkali
29、 treatment and UV radiation may affect the quality.l黄曲霉毒素解毒酶对花生油的脱毒条件温和，是和黄曲霉毒素解毒酶对花生油的脱毒条件温和，是和AFB1发生特异性反应，对发生特异性反应，对花生油的品质和保质无影响。具有巨大的开发潜力和广阔的市场前景。花生油的品质和保质无影响。具有巨大的开发潜力和广阔的市场前景。lADTZ could detoxify AFB1 specifically under mild conditions and has no effect on the peanut oil quality and storage,thu
30、s has great developing potential and promising prospects.rADTZ的应用前景的应用前景Promising prospects of rADTZl二、食品行业二、食品行业(Food Industry)l2005年全国花生油总产量年全国花生油总产量230万吨，工业总产值为人民币万吨，工业总产值为人民币225亿元。本项目产品在国内花生油市场亿元。本项目产品在国内花生油市场的市场总价值为人民币的市场总价值为人民币2.2亿元亿元/年年。lIn 2005,annual output of peanut oil was 2 million 300 t
31、housand ton,total industrial value at 22.5 billion RMB in China.Market value of our product will be 220 million RMB per year in the domestic peanut oil market.l2005年中国调味品、发酵制品的累计工业总产值为年中国调味品、发酵制品的累计工业总产值为540亿元，增长速度高达亿元，增长速度高达35，酱油行业正以每，酱油行业正以每年年3050的速度递增，市场潜力很大。本项目产品在国内酱油等调味品市场的市场总价值为的速度递增，市场潜力很大。本项
32、目产品在国内酱油等调味品市场的市场总价值为人民币人民币5.4亿元亿元/年年。lTotal industrial value of spice and fermented food was 54 billion RMB in China in 2005,a growth of 35%.Soy sauce market in China is rapidly growing at 30-50%annually.Our product will have a total value of 540 million per year in domestic spice market.l2005年全国乳制
33、品总产量年全国乳制品总产量2300万吨，工业总产值为人民币万吨，工业总产值为人民币2300亿元。本项目产品在国内乳制品市亿元。本项目产品在国内乳制品市场的市场总价值为人民币场的市场总价值为人民币23亿元亿元/年。年。lTotal output of milk product was 23 million ton in China in 2005,with the total value of 230 billion RMB.Total market value of our product is 2.3 billion RMB per year.rADTZ的应用前景的应用前景Promising
34、 prospects of rADTZl三、健康行业三、健康行业(Health Industry)l研制药用酶制剂研制药用酶制剂，用于原发性肝癌用于原发性肝癌、胃癌、肺癌的防治、胃癌、肺癌的防治 lFor prevention and cure of gastric carcinoma,primary hepatocarcinoma(PHC)and lung cancerl原发性肝癌高危人群：原发性肝癌高危人群：HBV携带者、肝炎患者比率在全球至少有携带者、肝炎患者比率在全球至少有10%以上，在中国的以上，在中国的某些地区达到了某些地区达到了15-20%，全球高危人群人口约，全球高危人群人口约
35、6亿人，中国高危人群人口约亿人，中国高危人群人口约1.3亿。亿。lPercentage of PHC extremely dangerous population,such as HBV carriers and hepatitis patients,is more than 10%in the world and 15%-20%in some chinese regions.PHC extremely dangerous population is 130 million in china,600 million in the world.l本项目的药用酶制剂产品在国内用于原发性肝癌高危人群
36、的市场总价值将超本项目的药用酶制剂产品在国内用于原发性肝癌高危人群的市场总价值将超过人民币过人民币100亿元亿元/年。年。lOur enzyme product will have a value of more than 10 billion RMB per year in domestic market.rADTZ的应用前景的应用前景Promising prospects of rADTZl四、检测行业四、检测行业(D(Detection)l研制研制AFT酶生物传感器，用于食品、饲料加工生产、海关、卫生监测等酶生物传感器，用于食品、饲料加工生产、海关、卫生监测等部门的质量安全检测。部门的质
37、量安全检测。lTo develop enzyme biosensor for quality and safety detection of AFT in food and feed process,custom and sanitation inspection.l由于目前使用的检测方法均存在玷污危险，检测人员在操作时需要冒接触剧毒的危由于目前使用的检测方法均存在玷污危险，检测人员在操作时需要冒接触剧毒的危险，而酶生物传感器最大的优点是不用接触毒性标准品，具有很好的推广价值，市险，而酶生物传感器最大的优点是不用接触毒性标准品，具有很好的推广价值，市场潜力很大。场潜力很大。lAFT enzym
38、e biosensor can operate without physical contact with toxic standard samples.It can be used for a variety of applications,thus huge market potential.l本项目产品在国内酶制剂及本项目产品在国内酶制剂及AFT生物传感器市场的市场总价值为人民币生物传感器市场的市场总价值为人民币1亿元亿元/年。年。lOur product has a market value of 100 million RMB per year in the enzyme and A
39、FT biosensor market.rADTZ的应用前景的应用前景Promising prospects of rADTZl五、对特殊的农作物进行转基因改造五、对特殊的农作物进行转基因改造 Transgenic reconstruction of special cropsl例如，将例如，将ADTZ基因转入花生的基因组中，使其表达，生产抗基因转入花生的基因组中，使其表达，生产抗AFT的转基因花生。的转基因花生。lTransfer of ADTZ gene to the genome of peanut and expression of ADTZ gene will confer the
40、peanut the property of AFT-resistant.广州科仁生物工程有限公司广州科仁生物工程有限公司Guangzhou Co-win Bioengineering Co.,Ltd lFounded in June 2006lGuangzhou Konzern Medicine Co.,Ltd is the wholly owned subsidiary of China Medicine Corporation which is a US public company.Konzern distributes approximately 1,100 medicine pro
41、ducts in China,including traditional pharmaceutical medicines,traditional Chinese medicines(finished medicines made of Chinese herbs),Chinese herbs and nutritional supplements.These products include both prescription drugs and over-the-counter drugs.Its network reaches 28 provinces in China,over 300
42、 hospitals,500 medicine companies and 1700 drug stores.广州科仁生物工程有限公司广州科仁生物工程有限公司Guangzhou Co-win Bioengineering Co.,LtdlThe company is seeking the co-developer to transmit the lab results to the final products,and will apply these products in different industries.lThe company will produce the ADTZ pr
43、oducts which will be used to remove the AFT toxin from feed,dairy products,flavoring,peanut oil and other foods.lThe company will make ADTZ products targeting the health industry sectors dealing with liver,stomach and other cancerslThe company will make the ADTZ biological sensor products for the border customs,hygiene units,food and feed factories.广州科仁生物工程有限公司广州科仁生物工程有限公司Guangzhou Co-win Bioengineering Co.,LtdWe are looking forward to developing the ADTZ project together with you!
