1、 第三章第三章 细菌的生长和遗传变异细菌的生长和遗传变异提纲提纲生长生长 细菌群体生长细菌群体生长测定方法测定方法(数量、重量)(数量、重量)间歇、连续式培养间歇、连续式培养生长曲线生长曲线(数量或重量)(数量或重量)遗传与变异遗传与变异分子机制分子机制应用应用细菌筛选与驯化细菌筛选与驯化(基因工程法菌种改良基因工程法菌种改良)第一节第一节 细菌的生长及其特性细菌的生长及其特性 生长生长细菌群体数量的增长细菌群体数量的增长,不是个体,不是个体体积的增长。体积的增长。提问:提问:为什么这里不考察细菌个体的生长呢?为什么这里不考察细菌个体的生长呢?个体太小,难观察计量个体太小,难观察计量 群体细菌
2、对环境产生影响群体细菌对环境产生影响 各类细菌都是倾向于各类细菌都是倾向于群居群居(物以类聚)(物以类聚)n生存状况提高,攻防具佳生存状况提高,攻防具佳n(攻)(攻)群居的细菌获得营养的能力大大高于游群居的细菌获得营养的能力大大高于游离的细菌,离的细菌,(防)(防)群居的细菌不易被天敌伤害群居的细菌不易被天敌伤害,还能释放类似外激素的调节因子,使群体主动还能释放类似外激素的调节因子,使群体主动适应环境的变化,可有性生殖;适应环境的变化,可有性生殖;细菌群体力量改变环境细菌群体力量改变环境 通常都是将细菌群体作为研究对象,考察细通常都是将细菌群体作为研究对象,考察细菌群体的菌群体的生长规律生长规
3、律“生、老、病、死生、老、病、死”。一、细菌生长一、细菌生长(数量)(数量)测定方法测定方法(1)直接计数法)直接计数法 借助显微镜观察测定借助显微镜观察测定n分四种分四种 1.1.涂片染色法涂片染色法 001ml菌液均均匀匀涂布,染色 面积 1cm2 计数 每个视野细菌的平均数量 细菌数量=视野中的菌液体积 =个/mL 目镜中的视野每个视野的面积由目测微尺的单元格量出,视野中菌液的体积按比例折算2.2.计数器计数器(血球计数板)血球计数板)测定法测定法 计数格计数格=44=16 大格大格 血球计数板血球计数板1 大格大格=55=25 小格小格1 小格小格=0.05cm0.05cm=0.002
4、5cm2总体积总体积=160.1250.0025=0.1cm3=0.1mL每小格深每小格深 0.1cm盖玻片盖玻片载玻片载玻片 菌液滴 染色(或不染色)面积 1cm2 血球计数板提问:提问:数了数了125个小格中有个小格中有90个细菌,样品中的细菌浓度是个细菌,样品中的细菌浓度是多少?多少?(90个个125)*400/0.1ml=2880个个/ml适用范围:适用范围:细菌个体若太小、过多细菌个体若太小、过多,由于每一小格中细由于每一小格中细菌层层叠加,相互遮挡,难以准确计数。菌层层叠加,相互遮挡,难以准确计数。数数数数细菌(或其他微生物或细胞)数目,(细菌(或其他微生物或细胞)数目,(一般数一般数125个小格个小格),),折算折算样品细菌浓度;样品细菌浓度;3.3.比例计数法比例计数法 比例比例样品菌液与等体积的血液混合,样品菌液与等体积的血液混合,观测二者比例观测二者比例样品溶液与等体积的血液混合 涂片 平均每个视野中平均每个视野中细菌数量细菌数量/红血球红血球的数量的数量比例为比例为5.55.5:1 1,则细菌数量,则细菌数量=?5.55.5400400万个万个/m lm l=2.2=2.210107 7个个/mLmL样品样品n红血球红血球数已知数已知(男性男性,女性女性),平均平均400400万个万个/mlml 4比浊计数法比浊计数法 浊浊细菌悬浮液的浊度细菌悬浮液的浊度