1、 1906 1906年，俄国植物学家茨维特年，俄国植物学家茨维特（TswettTswett）首次研究了植物叶的）首次研究了植物叶的色素成分。（如图）色素成分。（如图）分析过程为离线的，即不能分析过程为离线的，即不能连续进行。连续进行。人们将这种方法称为色谱法，人们将这种方法称为色谱法，随着色谱法的发展，可对大量无随着色谱法的发展，可对大量无色物质进行分离，但仍沿用了色色物质进行分离，但仍沿用了色谱法这一名词。谱法这一名词。现代色谱法现代色谱法的分离、分析的分离、分析过过 程是在线程是在线的，即连续进的，即连续进行。行。标准偏差标准偏差 即即0.6070.607倍峰高处色谱峰宽的一半。倍峰高处色
2、谱峰宽的一半。半峰宽半峰宽W W1/21/2 即峰高一半处对应的峰宽即峰高一半处对应的峰宽W W1/21/2=2.354=2.354 峰底宽峰底宽W Wb b 即色谱峰两侧拐点上的切线在基线上的截即色谱峰两侧拐点上的切线在基线上的截距距W Wb b=4=422112,1RRRRtVrtV()()()()lglg100lglgR xR zXR z nR zttIzntt柱效能和选择性对分离的影响柱效能和选择性对分离的影响柱效柱效 选择性选择性 差差 差差 差差 好好 好好 好好21211212RRRRbbbb2()1()2ttttRWWWWsmCKC 式中式中 c cs s、c cm m分别为组
3、分别为组分在固定相和流动相中的分在固定相和流动相中的浓度。浓度。K K与温度、压力有关；也与组分性质、流动与温度、压力有关；也与组分性质、流动相、固定相性质有关。条件一定时，相、固定相性质有关。条件一定时，K K一定。一定。smmkm 式中式中 m mS S、m mm m分别为组分在分别为组分在固定相和流动相中物质的质量。固定相和流动相中物质的质量。sssmmmmC VkmC V 容量因子不仅与温度和压力有关，而且还容量因子不仅与温度和压力有关，而且还与固定相和流动相的体积比有关。与固定相和流动相的体积比有关。smVkKVR0(1)ttkR0(1)VVk或 意义：在色谱图上找出意义：在色谱图上
4、找出t tR R、t t0 0，则可计则可计算出算出k k，即可以直接从色谱图上求得分配比，即可以直接从色谱图上求得分配比（容量因子）（容量因子）k k。反之，分配系数不同的组。反之，分配系数不同的组分具有不同的保留值，因而在色谱图上有分具有不同的保留值，因而在色谱图上有不同位置的色谱峰。不同位置的色谱峰。01sRmVttKV000RRtttktt见见P343000 (1)(1)()ABABsRAmsRBmsRRRABmVttKVVttKVVttttKKV 从热力学角度讨论了流出从热力学角度讨论了流出曲线形状与分离效果关系。曲线形状与分离效果关系。LnH理论塔板数22RR1/2b22RR1/2
5、b5.54()16()5.54()16()ttnWWttnWW有效 由此可以看出，组分保留时间越长、峰宽度由此可以看出，组分保留时间越长、峰宽度越小，则越小，则n n越多，色谱柱效能越高。越多，色谱柱效能越高。分配系数不同，最终可分离。分配系数不同，最终可分离。平衡次数平衡次数n n （5050），曲线接近正态分布），曲线接近正态分布曲线。曲线。给出了给出了n n与与W Wb b的关系式（由此关系式可得的关系式（由此关系式可得出流出曲线与分离效果关系）出流出曲线与分离效果关系）n n ，柱效，柱效 。若两组分若两组分K K相同，则无论相同，则无论n n多大，都无法多大，都无法分离分离。无法解释峰扩展原因。无法解释峰扩展原因。（为使（为使n n，则，则W Wb b应应 ，如何使，如何使W Wb b？）？）无法解释影响塔板高度的因素无法解释影响塔板高度的因素（L L一定，一定，n1/H,n1/H,如何使如何使H H？）？）
