非洲猪瘟ASF的分子病毒学课件.ppt

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1、非洲猪瘟的分子病毒学非洲猪瘟非洲猪瘟病总列数病总列数确诊时间确诊时间发生省份发生省份发生地点发生地点发病头数发病头数死亡头数死亡头数扑杀数扑杀数18月月3日日辽宁省辽宁省沈阳市沈北沈阳市沈北811628月月16日日河南省河南省郑州郑州3030136238月月19日日江苏省江苏省连云港海川连云港海川881457748月月23日日浙江省浙江省温州市乐青温州市乐青340133258月月30日日安徽省安徽省芜湖市南陵县芜湖市南陵县18580126469月月2日日安徽省安徽省宣城市宣州五星乡宣城市宣州五星乡9472579月月2日日安徽省安徽省宣城市宣州古泉镇宣城市宣州古泉镇4089月月3日日安徽省安徽省

2、宣城市金坝宣城市金坝152899月月3日日江苏省江苏省无锡市宜兴无锡市宜兴12997109月月5日日黑龙江省黑龙江省佳木斯长青乡佳木斯长青乡3912119月月6日日安徽省安徽省滁州市凤阳县滁州市凤阳县6222129月月6日日黑龙江省黑龙江省佳木斯向阳区佳木斯向阳区2610139月月6日日安徽省安徽省芜湖市南陵县许镇芜湖市南陵县许镇134149月月6日日安徽省安徽省宣城市宣州区天湖宣城市宣州区天湖1515159月月10日日安徽省安徽省铜陵市义安区铜陵市义安区6323169月月14日日内蒙古内蒙古阿巴嘎旗阿巴嘎旗179月月14日日河南省河南省获嘉县获嘉县科技日报科技日报2018年年8月月22日报道

3、日报道 我国发生非洲猪瘟的病毒基因测序初步结果显示,引起我国本次非洲猪瘟疫情的毒株为基因基因型型,部分基因序列与格鲁吉亚格鲁吉亚2007株株和俄罗斯伊尔库茨克俄罗斯伊尔库茨克2017株株的相应序列完全一致。提要ABSTRACT01/病毒的简述02/分类学地位03/形态学特征04/病毒稳定性05/基因组特征06/主要的蛋白非洲猪瘟非洲猪瘟 非洲猪瘟(African Swine fever,ASF)是一种急性,发热传染性很高的滤过性病毒所引起的猪病,其特征是发病过程短,但死亡率高,临床表现为发热(达4042),心跳加快,呼吸困难,部分咳嗽,眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物,皮肤发绀,淋巴结、肾、胃

4、肠粘膜明显出血;非洲猪瘟在临床症状上与典型猪瘟极为相似非洲猪瘟在临床症状上与典型猪瘟极为相似,以高热、高死亡率、全身广泛性出血、呼吸障碍以及神经功能紊乱为主要特征。联系联系区别区别病毒分类病毒分类CSF是黄病毒科瘟病毒属,单链RNA病毒,可分为3种基因型,11个亚型,1个血清型ASF是非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属,双链DNA病毒,根据编码p72蛋白的B646L核酸序列,非洲猪瘟可分为23个基因型,1个血清型毒株特点毒株特点不同毒株毒力差异大CSF在中国流行主要是基因2.1b亚型的中等毒力毒株ASF强毒株感染4-10天后100%死亡,中等毒株死亡率30%-50%,低毒株仅少量死亡传播特点传播特点

5、CSF与ASF都可通过接触传播或由于接触污染的媒介物传播,发病无季节性欧洲野猪与家猪比较容易被ASFV感染,有三种非洲野猪(疣猪、巨林猪、丛林猪)不表现出症状,隐性带毒,成为病毒的贮存器。ASFV是唯一的虫媒是唯一的虫媒DNA病毒病毒,可通过软蜱传播,病毒在其体内保持感染性造成持续传播,ASFV在蜱和野猪感染圈中长期存在,难以根除,并在一定条件下感染家猪,引起暴发联系联系区别区别临床症状临床症状+剖检病变剖检病变临床症状和剖检病变整体相似性很高,肉眼无法鉴别,实验室检测是诊断最可靠、最准确的方法CSF剖检病变脾脏肿大不明显,边缘梗死灶明显,肺脏病变主要以出血性病变为主ASF剖检病变脾脏肿大,梗

6、死灶不多见,肺脏表现水肿ASF死亡前死亡前48h体温下降为其特征同时临床症体温下降为其特征同时临床症状直到体温下降才显示出来,与状直到体温下降才显示出来,与CSF体温升高体温升高时症状就出现不同时症状就出现不同宿主免疫宿主免疫不感染人,不是人兽共患病预防CSF最有效的方法就是接种猪瘟疫苗ASFV强毒株基因组可编码多种蛋白质,用以干扰宿主的天然免疫系统,从而抑制和逃避宿主的免疫应答反应,为自身的增殖、扩散创造有利条件,ASFV拥有庞大的基因组结构和复拥有庞大的基因组结构和复杂的免疫逃逸机制,为疫苗研发工作带来诸多杂的免疫逃逸机制,为疫苗研发工作带来诸多困难困难防控手段防控手段具有高度的传染性与致

7、死性,易大面积发病感染CSF:接种猪瘟疫苗,免疫后可完全保护,不会再出现大面积发病,疫情较容易控制ASF:无有效疫苗,以扑杀为主并进行无害化处理分类学地位分类学地位 国际病毒分类委员会第四次报告将其归类于虹彩病毒科(粒子结构)(粒子结构)国际病毒分类委员会第五次报告将其归类于痘病毒科(基因结构、复制(基因结构、复制 方式)方式)国际病毒分类委员会第六次报告增加了非洲猪瘟科,将其列入非洲 猪瘟属,是其中的唯一成员是其中的唯一成员(分子生物学发展)(分子生物学发展)形态学特征形态学特征 ASFV是有囊膜包裹的的正二十面体病毒。毒粒外周外周包裹有六角形的囊膜,外部外部是直径为170-200nm的二十

8、面体衣壳,对应2000个左右衣壳粒,衣壳粒长约13nm,宽约5-6nm,衣壳粒间距离为7.4-8.1nm,呈中间有孔的六边形棱柱体。粒子的内部内部是直径为70-100nm的病毒核心,由包含基因组核酸的核蛋白以及类核结构组成。病毒从外至内由5个部分组成:外囊膜外囊膜、病毒衣壳病毒衣壳、内囊膜内囊膜、核壳核壳、类核类核DNA外囊膜外囊膜病毒衣壳病毒衣壳内囊膜内囊膜核壳核壳类核类核形态学特征形态学特征病毒稳定性病毒稳定性 ASFV具有很强的致病性,对外界不同的极端环境有很好的抗性具有很强的致病性,对外界不同的极端环境有很好的抗性。56下加热70 min或60下加热20 min可使病毒失活。在pH 4

9、-10的条件下,病毒仍可保持活性。将猪肉自然风干制成的腊肠,或者32-49下烟熏12 h,然后自然风干 25-30 天制成火腿,猪肉中携带的非洲猪瘟病毒也无法被全部杀死,仍然具有感染活性。基因组特征基因组特征 ASFV的基因组为具有末端共价闭合特点的单分子线状双链DNA,大小为170-190Kb,两末端部分碱基配对形成发夹环,中间区域较为保守,长度约中间区域较为保守,长度约125Kb,是一段高度保守的基因序列,是一段高度保守的基因序列。两端靠近发夹环部位有末端重复序列和可变区,可变区分别命名为可变区分别命名为VL(38-47Kb)与)与VR(13-16Kb),是不同),是不同病毒毒株之间基因组

10、差异主要的部分,与病毒的变异、逃避宿主防御系统等病毒毒株之间基因组差异主要的部分,与病毒的变异、逃避宿主防御系统等机制密切相关,机制密切相关,ASFV基因组大小变化由可变区决定基因组大小变化由可变区决定。整个基因组含有约150个开放阅读框(ORFs),可编码150-200种蛋白质。基因组特征基因组特征 截止目前,完成全基因组测序的毒株共有20株,其中,适应Vero细胞培养的无毒力BA71V毒株,是广泛应用于实验室研究的毒株。毒株名称毒株名称基因组大小(基因组大小(kb)毒株名称毒株名称基因组大小(基因组大小(kb)BA71V170Warmaths191L60182Tengani 62186BA

11、71180Pretorisukop_96-4190NHV172Mkuzi 1979193Kenya 1950194Malawi Lil-20-1 1983188Kenya 05/TK119147/Ss/2008185Ken 06.Bus184Benin 97/118226544/OG1O Italy183OURT 88/3172Odintsovo_02/14189E75181Warthog187Georgia 2007/1189病毒蛋白质病毒蛋白质非结构蛋白非结构蛋白结构蛋白结构蛋白病毒基因组编码的,在病毒复制过程中产生并具有一定功能,但并不结合于毒粒中的蛋白质构成一个形态成熟的具有感染性的病

12、毒颗粒所必需的蛋白质(衣壳蛋白衣壳蛋白,囊膜蛋白囊膜蛋白,存在于毒粒中的酶存在于毒粒中的酶)主要的蛋白主要的蛋白DNA外囊膜外囊膜病毒衣壳病毒衣壳内囊膜内囊膜核壳核壳类核类核p12(O61R)p24 CD2v(EP402R)p14(E120R)p49(B438L)p72(B646L)p150p37p34p14p5p35p15p8pp220pp62Proteasep12(O61R)p17(D117L)p22p54(E183L)pE248R pH108RpE199LRP1 RP5 RP2 RP6RP3 RP7pD1133L pQ706L pG1340L pB962LPoly(A)pol Capping enzyme Methyltransferasep10 pA104RRNA聚合酶亚基转录因子RNA修饰酶与DNA结合的主要结构蛋白DNA pol X DNA ligase AP endonuclease碱基切除修复

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