1、LoadingLoading 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析80k药物分析班精品文档第一节第一节 莨菪烷类药物的构造和性质莨菪烷类药物的构造和性质第二节第二节 鉴别实验鉴别实验第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查第四节第四节 含量测定含量测定精品文档第一节第一节 莨菪烷类药物的构造和性质莨菪烷类药物的构造和性质精品文档1 第一节第一节 莨菪烷类药物的构造和性质莨菪烷类药物的构造和性质一、典型药物 莨菪烷生物碱是从茄科植物，如颠茄、莨菪和白曼陀罗等中提取的具有对M受体阻断作用的生物碱。这类生物碱都是由莨菪醇与不同有机酸所成的酯。NH3COH含氮的醇含氮的
2、醇(莨菪醇莨菪醇)精品文档第一节第一节 莨菪烷类药物的构造和性质莨菪烷类药物的构造和性质H2SO4NH3CH22H2OOHOOH硫酸莨菪碱H2SO4OOHOHNH3CH2H2O硫酸阿托品l酯的构造，易水解l五元脂环上有叔胺氮原子l手性Cl酯的构造，易水解l五元脂环上有叔胺氮原子l消旋体，无旋光性精品文档第一节第一节 莨菪烷类药物的构造和性质莨菪烷类药物的构造和性质1.水解性酯水解生成醇和酸OHOOHNCH3OHHNCH3+HOOCOH阿托品 莨菪醇 莨菪酸2.碱性：阿托品和东莨菪碱构造中，五元脂环含有叔胺氮原子，较强的碱性，易于酸成盐，如阿托品pKb1为4.353.旋光性：可用于鉴别阿托品和东
3、莨菪碱精品文档精品文档精品文档第二第二节节 鉴别实验鉴别实验二、与硫酸二、与硫酸-重铬酸钾的反响氧化反响重铬酸钾的反响氧化反响HOOCOHH2OH2SO4HOOCCH22O2CHO+2CO2H2O药物水解后生成莨菪酸，可与硫酸-重铬酸钾在加热的条件下，发生氧化反响，生成苯甲醛而逸出苦杏仁的臭味。反响式如下：精品文档第二第二节节 鉴别实验鉴别实验三、与生物碱显色剂或沉淀剂的反响生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀。生物碱沉淀试剂生物碱沉淀试剂反应条件与结果反应条件与结果碘化铋钾试液碘化铋钾试液橙色或棕红色沉淀橙色或棕红色沉淀碘化钾碘试液碘化钾碘试液棕色或棕褐色沉淀
4、棕色或棕褐色沉淀碘化汞钾试液碘化汞钾试液白色或淡黄色沉淀白色或淡黄色沉淀三硝基苯酚试液三硝基苯酚试液结晶性沉淀并有特定熔点结晶性沉淀并有特定熔点硅乌酸试液硅乌酸试液白色或淡黄色或黄棕色沉淀白色或淡黄色或黄棕色沉淀磷乌酸试液磷乌酸试液淡黄色沉淀淡黄色沉淀精品文档第二第二节节 鉴别实验鉴别实验四、光谱鉴别法紫外光谱法一般通过比较一般通过比较 max max、minmin或吸收光谱的一致性来进展或吸收光谱的一致性来进展鉴别以及吸光系数。鉴别以及吸光系数。红外光谱法CHPCHP收载的原料药一般都采用红外光谱法进展鉴别收载的原料药一般都采用红外光谱法进展鉴别精品文档第二第二节节 鉴别实验鉴别实验五、色谱
5、鉴别法色谱法一般用于生物碱的鉴别，主要有TLC、HPLC、GC、PC等精品文档第二第二节节 鉴别实验鉴别实验六、硫酸盐和溴化物的反响 药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在，它们的水溶液那么分别显硫酸盐或溴化物的鉴别反响。ChP氢溴酸东莨菪碱的鉴别：取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性，滴加硝酸银试液，即生成淡黄色凝乳状沉淀，别离，沉淀能在氨试液中微溶，但在硝酸中几乎不溶。取供试品溶液，滴加氯试液，溴即游离，加三氯甲烷振摇，三氯甲烷层显黄色或红棕色。精品文档第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查精品文档第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查氢溴酸东莨菪碱制备工艺洋金花粗粉乙醇/渗漉渗漉液减压蒸馏
6、浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3,CHCl3/提取总生物碱Na2CO3,CHCl3/分离东莨菪碱HBr/成盐氢溴酸东莨菪碱（粗品）75%C2H5OH/精制成品根据其制备工艺，本品可通过酸度、其它生物碱、和易氧化物质检查进展控制一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查一、氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查精品文档第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查1.1.酸度酸度如氢溴酸东莨菪碱为弱酸弱碱盐、通过其5%的水溶液pH为4.05.5可控制酸性杂质2.2.易氧化物易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色NH3CHOOCH2(杂质
7、)NH3CHOOOCH2(杂质)精品文档第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查3.3.其它生物碱其它生物碱本品水溶液参加氨水试液不得发生混浊。当有其它生物本品水溶液参加氨水试液不得发生混浊。当有其它生物碱存在时，那么易产生混浊。碱存在时，那么易产生混浊。ChPChP氢溴酸东莨菪碱其他生物碱的检查：取本品氢溴酸东莨菪碱其他生物碱的检查：取本品0.10g0.10g，加水加水2ml2ml溶解后，分成两等份；一份中加氨试液溶解后，分成两等份；一份中加氨试液23d23d，不，不得发生浑浊；另一份中加氢氧化钾试液数滴，只许发生得发生浑浊；另一份中加氢氧化钾试液数滴，只许发生瞬即消失的类白色浑浊。瞬即消
8、失的类白色浑浊。其他生物碱还常用其他生物碱还常用TLCTLC和和HPL CHPL C法检查。其杂质限量法检查。其杂质限量判断主要有标准品对照法、自身稀释对照法等方法。判断主要有标准品对照法、自身稀释对照法等方法。精品文档第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查二、硫酸阿托品中有关物质的检查二、硫酸阿托品中有关物质的检查硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体，可硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体，可以利用旋光性对莨菪碱杂质进展检查。以利用旋光性对莨菪碱杂质进展检查。ChPChP用用HPLCHPLC法检查其中有关物质，通过峰面积的比值及保法检查其中有关物质，通过峰面积的比值及
9、保存时间来控制杂质限度存时间来控制杂质限度精品文档第四节第四节 含量测定含量测定精品文档第四节第四节 含量测定含量测定莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂量较少，因此测定方法要专属、灵敏酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色谱法精品文档一、酸性染料比色法一、酸性染料比色法在一定的在一定的pHpH条件下，某些生物碱药物可与某些酸性条件下，某些生物碱药物可与某些酸性染料结合而呈色，进而可用分光光度法进展测量。染料结合而呈色，进而可用分光光度法进展测量。第四节第四节 含量测定含量测定根本原理根本原理酸性染料如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚酸性染料如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香
10、草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等其与酸性离子定量结合、生成具蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂定有吸收光谱明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进展含量测定。光度，即可进展含量测定。精品文档其反响示意图如下：其反响示意图如下：也可将呈色的有机相碱化，使与有机碱结合的酸性染料释放出来，测定其吸光度，再计算出碱性药物的含量第四节第四节 含量测定含量测定精品文档第四节第四节 含量测定含量测定影响因素1.水性最正确pH值：使得BH+和
11、In-最多 pH过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低影响离子对的形成；pH过高，有机药物呈游离态，也抑制离子对的形成，因此须有一个最正确pH值存在，使离子对生成最有利。其选择方法一般根据药物与染料的pK值及水相与有机相的分配系数而定精品文档2.酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量。一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以；但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，往往影响测定结果。第四节第四节 含量测定含量测定精品文档4.水分的影响：影响结果，脱水剂或滤纸除去水分5.酸性染料里面的有色杂质 影响结果，先用萃取溶剂萃取除去3.有机溶剂的选择：u提取效率高，氯仿
12、最理想；u一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率高、能与离子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。第四节第四节 含量测定含量测定精品文档二、二、非水溶液滴定法非水溶液滴定法 非水溶液滴定法是在非水溶剂中进展的酸碱滴定测定法。主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、硫酸盐、磷酸盐以及有机酸碱金属盐类的含量。硫酸是二元酸，在水溶液中可以发生二级解离，生成SO42-。但是冰醋酸非水介质中，只能发生一级解离，生成HSO4-,即只提供一个H+。所以硫酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐，可用高氯酸滴定液直接滴定。(BH+)2 SO42-+HClO4 (BH+)ClO4 +(BH+
13、)HSO42-硫酸阿托品与高氯酸反响的化学计量摩尔比为1:1.第四节第四节 含量测定含量测定精品文档三三.高效液相色谱法高效液相色谱法 莨菪烷类药物HPLC分析测定时，常采用烷基磺酸盐作为离子对试剂，流动相一般呈酸性，以利于碱性药物的质子化。ChP2021中采用HPLC测定氢溴酸东莨菪碱及其片剂和注射液的含量。测定丁溴酸东莨菪碱的有关物质及其胶囊和注射液含量时，均采用十二烷基硫酸钠作为离子对。BP2021中HPLC测定硫酸阿托品制剂滴眼液、片剂和注射剂含量时，均采用磺基丁二酸钠二辛脂作为离子对试剂USP多库酯钠ChP2021中硫酸阿托品有关物质的检查，采用庚烷磺酸钠作为离子对试剂。第四节第四节 含量测定含量测定精品文档Thank youThank you！精品文档
