1、 第一章第一章 新药评价内容新药评价内容(一一)药学研究与评价药学研究与评价(二二)临床前药理研究临床前药理研究(三三)临床前毒理学研究临床前毒理学研究(四）临床研究与评价四）临床研究与评价第1页/共166页(一一)药学研究与评价药学研究与评价名称名称 结构或组份结构或组份 理化性质理化性质 原料药生产工艺原料药生产工艺 制剂处方及工艺制剂处方及工艺 定性鉴别定性鉴别 含量测定杂质检查含量测定杂质检查 原料药和制剂的稳定性原料药和制剂的稳定性 质量标准草案和起草说明质量标准草案和起草说明包装材料和容器的选择依据及质量标准包装材料和容器的选择依据及质量标准第2页/共166页(二二)药理研究药理研
2、究主要药效学主要药效学二种模型二种模型 量效关系量效关系 指标客观指标客观阳性对照阳性对照 空白对照空白对照 时效关系时效关系 临床给药途径临床给药途径 二种动物二种动物 体外试验至少重复体外试验至少重复3 3次次作用机理作用机理 (全新药全新药)第3页/共166页(三三)毒理学研究毒理学研究一般药理一般药理三个剂量三个剂量 临床途径临床途径 时效变化时效变化 神经系统神经系统 心血管系统心血管系统 呼吸系统呼吸系统药代动力学药代动力学三个剂量三个剂量 二种动物二种动物 临床途径临床途径 8 81212个采样点药动学基本参数个采样点药动学基本参数 方法学考证方法学考证分布排泄分布排泄急性毒性急
3、性毒性 毒性症状毒性症状 LDLD5050，二种动物二种动物 二种途径二种途径 长期毒性长期毒性 三个剂量三个剂量 临床途径临床途径 空白对照，动态观察空白对照，动态观察 中毒症状中毒症状 中毒剂量中毒剂量 动物选择指标测定二种动物动物选择指标测定二种动物 靶靶 器器 官官 安全剂量毒性性质安全剂量毒性性质 病理描述病理描述 病理照片病理照片 统计处理统计处理毒代动力学毒代动力学 三个剂量三个剂量 6-86-8点点 主要毒代参数主要毒代参数 AUC Cmax Tmax特殊毒性特殊毒性 遗传遗传 生殖生殖 致癌性致癌性局部毒性局部毒性 过敏过敏 刺激刺激 光毒光毒 溶血溶血免疫毒性免疫毒性 (生
4、物制品生物制品)依依 赖赖 性性 作用于作用于CNSCNS药物药物第4页/共166页第二章、毒理学研究第二章、毒理学研究 一、毒理学研究的意义一、毒理学研究的意义 二、毒理学研究的内容及方法二、毒理学研究的内容及方法 三、急性毒性研究三、急性毒性研究 四、长期毒性研究四、长期毒性研究 五、其他毒性研究五、其他毒性研究 六、特殊毒性研究六、特殊毒性研究 七、毒代动力学研究七、毒代动力学研究第5页/共166页一、毒理学研究的意义一、毒理学研究的意义1、毒理学研究简介、毒理学研究简介2、创新药物的基本要求、创新药物的基本要求3、20世纪重大药害事件世纪重大药害事件4、已审批药物的副作用与从市场撤出举
5、例、已审批药物的副作用与从市场撤出举例5、安全性因素对药物研发的影响、安全性因素对药物研发的影响第6页/共166页 -致癌致癌性性 遗传毒遗传毒性性 生殖毒生殖毒性性 局部耐受性、过局部耐受性、过敏、敏、依赖性、免疫依赖性、免疫毒性毒性 光敏和其它试光敏和其它试验等验等 了解毒性反应剂量、时间、强度、症状、靶器官及可逆性等，了解毒性反应剂量、时间、强度、症状、靶器官及可逆性等，为临床方案提供参考、预测出现的毒性反应，制订临床防护为临床方案提供参考、预测出现的毒性反应，制订临床防护 措施、保证受试者用药安全措施、保证受试者用药安全 毒理学研究局部用药毒性全身用药毒性发现毒理学一般毒性特殊毒性目的
6、第7页/共166页2.创新药物的基本要求创新药物的基本要求 质控质控安全安全有效有效 药物的基本属性（安全性、有效性、稳定性、可控性），在一定意义上，由药物的化学结构所决定 药物分子设计是实现新药创制的主要途径和手段稳定稳定第8页/共166页3 3、2020世纪重大药害事世纪重大药害事件件 甘甘 汞：汞：汞中毒汞中毒 死亡死亡585人人 醋醋 酸酸 铊：铊：铊中毒铊中毒 死亡死亡1万人万人 氨基比林：氨基比林：粒细胞缺乏症粒细胞缺乏症 死亡死亡2082人人 磺磺 胺胺 酏：酏：肝肾损害肝肾损害 死亡死亡107人人 非那西丁：非那西丁：肾损害、溶血肾损害、溶血 死亡死亡500人人 碘二乙基锡：碘
7、二乙基锡：神经毒性、脑炎、失明神经毒性、脑炎、失明 死亡死亡110人人 反反 应应 停：停：海豹样畸形儿海豹样畸形儿10000多多 死亡死亡5000人人 异丙肾气雾剂：异丙肾气雾剂：严重心律失常、心衰，严重心律失常、心衰，死亡死亡3500人人 氯碘喹啉：氯碘喹啉：骨髓变性、失明、受害骨髓变性、失明、受害7856人，死亡人，死亡5%心心 得得 宁：宁：眼眼-皮肤皮肤-粘膜综合征，粘膜综合征，受害受害2257人人第9页/共166页4 4、已审批药物的副作用与从市场撤出举、已审批药物的副作用与从市场撤出举例（例（1990-1990-）年份年份药物药物适应症适应症/分类分类副作用副作用1991Enka
8、ld恩卡尼上市年恩卡尼上市年抗心律失常药物抗心律失常药物作用于心血管，突然死亡作用于心血管，突然死亡1992Temafloxacin替马沙星替马沙星抗菌类药抗菌类药肾损伤肾损伤1998Poslcor(mibefradll)Duract(bronfenac sodium)降血压药降血压药/钙通道抑制剂钙通道抑制剂止痛药止痛药致死性相互作用（抑制肝酶）致死性相互作用（抑制肝酶）肝损伤肝损伤1999Tronan严格限制使用严格限制使用RaxarHismanal息斯敏息斯敏Rotashield抗生素抗生素喹诺酮抗生素喹诺酮抗生素抗组胺药抗组胺药轮状病毒疫苗轮状病毒疫苗肝肝/肾损伤肾损伤QT间期延长（致
9、死）间期延长（致死）药物相互作用药物相互作用肠梗阻肠梗阻2000RenzulinPropulsidLotonex治疗治疗型糖尿病药型糖尿病药烧心烧心过敏性胃肠综合症过敏性胃肠综合症肝损伤肝损伤心律不齐心律不齐/致死致死缺血性结肠炎缺血性结肠炎2001Phenylpropanolaminebaychlor调节血脂药调节血脂药降低胆固醇降低胆固醇出血性休克出血性休克横纹肌溶解横纹肌溶解/致死致死第10页/共166页5、安全性因素对药物研发的影、安全性因素对药物研发的影响响药物撤出市场的原因药物撤出市场的原因总撤出的百分率总撤出的百分率人体药代试验不恰当人体药代试验不恰当 39临床缺乏疗效临床缺乏疗
10、效 30动物毒性试验动物毒性试验 11人体副作用人体副作用 10经济因素经济因素 5其他其他 5第11页/共166页二、毒理学研究的内容及方法二、毒理学研究的内容及方法1 1、GLPGLP国际上安全性研究实验室共同遵循的规范国际上安全性研究实验室共同遵循的规范2 2、临床前药物安全性评价的主要内容、临床前药物安全性评价的主要内容3 3、新药临床前安全性评价的利弊权衡、新药临床前安全性评价的利弊权衡4 4、新药临床安全性再评价的目的、新药临床安全性再评价的目的5 5、新药临床试验安全性评价的局限性、新药临床试验安全性评价的局限性 6 6、20072007年年1010大药物不良反应事件回顾大药物不
11、良反应事件回顾7 7、药物临床安全性再评价主要内容、药物临床安全性再评价主要内容8 8、新药临床阶段安全性评价利弊权衡、新药临床阶段安全性评价利弊权衡9 9、药物上市后再评价的目的、药物上市后再评价的目的1010、药物上市后风险的主要来源、药物上市后风险的主要来源1111、药物的毒副作用与从市场撤出举例、药物的毒副作用与从市场撤出举例第12页/共166页1、GLP国际上安全性研究实验室共同遵循的规范 1.提高药品非临床研究的质量；2.确保实验资料的真实性、完整性和可靠性；3.提高科学数据的质量和有效性，促进实验数据的国家间相互认可；4.保证人民用药安全，为人类健康服务。第13页/共166页2
12、2、临床前药物安全性评价、临床前药物安全性评价的主要内容的主要内容 单次给药毒性试验（急性毒性试验）单次给药毒性试验（急性毒性试验）重复给药毒性试验（长期毒性试验）重复给药毒性试验（长期毒性试验）遗传毒性试验遗传毒性试验 生殖毒性试验生殖毒性试验 安全性药理学试验（一般药理学）安全性药理学试验（一般药理学）致癌性试验致癌性试验 药物依赖性试验药物依赖性试验 特殊毒性试验（过敏性、局部刺激性、溶血性）等特殊毒性试验（过敏性、局部刺激性、溶血性）等 免疫原性试验免疫原性试验 毒代动力学实验毒代动力学实验第14页/共166页临床前研究结果评估：利是指药效或疗效，弊是指毒性或毒副作用n毒性特点：（主要
13、症状、毒性大小、靶器官、可逆性）n安全范围：（LD50/ED50、LOAEL、NOAEL）LOAEL(lowest-observed-adverse-effect-level)出现副反应的最小剂量nNOAEL（No Observed Adverse Effect Level）无可见有害作用水平n同类药比较：了解程度及优势（有效性和安全性）n适应症背景：治疗谱、毒性大小（安全范围）、性质和早期可预测性n人体相关性：注意量化（毒代暴露量）利弊权衡是一个综合性的评价过程（系统工程）3、新药临床前安全性评价的利弊权衡、新药临床前安全性评价的利弊权衡第15页/共166页4、新药临床安全性再评价的目的、新
14、药临床安全性再评价的目的n临床前研究结果并不能完全推测临床研究结果，动物模临床前研究结果并不能完全推测临床研究结果，动物模型也不能完全复制出人体发生的疾病。型也不能完全复制出人体发生的疾病。n临床中存在联合用药产生药物相互作用问题。临床中存在联合用药产生药物相互作用问题。n药物在临床使用中发现毒副作用，需进行毒性机制研究药物在临床使用中发现毒副作用，需进行毒性机制研究寻找解毒药物。寻找解毒药物。n部分试验可以在药物进行临床研究中才开始进行。部分试验可以在药物进行临床研究中才开始进行。n临床研究中有时会出现药物引起的特异质毒性反应。临床研究中有时会出现药物引起的特异质毒性反应。n特需药品免做临床
15、前安全性评价研究的药物。特需药品免做临床前安全性评价研究的药物。第16页/共166页 药品上市前动物毒性研究的局限性药品上市前动物毒性研究的局限性 药品上市前人体临床试验伦理范围的局限性药品上市前人体临床试验伦理范围的局限性 药品上市前人体临床试验科学性研究的局限性药品上市前人体临床试验科学性研究的局限性 统计发现，在所有的药物临床试验与应用中，不良反应统计发现，在所有的药物临床试验与应用中，不良反应种类出现的概率是：种类出现的概率是：在一般动物毒性试验中只占左右；在一般动物毒性试验中只占左右；在在期人体耐受试验中只有；期人体耐受试验中只有；在在、期临床试验的出现率是；期临床试验的出现率是；在
16、在期临床试验时出现；期临床试验时出现；到市场销售时全部副作用才陆续出现。到市场销售时全部副作用才陆续出现。5、新药临床试验安全性评价的局限、新药临床试验安全性评价的局限性性 第17页/共166页6 6、20072007年年1010大药物不良反应事件回大药物不良反应事件回顾顾 头孢曲松钠的安全使用问题头孢曲松钠的安全使用问题（与钙使用，婴儿死亡）（与钙使用，婴儿死亡）静脉输注人免疫球蛋白引起丙肝抗体阳性率增加静脉输注人免疫球蛋白引起丙肝抗体阳性率增加 甲磺酸培高利特撤市甲磺酸培高利特撤市（心脏瓣膜病）（心脏瓣膜病）马来酸替加色罗撤市马来酸替加色罗撤市(心肌梗死、脑卒中）心肌梗死、脑卒中）含钆造影
17、剂的安全问题含钆造影剂的安全问题（肾源性纤维化病）（肾源性纤维化病）罗格列酮的安全性受质疑罗格列酮的安全性受质疑（心梗和心源性死亡）（心梗和心源性死亡）注射用甲氨蝶呤、阿糖胞苷中混入长春新碱注射用甲氨蝶呤、阿糖胞苷中混入长春新碱（N N受损）受损）感冒药禁用于感冒药禁用于2 2岁或以下儿童岁或以下儿童（死亡）（死亡）哺乳妇女服用可待因可能导致婴儿发生严重不良反哺乳妇女服用可待因可能导致婴儿发生严重不良反应应 硫酸普罗宁与胸腺肽注射剂可引起严重不良反应硫酸普罗宁与胸腺肽注射剂可引起严重不良反应第18页/共166页7、药物临床安全性再评价主要内容、药物临床安全性再评价主要内容n药物毒性作用靶器官、
18、药物毒性作用模型的研究药物毒性作用靶器官、药物毒性作用模型的研究 解决由于模型不合适而发生的不良反应，重新设计动解决由于模型不合适而发生的不良反应，重新设计动 物模型评价药物的毒性作用物模型评价药物的毒性作用n药物毒性作用机制药物毒性作用机制 解决小概率毒性作用药物的不良反应，评价没有动物解决小概率毒性作用药物的不良反应，评价没有动物 模型不良反应药物的毒性作用模型不良反应药物的毒性作用n联合用药的作用机制筛选研究联合用药的作用机制筛选研究 解决临床上由于联合用药而发生的不良反应解决临床上由于联合用药而发生的不良反应n根据新药特点，可在临床阶段提供新药安全性资料根据新药特点，可在临床阶段提供新
19、药安全性资料 致突变试验、致突变试验、致癌性试验和致癌性试验和IIIIII段生殖试验，一般可段生殖试验，一般可 以在申报以在申报NDANDA时提供其研究资料时提供其研究资料 第19页/共166页8、新药临床阶段安全性评价利弊权衡、新药临床阶段安全性评价利弊权衡n评估临床已出现的毒性，和毒性特点以及监测、防治措施。n确定进一步临床和剂量选择方案提供重要信息。n综合相关信息进行利弊权衡，判断能否向临床推进。n根据毒理结果调整临床适应症范围、适应人群或给药方案n综合比较新药与已上市药物之间毒副作用与安全性之间的关系，分析与判断该新药上市的可能性。第20页/共166页9、药物上市后再评价的目的、药物上
20、市后再评价的目的新药上市前安全性评价的局限性新药上市前安全性评价的局限性 病例太少、研究时间太短、试验对象年龄范围病例太少、研究时间太短、试验对象年龄范围太窄、用药对象条件控制太严太窄、用药对象条件控制太严药物副反应与安全性的关系药物副反应与安全性的关系 副作用、变态反应、特异质反应、药物依赖性、副作用、变态反应、特异质反应、药物依赖性、致癌、致突变、致畸作用致癌、致突变、致畸作用老药的毒、副作用研发成新药的可能性老药的毒、副作用研发成新药的可能性 反应停、长春新碱、阿托品、阿斯匹林、反应停、长春新碱、阿托品、阿斯匹林、雌雌激素激素药物再评价与药物命运的关系药物再评价与药物命运的关系 限制与撤
21、出使用、医疗事故判断的依据限制与撤出使用、医疗事故判断的依据第21页/共166页10.药物上市后风险的主要来源药物上市后风险的主要来源已知风险可避免的无法避免的药品缺陷仿冒制品可预防的AEs损伤或死亡其他的不确定因素n潜在的、未知的风险n缺失信息，如人种、年龄、性别、药物与药物之间、药物与疾病之间的相互作用等。不同的问题，应给予相应的解决方法不同的问题，应给予相应的解决方法上市后监测与安全性再评价上市后监测与安全性再评价用药错误用药错误第22页/共166页11.药物的毒副作用与从市场撤出举例药物的毒副作用与从市场撤出举例（1990-）年份年份药药 物物适应症适应症/分类分类副作用副作用1991
22、Enkald恩卡尼上市年恩卡尼上市年抗心律失常药物抗心律失常药物作用于心血管，突然死亡作用于心血管，突然死亡1992Temafloxacin替马沙星替马沙星抗菌类药抗菌类药肾损伤肾损伤1998Poslcor(mibefradll)Duract(bronfenac sodium)降血压药降血压药/钙通道抑制剂钙通道抑制剂止痛药止痛药致死性相互作用（抑制肝酶）致死性相互作用（抑制肝酶）肝损伤肝损伤1999Tronan严格限制使用严格限制使用Raxar格帕沙星格帕沙星(Grepafloxacin)Hismanal息斯敏息斯敏Rotashield轮状病毒疫苗轮状病毒疫苗 抗生素抗生素喹诺酮抗生素喹诺酮
23、抗生素抗组胺药抗组胺药轮状病毒疫苗轮状病毒疫苗肝肝/肾损伤肾损伤QT间期延长（致死）间期延长（致死）药物相互作用药物相互作用肠梗阻肠梗阻2000RenzulinPropulsidLotonex治疗治疗型糖尿病药型糖尿病药烧心烧心过敏性胃肠综合症过敏性胃肠综合症肝损伤肝损伤心律不齐心律不齐/致死致死缺血性结肠炎缺血性结肠炎2001Phenylpropanolaminebaychlor调节血脂药调节血脂药降低胆固醇降低胆固醇出血性休克出血性休克横纹肌溶解横纹肌溶解/致死致死第23页/共166页12.12.非临床安全性评价基本原则非临床安全性评价基本原则 把握药理毒理评价的系统性把握药理毒理评价的系
24、统性 充分暴露毒性充分暴露毒性 具体问题具体分析具体问题具体分析 执行执行GLP（药物非临床研究质量（药物非临床研究质量管理规范）管理规范）第24页/共166页13.非临床安全性评价全过程非临床安全性评价全过程质量管理质量管理GRP-Good Reviewing PracticeGSP-Good Supply Practice GUP-Good Using PracticeGSSP-Good Storage And Shipping PracticeGMP-Good Manufacturing PracticeGLP-Good Laboratary PracticeGCP-Good Clini
25、cal Practice药物相关的药物相关的GXP管理管理GCP/GLP药品研制药品研制药品生产药品生产GMPGSP药品流通药品流通GUP药品使用药品使用药品审评药品审评GRP药物储存GSSP第25页/共166页1414、药物安全性评价最终目的为临床服务、药物安全性评价最终目的为临床服务初步目的初步目的 毒理试验本身（试验评价）毒理试验本身（试验评价）1.1.毒性反应（定性和定量）毒性反应（定性和定量）l剂量、时间、程度、症状、性质、靶器官以及损伤的可剂量、时间、程度、症状、性质、靶器官以及损伤的可逆性逆性2.2.安全剂量及安全范围安全剂量及安全范围 最终目的最终目的向临床过渡（综合评价）向临
26、床过渡（综合评价）申报临床：申报临床：1.1.预测人临床用药时的可能毒性，以制定监测、防治措施预测人临床用药时的可能毒性，以制定监测、防治措施 2.2.推算临床研究的安全参考剂量和安全范围，进行利弊权推算临床研究的安全参考剂量和安全范围，进行利弊权衡衡申报生产：申报生产：3.3.为说明书提供信息为说明书提供信息-尤其是那些无法在人体试验的动物尤其是那些无法在人体试验的动物结果，限制用药人群，帮助利弊权衡。结果，限制用药人群，帮助利弊权衡。第26页/共166页 21/24/2621/24/26号号:过敏性（局部、全身和光敏毒性）、过敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血溶血 性和局部（血管、皮肤、粘
27、膜、肌肉等）刺激性和局部（血管、皮肤、粘膜、肌肉等）刺激 性等主要与局部、全身给药有关的特殊安全性性等主要与局部、全身给药有关的特殊安全性 试验研究和文献资料试验研究和文献资料 22/2722/27号号:复方制剂中多种成复方制剂中多种成/组份药效、毒性、组份药效、毒性、药代动药代动 力学相互影响的试验资料及文献资料力学相互影响的试验资料及文献资料 23/25/2223/25/22号号:致突变试验资料及文献资料致突变试验资料及文献资料 24/26/2324/26/23号号:生殖毒性试验资料及文献资料生殖毒性试验资料及文献资料 25/27/2425/27/24号号:致癌试验资料及文献资料致癌试验资
28、料及文献资料 26/2826/28号号:依赖性试验资料及文献资料依赖性试验资料及文献资料 27/28/2127/28/21号号:动物药代动力学试验资料及文献资料动物药代动力学试验资料及文献资料15、各类新药申报资料的一般要、各类新药申报资料的一般要求求第27页/共166页16、药品注册管理办法药品注册管理办法药药品注册药理毒理申报资料品注册药理毒理申报资料16.药理毒理研究资料综述药理毒理研究资料综述17.主要药效学试验资料及文献资料主要药效学试验资料及文献资料18.一般药理学的试验资料及文献资料一般药理学的试验资料及文献资料（）（）19.急性毒性试验资料及文献资料急性毒性试验资料及文献资料（
29、）（）20.长期毒性试验资料及文献资料长期毒性试验资料及文献资料（）（）21.过敏性（局部、全身、和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、皮过敏性（局部、全身、和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、皮肤、粘膜、肌肉等）刺激性等特殊安全性试验资料和文献资料肤、粘膜、肌肉等）刺激性等特殊安全性试验资料和文献资料（）22.复方制剂中多种成分药效、毒性、药代动力学相互影响的试验资复方制剂中多种成分药效、毒性、药代动力学相互影响的试验资料和文献资料料和文献资料23.致突变试验资料及文献资料（致突变试验资料及文献资料（）24.生殖毒性试验资料及文献资料（生殖毒性试验资料及文献资料（）25.致癌试验资料及文献资料（致
30、癌试验资料及文献资料（）26.依赖性试验资料及文献资料（依赖性试验资料及文献资料（）27.非临床药代动力学试验资料及文献资料非临床药代动力学试验资料及文献资料（）（）第28页/共166页 17.17.临床前安全性评价临床前安全性评价 与临床的差别与临床的差别 研究方案研究方案/种属种属动物动物人体人体个体数量个体数量大量大量个体个体个体年龄个体年龄青年青年各个年龄段各个年龄段个体健康状况个体健康状况健康健康不定不定个体遗传背景个体遗传背景同源同源异源异源给药剂量给药剂量从治疗量到中毒量从治疗量到中毒量治疗量治疗量给药时间给药时间通常每日一次通常每日一次根据治疗需要根据治疗需要居住条件居住条件统
31、一，最佳统一，最佳不定不定营养营养统一，最佳统一，最佳不定不定辅助治疗辅助治疗无无经常经常语言交流语言交流无无广泛广泛病理组织学病理组织学全面全面特例特例第29页/共166页 1818、长期毒性试验的给药期限、长期毒性试验的给药期限药物临床疗程药物临床疗程长期毒性试验给药期限长期毒性试验给药期限可以支持的临床研究阶段可以支持的临床研究阶段啮齿类动物啮齿类动物非啮齿类动物非啮齿类动物单次给药单次给药2周周2周周期、期、期、期、期期2周周1个月个月1个月个月期、期、期、期、期期2周周*1个月个月1个月个月期期1个月个月1个月个月1个月个月期期3个月个月3个月个月期期3个月个月3个月个月3个月个月期
32、期6个月个月6个月个月期期6个月个月6个月个月6个月个月期期6个月个月9个月个月期期6个月个月6个月个月9个月个月期期6个月个月9个月个月期期第30页/共166页19.安评资料审评中的主要问题安评资料审评中的主要问题 （一）受试物（一）受试物 （二）试验动物（二）试验动物 （三）给药途径（三）给药途径 （四）给药频率（四）给药频率 （五）给药期限（五）给药期限 （六）给药剂量（六）给药剂量 （七）观察指标（七）观察指标 （八）观察指标的时间和次数（八）观察指标的时间和次数 （九）结果及分析（九）结果及分析 （十）综合评价（十）综合评价第31页/共166页其它毒性（其它毒性（过敏性、溶血性、光毒
33、性、免疫过敏性、溶血性、光毒性、免疫毒性、药物依赖性等试验）毒性、药物依赖性等试验）2020、药物安全性评价研究的范围、药物安全性评价研究的范围第32页/共166页 21.21.药物非临床研究药物非临床研究-共性问题共性问题第33页/共166页22.临床前毒理学评价总的要求临床前毒理学评价总的要求 找出毒性剂量找出毒性剂量 Toxic dosage 确定安全剂量范围确定安全剂量范围 Safety margin 毒性反应毒性反应 Toxic reaction:性质、程度、量毒关系、产生时间，达峰性质、程度、量毒关系、产生时间，达峰时间时间,持续时间及反复产生毒性反应时间、迟发性、蓄积性、持续时间
34、及反复产生毒性反应时间、迟发性、蓄积性、耐受性耐受性 寻找毒性反应靶器官寻找毒性反应靶器官 Target Organ 毒性反应是否可逆毒性反应是否可逆 Reversibility 确保临床用药安全确保临床用药安全第34页/共166页（一）试验要求（一）试验要求（二）目的意义（二）目的意义（三）基本内容和要求（三）基本内容和要求（四）急性毒性（四）急性毒性LDLD5050常用计算方法常用计算方法（五）有关问题（五）有关问题三、急性毒性试验三、急性毒性试验第35页/共166页（一）试验要求（一）试验要求试验动物试验动物 啮齿类啮齿类-小鼠或大鼠小鼠或大鼠 非啮齿类非啮齿类-犬或其它犬或其它 一类药
35、至少必须用二种动物一类药至少必须用二种动物(啮齿类及非啮齿类各一种啮齿类及非啮齿类各一种,其中非啮齿类宜其中非啮齿类宜用用BeagleBeagle犬犬););其它类酌情用二种动物其它类酌情用二种动物 小鼠小鼠18-22g,18-22g,同次体重相差不超过同次体重相差不超过4g;4g;大鼠大鼠120-150g,120-150g,同次体重不超过同次体重不超过20g;20g;犬用成年犬犬用成年犬 各半各半 第36页/共166页（二）（二）急性毒性试验急性毒性试验目的意义目的意义1、了解新药急性毒性强度、了解新药急性毒性强度 2、计算新药相对毒性参数、计算新药相对毒性参数 3、为临床毒副反应监护提供参
36、考依据、为临床毒副反应监护提供参考依据 4、为长期毒性、蓄积性毒性提供依据、为长期毒性、蓄积性毒性提供依据 5、为特殊毒性试验选择剂量提供依据、为特殊毒性试验选择剂量提供依据6、其它方面、其它方面第37页/共166页1 1、新药急性毒性的强度、新药急性毒性的强度 表表.化学物质的急性毒性分级标准化学物质的急性毒性分级标准(WHO,1977)毒性分级毒性分级 ig大、小鼠大、小鼠LD50 吸入大、小鼠吸入大、小鼠LC50 涂皮兔涂皮兔LD50 人口服可能的人口服可能的 (mg/kg)(ppm)(mg/kg)致死量致死量(g)极极 毒毒 1 10 5000 10000 2180 1200 *吸入毒
37、性吸入毒性LC50指中毒栏中的浓度指中毒栏中的浓度,一次中毒一次中毒2-4小时小时,观察观察24天天 第38页/共166页新药急性毒性的强度新药急性毒性的强度 表表.欧共体对化学物的毒性分级欧共体对化学物的毒性分级 动物及给药途径动物及给药途径 剧剧 毒毒 毒毒 有有 害害 大鼠大鼠 LD50 ig(mg/kg)25 25-200 200-2000 大鼠或兔经皮大鼠或兔经皮LD50(mg/kg)50 50-400 400-2000 大鼠大鼠 LC50(mg/L/4h 0.5 0.2-2 2-20 第39页/共166页2 2、相对毒性参数、相对毒性参数 治疗指数治疗指数TI=LD50/ED50
38、安全系数安全系数SF=LD5/ED95 可靠或确实安全系数可靠或确实安全系数CSF=LD1/ED99 安全范围安全范围SM=(LD1/ED99-1)X 100%SED50/ED50,越大越安全越大越安全 LD5基本无害量基本无害量 ED95基本有效量基本有效量 LD1肯定无害量肯定无害量 ED99肯定有效量肯定有效量第40页/共166页3.3.为临床毒副反应监护提供参考为临床毒副反应监护提供参考中毒症状中毒症状起始时间起始时间持续时间持续时间恢复时间恢复时间对抗试验为临床急救提供依据对抗试验为临床急救提供依据第41页/共166页急性毒性试验观察动物反应指标急性毒性试验观察动物反应指标 中中 毒
39、毒 部部 位位 毒毒 性性 症症 状状 表表 现现 中枢神经系统中枢神经系统 呆滞呆滞:对刺激反应迟缓、减弱、消失；不安：对刺激反应对刺激反应迟缓、减弱、消失；不安：对刺激反应 过敏、过敏、兴奋；强直：行动姿势改变、叫声异常、震颤、兴奋；强直：行动姿势改变、叫声异常、震颤、共济失调共济失调 植物神经系统植物神经系统 瞳孔缩小、放大瞳孔缩小、放大;分泌增多，如流涎、流泪分泌增多，如流涎、流泪 呼呼 吸吸 系系 统统 鼻孔流鼻涕、呼吸缓慢、困难、潮式呼吸、速率加快等鼻孔流鼻涕、呼吸缓慢、困难、潮式呼吸、速率加快等 心血管心血管 系统系统 心动过速、缓慢、心律不齐、心跳过强、微弱心动过速、缓慢、心律
40、不齐、心跳过强、微弱 胃胃 肠肠 系系 统统 胀、腹泻、便秘、粪便不成形、粪便黑色胀、腹泻、便秘、粪便不成形、粪便黑色 生生 殖殖 系系 统统 乳腺膨胀、会阴部污浊、阴囊下垂等乳腺膨胀、会阴部污浊、阴囊下垂等 皮肤、皮肤、毛皮肤发红、松弛、皮疹、毛竖起毛皮肤发红、松弛、皮疹、毛竖起 粘粘 膜口腔流粘液、充血、溃疡、出血性紫绀膜口腔流粘液、充血、溃疡、出血性紫绀 眼眼 睛上睑下垂、眼球突出混浊睛上睑下垂、眼球突出混浊 其其 他直肠温度升高、降低；消瘦；拒食等他直肠温度升高、降低；消瘦；拒食等 第42页/共166页4 4、为长毒、蓄毒试验、为长毒、蓄毒试验 选择剂量提供依据选择剂量提供依据 长期毒
41、性剂量设计长期毒性剂量设计 LD50法法(1/10,1/50,1/100)MTD法法(1,1/3,1/10)蓄积性毒性剂量设计蓄积性毒性剂量设计 1/10LD50,然后按等比级数然后按等比级数1.5倍逐渐递增倍逐渐递增第43页/共166页5、为特殊毒性试验选择剂量提供依据、为特殊毒性试验选择剂量提供依据 生殖毒性试验高剂量为母鼠生殖毒性试验高剂量为母鼠MTD 致突变试验致突变试验 啮齿类动物微核试验高剂量为啮齿类动物微核试验高剂量为1/2 LD50 果蝇伴性隐性致死试验的高、低剂量分别为果蝇伴性隐性致死试验的高、低剂量分别为1/2 LD50和和1/4 LD50 精原细胞染色体畸变试验高剂量应为
42、精原细胞染色体畸变试验高剂量应为1/2 LD50 动物短期致癌试验高剂量应是动物短期致癌试验高剂量应是MTD 主要药效学剂量限度、一般药理学和药动学剂量设计也要参考主要药效学剂量限度、一般药理学和药动学剂量设计也要参考急性毒性的急性毒性的LD50第44页/共166页6 6、其它方面、其它方面系列化合物的合格率分析系列化合物的合格率分析(除理化性质为主外除理化性质为主外)也参也参考考LD50复方中药物的相互作用复方中药物的相互作用,有时也通过拆方及合用的有时也通过拆方及合用的LD50来判别相互作用的性质来判别相互作用的性质第45页/共166页四、长期毒性试验四、长期毒性试验（一）目的意义（一）目
43、的意义（二）基本内容和要求（二）基本内容和要求 1 1、LD50LD50试验试验 2 2、最大耐受量试验、最大耐受量试验 3 3、最大给药量试验、最大给药量试验 4 4、限量试验、限量试验（三）长期毒性研究目的（三）长期毒性研究目的第46页/共166页（一）目的意义（一）目的意义 毒性剂量毒性剂量 Toxic dosage 安全范围安全范围 Safety margin 毒性反应毒性反应 Toxic reaction:性质、程度、量毒关系、产生时间，达峰性质、程度、量毒关系、产生时间，达峰时间时间,持续时间及反复产生毒性反应时间、迟发性、蓄积性、持续时间及反复产生毒性反应时间、迟发性、蓄积性、耐
44、受性耐受性 毒性反应靶器官毒性反应靶器官 Target organ 毒性反应是否可逆毒性反应是否可逆 Reversibility第47页/共166页1-LD50试验 动物：小鼠、大鼠等动物：小鼠、大鼠等 动物与分组：一般动物与分组：一般5组；每组组；每组10只只 雌、雄各半。试验前禁食雌、雄各半。试验前禁食 给药途径：临床给药途径给药途径：临床给药途径 观察观察14天，进行大体解剖观察，如有改变天，进行大体解剖观察，如有改变-病理检查病理检查（二）基本内容和要求第48页/共166页 2-最大耐受量试验最大耐受量试验 （MTD-Maximum-Tolerated Dose）指动物单次指动物单次大
45、剂量给药或在大剂量给药或在24小时内接受多次大剂量受试药物后，小时内接受多次大剂量受试药物后，动物在短期内出现的与药物相关的毒性反应，但是又动物在短期内出现的与药物相关的毒性反应，但是又不引起动物死亡的最大剂量不引起动物死亡的最大剂量 动物：小鼠、大鼠、犬等动物：小鼠、大鼠、犬等 动物数：动物数：小动物小动物20只；大动物只；大动物4只只 雌、雄各半。试验前动物应注意禁食雌、雄各半。试验前动物应注意禁食 给药途径：临床给药途径给药途径：临床给药途径 观察观察14天，进行大体解剖观察，如有改变天，进行大体解剖观察，如有改变-病理检查病理检查（二）基本内容和要求第49页/共166页 时，观察时，观
46、察14天，如无死亡，则无必要进行更高剂量天，如无死亡，则无必要进行更高剂量如动物在如动物在5g/kg出现死亡，可选择较低剂量出现死亡，可选择较低剂量3、最大给药量试验4、限量试验（二）基本内容和要求第50页/共166页 观察动物在给予超过临床剂量（数倍或数十倍）和用药观察动物在给予超过临床剂量（数倍或数十倍）和用药周期（周期（3-43-4倍以上）的情况下所出现的毒性反应倍以上）的情况下所出现的毒性反应 设法发现引起毒性反应的剂量、剂量与毒性之间的关系、设法发现引起毒性反应的剂量、剂量与毒性之间的关系、中毒表现和程度、主要毒性靶器官或组织及可逆程度等中毒表现和程度、主要毒性靶器官或组织及可逆程度
47、等 预测临床研究阶段可能的安全范围和毒性，预先制定防预测临床研究阶段可能的安全范围和毒性，预先制定防治措施或避免某些有特殊疾病患者的使用，减少临床可治措施或避免某些有特殊疾病患者的使用，减少临床可能的风险能的风险 为临床试验初始剂量和指标的选择等提供重要参数为临床试验初始剂量和指标的选择等提供重要参数（三）长期毒性研究目的第51页/共166页第52页/共166页 常常用大鼠和犬或敏感动物。创新药一般用大鼠和犬或敏感动物。创新药一般2种以上，雌雄各半。种以上，雌雄各半。生物制品多用大鼠和猴（种属特异性可特殊）生物制品多用大鼠和猴（种属特异性可特殊）大鼠试验大鼠试验3月内：月内：6-8周龄；周龄；
48、3月：月：5-6周龄周龄 犬：一般选用性成熟的，犬：一般选用性成熟的，6-10月；猴：月；猴：3.5-4.5年年 根据试验周期长短确定每组动物数。根据试验周期长短确定每组动物数。原则：试验结束时小动物每组动物数应满足统计学要求；原则：试验结束时小动物每组动物数应满足统计学要求；大动物的数应满足毒理学评价要求；大动物的数应满足毒理学评价要求；一般大鼠为一般大鼠为10-30只，雌雄各半；犬、猴至少雌、雄各只，雌雄各半；犬、猴至少雌、雄各3只；只；毒性大、周期长数量应增加，考虑恢复期数量。毒性大、周期长数量应增加，考虑恢复期数量。第53页/共166页第54页/共166页 给药剂量给药剂量 一般一般3
49、个给药剂量组个给药剂量组 高剂量高剂量-动物应出现毒性和个别死亡（动物应出现毒性和个别死亡（20%）低剂量低剂量-等于或略高于有效剂量等于或略高于有效剂量，无毒性，无毒性 中剂量中剂量-介于以上两者之间介于以上两者之间，轻微毒性，轻微毒性 或者按急毒结果：或者按急毒结果：LD50法法(1/10,1/50,1/100)MTD法法(1,1/3,1/10)第55页/共166页 对照组的设置对照组的设置 观察指标观察指标 第56页/共166页五、其他毒性研究五、其他毒性研究1、致突变性试验、致突变性试验2、生殖毒性试验、生殖毒性试验3、致癌性试验、致癌性试验4、皮肤给药急性毒性试验皮肤给药急性毒性试验
50、 5、皮肤给药的长期毒性试验、皮肤给药的长期毒性试验6、皮肤刺激试验、皮肤刺激试验7、皮肤过敏试验、皮肤过敏试验8、光敏试验、光敏试验9、眼刺激试验、眼刺激试验10、滴鼻剂和吸入剂急性毒性试验、滴鼻剂和吸入剂急性毒性试验11、直肠、阴道用药急毒试验、直肠、阴道用药急毒试验12、直肠、阴道用药刺激试验、直肠、阴道用药刺激试验13、身体依赖性试验、身体依赖性试验-自然戒断试验自然戒断试验14、身体依赖性试验、身体依赖性试验-替代试验替代试验15、身体依赖性试验、身体依赖性试验-催促试验催促试验16、身体依赖性试验、身体依赖性试验-诱导试验诱导试验17、精神依赖性试验、精神依赖性试验第57页/共16
