1、分子实验室污染的预防与处理XXXXX医院XXX污染不知晓，“分子”知多少6109/L3105个1.38107条血滴白细胞染色体肉眼可见显微可见显微可见污染有多可怕n 实验室污染后短时间内无法开展工作；n 多少标本等待检测，如何面对患者目 录污染的预防 2污染的识别4污染的来源1污染的监测3污染的验证5污染处理6一、污染的来源标本采集过程中造成的污染标本污染试剂生产或分装过程中受到污染试剂污染质控品和校准品管理和使用过程造成的污染质控品和校准品污染操作过程中阳性标本对其他标本的污染标本交叉污染扩增产物造成的污染扩增子污染二、污染的预防-实验室设计实验室科学设计各区独立、注意风向、因地制宜、方便工
2、作李金明 教授分区独立是降低污染的物理屏障试剂间标本处理间扩增间排风扇窗门此实验室设计是否合理？气流无法控制，只有排风没有进风；标本间和扩增间排出的风可能会影响试剂间；没有传递窗，不便工作；没有气流控制的物理分区仅是心理安慰采用自然通风如何设计？试剂间标本处理间扩增间排风扇窗门分散式设计试剂间标本处理间扩增间试剂间标本处理间扩增间集中式设计二、污染的预防-实验室设计采用机械通风如何设计试剂间标本处理间扩增间分散式设计试剂间标本处理间扩增间集中式设计n 各区进排风管道宜独立；n 如果共用管道，需加装止逆阀；n 机械通风不等同于负压实验室。n 机械通风是一种通风方式，实验室可以设置可开闭窗户；n
3、负压实验室需形成稳定的压力差，不允许设置可开闭窗户。二、污染的预防-实验室设计实验室建设依据二、污染预防-试剂与物品管理 可降低污染；可降低污染；提升检测精度；提升检测精度；减少冻溶次数。减少冻溶次数。实验用品专用 不同区域的物品不可混用；不同区域的物品不可混用；缓冲间和工作区域的清洁用品不缓冲间和工作区域的清洁用品不能混用。能混用。分装试剂污染预防-优化工作流程优化工作及流程 避免物品传递带来的污染；避免物品传递带来的污染；经去核酸处理才能返回使用；经去核酸处理才能返回使用；避免产生气溶胶的动作或采取措避免产生气溶胶的动作或采取措施降低气溶胶形成风险。施降低气溶胶形成风险。试剂间标本制备间扩
4、增间该用品在扩增间使用完后如何返回试剂准备间？二、污染预防-设备管理n 宜配多套设备（移液器、核酸提取仪），交替使用；n 定时对移液器进行去核酸处理。移液器的维护保养移液器的维护保养（1 1）去污染；去污染；（2 2）去离子水清洗；）去离子水清洗；（2 2）高压（高压（121121，20min)20min)；（3 3）去核酸。去核酸。二、染污的预防-良好的实验室行为n 掌握分子检测的基本知识，有无核酸的概念；n 使用符合要求的耗材（吸头的密闭性）；n 日常清洁与去核酸处理；n 规范操作，避免污染。开盖前采取措施降低气溶胶形成风险；正确开盖规范加样动作；移液器正确使用；选择合适的提取方法；避免核
5、酸过长暴露规范加样；选择弱阳性作为质控品样本开盖加样本核酸提取加核酸二、污染预防-废弃物处理 保持标本密闭；保持标本密闭；经过灭活处理的（核酸已释放）经过灭活处理的（核酸已释放）不宜高压处理。不宜高压处理。接触核酸的物品 凡接触核酸的物品在安全柜内包凡接触核酸的物品在安全柜内包装后丢弃；装后丢弃；可以弃于含核酸清除剂的液体中。可以弃于含核酸清除剂的液体中。标本 用密封袋包装；用密封袋包装；按医疗废弃物处理，不能高压处按医疗废弃物处理，不能高压处理。理。扩增产物Autoclaving isnt a ideal methold for dealing with molecular wastes三、
6、污染监测阴性质控交叉污染和低浓度气溶胶导致假交叉污染和低浓度气溶胶导致假阳性风险具有一定的概率，单个阳性风险具有一定的概率，单个阴性质控可能无法体现。阴性质控可能无法体现。阳性结果比例控制四、污染识别01试剂污染02人为错误03交叉污染04产物污染，标准品或质控品污染05标本污染检测结果是否全部为阳性是否阴阳性结果同时失控，阳性结果比例没有失控观察阳性结果分布，是否阳性结果比例失控阳性结果比例是否偏高是否与待检者情况一致原因表现四、污染源验证试剂污染 在另外洁净区域重新分装一盒试剂；将新分装试剂和原有试剂同时扩增（不添加其他内容物）；如果原有试剂为阳性，新试剂为阴性，则表明试剂分装存在污染，如
7、两者均为阳性可能试剂在生产中污染。人为错误 阳性标本重新复查；结果一致，说明阴性失控可能为人为错误；结果不一致，实验室可能存在交叉污染或气溶胶污染五、污染源验证交叉污染 复查阳性和部分阴性结果；结果可重复可排除；结果不能重复，可能操作过程或移液器携带污染造成。产物污染，标准品或质控品污染 在样本制备间和扩增间分别放置无菌水；将无菌水当标本检测；如果无菌水阳性，则说明空气中有待测基因片段的气溶胶。标本污染 重新采集标本复查；六、污染处理停止工作，查明原因，评估影响，再做决定污染处理-去核酸酒精沉降紫外照射稀酸擦拭（1%）稀酸拖地稀酸处理废物优氯净处理标本 目的：目的：“无核酸化无核酸化”、仪器正
8、常工、仪器正常工作；作；0.5%-1%次氯酸钠和商品化核酸去除剂代替稀酸；0.0625-%0.25%的次氯酸钠效果优于1%Efficacy Assessment of Nucleic Acid Decontamination Reagents Used in Molecular Diagnostic LaboratoriesBDAC75%酒精、纯水喷洒台面和地面处理紫外照射通风 沉降空气中的气溶胶沉降空气中的气溶胶 作用时间作用时间10-1510-15分钟分钟 将核酸片段切版并聚集将核酸片段切版并聚集 作用时间作用时间30-6030-60分钟分钟 清理核酸残余片段；清理核酸残余片段；作用时间作用时间5-105-10分钟后用清分钟后用清水清洗。水清洗。降低气溶胶浓度；降低气溶胶浓度；工作完后可一直通风。工作完后可一直通风。六、污染处理谢谢聆听！
