1、尿液细菌学检验基本技术尿液细菌学检验基本技术(三)细菌学检验1、检验程序尿液细菌学检验基本技术三 泌尿标本一 尿液标本 中段尿培养加计数对于泌尿道感染的诊断有重要价值。细菌培养必须结合菌落计数辨别是否为病原菌。有致病菌或条件致病菌生长,正常尿液菌落计数不超过103cfu/ml,菌落计数105cfu/ml,提示感染(膀胱炎,肾盂肾炎、肾或膀胱结核等)。尿液细菌学检验基本技术常见病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌和伤寒沙门菌等。尿液细菌学检验基本技术尿液标本 无菌采集中段尿 如考虑厌氧菌感染,采取膀胱穿刺法采集标本。排尿困难者考虑导尿采集标本。尿液细菌学检验基本技术尿液标本的采集
2、1、一般原则 通常应采集中段晨尿1020ml送检。原则上应选择在抗菌药物应用之前采集尿液;2、沙门氏菌感染 一般在病后2周左右采集尿液培养;3、钩端螺旋体感染 一般在病后2周左右采集尿液培养;尿液细菌学检验基本技术 4、结核分枝杆菌感染 患者应停药12天后,留取晨尿或24h尿的沉渣部分1015ml培养;5、女性宜用肥皂水清洗外阴周围,用湿纱布清洁周围,排尿弃去前段尿,留取中段尿10ml左右于无菌容器内;6、男性用肥皂水清洗阴茎头,用湿纱布清洁周围,排尿弃去前段尿,取中段尿10ml左右于无菌容器内;尿液细菌学检验基本技术 7、留取尿液标本应立即送检,否则尿中细菌迅速繁殖,使菌落计数不可靠而影响诊
3、断;8、无菌导尿管采集尿液,应在排出15ml尿液后收集标本,但导尿有潜在引入尿道菌的危险。9、留置导尿管采尿,应先以75%酒精消毒导管口,用无菌注射器收集510ml尿,长期留置导尿管患者,应在更换新尿管时留取尿标本;尿液细菌学检验基本技术10、尿液应在收集后1h内接种,阴性杆菌菌落计数105CFU/ml、阳性球菌菌落计数104CFU/ml有意义;11、念珠菌尿是异常的,不需定量;培养基选择:血平皿、中国蓝平皿、流感嗜血杆菌平皿、沙保罗氏真菌平皿、L型培养基。尿液细菌学检验基本技术 保存与运输 室温2小时 冰箱8小时 奈瑟菌不能冷藏尿液细菌学检验基本技术细菌学检验操作流程尿液细菌学检验基本技术尿
4、液细菌学检验基本技术尿液细菌学检查 1涂片检查:革兰染色:查革兰阳性菌、阴性菌或假丝酵母菌。抗酸染色:查结核分枝杆菌。淋球菌涂片:用革兰染色和吕氏美蓝染色,如发现革兰阴性成双 排列的圆形或椭圆形球菌,应进一步培养证实。2中段尿细菌计数:用来助诊尿路感染。加样器取5微升或定量接种环取尿液。在血平板上35度1824小时。菌落计数,然后在计算出每毫升尿液细菌数。尿液细菌学检验基本技术特殊菌落培养(1)淋病奈瑟菌培养巧克力平板培养基 510%CO2(2)厌氧菌培养 穿刺接种(3)结核分枝杆菌培养(4)真菌培养尿液细菌学检验基本技术 细菌培养:48h无细菌生长,报告阴性。此间有细菌生长,需进行鉴定相做药敏试验。报告方式 培养48h无细菌生长,报告“2天无细菌生长”。查见细菌,报告菌名及其菌落计数(菌落数/ml)和药敏结果。